يساعدنا هذا النموذج من النزف تحت العنكبوتية على فهم الآليات الفيزيولوجية المرضية والعواقب بشكل أفضل. نأمل أن يؤدي ذلك إلى توليد علاجات ، مما يقلل من عبء المرض لدى المرضى المصابين. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها قابلة للتكرار بشكل كبير ، حيث يتم حقن كمية ثابتة من الدم.
علاوة على ذلك ، فإنه يشبه نزيف تحت العنكبوتية البشري في المعلمات الرئيسية. لجعل مسبار ICP ، احرق أحد طرفي قطعة 20 ملم من أنابيب البوليثين ، مما يجعل لوحة دائرية وإبقاء التجويف مفتوحا. ثم قم بتمرير حلقة أنابيب سيليكون ملليمتر واحد فوق أنبوب البوليثين قبل توصيل قطعة 10 ملم من أنابيب السيليكون بنهاية أنبوب البوليثين.
بعد ذلك ، قم بتخدير فأر Sprague Dawley وتنبيبه وقسطره قبل وضعه في إطار مجسم. بعد إعطاء التخدير الموضعي ، قم بعمل شق جلدي ثمانية ملليمترات ذيليا من ثقب الإبرة في خط الوسط. تحت مجهر تشريح ، تشريح جميع العضلات بصراحة في طبقات لتحديد الغشاء الأطلسي القذالي.
ثم استخدم مبعدة الذراع لكبح جماح عضلات الرقبة ، ووضع المبعدة ذيليا إذا لزم الأمر. بعد التحقق من توصيل مسبار ICP المعقم بمحول الطاقة ICP ، اغسل مسبار ICP بالمحلول الملحي ، مع التأكد من عدم وجود فقاعات هواء في المسبار. باستخدام إبرة قياس 23 ، قم بشق الغشاء الأطلسي القذالي ، مما يجعل ثقبا لإقناع مسبار برنامج المقارنات الدولية برفق من خلال الغشاء.
اسحب المسبار برفق وتأكد من أنه يظهر منحنى نابض يتراوح بين صفر إلى خمسة ملليمترات من الزئبق. إذا لم يكن الأمر كذلك ، فقم بإزالة المسبار ، وأعد فحص الاتصال بمحول الطاقة ، وتأكد من التدفق عبر التجويف. في المنطقة التي يلتف فيها الغشاء القذالي حول المسبار ، ضع قطرتين من غراء الأنسجة.
ثم حرك أنبوب السيليكون الذي يبلغ طوله ملليمترا واحدا للأمام باتجاه الغشاء ، قبل وضع غراء إضافي لتقليل خطر إزاحة مسبار ICP. بمجرد لصق مسبار ICP ، قم بإزالة المبعد. بعد ذلك ، باستخدام خيوط أحادية غير قابلة للامتصاص 4-0 ، ضع خيطا أفقيا واحدا للمرتبة في الطرف الذيلي للشق وخيطا بسيطا متقطعا في الطرف الرأسي.
لوضع مسبار دوبلر الليزري ، قم بعمل شق 15 ملم ذيليا في خط الوسط ، بدءا من مقدمة العينين مباشرة. بعد إزالة النسيج الضام والعضلات بالملقط ، استخدم نهاية قطعة قطن معقمة كروجين لتحديد البريجما والخيوط الإكليلية. بعد وضع المبعدة المسلحة ، ضع إبرة شوكية قياس 25 في الإطار التجسيمي بالضبط على bregma ولاحظ الموضع.
بعد ذلك ، قم بإزالة الإبرة من bregma. حرك الإطار الأمامي بمقدار 6.5 ملم. ثم استبدل الإبرة في خط الوسط لتحديد جانب الحفر.
حفر حتى يتم التعرف على الأم الجافية تحت العظم. باستخدام ملقط مستقيم ، قم بإزالة شظايا العظام برفق. ثم املأ التجويف بشمع العظام.
بعد ذلك ، من ثلاثة إلى أربعة ملليمترات جانبية على يمين البريغما وأمام الخيط الإكليلي لدوبلر الليزر ، قم بحفر ثقب آخر. الحرص على عدم اختراق الأم الجافية. ابحث عن الأوعية حيث يمكن لدوبلر الليزر قياس تدفق الدم.
ضع دوبلر الليزر وتحقق من القيم. مطلوب قيمة لا تقل عن 100 وحدة تدفق. إذا ظلت القيم مقبولة بعد إزالة المجهر ، أضف قطرة واحدة من الغراء لإصلاح المسبار.
أعد التحقق للتأكد مما إذا كانت القيمة أعلى من 80 وحدة تدفق. للحث على نزيف تحت العنكبوتية ، أدخل الإبرة برفق من خلال الجمجمة في خط الوسط بين نصفي الكرة الأرضية حتى يتم الشعور بالمقاومة بسبب قاعدة الجمجمة. اسحب الإبرة بمقدار ملليمتر واحد لضمان الموضع الصحيح أمام التشنج البصري.
لضمان النتيجة الأكثر تجانسا عند حقن الدم ، أدر الإبرة في اتجاه عقارب الساعة بمقدار 90 درجة بحيث يشير طرف الإبرة إلى اليمين. ثم قم بإزالة الخنجر. بعد موازنة لمدة 15 دقيقة ، اضبط مستوى التخدير للحصول على متوسط ضغط الدم الشرياني في حدود 80 إلى 100 ملم من الزئبق.
ثم قم بإجراء تحليل غازات الدم للتأكد من أن الرقم الهيدروجيني والضغط الجزئي لثاني أكسيد الكربون والضغط الجزئي للأكسجين ضمن المعايير الفسيولوجية. بعد ذلك ، باستخدام حقنة واحدة ملليلتر مع إبرة قياس 23 حادة ، اسحب 500 ميكرولتر من الدم من قسطرة الذيل. لتجنب حقن الهواء ، املأ المساحة الميتة لغرفة الإبرة الشوكية بالدم.
بعد ضبط حجم الدم في المحقنة إلى 300 ميكرولتر ، قم بتوصيل المحقنة بالإبرة الشوكية. ثم ، تمسك بقوة حول المحقنة ، وحقن الدم يدويا لتجاوز متوسط الضغط الشرياني. لاحظ ارتفاعا حادا في الضغط داخل المخ وانخفاضا حادا متزامنا في تدفق الدم الدماغي.
بعد 30 دقيقة من تحريض النزف تحت العنكبوتية ، قم بإزالة الإبرة ومسبار دوبلر بالليزر. وملء التجاويف بشمع العظام. باستخدام خيوط أحادية غير قابلة للامتصاص 4-0 ، أغلق الشق بخيطين أفقيين.
لاستخدام مسبار ICP للحقن في الصهريج الكبير ، قم بإزالة أنبوب السيليكون وأدخل محول منفذ دبوس في أنبوب البوليثين. لأداء إدارة داخل القراب بينما يكون الحيوان مستيقظا ، ضع حاقن منفذ دبوس على حقنة دقيقة. ثم إدارة العلاج من خلال محول منفذ دبوس.
إذا لم يكن من الضروري إجراء الإدارات داخل القراب ، فقم بقطع الخيط المتقطع البسيط. ثم ، باستخدام المقص ، قم بتقصير مسبار برنامج المقارنات الدولية قدر الإمكان ولصق النهاية لمنع تسرب السائل النخاعي. أغلق الشق بخيوط أحادية غير قابلة للامتصاص 4-0.
في تقييم الوظيفة الحركية الحسية الإجمالية باستخدام اختبار القطب الدوار ، كان أداء الفئران المصابة بنزيف تحت العنكبوتية المستحث تجريبيا أسوأ بكثير بعد 24 و 48 ساعة من الجراحة مقارنة بالحيوانات الوهمية. زادت الحساسية للإندوثيلين -1 ، وهو ناهض لعائلة مستقبلات الإندوثيلين -1 بشكل ملحوظ بعد يومين من النزف تحت العنكبوتية في الشرايين القاعدية والشرايين الدماغية الوسطى للفئران التجريبية مقارنة بتلك الموجودة في الضوابط الوهمية. كما أظهر كلا شرايين الفئران التجريبية زيادة مماثلة في الحساسية ل 5-carboxamidotryptamine ، وهو ناهض لعائلة مستقبلات 5-hydroxytryptamine.
بعد الإجراء ، يمكن إجراء اختبارات السلوك العصبي وكذلك تحليل الأنسجة بما في ذلك الكيمياء الهيستولوجية المناعية ، PCR ، محلل النشاف الغربي لتحليل العواقب والآليات.
