עבודות זו נתמכה באמצעות מענקים ממדעי הטבע והנדסת מועצת המחקר של קנדה (RGPIN 238,382-2,011) והמכון קנדי ​​לבריאות מחקר (MOP115076). הת&#39;ר פול נתמכה על ידי מלגות לתארים מתקדמים מדעי טבע והנדסת מועצת המחקר של קנדה ומלגת פתרונות בריאות אלברטה מתפתחת. מייגן האלאם נתמכה על ידי מלגה למדעי טבע והנדסת מחקר מועצה שלאחר התואר הראשון, מלגות פרדריק בנטינג וצ&#39;רלס בסט קנדה בוגר, ובית החולים מכון מחקר הדרכת פרס ילדים אלברטה בגנטיקה, התפתחות ילד, ובריאות.

פרוטוקול זה אושר על ידי האוניברסיטה של ועדת טיפול בבעלי חיים קלגרי ותאם את המדריך לטיפול והשימוש בחי מעבדה. 1. סכר נפרד מצאצאים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפרד את הסכר מצאצאיה למינימום של 5 דקות לפני חליבת 12. הערה: הסכר ניתן חלב עד 5-6 שעות לאחר הפרדת 1,6,13, לעומת זאת תקופות של הפרדה יותר מ -4 שעות עשויות לשנות הרכב חלב 14. בעוד זמן הפרדה אינו מופיע להשפיע חלב אוסף 12 נפח, מומלץ כי זמן הפרדה עקבי יישמר לאורך כל תקופת המחקר. הרכב חלב עשוי להשתנות בכל הנקה 15, לכן ניסיונות צריכים להיעשות כדי לשמור על היום של חלב אוסף עקבי. ייצור חלב מרבי הוא הציע להתרחש ביום ההנקה 14 12. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש בתא התחממות, להבטיח את הגורים הם מסוגלים לשמור על טמפרטורות גוף נכוניםמחדש ללא הנוכחות של האמא שלהם למשך הליך החליבה. הערה: במחקר שיוצג להלן, חליבה בוצעה בגמילה, כאשר הסכרים היו כ 22 שבועות ישנים וישנים 21 ימי הצאצאים, ולכן אין תא התחממות היה בשימוש. </li></ol> 2. הגדרה והכנה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאסוף את כל החומרים הנדרשים להליך החליבה. הערה: ניתן למצוא את כל החומרים בטבלת החומרים וציוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח כרית חימום על הספסל שבי החליבה תתקיים ולכסות את משטח עם ספסל סופג מתחת לכרית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להגדיר את מערכת ההרדמה. ודא שיש במערכת חמצן וisoflurane לפני תחילת מספיק. צרף את מסכת ההרדמה שתשמש לזירוז הרדמה ראשוני למכונה. מניחים את המסכה שתשמש לתחזוקת הרדמה סמוכה אם שונה ממסכת ההרדמה הראשונית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צרף מחט 25 G למזרק 1 מיליליטר לאוקסיטוציןהזרקה באמצעות טכניקת aseptic. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל את כרית החימום כך שטמפרטורת גוף אימהית נשמר במהלך הליך החליבה. הערה: צג הטמפרטורה של כרית החימום על מנת להבטיח את הכרית לא להיות חם מדי ולגרום לכוויות. לחלופין, להשתמש במקור חום, כגון שולחן כירורגית מחומם, שניתן להגדיר טמפרטורה מסוימת. </li></ol> 3. להרדים את Isoflurane שימוש דאם <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתח את מיכל החמצן ולהפוך את זרימה לL 1 (1,000 סמ&quot;ק) לדקה. הפעל את זרימת isoflurane ולהגדיר עד 5%. זהירות: הימנע משאיפה ישירה של חומר הרדמה ולמנוע הצטברות של אדי חומר הרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את הסכר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעבור למסכת התחזוקה אם נדרש, הצבת הסכר פרקדן על משטח הספסל הסופג. לאשר הרדמה על ידי חוסר רפלקס דוושה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להפחית את זרימת isoflurane ל 2-3% עבור תחזוקה של הרדמה. הרף לפקח סכר לאורך ההליך כדי להבטיח דהpression נשימה אינו מתרחש. הערה: לאחר בהרדמה, יש להגן על העיניים של הסכר באמצעות סיכה עין סטרילי כדי למנוע את העיניים מהתייבשות או להיות שרוט. </li></ol> 4. הזרקת אוקסיטוצין <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא אוקסיטוצין (20 USP יחידות / מיליליטר) לא עברו תאריך התפוגה שלה. לחטא את הבקבוקון של אוקסיטוצין עם אלכוהול סטרילי לנגב / כרית ניקוי אלכוהול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות טכניקה האספטי, לערוך 2 IU (0.1 מיליליטר) של אוקסיטוצין לתוך המזרק. שימוש במחט ומזרק חדש עבור כל סכר שיהיה חלב. הערה: מנות אוקסיטוצין בדרך כלל נעות בין זריקות בודדות של 1 עד 5 IU 1,6,12,16. לחלופין, במינון של 4 IU / קילוגרם משקל גוף יכול לשמש 12. מנה אחת של 2 IU ניתן לחזור פעם אחת אם חליבת קושי הוא נתקלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרק אוקסיטוצין intraperitoneally. הכנס את המחט לתוך רבע הימני התחתון של הבטן עם ההצבעה המחט לכיוון הראש, בזוויתשל 15-30 מעלות, כ -0.5 סנטימטרים עמוקים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למשוך בחזרה על הבוכנה על מנת להבטיח לחץ שלילי לפני ההזרקה. אם כל נוזל (דם, שתן, תוכן מעיים, וכו &#39;) הוא להישאף לתוך המזרק, להסיר את המחט ולנסות ההזרקה עם מחט ומזרק חדש. אם אין נוזל להישאף להזריק אוקסיטוצין וזורקים את המחט ומזרק מייד למכל Biohazard. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המתן כ5-15 דקות לאוקסיטוצין כדי לעורר אכזבת חלב. </li></ol> 5. הכנת חליבת האתרים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר את האתרים / פטמות שממנו חלב ייאסף. חלב יכול להיות שנאסף מכל פטמה 12. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוצא בעדינות את הפרווה סביב הפטמות לחליבה עם סתגלן, כפרווה עלולה לגרום לקושי באיסוף דגימה בשל הפתילה של חלב. להיות עדין - העור סביב הפטמות הוא מאוד רגיש ויכול להיות יבש ובתור שכזו הוא רגישה לסריטות ודמעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עיקור שלי הפטמהזה לא הכרחי, אבל אופציונלי, לנקות את הפטמה עם מים פושרים לאחר הפרווה הוסרה. הכן לפחות שני אתרים כמו אתר אחד או יותר עשוי להידרש לאוסף חלב. הערה: אם ניתוח חלב כולל אפיון חיידקים, אזור הפטמה עשוי לדרוש עיקור עם יוד 5. </li></ol> אוסף 6. חלב <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יש ללחוץ בעדינות את הבסיס של הפטמה, לגרש את חלב לאוסף באופן ידני. הערה: אם ניתוח חלב כולל אפיון חיידקים, כמה הטיפות הראשונות של חלב צריך להיות מושלכות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאסוף את טיפות חלב לתוך צינור נימים, מילוי צינור הנימים. צינורות נימים שלהכיל כמויות גדולות יותר (לדוגמא, 50 μl) להקל על התהליך. הערה: אם קושי באיסוף חלב הוא נתקל, מנה שנייה של אוקסיטוצין יכולה להינתן. מומלץ המנה לא תעלה על 4 סך IU. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לוותר חלב מצינור הנימים לתוך צינור microcentrifuge סטרילי על ידילגעת בקצה הצינורית ששימשה לצייר חלב מהפטמה לצד השני של צינור microcentrifuge - לבחון את חלב נמשך אל מחוץ לצינור הנימים באמצעות פעולת נימים. הערה: &quot;לפוצץ את&quot; חלב שאינו נמשך לתוך הצינור באמצעות מחט 18 G מצורפת מזרק 1 מיליליטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרף לפקח על הסכר לסימנים של כאב או דיכאון בדרכי הנשימה ולהתאים את זרימת isoflurane בהתאם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תמשיך לאסוף חלב כפי שתואר בסעיף זה עד חלב מספיק כבר נאסף לניתוח חלב בחר. לקביעת ריכוז creamatocrit והחלבון שתתואר להלן, לאסוף 0.25 מיליליטר של חלב. הערה: השתמש באתר חליבה שונה אם אכזבת חלב מאטה או האתר שנבחר לא מגרש חלב מספיק. מרבי של כ 2.5 מיליליטר של חלב לכל בעל חיים יכולים להיות שנאסף 17, או עד 0.5 מיליליטר לפטמה. החוקרים ממליצים שזמן כולל תחת הרדמה להיות מוגבל לכ 45-60 דקות, or 45 דקות של חליבה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאסוף חלב לתוך צינור microhematocrit למדידת creamatocrit מדגימות חלב טריים, ולאטום את קצה הצינורית עם איטום חימר. תווית צינור microhematocrit עם זיהוי הסכר ולאחסן את מדגם חלב זקוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר החליבה הושלמה, לכבות את זרימת isoflurane והחמצן. הסר את המסכה מהסכר ותמשיך לעקוב אחר סכר עד ער. מומלץ שאם לא בהכרה מלאה, הסכר צריך להיות ממוקם על משטח ספסל סופג במהלך תקופת ההתאוששות, ולא ישירות על מצעי הכלוב, כדי למנוע את המצעים מלהיות להישאף או מגרדים את עיניו של הסכר במהלך התאוששות. הערה: אל תשאיר את הסכר ללא השגחה עד שהוא חזר להכרה מספיק כדי לשמור recumbancy sternal. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם לא ניתוח נוסף נדרש, להקפיא חלב ב -80 ° C. אחרים טענו כי חלב יכול להיות מאוחסן במשך עד 3 שעות על 4 מעלות צלזיוס או 5 חודשים ב -20 ° C. 18. </li></ol> 7. מדידת Creamatocrit <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להעריך את תכולת השומן בחלב על ידי חישוב creamatocrit חלב (אחוז הקרם במדגם חלב) 19. הערה: מדידות עם חלב אנושי הוכיחו כי חלב אם טרי או קפוא יכול לשמש למדידת creamatocrit, אולם חלב טרי מתואם גבוה יותר (r = 0.92 לעומת r = 0.90) עם ריכוז שומנים בדם 11. השימוש בחלב טרי או קפוא למדידות creamatocrit צריך להישמר עקבי במחקר, כמו חלב מופשר קשור עם ירידה קטנה בcreamatocrit ערכי 11. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחלב טרי, לאסוף דגימה של חלב מהפטמה לתוך צינור microhematocrit; למלא לפחות ¾ (כ 15-20 μl) מלא. לחלופין, לצייר חלב טרי מהמדגם שנאסף לתוך צינור הנימים לאחר הערבוב טוב. חותם את הסוף עם איטום חימר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את צינור הנימים לטווית המטוקריט, עםהסוף אטום והצביע לעבר בחוץ, הבטחת צנטריפוגה הוא מאוזן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בגין ספין המטוקריט (120 שניות ב13,700 XG). הערה: זמן ספין או מהירות עשוי להשתנות בהתאם לדגם של צנטריפוגות בשימוש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את הצינור מצנטריפוגות לאחר הספין הוא להשלים ולבצע את המדידות לחישוב creamatocrit. שים לב ההפרדה של המדגם לקרם שכבה ושכבה ברורה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדוד ורשום את האורך הכולל של נוזל בצינור והאורך של השומן (השמנת) שכבה באמצעות מחוגה או שליט. הערה: creamatocrit מתבטא באחוז קרם השכבה בתוך מדגם חלב 19, מחושב כ( אורך של קרם שכבה / אורך כולל של עמודת חלב) x 100 (איור 1 א). לחשב ערכי ריכוז ואנרגיה שומן ממדידת creamatocrit כדלקמן: ריכוז שומן (גר &#39;/ ל&#39;) = (creamatocrit (%) - 0.59) /0.146 (איור 1) 19; ערך אנרגיה (KCאל / L) = 290 + (66.8 * creamatocrit (%) (איור 1 ג) 19. </li></ol> קביעת ריכוז חלבון 8. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש בסרום שור אלבומין כסטנדרט חלבון, לקבוע את ריכוז חלבון חלב כולל באמצעות assay חלבון סטנדרטי, כגון assay חלבון לורי 6. הערה: דילול של חלב עשוי להיות נחוץ למדידות חלבון חלב ליפול בתוך העקומה סטנדרטית של assay. </li></ol>

<ol>
	<li>Izumi, H., Kosaka, N., Shimizu, T., Sekine, K., Ochiya, T., Takase, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time-dependent+expression+profiles+of+microRNAs+and+mRNAs+in+rat+milk+whey.">Time-dependent expression profiles of microRNAs and mRNAs in rat milk whey.</a> PLoS ONE. 9 (2), e0088843 (2014).</li><li>Hsieh, C. C., Hern&#225;ndez-Ledesma, B., Fern&#225;ndez-Tom&#233;, S., Weinborn, V., Barile, D., de Moura Bell, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Milk+Proteins,+Peptides,+and+Oligosaccharides:+Effects+against+the+21st+Century+Disorders.">Milk Proteins, Peptides, and Oligosaccharides: Effects against the 21st Century Disorders.</a> BioMed Res. Int. , (2015).</li><li>Rogier, E. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lessons+from+mother:+Long-term+impact+of+antibodies+in+breast+milk+on+the+gut+microbiota+and+intestinal+immune+system+of+breastfed+offspring.">Lessons from mother: Long-term impact of antibodies in breast milk on the gut microbiota and intestinal immune system of breastfed offspring.</a> Gut Microbes. 5 (5), 663-668 (2014).</li><li>Keen, C. L., L&#246;nnerdal, B., Clegg, M., Hurley, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+changes+in+composition+of+rat+milk:+trace+elements,+minerals,+protein,+carbohydrate+and+fat.">Developmental changes in composition of rat milk: trace elements, minerals, protein, carbohydrate and fat.</a> J. of Nutr. 111 (2), 226-236 (1981).</li><li>Cabrera-Rubio, R., Collado, M. C., Laitinen, K., Salminen, S., Isolauri, E., Mira, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+human+milk+microbiome+changes+over+lactation+and+is+shaped+by+maternal+weight+and+mode+of+delivery.">The human milk microbiome changes over lactation and is shaped by maternal weight and mode of delivery.</a> Am. J. Clin. Nutr. 96 (3), 544-551 (2012).</li><li>Hallam, M. C., Barile, D., Meyrand, M., German, J. B., Reimer, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maternal+high-protein+or+high-prebiotic-fiber+diets+affect+maternal+milk+composition+and+gut+microbiota+in+rat+dams+and+their+offspring.">Maternal high-protein or high-prebiotic-fiber diets affect maternal milk composition and gut microbiota in rat dams and their offspring.</a> Obesity. 22 (11), 2344-2351 (2014).</li><li>Munch, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptome+Profiling+of+microRNA+by+Next-Gen+Deep+Sequencing+Reveals+Known+and+Novel+miRNA+Species+in+the+Lipid+Fraction+of+Human+Breast+Milk.">Transcriptome Profiling of microRNA by Next-Gen Deep Sequencing Reveals Known and Novel miRNA Species in the Lipid Fraction of Human Breast Milk.</a> PLoS ONE. 8 (2), e50564 (2013).</li><li>Li, M., Sloboda, D. M., Vickers, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maternal+obesity+and+developmental+programming+of+metabolic+disorders+in+offspring:+Evidence+from+animal+models.">Maternal obesity and developmental programming of metabolic disorders in offspring: Evidence from animal models.</a> Exp Diabetes Res. 2011, (2011).</li><li>Ellis, P. J. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrifty+metabolic+programming+in+rats+is+induced+by+both+maternal+undernutrition+and+postnatal+leptin+treatment,+but+masked+in+the+presence+of+both:+implications+for+models+of+developmental+programming.">Thrifty metabolic programming in rats is induced by both maternal undernutrition and postnatal leptin treatment, but masked in the presence of both: implications for models of developmental programming.</a> BMC Genomics. 15, 49 (2014).</li><li>Gomez-Gallago, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+to+collect+high+volumes+of+milk+from+mice+(Mus+musculus).">A method to collect high volumes of milk from mice (Mus musculus).</a> An. Vet. Murcia. 29, 55-61 (2013).</li><li>Wang, C. D., Chu, P. S., Mellen, B. G., Shenai, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creamatocrit+and+the+nutrient+composition+of+human+milk.">Creamatocrit and the nutrient composition of human milk.</a> J. Perinatol. 19 (5), 343-346 (1999).</li><li>Rodgers, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Practical+aspects+of+milk+collection+in+the+rat.">Practical aspects of milk collection in the rat.</a> Lab. Anim. 29 (4), 450-455 (1995).</li><li>Godbole, V. Y., Grundleger, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Composition+of+rat+milk+from+day+5+to+20+of+lactation+and+milk+intake+of+lean+and+preobese+zucker+pups.">Composition of rat milk from day 5 to 20 of lactation and milk intake of lean and preobese zucker pups.</a> J. Nutr. 111 (3), 480-487 (1981).</li><li>Del Prado, M., Delgado, G., Villalpando, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maternal+lipid+intake+during+pregnancy+and+lactation+alters+milk+composition+and+production+and+litter+growth+in+rats.">Maternal lipid intake during pregnancy and lactation alters milk composition and production and litter growth in rats.</a> J. Nutr. 127 (3), 458-462 (1997).</li><li>Nicholas, K. R., Hartmann, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Milk+secretion+in+the+rat:+progressive+changes+in+milk+composition+during+lactation+and+weaning+and+the+effect+of+diet.">Milk secretion in the rat: progressive changes in milk composition during lactation and weaning and the effect of diet.</a> Comp. Biochem. Physiol. A. Comp. Physiol. 98 (3-4), 533-542 (1991).</li><li>Azara, C. R. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethanol+intake+during+lactation+alters+milk+nutrient+composition+and+growth+and+mineral+status+of+rat+pups.">Ethanol intake during lactation alters milk nutrient composition and growth and mineral status of rat pups.</a> Biol. Res. 41 (3), 317-330 (2008).</li><li>Keen, C. L., L&#246;nnerdal, B., Sloan, M. V., Hurley, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+milking+procedure+on+rat+milk+composition.">Effects of milking procedure on rat milk composition.</a> Physiol. Behav. 24 (3), 613-615 (1980).</li><li>Romeu-Nadal, M., Castellote, A. I., L&#242;pez-Sabater, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+cold+storage+on+vitamins+C+and+E+and+fatty+acids+in+human+milk.">Effect of cold storage on vitamins C and E and fatty acids in human milk.</a> Food Chem. 106 (1), 65-70 (2008).</li><li>Lucas, A., Gibbs, J. A., Lyster, R. L., Baum, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creamatocrit:+simple+clinical+technique+for+estimating+fat+concentration+and+energy+value+of+human+milk.">Creamatocrit: simple clinical technique for estimating fat concentration and energy value of human milk.</a> Br. Med. J. 1 (6119), 1018-1020 (1978).</li><li>Furtado, K., Andrade, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+the+beneficial+and+adverse+effects+of+inhalable+and+injectable+anaesthetics+in+animal+models:+a+mini-review.">Comparison of the beneficial and adverse effects of inhalable and injectable anaesthetics in animal models: a mini-review.</a> OA Anaesthetics. 1 (2), 20 (2013).</li><li>Hausman Kedem, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+advanced+maternal+age+upon+human+milk+fat+content.">The effect of advanced maternal age upon human milk fat content.</a> Breastfeed. Med. 8 (1), 116-119 (2013).</li><li>Mandel, D., Lubetzky, R., Dollberg, S., Barak, S., Mimouni, F. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fat+and+energy+contents+of+expressed+human+breast+milk+in+prolonged+lactation.">Fat and energy contents of expressed human breast milk in prolonged lactation.</a> Pediatrics. 116 (3), e432-e435 (2005).</li></ol>

יש המחברים אין ניגודי אינטרסים לחשוף. כל הניסויים בבעלי החיים נערכו בהתאם לפרוטוקולי CCAC אושר.

Investigations into maternal milk components have increased as interest in early life development research rises. As the sole source of nutrition during the neonatal period, the bioactive compounds in milk are essential for ideal growth and development, especially in the context of intestinal and immune health3. The method presented here is a simple, non-invasive method of collecting milk from the lactating rat in amounts sufficient for downstream analysis, such as oligosaccharide profiling6. The me...

חלב הוא המקור היחיד לתזונה ליונקים יילוד, לספק אנרגיה וחומרים מזינים לצמיחת תינוק ו1,2 פיתוח. בעוד חלב מורכב בעיקר של תאים, שומנים, וחלבונים 1, הוא מכיל גם שפע של תרכובות ביו לווסת פיתוח חייו המוקדם של צאצאים כוללים אנזימים, פחמימות, הורמונים, נוגדנים, גורמי גדילה, ציטוקינים, exosomes, microvesicles, וRNA הקטן כזה כמייקרו-רנ&quot;א 1,2. התפקיד הבסיסי של חלב אימהי בהקמת צאצאים חיסוניים ובריאות מעיים 3, יחד עם ראיות לכך שהנקת תינוקות הם פחות רגישים למחלה 2, מדגיש את החשיבות של זיהוי מרכיבי חלב הקשורים לתהליכי מחלה בתחילת החיים והמנגנונים המולקולריים מעורבים במעשיהם. עכברוש הפיתוח הוא מודל פופולרי לחקירת ההשפעה של תזונה שונות, פיסיולוגי, והתערבויות כימיות בתחילהפיתוח&#39;החיים 4. הניתוח של חלב חולדה לכן עשוי לספק תובנות רומן לבריאות האם וצאצאים. התקדמות מדעית נוכחית כעת לספק הגדלת הזדמנויות לחקירות מעמיקות של ההשפעות של מרכיבי חלב ספציפיים על בריאות ומחלה. לדוגמא, רצף של פרופילי חיידקי החלב הובהר תפקידם בהתישבות במעי המוקדמת של מעי התינוק 5, ניתוח ספקטרומטר מסה של אוליגוסכרידים חלב סיפק תובנה השינוי של פרופילי oligosaccharide חלב באמצעות דיאטה אימהית 6, ורצף עמוק של microRNA מופרש ב כדוריות השומן של חלב מדגישה תפקידים אפשריים בשעתוק הגנים, חילוף חומרים, ואת תפקוד מערכת חיסון 7. מודלים של עכברים מייצגים את אחד אורגניזמים המודל הפופולריים ביותר בשימוש במחקרים אימהיים 8,9. יתרון אחד הוא תקופות קצרות שלהם להריון והנקה, שנמשכות רק approximatאיליי 21 ימים כל אחד; לכן הזמן הכולל מתחילת ההריון להנקה מייצג פרק זמן קצר שבו יכולים להיות שנוצרו נתונים יקרי ערך. הגודל הגדול יותר של חולדות בהשוואה לעכברים, בהקשר של אוסף חלב, עשוי לספק יתרון משמעותי ביחס להיקף של חלב וקלות אוסף חלב; ייצור חלב בעכבר למשל נראה,, להיות תלוי במשקל גוף כולל עם עכברים כבדים לייצר יותר חלב 10. כאן, תיאור כללי לאיסוף הידני של חלב מחולדות מניקות מסופק. פרוטוקול זה דורש ציוד מינימאלי, אינו פולשני, זול, וניתן להשתמש בם כדי לאסוף כמויות מספיקות של חלב לניתוחים נוספים במורד הזרם. בקיצור, הסכר הוא הרדים עם isoflurane, אכזבת חלב היא מגורה על ידי אוקסיטוצין, וחלב נאסף לתוך צינורות נימים באמצעות ביטוי ידני של חלב. לבסוף, כשני מרכיבים עיקריים של חלב הם שומן וחלבונים, descriptio קצרn של הערכת תכולת שומן חלב באמצעות מדידות creamatocrit 11 וכימות של ריכוז חלבון כולל באמצעות assay חלבון סטנדרטי מוצג.

<table><tbody><tr><td>&lt;strong&gt;&lt;em&gt;Equipment - Milking&lt;/em&gt;&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>1 ml syringes</td><td>BD-Canada</td><td>309602</td><td></td></tr><tr><td>25 G needles</td><td>BD-Canada</td><td>305122</td><td></td></tr><tr><td>18 G needles</td><td>BD-Canada</td><td>305196</td><td></td></tr><tr><td>50 &amp;mu;l Microdispenser Capillary Tubes</td><td>Fisher Scientific</td><td>21-169D</td><td></td></tr><tr><td>Oxytocin (20 USP Units/ml)</td><td>Bimeda-MTC</td><td>1OXY015</td><td></td></tr><tr><td>PPC Vet Isoflurane Inhalation Anesthetic, 250 ml</td><td>Fresenius Kabi</td><td>M60302</td><td>Used on the order of a veterinarian</td></tr><tr><td>Sterile Alcohol Prep Pad</td><td>Dukal</td><td>853</td><td></td></tr><tr><td>Absorbent Bench Underpad</td><td>VWR</td><td>82020-845</td><td></td></tr><tr><td>Maxi-Therm Hyper/Hypothermia Blanket</td><td>Cincinnati Sub-Zero</td><td>274</td><td></td></tr><tr><td>Rodent Anesthesia Machine with Vaporizer</td><td>Benson Medical Industries Inc.</td><td></td><td>Subject to individual laboratory needs</td></tr><tr><td>Animal Masks</td><td>Benson Medical Industries Inc.</td><td>50100/50102</td><td></td></tr><tr><td>Microcentrifuge Tubes</td><td>Axygen</td><td>MCT-060-C</td><td></td></tr><tr><td>ChroMini Professional Trimmer</td><td>Wahl</td><td></td><td></td></tr><tr><td>&lt;strong&gt;&lt;em&gt;Equipment - Creamatocrit&lt;/em&gt;&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>StatSpin SafeCrit Plastic Microhematocrit Tubes (Untreated)</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-274-914</td><td></td></tr><tr><td>Critoseal Capillary Tube Sealant Tray</td><td>VWR</td><td>470161-478</td><td></td></tr><tr><td>StatSpin CritSpin Microhematocrit Centrifuge</td><td>Beckman Coulter, Inc</td><td>X00-004999-001</td><td></td></tr></tbody></table>

milk collection in the rat using capillary tubes and estimation of milk fat content by creamatocrit

Milk, as the sole source of nutrition for the newborn mammal, provides the necessary nutrients and energy for offspring growth and development. It also contains a vast number of bioactive compounds that greatly affect the development of the neonate. The analysis of milk components will help elucidate key factors that link maternal metabolism and health with offspring growth and development. The laboratory rat represents a popular model organism for maternal studies, and rat milk can be used to examine the effect of various maternal physiological, nutritional, and pharmacological interventions on milk components, which may then impact offspring health. Here a simple method of manually collecting milk from the lactating rat that can be performed by a single investigator, does not require specialized vacuum or suction equipment, and provides sufficient milk for subsequent downstream analysis is described. A method for estimating the fat content of milk by measuring the percentage of cream within the milk sample, known as the creamatocrit, is also presented. These methods can ultimately be used to increase insight into maternal-child health and to elucidate maternal factors that are involved in proper growth and development of offspring.

חלב נאסף כמתואר בגמילה מסכרי Wistar (כ 22 שבועות, במשקל של 350-400 ז) שצרך שליטה (AIN-93G, n = 5), חלבון גבוה (40% WT קזאין / WT, n = 5) , או סיבי prebiotic גבוהים (21.6% WT / WT, 1: 1 יחס של אוליגופרוקטוז ואינולין, n = 4) דיאטה במהלך הריון והנקה. מינון האוקסיטוצין היה 2 IU. חלב נאסף באמצעות צינורות נימים, וצינור...

Watch this Scientific Journal Video about Milk Collection in the Rat Using Capillary Tubes and Estimation of Milk Fat Content by Creamatocrit at JoVE.com

Milk Collection in the Rat Using Capillary Tubes and Estimation of Milk Fat Content by Creamatocrit

Milk is a primary source of nutrition for the neonate. Analysis of milk components may provide insight into maternal factors that affect offspring health. This protocol describes a manual method of collecting milk samples from the lactating rat, which can then be used for further downstream analysis.

אוסף חלב בעכברוש שימוש נימי צינורות והערכה של שומן חלב תוכן על ידי Creamatocrit

Milk, as the sole source of nutrition for the newborn mammal, provides the necessary nutrients and energy for offspring growth and development. It also ...

milk-collection-rat-using-capillary-tubes-estimation-milk-fat-content

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Biology

12.3K Views.  University of Calgary. Milk is a primary source of nutrition for the neonate. Analysis of milk components may provide insight into maternal factors that affect offspring health. This protocol describes a manual method of collecting milk samples from the lactating rat, which can then be used for further downstream analysis.

Video: Milk Collection in the Rat Using Capillary Tubes and Estimation of Milk Fat Content by Creamatocrit

The Use of Gas Chromatography to Analyze Compositional Changes of Fatty Acids in Rat Liver Tissue during Pregnancy

Gas chromatography (GC) is a highly sensitive method used to identify and quantify the fatty acid content of lipids from tissues, cells, and plasma/serum, yielding results with high accuracy and high reproducibility. In metabolic and nutrition studies GC allows assessment of changes in fatty acid concentrations following interventions or during changes in physiological state such as pregnancy. Solid phase extraction (SPE) using aminopropyl silica cartridges allows separation of the major lipid classes including triacylglycerols, different phospholipids, and cholesteryl esters (CE). GC combined with SPE was used to analyze the changes in fatty acid composition of the CE fraction in the livers of virgin and pregnant rats that had been fed various high and low fat diets. There are significant diet/pregnancy interaction effects upon the omega-3 and omega-6 fatty acid content of liver CE, indicating that pregnant females have a different response to dietary manipulation than is seen among virgin females.

Pregnancy leads to significant changes to the fatty acid composition of maternal tissues. Lipid profiles can be obtained via gas chromatography to allow identification and quantification of fatty acids in individual lipid classes among rats fed various high and low fat diets during pregnancy.

השימוש בגז כרומטוגרפיה לנתח הלחנה שינויים של חומצות שומן ברקמות חולדה כבד במהלך הריון

Gas chromatography (GC) is a highly sensitive method used to identify and quantify the fatty acid content of lipids from tissues, cells, and plasma/serum, ...

Chemistry

Rat Mammary Epithelial Cell Transplantation into the Interscapular White Fat Pad

As early as the 1970s, researchers have successfully transplanted mammary epithelial cells into the interscapular white fat pad of rats. Grafting mammary epithelium using transplantation techniques takes advantage of the hormonal environment provided by the adolescent rodent host. These studies are ideally suited to explore the impact of various biological manipulations on mammary gland development and dissect many aspects of mammary gland biology. A common, but limiting, feature is that transplanted epithelial cells are strongly influenced by the surrounding stroma and outcompeted by endogenous epithelium; to utilize native mammary tissue, the abdominal-inguinal white fat pad must be cleared to remove host mammary epithelium prior to the transplantation. A major obstacle when using the rat model organism is that clearing the developing mammary tree in post-weaned rats is not efficient. When transplanted into gland-free fat pads, donor epithelial cells can repopulate the cleared host fat pad and form a functional mammary gland. The interscapular fat pad is an alternative location for these grafts. A major advantage is that it lacks ductal structures yet provides the normal stroma that is necessary to promote epithelial outgrowth and is easily accessible in the rat. Another major advantage of this technique is that it is minimally invasive, because it eliminates the need to cauterize and remove the growing endogenous mammary tree. Additionally, the interscapular fat pad contains a medial blood vessel that can be used to separate sites for grafting. Because the endogenous glands remain intact, this technique can also be used for studies comparing the endogenous mammary gland to the transplanted gland. This paper describes the method of mammary epithelial cell transplantation into the interscapular white fat pad of rats.

This article describes a transplantation method to graft donor rat mammary epithelial cells into the interscapular white fat pad of recipient animals. This method can be used to examine host and/or donor effects on mammary epithelium development and eliminates the need for pre-clearing, thereby extending the usefulness of this technique.

חולדה השתלת תא האפיתל לתוך משטח שומן לבן הגלימה

As early as the 1970s, researchers have successfully transplanted mammary epithelial cells into the interscapular white fat pad of rats. Grafting mammary ...

Cancer Research

Prevention of Heat Stress Adverse Effects in Rats by Bacillus subtilis Strain

This study was designed to evaluate the protective effect of the Bacillus subtilis strain against complications related to heat stress. Thirty-two Sprague-Dawley rats were used in this study. Animals were orally treated twice a day for two days with B. subtilis BSB3 strain or PBS. The next day after the last treatment, each group was divided and two experimental groups (one treated with PBS and one treated with B. subtilis) were placed at 45 oC for 25 min. Two control groups stayed for 25 min at room temperature. All rats were euthanized and different parameters were analyzed in all groups. Adverse effects of heat stress are registered by the decrease of villi height and total mucosal thickness in the intestinal epithelium; translocation of bacteria from the lumen; increased vesiculation of erythrocytes and elevation of the lipopolysaccharides (LPS) level in the blood. The protective efficacy of treatment is evaluated by prevention of these side effects. The protocol was set up for the oral treatment of rats with bacteria for prevention of heat stress complications, but this protocol can be modified and used for other routes of administration and for analysis of different compounds.

Prevention of Heat Stress Adverse Effects in Rats by Bacillus subtilis Strain

We described a protocol for prevention of heat stress effects in rats by oral pre-treatment with beneficial bacteria. This protocol can be modified and used for various routes of administration and for analysis of different compounds.

מניעת חום מתח תופעות לוואי בחולדות על ידי<em&gt; Subtilis Bacillus</em&gt; זנים

This study was designed to evaluate the protective effect of the Bacillus subtilis strain against complications related to heat stress. Thirty-two ...

Immunology and Infection

Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the tail vein is thin so that it is sometimes hard to puncture. In addition, the tail vein has low blood flow and requires a long sampling time to get sufficient blood. The present report describes a simple blood sampling method, the vacuum blood collection method, which is usually used to obtain blood samples from patients, here used for non-anesthetized rats. The 22 G butterfly needle tip was inserted into one of the lateral tail veins approximately 2-3 cm from the tip of the tail at an angle of approximately 20&#176;, and blood was collected in the vacuum collection tube by inserting the rubber end of the butterfly needle into the vacuum blood collection tube. The present experimental results show that the success rate was 95% in the experimental group and 90% in the beginner group. The success rate and puncture times were similar between two groups. The sampling duration was significantly shorter in the experimental group compared to beginner group. In conclusion, this vacuum blood collection method for sequential blood sampling from the tail vein of non- anesthetized rats is feasible and easy-to-learn, which might serve as a reliable alternative to other conventionally used blood sampling techniques for rats.

Here, we describe a simple tail vein blood sampling method in non-anesthetized rats using a vacuum extraction tube system. This method reduces the risk of direct exposure to blood and simplifies taking multiple samples from a single venipuncture.

חזר על איסוף דם של וריד הזנב של חולדות שאינם מרדימים עם מערכת איסוף דם ואקום

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

Medicine

Three-Dimensional Culture of Vascularized Thermogenic Adipose Tissue from Microvascular Fragments

Engineering thermogenic adipose tissue (e.g., beige or brown adipose tissues) has been investigated as a potential therapy for metabolic diseases or for the design of personalized microtissues for health screening and drug testing. Current strategies are often quite complex and fail to accurately fully depict the multicellular and functional properties of thermogenic adipose tissue. Microvascular fragments, small intact microvessels comprised of arteriole, venules, and capillaries isolated from adipose tissue, serve as a single autologous source of cells that enable vascularization and adipose tissue formation. This article describes methods for optimizing culture conditions to enable the generation of three-dimensional, vascularized, and functional thermogenic adipose tissues from microvascular fragments, including protocols for isolating microvascular fragments from adipose tissue and culture conditions. Additionally, best practices are discussed, as are techniques for characterizing the engineered tissues, and sample results from both rodent and human microvascular fragments are provided. This approach has the potential to be utilized for the understanding and development of treatments for obesity and metabolic disease.

Here, we present a detailed protocol outlining the use of microvascular fragments isolated from rodent or human fat tissue as a straightforward approach to engineer functional, vascularized beige adipose tissue.

תרבית תלת מימדית של רקמת שומן תרמוגנית וסקולרית מקטעים מיקרו-וסקולריים

Engineering thermogenic adipose tissue (e.g., beige or brown adipose tissues) has been investigated as a potential therapy for metabolic diseases or for ...

Bioengineering

Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits (Oryctolagus cuniculus)

Due to similarities in placentation and antibody transfer with humans, rabbits are an excellent model of maternal immunization. Additional advantages of this research model are the ease of breeding and sample collection, relatively short gestation period, and large litter sizes. Commonly assessed routes of immunization include subcutaneous, intramuscular, intranasal, and intradermal. Nonterminal sample collection for the chronological detection of the immunologic responses to these immunizations include the collection of blood, from both dams and kits, and milk from the lactating does. In this article, we will demonstrate techniques our lab has utilized in studies of maternal immunization in New Zealand White rabbits (Oryctolagus cuniculus), including intranasal immunization and milk collection.

Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits Oryctolagus cuniculus

This article describes and demonstrates the administration of intranasal vaccines and the collection of milk from lactating rabbits (Oryctolagus cuniculus) as a means to assess mucosal immunity in a translationally appropriate model of maternal immunization.

חיסון תוך-כלי ואוסף חלב במחקרים על חיסון אימהי בארנבים הלבנים של ניו זילנד (Oryctolagus cuniculus)

Due to similarities in placentation and antibody transfer with humans, rabbits are an excellent model of maternal immunization. Additional advantages of ...

Milk Collection Methods for Mice and Reeves' Muntjac Deer

Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen&#8217;s native host. Milk collection from animals allows scientists the opportunity to study many aspects of reproduction including vertical transmission, passive immunity, mammary gland biology, and lactation. Obtaining adequate volumes of milk for these studies is a challenging task, especially from small animal models. Here we illustrate an inexpensive and facile method for milk collection in mice and Reeves&#8217; muntjac deer that does not require specialized equipment or extensive training. This particular method requires two researchers: one to express the milk and to stabilize the animal, and one to collect the milk in an appropriate container from either a Muntjac or mouse model. The mouse model also requires the use of a P-200 pipetman and corresponding pipette tips. While this method is low cost and relatively easy to perform, researchers should be advised that anesthetizing the animal is required for optimal milk collection.

Milk collection from animal models facilitates various research avenues: understanding passive immunity, identifying pathogens responsible for vertical transmission and, through the use of transgenic mice, even commercial production of proteins found in human breast milk. Here we illustrate a simple method for milk collection in mice and Reeves&#8217; muntjac deer.

שיטות איסוף חלב לעכברים וריבס &#39;Muntjac צביים

Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen&#8217;s native ...

Preparation of Rat Serum Suitable for Mammalian Whole Embryo Culture

Mammalian whole embryo culture (WEC) is a widely used technique for examining pharmacological toxicity in developing mouse and rat embryos and for investigating the mechanisms of developmental processes. Immediately centrifuged (IC) rat serum is commonly used for WEC and is essential for the growth and development of cultured mouse and rat embryos ex vivo. For the culture of midgestation embryos (i.e., E8.0-12.5 for the mouse, and E10.0-14.5 for the rat), 100% rat serum is the best media for supporting the growth of the embryo ex vivo. To prepare rat serum suitable for WEC, the collected blood should be centrifuged immediately to separate the blood cells from the plasma fraction. After centrifugation, the fibrin clot forms in the upper layer; this clot should be squeezed gently using a pair of sterile forceps and subsequently centrifuged to completely separate the blood cells from the serum. In this video article, we demonstrate our standard protocol for the preparation of optimal IC rat serum, including blood collection from the abdominal aorta of male rats and extraction of the serum by centrifugation.

Mammalian whole embryo culture (WEC) is widely used in teratology and developmental biology. Immediately centrifuged rat serum is commonly provided as a medium for both mouse and rat WEC. In this video, we demonstrate our standard protocol for the preparation of high-quality rat serum suitable for mammalian WEC.

הכנת סרום העכברוש מתאים לתרבות עובר שלמה יונקים

Mammalian whole embryo culture (WEC) is a widely used technique for examining pharmacological toxicity in developing mouse and rat embryos and for ...

נוזל מוחי ונסיגת דם מחולדות עם רישום EEG במקביל

Sampling Cerebrospinal Fluid and Blood from Lateral Tail Vein in Rats During EEG Recordings

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure molecules of interest, such as hormones, growth factors, proteins, or small non-coding RNAs. A specific example is the sampling of biological liquids in the research of biomarkers for epilepsy. In these studies, it is desirable to compare the levels of molecules in cerebrospinal fluid (CSF) and in plasma, by withdrawing CSF and plasma in parallel and considering the time distance of the sampling from and to seizures. The combined CSF and plasma sampling, coupled with video-EEG monitoring in epileptic animals, is a promising approach for the validation of putative diagnostic and prognostic biomarkers. Here, a procedure of combined CSF withdrawal from cisterna magna and blood sampling from the lateral tail vein in epileptic rats that are continuously video-EEG monitored is described. This procedure offers significant advantages over other commonly used techniques. It permits rapid sampling with minimal pain or invasiveness, and reduced time of anesthesia. Additionally, it can be used to obtain CSF and plasma samples in both tethered and telemetry EEG recorded rats, and it may be used repeatedly across multiple days of experiment. By minimizing the stress due to sampling by shortening isoflurane anesthesia, measures are expected to reflect more accurately the true levels of investigated molecules in biofluids. Depending on the availability of an appropriate analytical assay, this technique may be used to measure the levels of multiple, different molecules while performing EEG recording at the same time.

מחבר זרקור: השגת CSF באיכות גבוהה ודגימות דם לגילוי סמנים ביולוגיים לאפילפסיה 

The protocol shows repeated cerebrospinal fluid and blood collections from epileptic rats performed in parallel with continuous video-electroencephalogram (EEG) monitoring. These are instrumental for exploring possible links between changes in various body fluid molecules and seizure activity.

דגימת נוזל מוחי ודם מווריד זנב לטרלי בחולדות במהלך רישומי EEG

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many ...

אוסף חלב בעכברוש שימוש נימי צינורות והערכה של שומן חלב תוכן על ידי Creamatocrit

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

השימוש בגז כרומטוגרפיה לנתח הלחנה שינויים של חומצות שומן ברקמות חולדה כבד במהלך הריון

חולדה השתלת תא האפיתל לתוך משטח שומן לבן הגלימה

מניעת חום מתח תופעות לוואי בחולדות על ידי

חזר על איסוף דם של וריד הזנב של חולדות שאינם מרדימים עם מערכת איסוף דם ואקום

תרבית תלת מימדית של רקמת שומן תרמוגנית וסקולרית מקטעים מיקרו-וסקולריים

חיסון תוך-כלי ואוסף חלב במחקרים על חיסון אימהי בארנבים הלבנים של ניו זילנד (Oryctolagus cuniculus)

שיטות איסוף חלב לעכברים וריבס 'Muntjac צביים

הכנת סרום העכברוש מתאים לתרבות עובר שלמה יונקים

דגימת נוזל מוחי ודם מווריד זנב לטרלי בחולדות במהלך רישומי EEG

דגימת נוזל מוחי ודם מווריד זנב לטרלי בחולדות במהלך רישומי EEG