该协议具有重要意义，因为它提供了一种全面且低成本的省时技术。它回答了转化研究和在个人和群体层面对组分数据进行分类的关键要素。由于可以提取有关动物整体轮廓的信息总量，因此该技术是有利的。
这包括对组件进行分类和随后的结论。该技术可以提供对广泛研究领域的见解，包括心脏病学，神经病学和药理学。该技术不仅适用于生殖研究。
首先以适合年龄的姿势处理大鼠，例如青少年老年大鼠的压缩式固定装置，方法是将受试者放在上胸部区域，鼻子朝下指向地面。在插入注射器之前，通过轻轻弯曲尾巴来暴露受试者的阴道管。在用前指和中指稳定握住注射器的同时，将注射器的尖端以与其平行的角度插入阴道管中，通过用拇指向内推柱塞来缓慢地将氯化钠排出到阴道管中。
通过将注射器的柱塞从上皮衬里拉开，从阴道管中提取氯化钠。使用每种细胞类型的标准来表征样品中存在的细胞并记录结果。有核角质化上皮细胞或定量上皮细胞将出现锯齿状或棱角分明的边缘。
尽管缺乏细胞核，但它可能在细胞内显示光圆形区域，代表曾经存在的细胞核，称为鬼核。大有核上皮或LNE细胞通常是圆形至多边形细胞，被不规则的锯齿状或棱角分明的边界包裹。它们的细胞核可以从完整到退化或，与染色体在经历死亡或恶化的细胞核中的不可逆凝结有关。
细胞核比细胞内的细胞质占用的空间小，核与细胞质的比例低于小上皮细胞。白细胞是致密的球形细胞。与所有其他描述的细胞类型相比，最小。
SNE细胞是具有圆形细胞核的非角化细胞，其占用的空间比细胞内的细胞质更大，相对于大上皮细胞，产生更高的细胞核与细胞质比。使用较低的对象化，例如四个 X 来获得整个单元格排列的代表性视图。记录细胞是聚集在一起，均匀分散还是随机分散，并注意每种细胞类型的特定组织。
然后目视估计并记录总细胞量，如微量，中等或数量，以及单个细胞量作为每种细胞类型的百分比。将这些分类组件组合在一起，确定正在呈现哪个发情周期阶段。在二月期，可以看出白细胞是显性或唯一的细胞类型。
这些通常在开始时以团块方式排列，但在后期阶段更分散。细胞的总量可能相对较低，最常见于第二天或第三天的末期后期。由于该阶段可能存在大量粘液，因此可以观察到浓缩的白细胞链。
伴随白细胞的SNE细胞的小团簇可见于向发情前过渡的晚期阶段。阴道液在过渡到、完全过渡到和从地斯特期过渡出来时，看起来是粘稠和不透明的。在发情期，SNE细胞是显性细胞，而白细胞，LNE和AKE细胞的数量可能很少。
在此阶段，SNE细胞通常以簇，片状或链状排列，并且具有颗粒状外观，可以在更高的放大倍率下观察到。一旦受试者完全过渡到发情期，阴道液就会变得不粘稠和透明。AKE细胞在发情阶段占主导地位，SNE细胞减少，并且随着发情的继续，细胞的数量和大小总体上增加。
AKE细胞通常以角蛋白条的形式簇拥。它们还可能包含鬼核，在从发情期到发情期的过渡过程中会变得更加分散。阴道液是非粘性和透明的，因为大鼠正在过渡到，完全过渡到和过渡出发情期。
当大鼠过渡到发情期时，寻找所有细胞类型，尽管与LEU相比，SNE和LNE细胞的数量通常更高。在发情期间观察到更多的碎片，并且由于发情后上皮细胞衰变而产生的转变。在这个阶段，缺乏一致的排列，因为可以看到所有细胞类型和不同的数量。
然而，在开始阶段挤在上皮细胞附近的白细胞在过渡到发情期时可能会恢复到聚集的排列。阴道液在分期表现为非粘稠和透明。并在进入发情期时更改为更粘稠和不透明的外观。
在每个阶段中，可以看到许多变异，例如在二发期，同时观察到上皮细胞和白细胞。在排列中，还观察到由白细胞组成的团块粘液链和白细胞的初始聚集，以及后来的随机甚至放电。在收集阴道液样本时，有一些没有代表性的收集需要重复灌洗，其中包括由于注射器插入不当而从阴道管壁中提取鳞状细胞。
仅收集碎片，细胞数量太低而无法分类，以及那些失焦的细胞。在条形图上绘制阶段进展是很常见的，这使得研究人员能够检查整体周期模式并确定非循环性。然后可以通过周期长度和阶段进展模式对样品进行分析。
可以使用堆叠条形图创建Estrous周期图，跟踪每只大鼠或每个队列的阶段进展。其中，每天的分类组件以每天或每个阶段的图形绘制。还可以按数字方式组织分类组件数据，以创建标准化范围并收集统计信息。
练习该技术，使其具有微创性，并扫描显微镜载玻片以寻找代表性样品以减少选择偏差。总的来说，请记住，没有正常周期这样的事情。按照这个程序，可以引入实验变量，例如运动和行为范式。
这将使研究能够事先建立动物的基线循环，并在之后检测对特定干预措施的激素反应。这种方法使研究人员能够探索性类固醇激素与其他身体系统之间的联系。这方面的一个例子是性类固醇激素的心脏受体如何与系统功能相关。
