JoVE Logo

Sign In

בכרומטוגרפיה, מומס נע דרך עמודת כרומטוגרפיה ונוטה להתפשט, ויוצר רצועה בצורת גאוסיאן. ככל שהמומס מבלה זמן רב יותר בעמודה, כך הרצועה מתרחבת יותר. הרחבה זו יכולה להוביל לחפיפות בעמודה, המשפיעות על יעילות ההפרדה.

ניתן להעריך את יעילות ההפרדה על ידי קביעת רמת ההפרדה בין שתי פסגות סמוכות בכרומטוגרמה, המייצגות את הרכיבים הבודדים של הדגימה.

בכרומטוגרפיה, הרזולוציה מתבטאת כיחס בין ההפרש בזמן או בנפח השמירה בין שתי פסגות סמוכות לרוחב הממוצע של הבסיס שלהן. רזולוציה גבוהה יותר מצביעה על הפרדה טובה יותר בין הפסגות.

ערך הרזולוציה מהווה מדד כמותי ליכולת של העמודה להפריד בין שני אנליטים. הוא מצביע על המרחק בין שתי הפסגות ביחס לרוחבן. רזולוציה של 1.0 גורמת לחפיפה של 2.3% בין שתי פסגות ברוחב שווה, המהווה את ההפרדה המינימלית הנדרשת עבור כימות מדויק. רזולוציה של 1.5 תואמת לחפיפה של 0.1% בין פסגות ברוחב שווה, הנחשבת מספקת להפרדה בסיסית של פסגות בגובה שווה.

ברזולוציות נמוכות יותר, החפיפה בזמן ובנפח היציאה בין שתי פסגות סמוכות גבוהה, מה שאומר שיש חפיפה משמעותית של שני המומסים. ככל שהרזולוציה עולה, שטח החפיפה קטן.

מכיוון שלעקומות גאוסיאניות יש צורה צפויה, ניתן להתאים את המשוואה למדידה ברוחב בגובה מחצית הפסגה המרבית אם מדידת רוחב הבסיס מאתגרת. בנוסף, ניתן לחשב את הרזולוציה תוך שימוש בגורם ההפרדה, הידוע גם כבררנות. זהו מדד תרמודינמי של היחסיות בזמן השמירה של שני מומסים, המובא כיחס בין גורמי השמירה שלהם.

משוואת הרזולוציה המרכזית או משוואת פורנל מקשרת בין הרזולוציה ליעילות. ניתן לשפר את הרזולוציה על ידי הארכת זמן השמירה או צמצום רוחב הבסיס של המומסים. הארכת זמן השמירה יכולה להתבצע על ידי הגברת האינטראקציה של המומסים עם העמודה או על ידי העלאת הבררנות של העמודה לאחד המומסים. הוספת לוחות תיאורטיים נוספים להגדלת מספר שלבי ההפרדה יכולה גם לשפר את הרזולוציה על ידי הארכת אורך העמודה. עם זאת, פעולה זו גם מאריכה את הזמן הנדרש להפרדה.

בעמודות ארוזות, רוחבי הפסגות גדלים עם השורש הריבועי של המרחק שהן נודדות. בינתיים, המרחק בין מרכזי הפסגות גדל באופן ליניארי עם המרחק שהן עוברות. משמעות הדבר היא שההפרדה משתפרת ככל שהפסגות נעות מהר יותר מהרחבתן.

Tags

ChromatographyChromatographic ColumnSoluteGaussian shaped BandSeparation EffectivenessChromatogramResolutionRetention TimeOverlapCo elutionSeparation FactorSelectivityPurnell EquationTheoretical PlatesBaseline WidthPeak Height

From Chapter 11:

article

Now Playing

11.5 : רזולוציית כרומטוגרפיה

Principles of Chromatography

301 Views

article

11.1 : שיטות כרומטוגרפיות: מינוח

Principles of Chromatography

649 Views

article

11.2 : שיטות כרומטוגרפיה: סיווג

Principles of Chromatography

762 Views

article

11.3 : ספיחה וחלוקת אנליטים

Principles of Chromatography

530 Views

article

11.4 : דיפוזיה בעמודות כרומטוגרפיה

Principles of Chromatography

364 Views

article

11.6 : יעילות עמודה: תיאוריית הצלחות

Principles of Chromatography

396 Views

article

11.7 : יעילות עמודה: תיאוריית הקצב

Principles of Chromatography

217 Views

article

11.8 : אופטימיזציה של הפרדת כרומטוגרפיה

Principles of Chromatography

291 Views

article

11.9 : כרומטוגרפיית ג'ל סיליקה : סקירה

Principles of Chromatography

842 Views

article

11.10 : כרומטוגרפיה ברובד דק (TLC)

Principles of Chromatography

894 Views

article

11.11 : כרומטוגרפיה גזית: מבוא

Principles of Chromatography

540 Views

article

11.12 : כרומטוגרפיה גזית: סוגי עמודות ופאזות נייחות

Principles of Chromatography

381 Views

article

11.13 : מערכות הזרקת דגימה

Principles of Chromatography

306 Views

article

11.14 : כרומטוגרפיית גז: סקירה של גלאים

Principles of Chromatography

309 Views

article

11.15 : גז כרומטוגרפיה: סוגי גלאים-I

Principles of Chromatography

298 Views

See More

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved