طريقة طفيفة التوغل لتقطير الأدوية داخل القصبة الهوائية في القوارض حديثي الولادة لعلاج أمراض الرئة

يوضح هذا البروتوكول أنه من الممكن غرس مواد بحثية في القصبة الهوائية لجراء الفئران حديثي الولادة ، الذين يبلغ عمرهم خمسة أيام ، عن طريق التصور المباشر. تعمل هذه الطريقة على تحسين موثوقية إدارة المواد البحثية أو الدواء في القصبة الهوائية عن طريق التصور المباشر. من خلال تجنب الحقن في القصبة الهوائية ، تقلل هذه الطريقة من الألم ، والأهم من ذلك ، النزيف في القصبة الهوائية ، مما يسمح بتحسين البقاء على قيد الحياة.

مطلوب تطوير المهارات الدقيقة لتنفيذ هذا البروتوكول ، بما في ذلك تحديد المواقع المناسبة للحيوان ، والاستخدام الصحيح للمنظار الآلي التشغيلي لتصور الحبال الصوتية ، وفعالية الإدارة في الرئتين. ستوضح الإجراء تارا سوداديفي ، زميلة ما بعد الدكتوراه من مختبري ، وأليسون ها ، طالبة الدراسات العليا. قبل البدء في التجربة، تأكد من فقدان منعكس الذيل والدواسة في جرو فئران عمره خمسة أيام مخدر واستخدم شريط وضع العلامات المختبري لكبح جماح الجرو في وضع ضعيف على منصة مسطحة مائلة عند 45 درجة.

استخدم ملقط حاد لسحب اللسان بلطف إلى جانب واحد ، وبمساعدة منظار منظار الأذن الذي يبلغ قطره مليمترين ، أمسك اللسان بلطف في مكانه بحيث تكون الحنجرة مرئية. باستخدام منظار الأذن العامل مع المنظار الصحيح الحجم، حدد موقع الحبال الصوتية من خلال العدسة المكبرة لمنظار الأذن. بالنسبة للتقطير داخل القصبة الهوائية ، قم بتحميل حقنة سعة ملليلتر واحد مزودة بطرف ماصة طويل الزاوية محمل بالهلام مع 0.9 سم مكعب من الهواء ، متبوعا ب 30 إلى 50 ميكرولتر من المادة محل الاهتمام.

ثني طرف الماصة إلى زاوية 30 درجة وأدخل طرف الماصة المحمل عبر المنظار إلى حوالي مليمترين وراء الحبال الصوتية. ادفع مكبس المحقنة لإدارة المادة ذات الأهمية والهواء عبر المنظار إلى الحبال الصوتية. عندما يتم تسليم جميع المواد ، ضع الجرو على وسادة تسخين سائل دائرية مدمجة بزاوية 38 درجة مئوية مع المراقبة حتى التنفس المنتظم ، قبل إعادة توحيد الجرو مع السد.

لتقييم توزيع المادة داخل عينة أنسجة الرئة ، امسح الصدر والبطن من الجراء الفئران التي تم قتلها بالكحول الإيثيلي بنسبة 70٪ واستخدم تقنية معقمة لإزالة الرئتين وفقا للبروتوكولات القياسية لتقييمها البصري. في هذه الدراسة ، تم تقييم فعالية تقنية التقطير داخل القصبة الهوائية من خلال الفحص البصري لأنسجة الرئة التي تم جمعها من جرو فئران عمره خمسة أيام تم غرسه بصبغة إيفانز الزرقاء. كان التقطير فعالا بنسبة 100٪ تقريبا ، حيث انتشرت الصبغة في الرئة فور تناولها وتوزيعها عبر جميع فصوص أنسجة الرئة.

لم يتم ملاحظة الصبغة داخل أي أنسجة خارج الرئتين ، مما يؤكد قدرة التقنية على استخدامها في التسليم الانتقائي لعلاج يهم الرئتين. يعد وضع الحيوان في البداية بالزاوية الصحيحة على سطح صلب أمرا ضروريا لنجاح الخطوة التالية المتمثلة في تصور الحبال الصوتية باستخدام المنظار الآلي التشغيلي.