الميزة الشائعة لهذه التقنية هي أنه يمكن دراسة الذكريات البصرية بطريقة خاضعة للرقابة في النمل الخشبي الثابت بدلاً من التنقل الحر. هذه الطريقة لديها إمكانية لاستخدامها في التحقيق في الأساس العصبي للتعلم البصري في نموذج راسخ جدا للملاحة الحشرات. لتحديد النمل الذي يتم تحفيزه على تناول الطعام ، ضع شريحة مع قطرة السكروز داخل صندوق صغير مع فلوون يغطي الجدران.
ثم ضع كل نملة مختارة في المربع وانتظر لترى ما إذا كانت تتغذى على قطرة السكروز. إذا كانت النملة تتغذى على قطرة السكروز على الفور نقله إلى مربع فارغ. بعد ذلك ، قم بنقل كل نملة إلى أنبوب منفصل ووضع الأنبوب لفترة وجيزة في الفريزر لشل حركة النمل.
ضع النملة المُشلّة في الحامل من خلال القطع في الورق المقوى، ممسكًا بها المفصل بين رأسه والصدر. ثم استخدم دبابيس الحشرات لضمان بقاء الهوائيات على جانب الرأس. باستخدام عنصر التدفئة حسب الطلب ، تذوب الشمع للتمسك طرف دبوس حشرة إلى رأس النملة ، بالتوازي مع الورق المقوى.
بعد أن يجف الشمع ، قم بإزالة دبابيس الحشرات من الهوائيات ، وإزالة النملة بعناية من الحامل. بعد ذلك ، قم بإصلاح دبوس الحشرة الذي يحمل النمل في أسطوانة طينية ، وإصلاح حامل بلاستيكي مصنوع خصيصًا تحته. تأكد من أن النملة تحافظ على وضعية نموذجية دائمة وأن الجسم كله ، باستثناء الرأس ، يمكنه التحرك بحرية.
أولاً، ضع كاميرا مع عدسة ماكرو على أعلى مربع الأكريليك الأبيض مباشرة فوق حامل النمل، ووضع النملة في الحامل داخل الصندوق. ثم، إرفاق إبرة وحقنة مليئة بالنيروز، التحفيز غير المشروط، إلى مستطيل من الورق المقوى الأزرق مشرق، التحفيز المشروط، لاستخدامها كإشارة بصرية. للتدريب المقترن، ابدأ في تسجيل النملة 10 ثوانٍ قبل تقديم التحفيز المشروط.
إذا كان النمل ينفذ Maxilla Labium التمديد منعكس، أو MaLER، خلال هذا الوقت، تأجيل المحاكمة لبضع ثوان. نقل حقنة مع التحفيز المشروط أمام النمل لمدة 10 ثوان. ثم، تنضح قطرة واحدة من السكروز من الحقنة وتغذية النملة لمدة خمس ثوان.
كرر إجراء التدريب المقترن 10 مرات مع خمس دقائق بين كل محاكمة. للتدريب غير المدفوع، ابدأ تسجيل الفيديو قبل 10 ثوان من المحاكمة. ثم، تقديم التحفيز الشرطي كما سبق وصفه.
بعد 2.5 دقيقة، وتقديم التحفيز السكروز غير المشروط مباشرة إلى الفم النمل مع حقنة دون الورق المقوى الأزرق. بعد الانتهاء من التجارب التدريبية، ابدأ الكاميرا تسجيل 10 ثوان قبل مرحلة الاختبار. ثم، تقديم التحفيز المشروط إلى النمل لمدة 10 ثوان.
بعد انتهاء الاختبار ، قم بتسليم التحفيز غير المشروط للنملة لتأكيد أن النملة لا تزال متحمسة لإطعامها. باستخدام التسجيل الذي تم أثناء التدريب والاختبار ، يسجل ردود النملة خلال 10 ثوان من عرض التحفيز المشروط. وأخيرا، فصل ردود النمل أثناء عرض التحفيز المشروط إلى ثلاث فئات، تمديد كامل مع الحركة كما لو كان التغذية، تمديد كامل دون حركة، أو تمديد جزئي للملعاب ماكسيلا أو بابات الفك العلوي.
في هذا البروتوكول ، أجرى النمل الذي خضع لتدريب مقترن أكثر MALER استجابة للتحفيز الشرطي. على العكس من ذلك ، أظهر النمل غير المدفوع أي زيادة كبيرة في MaLER أثناء التدريب. لفحص ذاكرتهم قصيرة ومتوسطة الأجل ، تم اختبار النمل إما بعد 10 دقائق أو ساعة واحدة من تجربة التدريب الأخيرة.
بالنسبة لكلا الاختبارين ، كانت نسبة النمل الذي يؤدي MaLER استجابة للتحفيز المشروط أعلى عندما خضعوا لتدريب مقترن. تم تقسيم استجابات MaLER إلى ثلاث فئات، FEM و FE و PE. عادة، كان أداء النمل FEM أو PE أكثر في كثير من الأحيان من FE. ومع ذلك ، فإن عدد قليل فقط من النمل أظهر باستمرار نفس النوع من الاستجابة. أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر التعامل مع النمل بعناية لتقليل مستويات التوتر وأي ضرر محتمل ، خاصة أثناء التسخير.
من خلال تكييف هذا الإجراء ، يمكن استخدام المحفزات البصرية المختلفة من أجل التحقق من الخصائص التي يستخدمها النمل الخشبي لتشكيل ذكريات بصرية. بعد تطورها ، تمهد هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال علم الأعصاب والملاحة للحشرات لاستكشاف الذكريات الترابطية البصرية مع النمل الخشبي للميكروفا.
