בכרומטוגרפיה, מומס נע דרך עמודת כרומטוגרפיה ונוטה להתפשט, ויוצר רצועה בצורת גאוסיאן. ככל שהמומס מבלה זמן רב יותר בעמודה, כך הרצועה מתרחבת יותר. הרחבה זו יכולה להוביל לחפיפות בעמודה, המשפיעות על יעילות ההפרדה.
ניתן להעריך את יעילות ההפרדה על ידי קביעת רמת ההפרדה בין שתי פסגות סמוכות בכרומטוגרמה, המייצגות את הרכיבים הבודדים של הדגימה.
בכרומטוגרפיה, הרזולוציה מתבטאת כיחס בין ההפרש בזמן או בנפח השמירה בין שתי פסגות סמוכות לרוחב הממוצע של הבסיס שלהן. רזולוציה גבוהה יותר מצביעה על הפרדה טובה יותר בין הפסגות.
ערך הרזולוציה מהווה מדד כמותי ליכולת של העמודה להפריד בין שני אנליטים. הוא מצביע על המרחק בין שתי הפסגות ביחס לרוחבן. רזולוציה של 1.0 גורמת לחפיפה של 2.3% בין שתי פסגות ברוחב שווה, המהווה את ההפרדה המינימלית הנדרשת עבור כימות מדויק. רזולוציה של 1.5 תואמת לחפיפה של 0.1% בין פסגות ברוחב שווה, הנחשבת מספקת להפרדה בסיסית של פסגות בגובה שווה.
ברזולוציות נמוכות יותר, החפיפה בזמן ובנפח היציאה בין שתי פסגות סמוכות גבוהה, מה שאומר שיש חפיפה משמעותית של שני המומסים. ככל שהרזולוציה עולה, שטח החפיפה קטן.
מכיוון שלעקומות גאוסיאניות יש צורה צפויה, ניתן להתאים את המשוואה למדידה ברוחב בגובה מחצית הפסגה המרבית אם מדידת רוחב הבסיס מאתגרת. בנוסף, ניתן לחשב את הרזולוציה תוך שימוש בגורם ההפרדה, הידוע גם כבררנות. זהו מדד תרמודינמי של היחסיות בזמן השמירה של שני מומסים, המובא כיחס בין גורמי השמירה שלהם.
משוואת הרזולוציה המרכזית או משוואת פורנל מקשרת בין הרזולוציה ליעילות. ניתן לשפר את הרזולוציה על ידי הארכת זמן השמירה או צמצום רוחב הבסיס של המומסים. הארכת זמן השמירה יכולה להתבצע על ידי הגברת האינטראקציה של המומסים עם העמודה או על ידי העלאת הבררנות של העמודה לאחד המומסים. הוספת לוחות תיאורטיים נוספים להגדלת מספר שלבי ההפרדה יכולה גם לשפר את הרזולוציה על ידי הארכת אורך העמודה. עם זאת, פעולה זו גם מאריכה את הזמן הנדרש להפרדה.
בעמודות ארוזות, רוחבי הפסגות גדלים עם השורש הריבועי של המרחק שהן נודדות. בינתיים, המרחק בין מרכזי הפסגות גדל באופן ליניארי עם המרחק שהן עוברות. משמעות הדבר היא שההפרדה משתפרת ככל שהפסגות נעות מהר יותר מהרחבתן.
From Chapter 11:
Now Playing
Principles of Chromatography
301 Views
Principles of Chromatography
649 Views
Principles of Chromatography
762 Views
Principles of Chromatography
530 Views
Principles of Chromatography
364 Views
Principles of Chromatography
396 Views
Principles of Chromatography
217 Views
Principles of Chromatography
291 Views
Principles of Chromatography
842 Views
Principles of Chromatography
894 Views
Principles of Chromatography
540 Views
Principles of Chromatography
381 Views
Principles of Chromatography
306 Views
Principles of Chromatography
309 Views
Principles of Chromatography
298 Views
See More
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved