Name: assessment of endothelial cell migration after exposure to toxic chemicals
Uploaded: 2015-07-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 7 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Endothelial Cell Migration After Exposure to Toxic Chemicals at JoVE.com

This work was funded by the German Ministry of Defense (Grant No. M-SAB1-6-A009).

הפרוטוקול הבא מתאר טכניקות לחקירה של נדידת תאי אנדותל המוקדמת. הטיפוח הנכון של תאי האנדותל של כלי דם דורש מראש ציפוי של צלוחיות תרבית תאים עם ג&#39;לטין כדי להבטיח שגשוג ותחזוקה נאותים של פנוטיפ האנדותל. 1. טרום ציפוי של צלוחיות תרבית תאים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממיסים ג&#39;לטין ב 0.1 M PBS לריכוז סופי של 0.1%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החיטוי הפתרון עם פרמטרים למעוקר נוזלי (לפרטים ראו הוראות של החיטוי הספציפי). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוסיף נפח מספיק של פתרון ג&#39;לטין autoclaved לבקבוק תרבות תא סטרילי (למשל, לפחות 5 מיליליטר לבקבוק תרבית תאי T25). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העבר את צלוחיות לחממה (37 מעלות צלזיוס, 5% CO 2 אינו נדרש אבל לא מפריע) לפחות 30 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את פתרון ג&#39;לטין שנותר. השתמש בצלוחיות מצופים מראש לאחר מכן (ראה טיפוח תא) או שלקרע בתנאים סטריליים עד לשימוש. </li></ol> 2. טיפוח תא של תאי האנדותל מוקדמים הערה: תאי האנדותל מוקדמים בתאי גזע עובריים נגזרים (EEC) התקבלו מגופי embryoid עכברי מובחנים על ידי מיון תא מופעל מגנטי של שבריר התא החיובי PECAM-1 כמתואר לעיל 10,11. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תרבות EEC על תרבות מנות תא ג&#39;לטין המצופה DMEM בתוספת 15% FCS, 50 U / פניצילין מיליליטר, 50 U / ml סטרפטומיצין, L-גלוטמין 200 מיקרומטר, SS-mercaptoethanol 100 מיקרומטר ו 1% חומצות אמינו לא חיוניות. לטפל בתאים בתנאים סטריליים. לטפח את התאים עם 5% CO 2 על 37 מעלות צלזיוס ולחות של 95% עד תת-מפגש (מקסימום. 80%). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בתת-מפגש, לפצל את התאים ביחס של 1: 5. הערה: הפלוגה של תאי האנדותל היא שלב קריטי. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקצור את התאים עם Accutase RT. הסר את המדיה, לשטוף עם PBS ולהוסיף 1 מיליליטר של Accutase 25 סנטימטר ל <sup&gt; 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגירה הבקבוק ב RT עבור 2-10 דקות, עד שהתאים מנותקים. לפזר את התאים ולהעביר אותם ליישום הרצוי. הערה: נטרול כימי של Accutase אינו נדרש כפי שהוא מתרחש כאשר תאי זרע מאוחסנים בחממה על 37 מעלות צלזיוס. עם זאת, Accutase פעילות יכולה גם להיות ירידה על ידי הוספת DMEM FCS המכיל. </li></ol></li></ol> 3. וידן קאמרית הערה: מבחני קאמריים בוידן מבוצעים על ידי השימוש במערכות הכנס terephthalate פוליאתילן אור-אטומה עם גודל נקבובית 8 מיקרומטר. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טרום מעיל מוסיף מסנן (נכון שבתוך בארות תרבית תאים ובכך ליצור חדר וידן) על ידי הוספת 500 μl של ג&#39;לטין 0.1% מומס ב0.1 M PBS לפחות 30 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם תאים הם להיחשף לחומרים כימיים רעילים, לחשוף על פי תכנון הניסוי הספציפי לפני קצירת תא. הערה: תאים נחשפו ל12.5 מיקרוגרם כלוראמבוציל / מיליליטר DMEMלמשך 24 שעות. בכל קשור לתכנון הניסוי הספציפי, הוראות עשויות להשתנות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קציר EEC ולקבוע את המספר הסלולרי באמצעות תא תא ספירה. הערה: ניתן להשתמש במכשירי ספירה אוטומטיים, אך יש להשתמש בזהירות: ספירת תאים במדריך היא מדויקת יותר ומומלצת מאוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 500 בינוני תרבית תאי μl לתוך תא התא התחתון של לשכת וידן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוסיף בדיוק 10 4 EEC ב 500 בינוני תרבית תאי μl להוספת מסנן בתא התא העליון. לחסל את הבועות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגירה מוסיף מסנן בחממה במשך 8 שעות בדיוק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשטוף עם PBS אחת ולהחליף בינוניים עם paraformaldehyde 0.5 מיליליטר 4% בשני התאים במשך 25 דקות לקיבוע תא. שטוף את המסנן בהרחבה אבל לפחות 3 פעמים עם 0.1 M PBS. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בלו הקרומים עם אזמל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הר הקרום בין שני תלושי כיסוי זכוכית עם הרכבה בינונית מכילים DAPI לstainin הגרעיניז. שים לב לנטייה. ודא כי תאים רק שהגרו לכיוון צד התא התחתון של הקרום נספרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ספירת תאים שהגרו לכיוון צד התא התחתון של הקרום עם מיקרוסקופ פלואורסצנטי בהגדלה 400X. אל תבלבלו את הנקבוביות קרום עם תאים נדדו (איור 1 א, 1 ב &#39;). לחקור מספר סביר של חזרות ביולוגיות (לפחות 3 משכפל ביולוגי למצב). </li></ol> 4. ריפוי פצע Assay <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בהתאם לציוד זמין, לבחור בקפידה את מנות תרבית תאים או צלחות: בעת השימוש במיקרוסקופ דסק&quot;ש, להימנע ממאכלים המבוססת תרבות משטח פלסטיק או צלחות טובות, אבל להשתמש במכשירים מבוססים זכוכית במקום. הערה: אם באמצעות מיקרוסקופ שלב בניגוד, יכולות לשמש גם צלחות פלסטיק מבוססת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטפח EEC במכשיר תרבית תאים מתאים (למשל, צלחת פטרי 4 סנטימטר זכוכית תחתונה מתאים להדמיה תא חי) עד מפגש 80%. חשוב: לא לטפח את התאים כדי להשלים מפגש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגרד את monolayers עם 10 טיפים פיפטה μl סטרילי. דחף את הקצה בעדינות בלי יותר מדי לחץ על פני השטח הצלחת ולהעביר אותו בקו ישר בצורה חלקה מצד אחד לother.Wash התאים פעמיים עם 0.1 M PBS להסיר תאים מנותקים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוספת נפח מספק של מדיום למנה התרבות. במידת צורך, להוסיף תרכובות שיש לחקור. הערה: 1.5 מיליליטר בינוני מכיל 15 ng / ml אלפא חומצה לינולנית נוסף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הר צלחת התרבות תחת מיקרוסקופ מסוגל הדמיה תא חי. ודא 5% CO 2, 37 מעלות צלזיוס ואווירת humidified. הערה: לחות חשוב במיוחד כדי למנוע אידוי בינוני. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לרכוש תמונות זמן לשגות מעל 24 שעות ב 10 דקות במרווחים. תכנית לגדלי קבצים גדולים. הערה: רזולוציה של 512 x 512 פיקסלים היא בדרך כלל מספיק; עם זאת, אנו ממליצים להשתמש בתמונות של לפחות 1,024 x 1,024. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדוד את רוחב הפער בזמן t = 0 שעה ובזמן t = 24 שעות באמצעות כלי האורך של התוכנה המסופק עם מיקרוסקופ או להשתמש בתוכנת קוד פתוח (לדוגמא, ImageJ). הערה: בתוכנת רכישת תמונה וניתוח ספציפית כללית מסופק על ידי היצרן. לכן, לפרטים טכניים בנוגע לשימוש בתוכנה, עיינו במדריך. </li></ol> מעקב 5. סלולארי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בהתאם לציוד זמין, לבחור בקפידה את מנות תרבית תאים או צלחות: בעת השימוש במיקרוסקופ דסק&quot;ש, להימנע ממאכלים המבוססת תרבות משטח פלסטיק או צלחות טובות, אבל להשתמש במכשירים מבוססים זכוכית במקום. הערה: אם באמצעות מיקרוסקופ שלב בניגוד, יכולות לשמש גם צלחות פלסטיק מבוססת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זרע 5 x 10 4 EEC DMEM בתוספת במכשיר תרבית תאים מתאים (למשל, צלחת 24 multiwell) ולטפח את התאים עם 5% CO 2 על 37 מעלות צלזיוס ולחות% 95 במשך 1-2 ימים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר התאים גדלו עד 80מפגש%, להסיר את המדיה ותרבות התאים עם המדיה חדשה בנוכחות חומרי הבדיקה המתאימות (למשל, 12.5 מיקרוגרם כלוראמבוציל / מיליליטר DMEM). תמיד כוללים תאי שליטה (שטופלו בממס, למשל, אתנול) על 37 מעלות צלזיוס למשך פרק זמן מסוים (24 שעות, בהתאם למערכת assay הבודד). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הר צלחת התרבות תחת מיקרוסקופ מסוגל הדמיה לחיות תא (37 מעלות צלזיוס, 5% CO 2 ולחות של 95%). לרכוש תמונות זמן לשגות מעל 24 שעות במרווחים מוגדרים מראש. לרכוש תמונות במרווחים של 10 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע באופן ידני מעקב של השוק האירופי המשותף על ידי השימוש בתוסף ImageJ MTrackJ. בחר 10 תאים באופן אקראי משדה הראייה ולעקוב אחר תנועותיהם על ידי הוספת נקודה לכל נקודת נתונים בזמן באמצעות &quot;הוסף&quot; הפקודה של MTrackJ. </li></ol> הערה: MTrackJ זמין בחינם ובImageJ הוא availab [Meijering, Mtrackj &quot;http://www.imagescience.org/meijering/software/mtrackj/&quot;.]le ב[ Rasband, ImageJ. &quot;http://rsbweb.nih.gov/ij/&quot;]. במדריך מפורט על תוסף MTrackJ זמין ב&quot; http://www.imagescience.org &quot;. 6. הדמיה של תא חי / הערכה של מיטוכונדריאלי ממברנה פוטנציאלי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטפח EEC במכשיר תרבית תאים מתאים (למשל, 4 סנטימטר צלחת זכוכית תחתונה פטרי מתאימה להדמיה תא חי) עד מפגש 80%. חשוב: אל לטפח את התאים כדי להשלים מפגש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במידת צורך, לחשוף את התאים לכימיקלים. הערה: תאים נחשפו לכלוראמבוציל / מיליליטר 12.5 מיקרוגרם למשך 24 שעות. בכל קשור לתכנון הניסוי הספציפי, הוראות עשויות להשתנות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן פתרון 10 מ&quot;מ מניות של tetramethylrhodamine (TMRM) בDMSO. להגן מפני אור. הערה: פתרון המניות ניתן לאחסן ב -20 ° C. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לדלל את פתרון המניות במדיום תרבית תאים לפתרון עובד עם ריכוז של 10 מיקרומטר (1: 1,000 דילול). להגן מפני אורולהשתמש בהקדם האפשרי. הערה: הפתרון עובד יכול להיות כל הזמן בRT לכמה זמן (HR&gt; 1), לעומת זאת, הכנה של פתרון עובד טרי מומלצת מאוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 2 μl של הפתרון עובד עד 1 מיליליטר בינוני (פתרון טעינה) תרבית תאים טרי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טען את התאים על ידי החלפה בינוני תרבית תאים עם פתרון הטעינה. דגירה במשך 15 דקות על 37 מעלות צלזיוס, 5% CO 2 ואווירה humidified (חממה). זהירות: כמעט כל האינדיקטורים הקרינה מיוצאים על ידי תאי חיים לאורך זמן; לכן להימנע מהעמסה ממושכת או ניתוח מתעכב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ללא שטיפה, מניח את הצלחת תחת מיקרוסקופ המתאים להדמיה תא חי. חשובה: מדדי הקרינה הם רגישים מאוד לאור, ולכן, יש להימנע מחשיפה לאור מיותרת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לרכוש תמונות מבלי לשנות את הפרמטרים הרכישה כדי להבטיח השוואתיים בין תמונות שונות. </li></ol>

<ol>
	<li>Bauer, S. M., Bauer, R. J., Velazquez, O. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenesis,+vasculogenesis,+and+induction+of+healing+in+chronic+wounds.">Angiogenesis, vasculogenesis, and induction of healing in chronic wounds.</a> Vascular and Endovascular Surgery. 39, 293-306 (2005).</li><li>Reinke, J. M., Sorg, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wound+repair+and+regeneration.">Wound repair and regeneration.</a> European Surgical Research. Europaische Chirurgische Forschung. Recherches Chirurgicales Europeennes. 49, 35-43 (2012).</li><li>Hart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation.+1:+Its+role+in+the+healing+of+acute+wounds.">Inflammation. 1: Its role in the healing of acute wounds.</a> Journal of Wound Care. 11, 205-209 (2002).</li><li>Liu, Z. J., Hyperoxia Velazquez, O. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=endothelial+progenitor+cell+mobilization,+and+diabetic+wound+healing.">endothelial progenitor cell mobilization, and diabetic wound healing.</a> Antioxidants &amp; Redox Signaling. 10, 1869-1882 (2008).</li><li>Gallagher, K. A., Goldstein, L. J., Thom, S. R., Velazquez, O. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperbaric+oxygen+and+bone+marrow-derived+endothelial+progenitor+cells+in+diabetic+wound+healing.">Hyperbaric oxygen and bone marrow-derived endothelial progenitor cells in diabetic wound healing.</a> Vascular. 14, 328-337 (2006).</li><li>Kehe, K., Balszuweit, F., Steinritz, D., Thiermann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+toxicology+of+sulfur+mustard-induced+cutaneous+inflammation+and+blistering.">Molecular toxicology of sulfur mustard-induced cutaneous inflammation and blistering.</a> Toxicology. 263, 12-19 (2009).</li><li>Schmidt, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitrogen+mustard+(Chlorambucil)+has+a+negative+influence+on+early+vascular+development.">Nitrogen mustard (Chlorambucil) has a negative influence on early vascular development.</a> Toxicology. 263, 32-40 (2009).</li><li>Steinritz, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+N-acetyl+cysteine+and+alpha-linolenic+acid+on+sulfur+mustard+caused+impairment+of+in+vitro+endothelial+tube+formation.">Effect of N-acetyl cysteine and alpha-linolenic acid on sulfur mustard caused impairment of in vitro endothelial tube formation.</a> Toxicological Sciences. 118, 521-529 (2010).</li><li>Steinritz, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chlorambucil+(nitrogen+mustard)+induced+impairment+of+early+vascular+endothelial+cell+migration+-+Effects+of+alpha-linolenic+acid+and+N-acetylcysteine.">Chlorambucil (nitrogen mustard) induced impairment of early vascular endothelial cell migration - Effects of alpha-linolenic acid and N-acetylcysteine.</a> Chemico-biological Interactions. 219C, 143-150 (2014).</li><li>Schmidt, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+endostatin+on+embryonic+vasculo-+and+angiogenesis.">Influence of endostatin on embryonic vasculo- and angiogenesis.</a> Developmental Dynamics : an Official Publication of the American Association of Anatomists. 230, 468-480 (2004).</li><li>Dainiak, M. B., Kumar, A., Galaev, I. Y., Mattiasson, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+in+cell+separations.">Methods in cell separations.</a> Advances in Biochemical Engineering/Biotechnology. 106, 1-18 (2007).</li><li>Wang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+VEGF-induced+endothelial+cell+migration+by+mitochondrial+reactive+oxygen+species.">Regulation of VEGF-induced endothelial cell migration by mitochondrial reactive oxygen species.</a> American Journal of Physiology. Cell physiology. 301, C695-C704 (2011).</li><li>Boyden, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+chemotactic+effect+of+mixtures+of+antibody+and+antigen+on+polymorphonuclear+leucocytes.">The chemotactic effect of mixtures of antibody and antigen on polymorphonuclear leucocytes.</a> The Journal of Experimental Medicine. 115, 453-466 (1962).</li><li>Relou, I. A., Damen, C. A., van der Schaft, D. W., Groenewegen, G., Griffioen, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+culture+conditions+on+endothelial+cell+growth+and+responsiveness.">Effect of culture conditions on endothelial cell growth and responsiveness.</a> Tissue &amp; Cell. 30, 525-530 (1998).</li><li>Smeets, E. F., von Asmuth, E. J., vander Linden, C. J., Leeuwenberg, J. F., Buurman, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+substrates+for+human+umbilical+vein+endothelial+cell+culture.">A comparison of substrates for human umbilical vein endothelial cell culture.</a> Biotechnic &amp; Histochemistry : Official Publication of the Biological Stain Commission. 67, 241-250 (1992).</li><li>Perry, S. W., Norman, J. P., Barbieri, J., Brown, E. B., Gelbard, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+membrane+potential+probes+and+the+proton+gradient:+a+practical+usage+guide.">Mitochondrial membrane potential probes and the proton gradient: a practical usage guide.</a> BioTechniques. 50, 98-115 (2011).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

חשיפת עור לחומרים כימיים רעילים לעתים קרובות תוצאות הפרעה בריפוי פצע חמורה. המנגנונים הם במידה רבה לא ידועים. ריפוי פצע הוא תהליך מורכב הכולל שלבים שונים (עצירת דימום, דלקת, שגשוג ושיפוץ). נדידת תאים מעורבת בכל שלב, לעומת זאת, זה הוא בעל חשיבות עליונה ליצירת רקמת פרור. ?...

נדידת תאים היא חשובה בתהליכים פיסיולוגיים רבים וpathophysiological כוללים פיתוח, מחלות שונות, וריפוי פצעים לאחר פציעת עור. בעקבות פציעת עור, דלקת מסירה כונני רקמה ופרור פגומים או נמקי סגירת פצע ראשונית ומאפשרת היווצרות של רשת של נימי דם חדשים באמצעות vasculogenesis (היווצרות רומן) או אנגיוגנזה (הנבטה של שלפוחית ​​הקיימת) 1-3. שני vasculo- ואנגיוגנזה דורשת הגירה של תאי האנדותל. הרשת הולכת והגדלה של כלי דם חיונית להובלת חמצן וחומרים מזינים למתרבה קרטינוציטים שסופו של דבר לעבור קרטיניזציה, יוצר האפיתל חדש ולספק סגירת פצע. הגירה לקויה של תאי האנדותל היא סיבה בסיסית של ריפוי פצע הפרעת 4,5. הגירה כך, שיטות להערכה של תאי האנדותל מוקדמים נדרשות לחקור את pathophysiology של הפרעות נדידת תאים ולזהות אסטרטגיות חדשות להתערבות טיפולית. חשיפת עור לסוכני אלקילציה (למשל, גופרית וחנקן חרדל) גורמת ריפוי פצע הפרעה 6. תרכובות כאלה היו בשימוש כחומרי לחימה כימית במספר עימותים במאה ה -20 ולהישאר סיבה לדאגה חזקה בשל מאגרים קיימים באזורים לא יציבים מבחינה פוליטית וסינתזה פשוטה יחסית. למרות שגז החרדל היה מסונתז ראשון בשנת 1822, פתולוגיה המולקולרית והקלינית של חשיפת SM אינה מובנת בפירוט ולא תרופה לחשיפת SM זוהתה. מספר מחקרים שנערכו להבין ומודל ריפוי פצע לקוי לאחר חשיפת SM ולבדוק לתרכובות מועמד פוטנציאליות מסוגלים להזמין השפעה ש. שמידט ואח &#39;. (2009) בדק את ההשפעה של כלוראמבוציל, מתחם אלקילציה עם מאפיינים דומים לSM בmouדגמי SE גוף embryoid ומצא לפעמים ירידה בהיווצרות כלי 7 דרמטית, יותר מ 99%. השפעה שלילית זו בולטת ביותר בשלב של פיתוח אשר, בתנאים פיסיולוגיים, הוא נשלט על ידי ההתפשטות והנדידה של תאי האנדותל של כלי דם מבשר. כך, תאים אלה זוהו להיות רגישים במיוחד לאלקילציה סוכנים. Steinritz et al. (2010) נבדק אוכלי נבלות של מיני חמצן מגיבים (ROS), ב, N-acetylcysteine ​​מסוים (NAC) וחומצת אלפא לינולנית (ALA) ביכולתם להפחית את רעילות SM במודלי גוף עכבר embryoid ובפרט, ל לשחזר היווצרות כלי 8. השפעות מגנות זמניות נצפו, מצביעה על כך שהיווצרות ROS מוגזמת עשוי לתרום להשפעות השליליות של SM בריפוי פצעים. תופעות אלה לא היו קבועות ותרכובות שני המועמד לא יכולות להיות מסוגלים להחזיר היווצרות כלי וריפוי פצע בטווח הארוך 8. However, ניסויים אלה בוצעו במודל 3D מורכב שעשה יאפשר חקירה של נדידת תאים. לפיכך, אנו לאחר מכן נבדקו NAC וALA להשפעות מועילות על נדידת תאים של השוק האירופי המשותף שיש להם תפקיד מפתח בתהליך של היווצרות כלי 9. יתר על כן, יש ראיות כי קוטביות התא נדרש לנדידת תאים. תפקוד לקוי של המיטוכונדריה המובילה להיווצרות ROS הוצג לפגוע בקוטביות תא ועלול להשפיע לרעה על כך נדידת תאים. לכן, הדמיה תא חי בכל קשור לתפקוד המיטוכונדריה בוצעה ואת ההשפעות של אוכלי נבלות ROS נבדקו. הפרוטוקול הבא מתאר דרישות כלליות לגידול של השוק האירופי המשותף, assay קאמרי בוידן, ריפוי הפצע assay כולל ניתוח מעקב תא והשימוש בTMRM להערכה של תפקוד המיטוכונדריה בפירוט. היבטים חשובים של פרוטוקולי ניסוי לגידול וההגירה EEC מודגשים.

<table><tbody><tr><td>Boyden Chamber&amp;nbsp;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Corning FluoroBlok Tissue Culture (TC)-treated Inserts, 24 well - 3 &amp;micro;m</td><td>Corning Incorporated</td><td>#351151</td><td></td></tr><tr><td>Corning FluoroBlok Tissue Culture (TC)-treated Inserts, 24 well - 8 &amp;micro;m</td><td>Life Sciences</td><td>#351152</td><td></td></tr><tr><td>(for use with Falcon Insert 24 well Companion Plate (353504)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Wound&amp;nbsp; healing assay</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Glass bottom dishes</td><td>Word Precision Instruments, Inc.</td><td>#FD35-100</td><td></td></tr><tr><td>Assessment of mitochondrial potential</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>TMRM (tetramethylrhodamine methyl ester)</td><td>Life Technologies</td><td>#T669</td><td></td></tr><tr><td>Cell culture</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Accutase</td><td>PAA, Pasching, Austria</td><td># L11-007</td><td></td></tr><tr><td>&amp;alpha;-Linolenic acid</td><td>Fluka (Sigma), Steinheim, Germany</td><td>&amp;nbsp;# L2376</td><td></td></tr><tr><td>Chlorambucil</td><td>Fluka (Sigma), Steinheim, Germany</td><td># 23125</td><td></td></tr><tr><td>Gelatin</td><td>Sigma-Aldrich, Steinheim, Germany</td><td># G2500-100G</td><td></td></tr></tbody></table>

assessment of endothelial cell migration after exposure to toxic chemicals

חשיפה לחומרים כימיים (כוללים חומרי לחימה כימית אלקילציה כמו חרדל גופרית וחנקן) לגרום לשפע של תסמינים קליניים כוללים הפרעת ריפוי פצע. התהליך הפיזיולוגי של ריפוי פצע הוא מורכב ביותר. ההיווצרות של רקמת פרור היא צעד מפתח בתהליך זה וכתוצאה מכך סגירת פצעים ראשונית ומתן רשת של כלי דם נימים חדשים - בין אם באמצעות vasculogenesis (היווצרות רומן) או אנגיוגנזה (הנבטה של ​​כלי קיימים). שני vasculo- ואנגיוגנזה דורשת הגירה פונקציונלית, בבימויו של תאי האנדותל. כך, החקירה של הגירה מוקדם תא האנדותל (EEC) חשובה להבין הפתופיזיולוגיה של פצע כימי הנגרם על ריפוי הפרעות ופוטנציאל לזהות אסטרטגיות חדשות להתערבות טיפולית. חוקרים הערכנו ריפוי פצע לקוי לאחר אלקילציה חשיפת סוכן ונבדקו תרכובות מועמד פוטנציאליות לTReatment. אנחנו השתמשנו בסט של טכניקות שתוארו בפרוטוקול זה. קאמרי בוידן שונה כדי לחקור כמותית chemokinesis של השוק האירופי המשותף מתואר. יתר על כן, השימוש בריפוי הפצע assay בשילוב עם ניתוח מסלול להעריך הגירה איכותית בא לידי ביטוי. לבסוף, אנחנו מדגימים את השימוש בTMRM הצבע פלואורסצנטי לחקירת פוטנציאל קרום המיטוכונדריה לזהות מנגנונים של נדידת תאים מופרעת. הפרוטוקול הבא מתאר טכניקות בסיסיות שהותאמו לחקירת EEC.

חשיפת עור לסוכני אלקילציה מעוררת אודם, היווצרות כיב כיב עורי ושמזוהה עם הפרעת ריפוי פצע. ריפוי פצע דורש vasculogenesis angio- ואשר מבוססים על הגירה של תאי האנדותל. הגירה כמותי יכולה להיות מוערכת על ידי שימוש של assay קאמרי בוידן. כפי שניתן לראות בתרשים 1C חשיפה של השוק האי...

Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Endothelial Cell Migration After Exposure to Toxic Chemicals at JoVE.com

Assessment of Endothelial Cell Migration After Exposure to Toxic Chemicals

Investigation of early endothelial cell (EEC) migration is important to understand the pathophysiology of certain illnesses and to potentially identify novel strategies for therapeutic intervention. The following protocol describes techniques to assess cell migration that have been adapted for the investigation of EEC.

הערכה של נדידת תאי האנדותל לאחר חשיפה לכימיקלים רעילים

Exposure to chemical substances (including alkylating chemical warfare agents like sulfur and nitrogen mustards) cause a plethora of clinical symptoms ...

assessment-endothelial-cell-migration-after-exposure-to-toxic

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

8.6K Views.  Bundeswehr Institute of Pharmacology and Toxicology. Investigation of early endothelial cell (EEC) migration is important to understand the pathophysiology of certain illnesses and to potentially identify novel strategies for therapeutic intervention. The following protocol describes techniques to assess cell migration that have been adapted for the investigation of EEC.

Video: Assessment of Endothelial Cell Migration After Exposure to Toxic Chemicals

Evaluation of the Cell Invasion and Migration Process: A Comparison of the Video Microscope-based Scratch Wound Assay and the Boyden Chamber Assay

The invasion and migration abilities of tumor cells are main contributors to cancer progression and recurrence. Many studies have explored the migration and invasion abilities to understand how cancer cells disseminate, with the aim of developing new treatment strategies. Analysis of the cellular and molecular basis of these abilities has led to the characterization of cell mobility and the physicochemical properties of the cytoskeleton and cellular microenvironment. For many years, the Boyden chamber assay and the scratch wound assay have been the standard techniques to study cell invasion and migration. However, these two techniques have limitations. The Boyden chamber assay is difficult and time consuming, and the scratch wound assay has low reproducibility. Development of modern technologies, especially in microscopy, has increased the reproducibility of the scratch wound assay. Using powerful analysis systems, an &#34;in-incubator&#34; video microscope can be used to provide automatic and real-time analysis of cell migration and invasion. The aim of this paper is to report and compare the two assays used to study cell invasion and migration: the Boyden chamber assay and an optimized in vitro video microscope-based scratch wound assay.

This study reports two different methods for the analysis of cell invasion and migration: the Boyden chamber assay and the in vitro video microscope-based wound-healing assay. The protocols for these two experiments are described, and their benefits and disadvantages are compared.

הערכה של הפלישה התא, תהליך ההעברה: השוואה של השריטה מבוסס-מיקרוסקופ וידאו פצע Assay ואת וזמינותו קאמרית בוידן

The invasion and migration abilities of tumor cells are main contributors to cancer progression and recurrence. Many studies have explored the migration ...

Cancer Research

A Novel Three-dimensional Flow Chamber Device to Study Chemokine-directed Extravasation of Cells Circulating under Physiological Flow Conditions

Extravasation of circulating cells from the bloodstream plays a central role in many physiological and pathophysiological processes, including stem cell homing and tumor metastasis. The three-dimensional flow chamber device (hereafter the 3D device) is a novel in vitro technology that recreates physiological shear stress and allows each step of the cell extravasation cascade to be quantified. The 3D device consists of an upper compartment in which the cells of interest circulate under shear stress, and a lower compartment of static wells that contain the chemoattractants of interest. The two compartments are separated by porous inserts coated with a monolayer of endothelial cells (EC). An optional second insert with microenvironmental cells of interest can be placed immediately beneath the EC layer. A gas exchange unit allows the optimal CO2 tension to be maintained and provides an access point to add or withdraw cells or compounds during the experiment. The test cells circulate in the upper compartment at the desired shear stress (flow rate) controlled by a peristaltic pump. At the end of the experiment, the circulating and migrated cells are collected for further analyses. The 3D device can be used to examine cell rolling on and adhesion to EC under shear stress, transmigration in response to chemokine gradients, resistance to shear stress, cluster formation, and cell survival. In addition, the optional second insert allows the effects of crosstalk between EC and microenvironmental cells to be examined. The translational applications of the 3D device include testing of drug candidates that target cell migration and predicting the in vivo behavior of cells after intravenous injection. Thus, the novel 3D device is a versatile and inexpensive tool to study the molecular mechanisms that mediate cellular extravasation.

The three-dimensional flow chamber device is a novel in vitro technology for the quantitative and step-wise evaluation of the extravasation cascade of cells circulating under conditions of physiological shear stress. The device therefore fills a critical need for basic, preclinical, and clinical studies of cell migration.

התקן תזרים הלשכה תלת ממדי רומן ללמוד chemokine ביים-extravasation של תאים במחזור בתנאי זרימה פיסיולוגיים

Extravasation of circulating cells from the bloodstream plays a central role in many physiological and pathophysiological processes, including stem cell ...

Bioengineering

Analysis of Cell Migration within a Three-dimensional Collagen Matrix

The ability to migrate is a hallmark of various cell types and plays a crucial role in several physiological processes, including&#160;embryonic development, wound healing, and immune responses. However, cell migration is also a key mechanism in cancer enabling these cancer cells to detach from the primary tumor to start metastatic spreading. Within the past years various cell migration assays have been developed to analyze the migratory behavior of different cell types. Because the locomotory behavior of cells markedly differs between a two-dimensional (2D) and three-dimensional (3D) environment it can be assumed that the analysis of the migration of cells that are embedded within a 3D environment would yield in more significant cell migration data. The advantage of the described 3D collagen matrix migration assay is that cells are embedded within a physiological 3D network of collagen fibers representing the major component of the extracellular matrix. Due to time-lapse video microscopy real cell migration is measured allowing the determination of several migration parameters as well as their alterations in response to pro-migratory factors or inhibitors. Various cell types could be analyzed using this technique, including lymphocytes/leukocytes, stem cells, and tumor cells. Likewise, also cell clusters or spheroids could be embedded within the collagen matrix concomitant with analysis of the emigration of single cells from the cell cluster/ spheroid into the collagen lattice. We conclude that the 3D collagen matrix migration assay is a versatile method to analyze the migration of cells within a physiological-like 3D environment.

Cell migration is a biological phenomenon that is involved in a plethora of physiological, such as wound healing and immune responses, and pathophysiological processes, like cancer. The 3D-collagen matrix migration assay is a versatile tool to analyze the migratory properties of different cell types within in a 3D physiological-like environment.

ניתוח של נדידת תאים בתוך קולגן מטריקס תלת ממדי

The ability to migrate is a hallmark of various cell types and plays a crucial role in several physiological processes, including&#160;embryonic ...

Quantitative Assessment of Human Neutrophil Migration Across a Cultured Bladder Epithelium

The recruitment of immune cells from the periphery to the site of inflammation is an essential step in the innate immune response at any mucosal surface. During infection of the urinary bladder, polymorphonuclear leukocytes (PMN; neutrophils) migrate from the bloodstream and traverse the bladder epithelium. Failure to resolve infection in the absence of a neutrophilic response demonstrates the importance of PMN in bladder defense. To facilitate colonization of the bladder epithelium, uropathogenic Escherichia coli (UPEC), the causative agent of the majority of urinary tract infections (UTIs), dampen the acute inflammatory response using a variety of partially defined mechanisms. To further investigate the interplay between host and bacterial pathogen, we developed an in vitro model of this aspect of the innate immune response to UPEC. In the transuroepithelial neutrophil migration assay, a variation on the Boyden chamber, cultured bladder epithelial cells are grown to confluence on the underside of a permeable support. PMN are isolated from human venous blood and are applied to the basolateral side of the bladder epithelial cell layers. PMN migration representing the physiologically relevant basolateral-to-apical direction in response to bacterial infection or chemoattractant molecules is enumerated using a hemocytometer. This model can be used to investigate interactions between UPEC and eukaryotic cells as well as to interrogate the molecular requirements for the traversal of bladder epithelia by PMN. The transuroepithelial neutrophil migration model will further our understanding of the initial inflammatory response to UPEC in the bladder.

We developed an in vitro model that mimics an important component of the acute inflammatory response during infection of the bladder with uropathogenic Escherichia coli. The transuroepithelial neutrophil migration assay enables quantitative assessment of human neutrophil migration across bladder epithelia, cultured on permeable supports, in response to bacterial infection or chemoattractant substances.

הערכה כמותית של אדם נויטרופילים הגירה מעבר מתורבת שלפוחית ​​השתן האפיתל

The recruitment of immune cells from the periphery to the site of inflammation is an essential step in the innate immune response at any mucosal surface. ...

Immunology and Infection

Assessment of Lymphocyte Migration in an Ex Vivo Transmigration System

Herein, we present an efficient method that can be executed with basic laboratory skills and materials to assess lymphocyte chemokinetic movement in an ex vivo transmigration system. Group 2 innate lymphoid cells (ILC2) and CD4+ T helper cells were isolated from spleens and lungs of chicken egg ovalbumin (OVA)-challenged BALB/c mice. We confirmed the expression of CCR4 on both CD4+ T cells and ILC2, comparatively. CCL17 and CCL22 are the known ligands for CCR4; therefore, using this ex vivo transmigration method we examined CCL17- and CCL22-induced movement of CCR4+ lymphocytes. To establish chemokine gradients, CCL17 and CCL22 were placed in the bottom chamber of the transmigration system. Isolated lymphocytes were then added to top chambers and over a 48 h period the lymphocytes actively migrated through 3 &#181;m pores towards the chemokine in the bottom chamber. This is an effective system for determining the chemokinetics of lymphocytes, but, understandably, does not mimic the complexities found in the in vivo organ microenvironments. This is one limitation of the method that can be overcome by the addition of in situ imaging of the organ and lymphocytes under study. In contrast, the advantage of this method is that is can be performed by an entry-level technician at a much more cost-effective rate than live imaging. As therapeutic compounds become available to enhance migration, as in the case of tumor infiltrating cytotoxic immune cells, or to inhibit migration, perhaps in the case of autoimmune diseases where immunopathology is of concern, this method can be used as a screening tool. In general, the method is effective if the chemokine of interest is consistently generating chemokinetics at a statistically higher level than the media control. In such cases, the degree of inhibition/enhancement by a given compound can be determined as well.

In this protocol, lymphocytes are placed in the top chamber of a transmigration system, separated from the bottom chamber by a porous membrane. Chemokine is added to the bottom chamber, which induces active migration along a chemokine gradient. After 48 h, lymphocytes are counted in both chambers to quantitate transmigration.

הערכה של הגירה לימפוציט במערכת הגירה לשעבר של Vivo

Herein, we present an efficient method that can be executed with basic laboratory skills and materials to assess lymphocyte chemokinetic movement in an ex ...

Migration, Chemo-Attraction, and Co-Culture Assays for Human Stem Cell-Derived Endothelial Cells and GABAergic Neurons

Role of brain vasculature in nervous system development and etiology of brain disorders is increasingly gaining attention. Our recent studies have identified a special population of vascular cells, the periventricular endothelial cells, that play a critical role in the migration and distribution of forebrain GABAergic interneurons during embryonic development. This, coupled with their cell-autonomous functions, alludes to novel roles of periventricular endothelial cells in the pathology of neuropsychiatric disorders like schizophrenia, epilepsy, and autism. Here, we have described three different in vitro assays that collectively evaluate the functions of periventricular endothelial cells and their interaction with GABAergic interneurons. Use of these assays, particularly in a human context, will allow us to identify the link between periventricular endothelial cells and brain disorders. These assays are simple, low cost, and reproducible, and can be easily adapted to any adherent cell type.

We present three simple in vitro assays-the long-distance migration assay, the co-culture migration assay, and chemo-attraction assay-that collectively evaluate the functions of human stem cell derived periventricular endothelial cells and their interaction with GABAergic interneurons.

הגירה, כימותרפיה-אטרקציה, ושיתוף התרבות Assays בשביל הגזע האנושי תאים הנגזרת האנדותל והנוירונים

Role of brain vasculature in nervous system development and etiology of brain disorders is increasingly gaining attention. Our recent studies have ...

Neuroscience

In vitro Cell Migration and Invasion Assays

Migration is a key property of live cells and critical for normal development, immune response, and disease processes such as cancer metastasis and inflammation. Methods to examine cell migration are very useful and important for a wide range of biomedical research such as cancer biology, immunology, vascular biology, cell biology and developmental biology. Here we use tumor cell migration and invasion as an example and describe two related assays to illustrate the commonly used, easily accessible methods to measure these processes. The first method is the cell culture wound closure assay in which a scratch is generated on a confluent cell monolayer. The speed of wound closure and cell migration can be quantified by taking snapshot pictures with a regular inverted microscope at several time intervals. More detailed cell migratory behavior can be documented using the time-lapse microscopy system. The second method described in this paper is the transwell cell migration and invasion assay that measures the capacity of cell motility and invasiveness toward a chemo-attractant gradient. It is our goal to describe these methods in a highly accessible manner so that the procedures can be successfully performed in research laboratories even just with basic cell biology setup.

In vitro Cell Migration and Invasion Assays

Commonly used, highly accessible methods for examining cell migration and invasion in vitro are described. The first method is the cell wound closure assay that measures cell motility. The second method is the transwell migration and invasion assay that assesses the chemotactic and invasive capacity of cells.

נדידת תאים במבחנה ומבחני פלישה

Migration is a key property of live cells and critical for normal development, immune response, and disease processes such as cancer metastasis and ...

Biology

Quantitation of Endothelial Cell Adhesiveness In Vitro

One of the cardinal processes of inflammation is the infiltration of immune cells from the lumen of the blood vessel to the surrounding tissue. This occurs when endothelial cells, which line blood vessels, become adhesive to circulating immune cells such as monocytes. In vitro measurement of this adhesiveness has until now been done by quantifying the total number of monocytes that adhere to an endothelial layer either as a direct count or by indirect measurement of the fluorescence of adherent monocytes. While such measurements do indicate the average adhesiveness of the endothelial cell population, they are confounded by a number of factors, such as cell number, and do not reveal the proportion of endothelial cells that are actually adhesive. Here we describe and demonstrate a method which allows the enumeration of adhesive cells within a tested population of endothelial monolayer. Endothelial cells are grown on glass coverslips and following desired treatment are challenged with monocytes (that may be fluorescently labeled). After incubation, a rinsing procedure, involving multiple rounds of immersion and draining, the cells are fixed. Adhesive endothelial cells, which are surrounded by monocytes are readily identified and enumerated, giving an adhesion index that reveals the actual proportion of endothelial cells within the population that are adhesive.

Quantitation of Endothelial Cell Adhesiveness In Vitro

We report an in vitro method that allows the quantitation of the actual number of adhesive cells within an endothelial cell monolayer.

כימות של דביקות תא האנדותל<em&gt; במבחנה</em

One of the cardinal processes of inflammation is the infiltration of immune cells from the lumen of the blood vessel to the surrounding tissue. This ...

A Cost Effective and Adaptable Scratch Migration Assay

Cell migration is a key component in both physiological and pathological events. Normal cell migration is required for essential functions such as development and mounting an immune response. When a defect or alteration occurs with the cell migration process, it can have detrimental outcomes (i.e., cancer metastasis, wound healing, and scar formation). Due to the importance of cell migration, it is necessary to have access to a cell migration assay that is affordable, adaptable, and repeatable. Utilizing the common scratch migration assay, we have developed a new approach to analyzing cell migration that uses general laboratory equipment. The method described uses visual markers that allow for recapturing specific areas of interest without the use of time-lapse microscopy. In addition, it provides flexibility in the experimental design, ranging from altering the migration matrix substrate to the addition of pharmacological modifiers. Furthermore, this protocol outlines a way to account for the area of cell migration, which is not considered by several methods when examining cell migration. This new approach offers a scratch migration assay to a larger audience and will provide greater opportunity for researchers to examine the physiological and pathophysiological impact of cell migration.

We present a cost-effective method to the scratch migration assay that provides a new approach for determining cell migration without the use of equipment-intensive methods. While fibroblasts were used in this protocol, it can be adapted and utilized to study additional cell types and influences on cell migration.

תס"א של העברת שריטות חסכונית ותואמה

Cell migration is a key component in both physiological and pathological events. Normal cell migration is required for essential functions such as ...

An Introduction to Cell Motility and Migration

Cell motility and migration play important roles in both normal biology and in disease. On one hand, migration allows cells to generate complex tissues and organs during development, but on the other hand, the same mechanisms are used by tumor cells to move and spread in a process known as cancer metastasis. One of the primary cellular machineries that make cell movement possible is an intracellular network of myosin and actin molecules, together known as &#8220;actomyosin&#8221;, which creates a contractile force to pull a cell in different directions.In this video, JoVE presents a historical overview of the field of cell migration, noting how early work on muscle contraction led to the discovery of the actomyosin apparatus. We then explore some of the questions researchers are still asking about cell motility, and review techniques used to study different aspects of this phenomenon. Finally, we look at how researchers are currently studying cell migration, for example, to better understand metastasis.

Cell Motility and Migration, Cell Invasion and Chemo-attraction

מבוא לתנועתיות תאים ולהגירה

Cell motility and migration play important roles in both normal biology and in disease. On one hand, migration allows cells to generate complex tissues ...

הערכה של נדידת תאי האנדותל לאחר חשיפה לכימיקלים רעילים

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

הערכה של הפלישה התא, תהליך ההעברה: השוואה של השריטה מבוסס-מיקרוסקופ וידאו פצע Assay ואת וזמינותו קאמרית בוידן

התקן תזרים הלשכה תלת ממדי רומן ללמוד chemokine ביים-extravasation של תאים במחזור בתנאי זרימה פיסיולוגיים

ניתוח של נדידת תאים בתוך קולגן מטריקס תלת ממדי

הערכה כמותית של אדם נויטרופילים הגירה מעבר מתורבת שלפוחית השתן האפיתל

הערכה של הגירה לימפוציט במערכת הגירה לשעבר של Vivo

הגירה, כימותרפיה-אטרקציה, ושיתוף התרבות Assays בשביל הגזע האנושי תאים הנגזרת האנדותל והנוירונים

נדידת תאים במבחנה ומבחני פלישה

כימות של דביקות תא האנדותל

תס"א של העברת שריטות חסכונית ותואמה

מבוא לתנועתיות תאים ולהגירה

הערכה של נדידת תאי האנדותל לאחר חשיפה לכימיקלים רעילים

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

הערכה של הפלישה התא, תהליך ההעברה: השוואה של השריטה מבוסס-מיקרוסקופ וידאו פצע Assay ואת וזמינותו קאמרית בוידן

התקן תזרים הלשכה תלת ממדי רומן ללמוד chemokine ביים-extravasation של תאים במחזור בתנאי זרימה פיסיולוגיים

ניתוח של נדידת תאים בתוך קולגן מטריקס תלת ממדי

הערכה כמותית של אדם נויטרופילים הגירה מעבר מתורבת שלפוחית ​​השתן האפיתל

הערכה של הגירה לימפוציט במערכת הגירה לשעבר של Vivo

הגירה, כימותרפיה-אטרקציה, ושיתוף התרבות Assays בשביל הגזע האנושי תאים הנגזרת האנדותל והנוירונים

נדידת תאים במבחנה ומבחני פלישה

כימות של דביקות תא האנדותל

תס"א של העברת שריטות חסכונית ותואמה

מבוא לתנועתיות תאים ולהגירה

הערכה כמותית של אדם נויטרופילים הגירה מעבר מתורבת שלפוחית השתן האפיתל