Die retroorbitale Injektion ist eine spezielle Injektionsmethode, mit der Verbindungen in den venösen Kreislauf verabreicht werden. Tierversuche sind ein wichtiger Schritt in Richtung klinischer Arbeit. Im Rahmen der Tierversuche besteht die Notwendigkeit, verschiedene Arten von Verbindungen auf verschiedenen Wegen zu verabreichen.
Einige dieser Wege umfassen subkutan, intraperitoneal und intravenös. Die intravenöse Injektion ist der am häufigsten verwendete Weg bei Neugeborenen, die sich auf der Neugeborenen-Intensivstation befinden. In der Nagetierforschung, insbesondere bei erwachsenen Nagetieren, werden jedoch routinemäßig intravenöse Injektionen in die Schwanzvene durchgeführt.
Bei Neugeborenen ist es äußerst schwierig, eine Schwanzveneninjektion erfolgreich und reproduzierbar durchzuführen. Daher kann die retroorbitale Route als einfachere Alternative genutzt werden. Zuerst werden wir die Verwendung eines Farbstoffs, Trypanblau, demonstrieren, damit der Betrachter deutlich sehen kann, wie der Farbstoff in den venösen Kreislauf gelangt.
Die neugeborene Ratte wird unter Vollnarkose gesetzt, wobei ihr Kopf auf der Seite liegt und über einer Lichtquelle ruht, so dass das Auge und das seitliche Gefäßsystem freigelegt und sichtbar sind. Die Nadel wird an der Vorderseite der Augenhöhle eingeführt, dem Äquivalent zum medialen Kanthus. Injizieren Sie die Lösung in einer sanften, glatten und flüssigen Bewegung.
Um dieses Verfahren besser nachvollziehen zu können, ist es wichtig, die orbitale Venenanatomie zu verstehen. Bei der Ratte befindet sich direkt unterhalb des Auges ein Netzwerk aus mehreren Venen, die einen einfachen und direkten Zugang zum Venengeflecht ermöglichen. Bei der neugeborenen Albino-Ratte ist es auch sowohl in der oberflächlichen Schläfen- als auch in der Gesichtsvene sichtbar.
Dieses Verfahren kann auf genau die gleiche Weise durchgeführt werden. Bei neugeborenen Mäusen. Verwenden Sie eine Nadel mit einer Stärke von 29 bis 31 etwa 0,30 Millimetern.
Um genaue Volumina zu erhalten, ziehen Sie die zu injizierende Lösung aus einem pipettierten Volumen auf. Legen Sie die Tiere seitlich liegend auf eine ebene Fläche. Induzieren Sie eine Ganzkörper-Isofluran-Anästhesie.
5 % Induktion, 3 % Wartung. Überprüfen Sie die Narkosetiefe mit der Pull-Withdrawal-Reflex-Methode. Mit dem Kopf nach rechts die Injektion in den rechten Sinus retroorbitalis verabreichen.
Führen Sie die Nadelabschrägung an der Vorderseite der Augenhöhle, die dem mittleren Kanthus entspricht, in einem Winkel von etwa 40 Grad ein. Dieser Winkel ermöglicht es, die Nadel auf den hinteren Teil der Augenhöhle zu richten. Injizieren Sie in einer sanften, glatten und flüssigen Bewegung.
Warten Sie einen kurzen Moment, bevor Sie die Nadel langsam zurückziehen, um einen Rückfluss zu vermeiden. Verwenden Sie für jedes Tier eine neue sterile Spritze, um eine Kontamination zu vermeiden. Legen Sie den Welpen in die Auffangbox, die auf einem geschützten Wärmegerät bei etwa 35 bis 37 Grad Celsius ruht.
Warten Sie, bis sich der Welpe erholt hat, und prüfen Sie, ob es Anzeichen von Stress gibt, bevor Sie den Welpen zur Mutter zurückbringen. Diese Technik wurde verwendet, um den Tracer Biotin-Dextran in das Gefäßsystem des Gehirns von Tieren zu verabreichen, die eine Keimmatrixblutung erlitten hatten. Tiere, die eine Kochsalzinjektion als Kontrolle erhielten, zeigten keine sichtbare Färbung des Gefäßsystems im Gehirn.
Die erfolgreiche retroorbitale Injektion des Biotin-Dextran-Tracers ermöglichte die Beurteilung seines Vorhandenseins im Gehirngefäßsystem innerhalb von 10 Minuten nach retroorbitaler Verabreichung. Diese Technik wurde dann verwendet, um die vaskuläre Leckage des Tracers auf der Ebene der einzelnen Blutgefäße bei den GMH-verletzten Tieren nachzuweisen. Dieses Ergebnis ermöglicht beispielsweise die Quantifizierung der Verletzung, indem die Menge der Blutgefäße quantifiziert wird, die nach einer GMH-Hirnverletzung undicht sind.
Darüber hinaus kann dieses Verfahren auch ohne Lichtquelle durchgeführt werden, was es zu einer einfachen, unkomplizierten und reproduzierbaren Technik macht, die die Verabreichung von Substanzen direkt in den venösen Kreislauf von neugeborenen Ratten und Mäusen ermöglicht. Bei korrekter Durchführung sollte dieses Verfahren keine nachteiligen Auswirkungen haben. Diese Verabreichungswurzel ermöglicht Injektionen von Antikörpern, Zellen und anderen Verbindungen direkt in den venalen Kreislauf von Neugeborenen.
Dieser Weg ist im Vergleich zu anderen Wegen, wie z. B. intraperitonealen oder subkutanen Injektionen, von größerer klinischer Relevanz.
