Cette méthode aide à déterminer si la cellule tumorale a envahi au-delà de la lamina élastique dans le cancer gastrique pT3. érosion élastique de lamina dans l’image pronostique pour le cancer gastrique de pT3. Le principal avantage de cette technique est qu’il est pratique, et l’approche précise pour identifier le lamina élastique, ce qui le rend plus précis pour le pathologiste d’évaluer si les cellules tumorales envahissent au-delà de la lamina élastique dans le cancer gastrique pT3.
Cette technique peut être vers un diagnostic pathologique de stade d’essai du cancer du poumon et du cancer. Cette méthode pourrait également être appliquée au système de stade TNM du cancer du poumon et du cancer colo-rectal. Tout d’abord, plonger les diapositives dans du xylène dans un bocal Coplin pendant 10 minutes.
Retirez les diapositives de ce bocal et plongez-les dans du xylène frais dans un autre bocal Coplin pendant encore 10 minutes. Immerger les glissières dans 100% d’éthanol pendant cinq minutes, puis les transférer à l’éthanol frais à 100% pendant encore cinq minutes. Ensuite, plongez les diapositives dans 95% d’éthanol pendant deux minutes.
Transférer les diapositives dans un bocal contenant 70 % d’éthanol pendant deux minutes. Après cela, rincer brièvement les diapositives à l’eau distillée dans un nouveau bocal Coplin. Tout d’abord, utilisez du papier de soie pour essuyer toute solution excédentaire sur la lame ou autour du tissu.
Placez les glissières dans des conditions qui correspondent à la température ambiante et à l’humidité. Ajouter quelques gouttes de permanganate de potassium à chaque diapositive pour les oxyder, en s’assurant que le volume ajouté est suffisant pour couvrir la section tissulaire sur chaque diapositive. Après cinq minutes, rincer les toboggans oxydés à l’eau distillée dans des pots de Coplin, en répétant le rinçage deux à trois fois et en utilisant un nouveau pot d’eau pour chaque rinçage.
Le tissu doit avoir une couleur brune observable. Maintenant, ajoutez quelques gouttes d’acide oxalique à chaque diapositive pour les blanchir, en vous assurant que le volume ajouté est suffisant pour couvrir la section tissulaire sur chaque diapositive. Après cinq minutes, rincer les toboggans blanchis à l’eau distillée, en répétant le rinçage deux à trois fois et en utilisant un nouveau pot d’eau pour chaque rinçage.
Lavez brièvement les glissières dans 95% d’alcool. Immerger les glissières lavées dans une solution élastine pendant huit à 24 heures. Puis immerger les diapositives directement dans 95% d’éthanol pendant une à deux minutes pour bien différencier chaque section tissulaire.
Rincez complètement les toboggans à l’eau distillée. Vérifiez au microscope la coloration des fibres élastiques bleu-noir et le fond gris. Contrestain les diapositives dans une solution van Gieson pendant une minute, en s’assurant que le volume utilisé est suffisant pour couvrir la section tissu sur chaque diapositive complètement.
Ensuite, déposez rapidement 95% d’éthanol sur les tranches de tissu pendant quelques secondes pour bien différencier chaque section tissulaire. Pour commencer, plongez les glissières dans 95% d’alcool pendant cinq minutes pour les déshydrater rapidement. Transférer les diapositives à 100% d’alcool pendant cinq minutes pour poursuivre la déshydratation.
Ensuite, transférez les diapositives à 100% d’alcool frais pendant cinq minutes supplémentaires. Plongez les diapositives dans deux changements différents de xylène à chaque immersion d’une durée de trois minutes. Après cela, ajouter une goutte de milieu de montage résineux à la diapositive et placer un glissement de couverture sur le dessus.
À l’aide d’un microscope, observez les sections tissulaires décrites dans le protocole textuel. Dans cette étude, la coloration élastique est utilisée pour identifier visuellement le lamina élastique subserosal. Une coloration réussie représentative révèle qu’après la coloration de solution d’élastine, mais avant la contre-coloration de van Gieson, la lamina élastique peut être clairement vue sous forme de filaments qui sont tachés bleu-noir.
Ils sont proches des cellules mésothéliales serosales, et une certaine distance est encore observée entre le lamina élastique et les cellules tumorales. Les taches élastiques typiques avec le contre-tache de van Gieson démontrent que le lamina élastique est teinté bleu-noir. Les fibres de collagène sont teintées de rouge, et les fibres musculaires et les cellules cancéreuses sont teintées de jaune.
Les cellules cancéreuses pénétrant le lamina élastique sont considérées comme une invasion élastique de lamina. Alors que les cellules cancéreuses étant proches mais n’envahissant pas le lamina élastique est considéré comme élastique lamina non-invasion. Si la coloration révèle une structure répétitive indicative de plusieurs couches de lamine élastique, et que la tumeur n’envahit pas au-delà de la couche la plus externe, l’échantillon doit être diagnostiqué comme une non-invasion élastique de lamina.
Elastin solution est un et le temps de coloration est relativement long, il est donc préférable d’immerger toutes les diapositives avec la coloration élastine dans un récipient scellé. Après la coloration de solution d’élastine, doit être lavé avec de l’eau distillée.
