עבודה זו נתמכה על ידי NIH מענקי CA163640, CA166590, וAG041250 לLC.

הנהלים המתוארים להלן אושרו על ידי הוועדה המוסדית הטיפול בבעלי חיים והשימוש (IACUC) מאוניברסיטת אוהיו. 1. הכנת מועשרת הסביבה לפני עכברים שיכון <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ניקוי ותחזוקה של מכשירים. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל בן העשרה הגדול (120 סנטימטרים X 90 סנטימטרים X 76 סנטימטרים) באמצעות שטיפת כלוב. פרוטוקול לשטוף כלוב מתקן בעלי החיים אופייני כולל 5 עד 6 מחזורי כביסה, עם המחזור האחרון הגיע 82 מעלות צלזיוס. כל הכביסה צריכה לקחת כ -40 דקות. אוויר יבש לפח. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם בן הגדול העשרה, וכל מכשירי דיור אחרים, לא ניתן לשלוח באמצעות שטיפת כלוב, לאחר מכן לרסס ולנגב את החלק הפנימי של בן עם חומרי חיטוי sporicidal הבאים הוראות היצרן. נגב את הסל במגבת ספוגה במים ברז נייר או 30% אתנול ויבש במגבת נייר כדי להיפטר מריח מכל חומר החיטוי הקודם. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יציקה שימושצינורות טיק, איגלו עם גלגלי סוג הצלחת, וצעצועים כמו לול-אחרים פלסטיק שונים בEE. לשטוף צעצועים אלה באמצעות שטיפת כלוב. אם אין לך גישה לצעד מעקב לשטוף כלוב 1.1.1.1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש גלגלי ריצת המתכת בEE. לשטוף גלגלים באמצעות שטיפת כלוב. אם הצבע על הגלגלים מתחיל לדעוך, כך שהגלגל הופך רועש כאשר בעלי החיים לרוץ על זה, תחול וזלין קטן סכום שבו הגלגל ואקסל להתחבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בולי עץ בEE. נקה את היומנים על ידי הסרת כל מצעים או פסולת אחרת ביד. אז לעקר את היומנים ידי המעוקר על מחזור מחזור או טקסטיל יבש, אשר מגיע לטמפרטורה של 121 מעלות צלזיוס במשך 15 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש כלובים בין הממדים של 29 סנטימטרים X 18 סנטימטרים X 12.5 סנטימטר וסנטימטר 30.5 x 19 סנטימטרים X 14 סנטימטרים להחזיק חוט האכלה ושתיית rack.Cut חור לפחות 5 סנטימטרים קוטר מחוץ לחלק הקדמי-התחתון של הכלוב ל עכברים ללכת פנימה והחוצה מEE. לנקות כלובי האכלה אלה באמצעות שטיפת כלוב. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדרת הסביבה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יוצקים מצעי בעלי חיים במעבדה קלח תירס ¼ אינץ &#39;לפח ההעשרה הגדול. מכסה את כל שטח הרצפה של בן עד לעומק של 2-2.5 סנטימטר עם מצעים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים שניים או שלושה יומנים בפינה אחת של בן. יומני מקום בפינה כדי לעקל על שטח של כ 1,225 סנטימטר 2. באזור מוחרם על ידי היומנים, למקם את שלושה איגלו עם גלגלי צלחת על גבי. ודא הגלגלים לא לגעת בקירות של בן, היומנים, או אחד את השני, כך שיש מספיק מקום לגלגלים להסתובב באופן חופשי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חתיכה יחד צינורות הפלסטיק, כך שזרועות מרובות סניף מ- חתיכת חיבור centeral. מניחים צינור זה באמצע בן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשתי פינות של בן, למקם את כלוב האכלה אחת בכל מלא באותה המיטה כמו הסל, והחור בחלק הקדמי של כלוב ההאכלה צריך להיות מול לכיוון מרכז בן. על גבי כלובי האכלה אלה חוט מזון ומים נקיצריך להיות ממוקם להחזיק מזון ומים. אל תניח את המכסה על הכלוב. לשים אוכל ומים בחוטי הכלוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח שלושה גלגלי מתכת לפח, אם כי לא כל האחד ליד שני. שלושה סוגים שונים של גלגלים הם גלגל אחד 11.5 סנטימטר, גלגל 20.5 סנטימטר אחד, וגלגל סנטימטרים 28 אחד. אז למקם את הצעצועים כמו לול-4-5 יותר פלסטיק או מנהרות לאורך בן ההעשרה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לכסות את הסל עם נייר סינון מיקרו מבודד. השתמש קליפים קלסר קליפ נייר הסינון לסל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החידוש חשוב EE. שימוש בהגדרה זו כמסגרת EE ולהשתנות המיקום של כלובים האמורים, חפצים, וצעצועים ליצירת סביבה חדשה לבעלי החיים. </li></ol></li></ol> 2. שיכון בעלי חיים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להתרבות בעלי חיים לניסויים במעבדת דיור קבוע ולא EE. לחלופין, להעמיד את בעלי החיים בEE מוקדם ככל 21 ימים של גיל על גמילה. בעלי החיים גנוטיפ ואגרוף / תג אוזן לפני דיור EE. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעת ביצועבעלי חיים לפח ההעשרה מכלוב סטנדרטי, למקם את הכלוב בסל בצד השני שלה, כך שבעלי החיים יכולים לנוע בחופשיות מהכלוב הסטנדרטי לסל ההעשרה. אל תאפשר חומרי הקינון שיועברו לפח ההעשרה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בית 10-20 חיות מאותו הגיל, המין, והמתח גנטי בEE. </li></ol> 3. שמירה על איכות הסביבה והקפדה על העכברים במהלך לימודים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יומי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשקט לבחון את בעלי החיים לסימני מחלה או מצוקה. אם יש צורך, בעדינות לטפל בחיות כדי לבדוק עוד מצבים בריאותיים. תצפיות שיא לא נורמליות ולהתייעץ טכנאי בריאות או צוות וטרינר אם התנאים מציג בעלי החיים שדורשים הסרת מהניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לספק טיפול מקומי במשחה אנטי-ביוטיים משולשים לפצעים קטנים או גלדים. אם בעל חיים צריך להיות הוסרו בשל מחלה או פציעה כרונית, להסיר את החיה מהניסוי להמתת חסד. אם בעלי חייםעומד בקריטריונים להסרת מוקדמים לועדת הפיקוח של בעלי החיים מחקר הטיפול או הווטרינר, לא לחזור חיות בחזרה לEE. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פעמיים בשבוע <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את רמות הזנה ומים. ודא כי הזנה ומים יימשכו 3-4 הימים הבאים. לסדר את גלגלי ריצה וצעצועי העשרה, כך שהם פרושים וניתן להשתמש בם על ידי עכברים. החלף כל כי הם מלוכלכים מדי. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שבועי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להחליף בקבוקי מים עם בקבוקי מים נקיים. סידור מחדש של מכשירי העשרה באופן שלהלן הגדרתו בסעיף 1.2. עדיין הוא שונה מההגדרה של השבוע הקודם. הערה: אם ניסוי דורש בעלי החיים שיש להסירו מהסביבה המועשרת לפעילות (הקלטת משקל גוף, לקיחת דם, בדיקת התנהגות, וכו &#39;) עדיף לארגן מחדש את הסביבה תוך החיות מסל ההעשרה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנקות את כלובי ההאכלה בEE ביד או לשלוח אותו באמצעות שטיפת כלובכמפורט בסעיף 1.1.5. החלף את מדפי החוט שמחזיקים את המזון ומים עם מדפי תיל נקיים גם כן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע את ההוראות בסעיף 2.2. בעת ביצוע בעלי החיים בחזרה בהעשרה. ספוט לבדוק את שאר בן העשרה הגדול והנקי, במידת צורך, על ידי גורף את חול מלוכלך ומתפשט למטה מצעים נקיים חדשים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דו-שבועי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעת ביצוע בעלי השבועיים, לנקות את הצעצועים ביד או לשלוח באמצעות שטיפת כלוב כמפורט בסעיף 1.1.2. במידת הצורך, להניח את העכברים בכלוב מייקר מבודד סטנדרטי לזמן הנדרש כדי לנקות. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חודשי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נקה את רוב הפסולת על ידי הזזת צעצועי העשרה והאכלת כלובים וגורפים את הלכלוך. החלף עם המלטה טרי. ודא שיש אינץ &#39;של מצעים אחד בכל תחומי הכלוב. במידת הצורך, להניח את העכברים בכלוב מייקר מבודד סטנדרטי לזמן הנדרש כדי לנקות. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כל שלושהחודשים (או בסוף הניסוי) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את כל המצעים וצעצועים ולנקות ולחטא את סל ההעשרה כפי שתואר בסעיף 1.1.1. אם הניסוי נמשך, להחליף עם מצעים חדשים, האכלת כלובים, מבחר של צעצועים ולאחר מכן להחזיר את העכברים לסל. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחטא את כל סל ההעשרה בתדירות גבוהה יותר מאשר אחת לשלושה חודשים אם נדרש על ידי מוסד המחקר שבו שוכן EE. אם זה הכרחי ועוד מיכל העשרה גדול זמין, להגדיר את מיכל העשרה נוסף כמפורט בסעיף 1.2. ולהעביר את בעלי החיים למכל החדש, בעוד הקודם הוא להיות ניקה. </li></ol> 4. תנאי דיור בקרה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעלי חיים בית בקבוצת הביקורת בכלובי מיקרו מבודד של ממדים 30.5 סנטימטרים X 19 סנטימטרים X 14 סנטימטר. כולל מדף תיל בכלוב להחזקת מזון ובקבוק מים, אם הכלוב לא מחובר למערכת השקיה אוטומטית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl">לספק את אותו מצע קלח תירס בכלוב השליטה כהוא בEE. לספק 4 סנטימטרים X 4 סנטימטר nestlet לעכברים כדי להפוך את קן מ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להחליף ו / או לנקות את הכלובים, האכלת חוטים, מזון ומים פעם בשבוע. נקי כלובים ומדפי תיל באמצעות שטיפת כלוב או כמפורט בסעיף 1.1.1.1. לנקות את הכלובים לעתים קרובות יותר אם בעלי חיים משתין בתדירות גבוהה יותר או אם דליפות המים שתייה על המצעים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפקח על בריאותם של בעלי החיים בדיור בקרה יומי. הבטח לי בעלי החיים שפע של מזון ומים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בית 3 ~ 5 עכברים מאותו המין בכלוב עכבר רגיל. אל תספק כל צעצוע, צינור, או לול בכלוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טכנאי בריאות והמעבדה מתקן טיפול בבעלי חיים במעבדה מוסדיים עשויים לספק לבעלי שליטת עכברים אלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשמור על חיות בשעתי אור 12 / מחזור כהה הוא לעכברים בEE. </li></ol>

<ol>
	<li>Cao, L., During, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+is+the+brain-cancer+connection.">What is the brain-cancer connection.</a> Annu. Rev. Neurosci. 35, 331-345 (2012).</li><li>Nithianantharajah, J., Hannan, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enriched+environments,+experience-dependent+plasticity+and+disorders+of+the+nervous+system.">Enriched environments, experience-dependent plasticity and disorders of the nervous system.</a> Nat. Rev. Neurosci. 7, 697-709 (2006).</li><li>Milsum, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+model+of+the+eustress+system+for+health/illness.">A model of the eustress system for health/illness.</a> Behav. Sci. 30, 179-186 (1985).</li><li>Selye, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Stress Without Distress. , (1974).</li><li>Krech, D., Rosenzweig, M. R., Bennett, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+environmental+complexity+and+training+on+brain+chemistry.">Effects of environmental complexity and training on brain chemistry.</a> J. Comp. Physiol. Psychol. 53, 509-519 (1960).</li><li>Rosenzweig, M. R., Krech, D., Bennett, E. L., Diamond, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+environmental+complexity+and+training+on+brain+chemistry+and+anatomy:+A+replication+and+extension.">Effects of environmental complexity and training on brain chemistry and anatomy: A replication and extension.</a> J. Comp. Physiol. Psychol. 55, 429-437 (1962).</li><li>Frick, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+Environmental+Enrichment+on+Spatial+Memory+and+Neurochemistry+in+Middle-Aged+Mice.">Effects of Environmental Enrichment on Spatial Memory and Neurochemistry in Middle-Aged Mice.</a> Learn. Mem. 10 (3), 187-198 (2003).</li><li>Dellen, A., Blakemore, C., Deacon, R., York, D., Hannan, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delaying+the+onset+of+Huntington&#8217;s+in+mice.">Delaying the onset of Huntington&#8217;s in mice.</a> Nature. 404, 721-722 (2000).</li><li>Spires, T. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environmental+enrichment+rescues+protein+deficits+in+a+mouse+model+of+Huntington&#8217;s+disease,+indicating+a+possible+disease+mechanism.">Environmental enrichment rescues protein deficits in a mouse model of Huntington&#8217;s disease, indicating a possible disease mechanism.</a> J. Neurosci. 24 (9), 2270-2276 (2004).</li><li>Jankowsky, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environmental+enrichment+mitigates+cognitive+deficits+in+a+mouse+model+of+Alzheimer&#8217;s+disease.">Environmental enrichment mitigates cognitive deficits in a mouse model of Alzheimer&#8217;s disease.</a> J. Neurosci. 25 (21), 5217-5224 (2005).</li><li>Westood, J. A., Darcy, P. K., Kershaw, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environmental+Enrichment+does+not+impact+on+tumor+growth+in+mice.">Environmental Enrichment does not impact on tumor growth in mice.</a> F1000Research. 2, 140 (2013).</li><li>Cao, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=VEGF+links+hippocampal+activity+with+neurogenesis,+learning.">VEGF links hippocampal activity with neurogenesis, learning.</a> Nat. Genet. 36 (8), 827-835 (2004).</li><li>Young, D., Lawlor, P. A., Leone, P., Dragunow, M., During, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environmental+enrichment+inhibits+sponta-+neous+apoptosis,+prevents+seizures+and+is+neuroprotective.">Environmental enrichment inhibits sponta- neous apoptosis, prevents seizures and is neuroprotective.</a> Nat. Med. 5 (4), 448-453 (1999).</li><li>Cao, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environmental+and+genetic+activation+of+a+brain-adipocyte+BDNF/leptin+axis+causes+cancer+remission+and+inhibition.">Environmental and genetic activation of a brain-adipocyte BDNF/leptin axis causes cancer remission and inhibition.</a> Cell. 142 (1), 52-64 (2010).</li><li>Cao, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=White+to+brown+fat+phenotypic+switch+induced+by+genetic+and+environmental+activation+of+a+hypothalamic-adipocyte+axis.">White to brown fat phenotypic switch induced by genetic and environmental activation of a hypothalamic-adipocyte axis.</a> Cell Metab. 14 (3), 324-338 (2011).</li></ol>

המחברים מצהירים שום ניגוד עניינים.

ההשפעות חזקות של EE על ביטוי גנים במוח, ירידה בהשמנה וצמיחת הסרטן בעכברים תלויות במידה רבה ביכולתו של החוקר כדי לשמור על הסביבה החדשנית ולטפל בבעלי החיים באופן שמקדם פעילות גופנית, אינטראקציה חברתית, ואתגרים קוגניטיביים, עדיין לא מצוקת בעלי החיים. ישנם שני שלבים פרוצדורליים החשובים ביותר לזכור. ראשית, זכור לשנות את המיקום של צעצועים, חפצים, וכלובים בכל שבוע. למרות הצעצועים וחפצים עשויים להיות זהים מהשבוע הקודם, העכברים תופסים את הסביבה כרומן. לשנות את הצעצועים וחפצים עצמם עם אלה שונים בכל שבוע אחר. שנית, זכור לשמור על הסביבה נקייה. אם המצעים המלוכלכים לא מקבלים שהוסרו, רמות החנקן מוגברות עשויות להיות לחץ לבעלי החיים. בנוסף, ישנן טכניקות רבות ללב בפרוטוקול EE זה. השימוש בצעצועים ושונים שונים או ייחודייםעיצובים של מבוכי צינור פלסטיק מעודד. הסביבה יכולה להיות מאתגרת אבל לא צריך להוות איום על בריאותם של בעלי החיים. יתר על כן, להיזהר מצעצועים שהם לא מתפקדים, כי הצעצועים לא מתפקדים להגביר את הסיכון של גפיים עכבר להיתפס, או עלול להיות רעיל לבעלי החיים אם נצרכו על ידי לעיסה על זה. קבוע אחת לEE הוא השימוש בשלושה גלגלי צלחת על גבי איגלו, מוחרם לפינה או צד של בן על ידי 2-3 יומנים. התקנה זו של ריצת צלחות מאחורי היומנים כבר היום בכל מחקרי ההעשרה שלנו. במונחים של השימוש ומיקום של חפצים האחרים, התיאור של הפריסה לעיל היא הדפסה כחולה יסוד של התקנת EE. וריאציה של ההתקנה עם מסגרת זו יסוד של צינורות פלסטיק, פועל גלגלים, פועל צלחות, כלובים ויומנים צריכים לספק סביבת רומן מספיק כדי לשחזר את התוצאות המדווחות. אם עבודה עם בעלי חיים מהונדסים שיש להם סוכרת או מטבולים אחריםמחלות, לשים לב לצריכת מזון ומים כדי להבטיח שבעלי החיים לא נגמרו אוכל ומים. אם יש לי בעלי החיים סוכרת, הם להשתין יותר, כך המצעים של דיור EE ייתכן שיהיו הצורך לבדוק מקום וניקו בתדירות גבוהה יותר. המקומות בדיור EE שצריכים מצעים הוסרו לרוב הם הפינות. זכור להתאים את הגלגלים וצעצועים אחרים, כך שהם יכולים להיות בשימוש על ידי בעלי החיים. בעלי החיים הם מסוגלים להריץ גלגלי צלחת למצעים ודפיקות גלגלי דריסה. אם בעלי החיים צעירים, 3-5 שבועות של גיל, הם עלולים לחפור מתחת לכלובים בEE ולהסתיר יחד תחת שם, משאירים את חוקר מושג לגבי איפה בעלי החיים. בעת הסרת מצעים מלוכלכים, החלפת צעצועים, או ניקוי כלובים, הוא הציע לשים את החיות בכלוב סטנדרטי נקי כדי לא להדגיש אותם תוך התאמת סביבתם. קל יותר לקבל את כל בעלי החיים בכלוב אחד, אם יש להם פחות מקומות להתחבא בenvironment. לכן, הסרת צעצועים לפני sequestering בעלי החיים בכלוב הופכת את התהליך לקל יותר. יתר על כן, אין מקום יותר מ 5-6 חיות בכלוב סטנדרטי אחת בזמן ההמתנה לניקוי או התאמת סביבת EE. בעלי החיים ממין זכר בEE יכולים להיות אגרסיביים במיוחד כאשר EE הוא יזם בבגרות. לכן, חשוב לשמור על הסביבה לכל בעלי חיים פצועים או מתים. בנוסף, המספר הטיפוסי של בעלי חיים אנו בבית א &#39;א&#39; לגודל גדול זה של מיכל הוא 10-20 עכברים. מספר בעלי החיים חוקרים אחרים להשתמש לEE להשתנות, באמצעות כ -10 או פחות עכברים, ואת הגודל של הכלוב או סל צריך להילקח בחשבון בעת ​​קביעת מספרם של בעלי החיים לבית בEE. יש בעלי חיים רבים מדי בסביבת חיים יכול להוביל לתוקפנות בעכברי זכרים. העכברים ששוכנו בEE היו של C57BL / 6 רקע. עכברים של זנים אחרים עשויים להיות פחות או יותר אגרסיווי, או יותר נוטים לבעיות בריאות בהתקנת EE זה. זה צריך להילקח בחשבון בקביעת תכנית הגידול לעכברים והסביבה המועשרת. ארבעה שבועות דיור EE הוא מספיק כדי לגרום ירידה של השמנה, ירידה של רמת הלפטין, ועיכוב של צמיחה מלנומה B16. עוד EE יכול להוביל להשפעות חזקות יותר על חילוף חומרים ועיכוב הסרטן. אם עכברים לעבור ניתוחים במהלך או לפני החשיפה לEE, הם עשויים להיות שוכנו עם תפרים בשלמותה. אם לא בעלי חיים מגיבים היטב להגדרת EE המסוימת הזה עם סיכות או צנתרים שלמים לא נחקר כירורגית. יתר על כן, אנו חוקרים כעת כיצד EE מסוים זה משפיע על תוחלת החיים של בעלי חיים או healthspan גילאים. נתונים ראשוניים מצביעים על כך שC57BL נקבה / 6 עכברים, 10 חודשים של גיל, להגיב לEE בדומה לעכברים צעירים. מגבלה אחת של דיור EE היא אדיב בן כה גדול בחלל מתקן בעלי חיים, ומעדיף בחדר ספציפי מגדר. מחקרים עתידיים על כך EFFרישומם של EE בקנה מידה קטנה יותר, כמו גם צעצועי מציאת, כי הם קלים לניקוי, לסבול ניקוי בטמפרטורה גבוה ובטוחים לבריאות בעלי החיים, ישפרו את היישומים של EE בחילוף חומרים וחקר הסרטן.

העשרה סביבתית (EE) היא פרדיגמה ניסויית המשמשת כדי לחקור את ההשפעות של סביבה מורכבת ומאתגרת, שאינו מדגישה את החיות 1. EE הוא טכניקת דיור בעלי חיים מורכבות מהחלל גדל, פעילות גופנית, ואינטראקציות חברתיות, אשר בתורו מגדיל חושי, קוגניטיבית, מוטורי, וגירוי חברתי 2. איגלו, גלגלי ריצה, גלגלי צלחת, מבוכי צינור, ואובייקטים אחרים בסביבת הדיור לטפח קוגניטיבי זה חושי, חברתי, וגירוי מוטורי על ידי קידום חקר ואינטראקציה. הפריסה של האובייקטים בשינויים המתחם באופן קבוע כדי להציג סביבת רומן, שהעכברים נאלצים להסתגל. אסטרטגיה זו מציעה אתגרים קלים וקצרים שגורמים לתגובה מסתגלת מועילה, שפירה, ובריאה, הידוע בשם eustress, בניגוד לסביבה מרתיעה יותר, עוינת או מצוקת הסתגלות 3,4. על ידי קידום eustress והגבלת מצוקה מזיקה, עכבריםלהראות מגוון של פנוטיפים חיוביים. EE הוא מודל ניסויי אמין עם מגוון רחב של יישומים, בעת היותו נטול אלמנטים מסורתיים של 1 חשבו מלחיץ כ. ההשפעות של EE במכרסמים נחקרו במשך יותר מחצי מאה. בשנתי ה -1960 מוקדמות מחקרים הראו כי רמות cholinesterase קליפת המוח ירדו ורמות cholinesterase קורטיקליים גדלו בחולדות ששוכנו בסביבות עם שטח מוגבר חיים, מספר גדל של חולדות, ומגוון רחב של צעצועי עץ, מבוכים, ופלטפורמות 5,6. בנוסף, EE קשור עם שינויים רבים מסתגלים במוח, ההתנהגות, וחילוף החומרים בעכברים בגילים שונים ורקע גנטי. לכן, EE הוא פרדיגמה שימושית לטווח רחב של ניסויי חקר ההשפעות של הסביבה על עכברים. יכולות להיות שנצפו תופעות EE בעכברים במהירות חשיפה של שבוע, וניתן לראות בבעלי חיים עתיקים כמו שנה וחצי 7. EE הוא לעתים קרובות used בניסויי מדעי המוח וneurobehavioral ללמוד התאוששות של תפקוד, למידה וזיכרון 2. יתר על כן, יש EE השפעה ניכרת על הפנוטיפ של מגוון רחב של רעלן מושרה ומודלים של בעלי חיים מהונדסים של מחלות נוירולוגיות אנושיות כוללים מחלת הנטינגטון, מחלת אלצהיימר, מחלת פרקינסון, אפילפסיה, שבץ, ועוד 2. עם זאת, במהלך השנים חלה חוסר עקביות בעיצוב ההעשרה עושה השוואות בין מחקרים ממעבדות שונות קשות. לדוגמא, כל אחד מהמחקרים על השפעות EE ביחס למחלות נוירולוגיות אדם הנזכרות לעיל שמשתנה פרמטרים להעשרה. המחקר על מחלת הנטינגטון שוכנו 4-6 עכברים בכלובים גדולים (44 x 28 x 12.5 סנטימטר 3) המכיל קופסות קרטון, מנהרות, וסדינים, כמו גם חפצי עץ ופלסטיק ששונו כל יומיים 8,9. אחד המחקרים שנעשו על אלצהיימר ו# 8217; s שוכנו 20 עכברים בכלוב גדול יותר (1 מ &#39;3) המכיל גלגלי 2 ריצה, צינורות פלסטיק, קופסות קרטון וחומר הקינון ששונו או מחדש שבועי 10. יש הגדרות של EE רבים נושאים דומים כגון אובייקטים לרוץ על או להסתיר ב, עדיין מספר העכברים לדיור EE, אזור המגורים, והתקופה של שינוי הסביבה משתנים הרבה. העיצובים עקביים של EE הובילו לשכפול כושל של השפעות EE. הנתונים שלנו על סרטן וחילוף חומרים יחד מציעים כי השילוב של גירויים הניתנים בפרוטוקול להוביל דיור EE מפורט הבאים לאנטי-סרטני משמעותיות והשפעות אנטי-השמנת 14,15. עם זאת, ההבדל של הגדרות EE שאומצו על ידי מעבדות שונות עשויים להשפיע על התוצאות של EE, כפי שנראה באחד נכשל ניסיון לשחזר השפעות EE על הצמיחה של גידולי סרטן ספציפיים הושתלו בעכברים 11. התוצאות השונות יכולות להיות בגלל מגוון סיבות, החל הלוך ושובמ &#39;שיעורי צמיחה שונים של תרביות תאי גידול לסוג של חומר ניקוי המשמש לניקוי ציוד דיור 11. כדי לשכפל את התוצאות ראו בניסויים שלנו, נדרש עיצוב מיוחד של בעלי העשרה ובעלי חיים. ההליך הבא מפרט את דיור EE שיאפשר לחוקרים אחרים לשחזר את מודל ההעשרה היעיל שלנו בהצלחה.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Large enrichment bin (120cm x 90cm x 76cm)</td>
			<td>Custom made.</td>
			<td>Custom made.</td>
			<td>Made of polypropylene. Edges of the bin are 1.5cm thick.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large enrichment bin alternative (120cm x 110cm x 76cm)</td>
			<td>Global Industrial</td>
			<td>155202</td>
			<td>If necessary, this bin works as an alternative to the one above.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Habitrail Mini tubes</td>
			<td>Habitrail</td>
			<td>62720; 62705; 62725; 62715; 62054</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic igloos with saucer wheels</td>
			<td>Bio Serv</td>
			<td>K3327; K3250</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metal Running Wheels</td>
			<td>Super Pet</td>
			<td>61392; 61394; 61396</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Manzanita Wood Gnawing Sticks, 3&#34;</td>
			<td>Bio Serv</td>
			<td>W0016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse Tunnels</td>
			<td>Bio Serv</td>
			<td>K3322</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse cages that go in the large EE bin.</td>
			<td>Lab Products Inc</td>
			<td>10027 Mouse Cage</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cage Klenz 180 Alkaline Cage Wash Detergent, Cage Klenz 250 Acid Detergent</td>
			<td>Steris Life Sciences</td>
			<td>1K1802; 1K2502</td>
			<td>These detergents are used in the cage wash for the toys, large enrichment bins, and cages.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sporklenz</td>
			<td>Steris Life Sciences</td>
			<td>6526Q8</td>
			<td>Alternative sporicide/disinfectant to washing toys, bins, and cages in cage wash.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bed-O-Cobs 1/4&#34; bedding</td>
			<td>The Andersons, Inc.</td>
			<td>4B</td>
			<td>Corn cob bedding is 1/4&#34; in diameter.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nestlets for control housed mice</td>
			<td>Ancare</td>
			<td></td>
			<td>Cotton squares</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a protocol for housing mice in an enriched environment

Environmental enrichment (EE) is a housing environment for mice that boosts mental and physical health compared to standard laboratory housing. Our recent studies demonstrate that environmental enrichment decreases adiposity, increases energy expenditure, resists diet induced obesity, and causes cancer remission and inhibition in mice. EE typically consists of larger living space, a variety of &#8216;toys&#8217; to interact with, running wheels, and can include a number of other novel environmental changes. All of this fosters a more complex social engagement, cognitive and physical stimulations. Importantly, the toy location and type of toy is changed regularly, which encourages the mice to adapt to a frequently changing and novel environment. Many variables can be manipulated in EE to promote health effects in mice. Thus these approaches are difficult to control and must be properly managed to successfully replicate the associated phenotypes. Therefore, the goal of this video is to demonstrate how EE is properly set up and maintained to assure a complex, challenging, and controlled environment so that other researchers can easily reproduce the protective effects of EE against obesity and cancer.

EE משפיע ביטוי גורם גדילה, מגביר את הנוירוגנזה והישרדות של תאים במערכת העצבים המרכזית (CNS) 12,13. מחקרים מאוחרים יותר הראו כי טכניקה זו של EE מובילה לדיכוי מדהים של צמיחת הסרטן במודלי סרטן שלושה עכבר כוללים מלנומה B16, סרטן המעי הגס ודק MC38 / + עכבר APC המכיל מוטציה בתאי מין, והוא רגיש מאוד להיווצרות ספונטנית אדנומה ב המעיים 14. התוצאות באיור 2 לאשר דיכוי צמיחת גידול מלנומה B16 הושתל בעכברים שנחשפו לEE במשך 5 שבועות (~ 80% ירידה של מסת גידול). דיכוי צמיחת הסרטן אף נצפה בעכברים כאשר EE יזם לאחר הגידול שהוקם 14. EE הביא עיכוב גדול יותר של צמיחה מלנומה בעכברי השמנת הדיאטה מושרה שומן הגבוה (~ 70% ירידה של מסת גידול) מזה בעכברים במשקל תקין (~ ירידה של 50% ממסת גידול) 14. ind EE<html> uced שינויי חתימה בסמנים הביולוגיים בסרום כוללים ירידה חזקה של לפטין, ירידה של IGF-1, ועלייה של רמות אדיפונקטין 14. בנוסף, טכניקה זו של EE יורדת השמנה, מגדילה את הוצאות אנרגיה, מובילה להתנגדות נגד השמנה נגרמת דיאטה, וגורמת לבן למתג פנוטיפי שומן חום על ידי הפעלת sympathoneural-adipocyte-ההיפותלמוס ציר 15. הירידה בהשמנה הייתה לראות כבר בשישה ימים נחשפו לEE (איור 3 א &#39;, ב&#39;) ואישר שוב בבעלי חיים שנחשפו לEE במשך ארבעה שבועות (איור 3 ג, ד). כמו כן, חשוב לשים לב ש, אחד, אנטי-סרטני וההשפעות אנטי-השמנה קשורה עם EE לא ניתן להסביר על ידי פעילות גופנית לבד, ו, שתי, ניתן לשחזר את השפעות EE ידי ביטוי יתר של גורם נוירוטרופי המופק ממוח (BDNF ) בהיפותלמוס 14,15. <html> 2874fig1.jpg &quot;/&gt; איור 1: בן הסביבה מועשר להגדיר יש הסביבה המועשרת על שטח של 120 סנטימטרים X 90 סנטימטר וכוללת שני כלובים שונה, גלגלי ריצה, איגלו עם גלגלי צלחת, צינורות פלסטיק, בולי עץ, וצעצועי העשרת פלסטיק אחרים.. <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/52874/52874fig2.jpg" /> איור 2: סביבה מועשרת מפחיתה את צמיחת גידול בעכברי זכרי C57BL / 6 עכברי זכרים ישנים שלושה בשבוע היו בבית א &#39;א&#39; או כלובי שליטה למשך 5 שבועות לפני חיסון גידול.. משקולות גידול מלנומה B16 בגיל 17 ימים לאחר החיסון של 10 5 תאים לכל תת עור חיה מעל האגף הימני (n = 10 לכל קבוצה. -test t של הסטודנט, * p &lt;0.05). <img alt="איור 3 א" src="/files/ftp_upload/52874/52874fig3a.jpg" /> <img alt="3 ב איור" src="/files/ftp_upload/52874/52874fig3b.jpg" /> s / ftp_upload / 52,874 / 52874fig3c.jpg &quot;/&gt; <img alt="3D איור" src="/files/ftp_upload/52874/52874fig3d.jpg" /> איור 3: הסביבה מועשרת יורדת השמנה בC57BL / 6 עכברי זכרים שלושה עכברים ישנים שבוע היו נתונים לEE;. קבוצה אחת במשך 6 ימים, נוסף לארבעה שבועות. (א) שישה ימים בEE ירד משקולות כרית שומן (n = 5 לכל קבוצה. -test T של הסטודנט, * p &lt;0.05). (ב) שישה ימים בEE ירד משקולות כרית שומן ביחס למשקל גוף (n = 5 לכל קבוצה. -test T של הסטודנט, * p &lt;0.05). (ג) ארבעה שבועות בEE ירד משקולות כרית שומן (n = 5 לכל קבוצה. -test T של הסטודנט, * p &lt;0.05). (ד) ארבעה שבועות בEE ירד משקולות כרית שומן ביחס למשקל גוף (n = 5 לכל קבוצה. -test T של הסטודנט, * p &lt;0.05). BAT: רקמת שומן חום, IWAT: מפשעתי רקמת שומן לבנה, EWAT: רקמת שומן לבנה epididymal,RWAT: רקמת שומן לבנה retroperitoneal.

Watch this Scientific Journal Video about A Protocol for Housing Mice in an Enriched Environment at JoVE.com

A Protocol for Housing Mice in an Enriched Environment

Environmental enrichment for mice requires a complex and challenging setup, as well as comprehensive husbandry and handling techniques to assure robust metabolic and anti-cancer effects in the mice. This protocol provides detailed procedures to reproduce the above mentioned effects in mice.

פרוטוקול לעכברי שיכון בסביבה מועשרת

Environmental enrichment (EE) is a housing environment for mice that boosts mental and physical health compared to standard laboratory housing. Our recent ...

a-protocol-for-housing-mice-in-an-enriched-environment

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Behavior

18.2K Views.  The Ohio State University. Environmental enrichment for mice requires a complex and challenging setup, as well as comprehensive husbandry and handling techniques to assure robust metabolic and anti-cancer effects in the mice. This protocol provides detailed procedures to reproduce the above mentioned effects in mice.

Video: A Protocol for Housing Mice in an Enriched Environment

Two-photon Calcium Imaging in Mice Navigating a Virtual Reality Environment

In recent years, two-photon imaging has become an invaluable tool in neuroscience, as it allows for chronic measurement of the activity of genetically identified cells during behavior1-6. Here we describe methods to perform two-photon imaging in mouse cortex while the animal navigates a virtual reality environment. We focus on the aspects of the experimental procedures that are key to imaging in a behaving animal in a brightly lit virtual environment. The key problems that arise in this experimental setup that we here address are: minimizing brain motion related artifacts, minimizing light leak from the virtual reality projection system, and minimizing laser induced tissue damage. We also provide sample software to control the virtual reality environment and to do pupil tracking. With these procedures and resources it should be possible to convert a conventional two-photon microscope for use in behaving mice.

Here we describe the experimental procedures involved in two-photon imaging of mouse cortex during behavior in a virtual reality environment.

סידן הדמיה שני פוטונים בעכברים ניווט סביבת מציאות מדומה

In recent years, two-photon imaging has become an invaluable tool in neuroscience, as it allows for chronic measurement of the activity of genetically ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure multiple dimensions of unconditioned behavior in small laboratory mammals (e.g., mice, rats, tree shrews and small primates). This paradigm is a valuable alternative for the use of a behavioral test battery, since a broad behavioral spectrum of an animal&#8217;s behavioral profile can be investigated in one single test.
The apparatus consists of a box, representing the &#8216;protected&#8217; area, separated from a group compartment. A board, on which small cylinders are staggered in three lines, is placed in the center of the box, representing the &#8216;unprotected&#8217; area of the set-up. The cognitive abilities of the animals can be measured by baiting some cylinders on the board and measuring the working and reference memory. Other unconditioned behavior, such as activity-related-, anxiety-related- and social behavior, can be observed using this paradigm. Behavioral flexibility and the ability to habituate to a novel environment can additionally be observed by subjecting the animals to multiple trials in the mHB, revealing insight into the animals&#8217; adaptive capacities.
Due to testing order effects in a behavioral test battery, na&#239;ve animals should be used for each individual experiment. By testing multiple behavioral dimensions in a single paradigm and thereby circumventing this issue, the number of experimental animals used is reduced. Furthermore, by avoiding social isolation during testing and without the need to food deprive the animals, the mHB represents a behavioral test system, inducing if any, very low amount of stress.

This protocol describes the modified hole board, which is a behavioral test set-up that comprises the characteristics of an open field and a traditional hole board. This set-up enables the differential analysis of unconditioned behavior of small laboratory mammals as well as the analysis of cognitive abilities.

מועצת החור השתנה - מדידת התנהגות, קוגניציה ואינטראקציה חברתית בעכברים וחולדות

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

Morris Water Maze Test: Optimization for Mouse Strain and Testing Environment

The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, including neurocognitive disorders such as Alzheimer&#8217;s disease. However, the background strain of the mouse model used can have a substantial effect on the observed behavioral phenotype, with some strains exhibiting superior learning ability relative to others. To ensure differences between transgene negative and transgene positive mice can be detected, identification of a training procedure sensitive to the background strain is essential. Failure to tailor the MWM protocol to the background strain of the mouse model may lead to under- or over- training, thereby masking group differences in probe trials. Here, a MWM protocol tailored for use with the F1 FVB/N x 129S6 background is described. This is a frequently used background strain to study the age-dependent effects of mutant P301L tau (rTg(TauP301L)4510 mice) on the memory deficits associated with Alzheimer&#8217;s disease. Also described is a strategy to re-optimize, as dictated by the particular testing environment utilized.

This manuscript describes a Morris water maze (MWM) protocol tailored for use with a commonly used mouse model of Alzheimer's disease. The MWM is widely used in transgenic mouse models. Implementation of a procedure sensitive to the background strain of the mouse model is essential for detecting group differences.

מבחן מוריס מים מבוך: אופטימיזציה לזני עכבר ובדיקת איכות סביבה

 The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, ...

Evaluation of a Smartphone-based Human Activity Recognition System in a Daily Living Environment

An evaluation method that includes continuous activities in a daily-living environment was developed for Wearable Mobility Monitoring Systems (WMMS) that attempt to recognize user activities. Participants performed a pre-determined set of daily living actions within a continuous test circuit that included mobility activities (walking, standing, sitting, lying, ascending/descending stairs), daily living tasks (combing hair, brushing teeth, preparing food, eating, washing dishes), and subtle environment changes (opening doors, using an elevator, walking on inclines, traversing staircase landings, walking outdoors). 
To evaluate WMMS performance on this circuit, fifteen able-bodied participants completed the tasks while wearing a smartphone at their right front pelvis. The WMMS application used smartphone accelerometer and gyroscope signals to classify activity states. A gold standard comparison data set was created by video-recording each trial and manually logging activity onset times. Gold standard and WMMS data were analyzed offline. Three classification sets were calculated for each circuit: (i) mobility or immobility, ii) sit, stand, lie, or walking, and (iii) sit, stand, lie, walking, climbing stairs, or small standing movement. Sensitivities, specificities, and F-Scores for activity categorization and changes-of-state were calculated.
The mobile versus immobile classification set had a sensitivity of 86.30% &#177; 7.2% and specificity of 98.96% &#177; 0.6%, while the second prediction set had a sensitivity of 88.35% &#177; 7.80% and specificity of 98.51% &#177; 0.62%. For the third classification set, sensitivity was 84.92% &#177; 6.38% and specificity was 98.17 &#177; 0.62. F1 scores for the first, second and third classification sets were 86.17 &#177; 6.3, 80.19 &#177; 6.36, and 78.42 &#177; 5.96, respectively. This demonstrates that WMMS performance depends on the evaluation protocol in addition to the algorithms. The demonstrated protocol can be used and tailored for evaluating human activity recognition systems in rehabilitation medicine where mobility monitoring may be beneficial in clinical decision-making.

A standardized evaluation method was developed for Wearable Mobility Monitoring Systems (WMMS) that includes continuous activities in a realistic daily living environment. Testing with a series of daily living activities can decrease activity recognition sensitivity; therefore, realistic testing circuits are encouraged for valid evaluation of WMMS performance.

הערכה של מערכת פעילות אנושית המבוססת על טלפון חכם הכרה בימי סביבת חיים

An evaluation method that includes continuous activities in a daily-living environment was developed for Wearable Mobility Monitoring Systems (WMMS) that ...

A Method to Study Adaptation to Left-Right Reversed Audition

An unusual sensory space is one of the effective tools to uncover the mechanism of adaptability of humans to a novel environment. Although most of the previous studies have used special spectacles with prisms to achieve unusual spaces in the visual domain, a methodology for studying the adaptation to unusual auditory spaces has yet to be fully established. This study proposes a new protocol to set-up, validate, and use a left-right reversed stereophonic system using only wearable devices, and to study the adaptation to left-right reversed audition with the help of neuroimaging. Although individual acoustic characteristics are not yet implemented, and slight spillover of unreversed sounds is relatively uncontrollable, the constructed apparatus shows high performance in a 360&#176; sound source localization coupled with hearing characteristics with little delay. Moreover, it looks like a mobile music player and enables a participant to focus on daily life without arousing curiosity or drawing attention of other individuals. Since the effects of adaptation were successfully detected at the perceptual, behavioral, and neural levels, it is concluded that this protocol provides a promising methodology for studying adaptation to left-right reversed audition, and is an effective tool for uncovering the adaptability of humans to a novel environments in the auditory domain.

The present study proposes a protocol to investigate the adaptation to left-right reversed audition achieved only by wearable devices, using neuroimaging, which can be an effective tool for uncovering the adaptability of humans to a novel environment in the auditory domain.

שיטה ללמוד ההסתגלות משמאל הפוך האודישן

An unusual sensory space is one of the effective tools to uncover the mechanism of adaptability of humans to a novel environment. Although most of the ...

The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by many patients prompts the need to develop new therapeutic alternatives and to better understand the etiology of the disorder. Pre-clinical models with translational merits are rudimentary for this task. Here we present a protocol for the unpredictable chronic mild stress (UCMS) method in mice. In this protocol, adolescent mice are chronically exposed to interchanging unpredictable mild stressors. Resembling the pathogenesis of depression in humans, stress exposure during the sensitive period of mice adolescence instigates a depressive-like phenotype evident in adulthood. UCMS can be used for screenings of antidepressants on the variety of depressive-like behaviors and neuromolecular indices. Among the more prominent tests to assess depressive-like behavior in rodents is the sucrose preference test (SPT), which reflects anhedonia (core symptom of depression). The SPT will also be presented in this protocol. The ability of UCMS to induce anhedonia, instigate long-term behavioral deficits and enable reversal of these deficits via chronic (but not acute) treatment with antidepressants strengthens the protocol&#39;s validity compared to other animal protocols for inducing depressive-like behaviors.

Here we present the unpredictable chronic mild stress protocol in mice. This protocol induces a long-term depressive-like phenotype and enables to assess the efficacy of putative antidepressants in reversing the behavioral and neuromolecular depressive-like deficits.

פרוטוקול לא צפוי מתח כרוני מתון להשראת אנהדוניה בעכברים

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by ...

Low-cost Protocol of Footprint Analysis and Hanging Box Test for Mice Applied the Chronic Restraint Stress

Gait disturbance is frequently observed in patients with movement disorders. In mouse models used for movement disorders, gait analysis is important behavioral test to determine whether the mice mimic the symptoms of patients. Motor deficits are often induced by stress when no spontaneous motor phenotype is observed in the mouse models. Therefore, gait analysis followed by stress loading would be a sensitive method for evaluating the motor phenotype in mouse models. However, researchers face the requirement of an expensive apparatus to obtain quantitative results automatically from gait analysis. For stress, stress loading by simple methods without expensive apparatuses required for electric shock and forced running is desirable. Therefore, we introduce a simple and low-cost protocol consisting of footprint analysis with paper and ink, hanging box test to evaluate motor function, and stress loading defined by restraint with a conical tube. The motor deficits of mice were successfully detected by this protocol.

The low-cost protocol consisting of footprint analysis and hanging box test after restraint stress is useful for evaluating the movement disorders of mouse model.

פרוטוקול נמוכים של ניתוח טביעת רגל ותלייה תיבת הבדיקה עבור עכברים חלה הלחץ איפוק כרונית

Gait disturbance is frequently observed in patients with movement disorders. In mouse models used for movement disorders, gait analysis is important ...

In Vivo Protocol of Controlled Subconcussive Head Impacts for the Validation of Field Study Data

Subconcussive hits pose a threat to neuronal health as they have shown to induce neuronal structural damage and functional impairment without causing outward symptomology and appear to be a key contributor to an irreversible neurodegenerative disease, chronic traumatic encephalopathy (CTE). In addition, athletes can incur more than 1,000 of these hits per season. The subconcussive soccer heading model (SSHM) is a relevant, reproducible, and leading method of isolating and examining the effects of these subconcussive head impacts. By controlling variables such as ball traveling speed, the frequency of impacts, interval, ball placement to the head, as well as by measuring head impact magnitude, the SSHM provides the scientific community with a superior avenue of investigating the acute subconcussive effects on neuronal health. In this paper, we demonstrate the utility of SSHM in studying a time-course expression of neurofilament-light polypeptide (NF-L) in plasma in a repeated measures fashion. NF-L is an axonal injury marker that has previously been shown to be elevated in boxers and football players following subconcussive head trauma. Thirty-four adult aged soccer players were recruited and randomly assigned to either a soccer heading (n = 18) or kicking (n = 16) group. The heading group executed 10 headers with soccer balls projected at a velocity of 25 mph over 10 min. The kicking group followed the same protocol with 10 kicks. Plasma samples were obtained before and at 0 h, 2 h, and 24 h after heading/kicking and assessed for NF-L expressions. The heading group showed a gradual increase in plasma NF-L expression and peaked at 24 h after the heading protocol, whereas the kicking group remained consistent across the time points. These results confirmed the NF-L data from clinical field studies, encouraging the use of SSHM to validate clinical subconcussion data.

The subconcussive soccer heading model is a safe and concise methodological approach to isolate and measure the effects of subconcussive head impacts.

בפרוטוקול Vivo של השפעות על הראש Subconcussive מבוקרת לשם אימות נתוני מחקר שדה

Subconcussive hits pose a threat to neuronal health as they have shown to induce neuronal structural damage and functional impairment without causing ...

A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice

Depression is not yet fully understood, but various causative factors have been reported. Recently, the prevalence of depression has increased. However, therapeutic treatments for depression or research on depression is scarce. Thus, in the present paper, we propose a mouse model of depression induced by movement restriction. Chronic mild stress (CMS) is a well-known technique to induce depressive-like behavior. However, it necessitates a complex procedure consisting of a combination of various mild stresses. In contrast, chronic immobilization stress (CIS) is a readily accessible chronic stress model, modified from a restraint model that induces depressive behavior by restricting movement using a restrainer for a certain period. To evaluate the depressive-like behaviors, the sucrose preference test (SPT), the tail suspension test (TST), and the ELISA assay to measure stress marker corticosterone levels are combined in the present experiment. The described protocols illustrate the induction of CIS and evaluation of the changes in behavior and physiological factors for the validation of depression.

This article provides a simplified and standardized protocol for induction of depressive-like behavior in chronically immobilized mice by using a restrainer. In addition, behavior and physiological techniques to verify induction of depression are explained.

פרוטוקול מאמץ משתק כרוני לגרימת התנהגות של דיכאון כמו עכברים

Depression is not yet fully understood, but various causative factors have been reported. Recently, the prevalence of depression has increased. However, ...

Nest Building Behavior as an Early Indicator of Behavioral Deficits in Mice

Nest building is an innate behavior in male and female rodents, even when raised in laboratory settings. As such, many researchers provide rodents synthetic and/or natural materials (such as twine, tissue, cotton, paper, and hay) as a gauge of their overall well-being and as an ancillary assessment to predict the possible decline in cognition. Typically, changes in nesting behaviors, such as failure to create a nest, indicate a change in health or welfare. In addition, nesting behavior is sensitive to many environmental and physiological challenges, as well as many genetic mutations underlying pathological disease states. The following protocol describes a nesting behavior paradigm that explores the usage of four types of nesting material. In addition, the protocol utilizes intraclass correlations to demonstrate that inter-rater reliability is higher when nests are constructed out of shredded paper compared to other common nesting materials such as cotton squares, paper twists, and soft cob bedding. The chosen methodology and statistical considerations (i.e., intraclass correlation) for this assay may be of interest for those conducting experiments assessing the quality of living of mice.&#160;

Here, we present a protocol to quantify nest building behavior in mice, which is known to be impaired in several neurological disorders and diseases. This protocol examines the utility of four materials and offers the opportunity to quantify the rater agreement in scoring, improving the validity and reliability of the assay.