Farelerde geçici orta serebral arter tıkanıklığı ile ilgili video kılavuzlarımıza hoş geldiniz. Benim adım Rok Ister ve bu deney Zagreb Üniversitesi Tıp Fakültesi'ndeki Rejeneratif Sinirbilim Laboratuvarı'nda gerçekleşti. Geçici orta serebral arter yöntemi veya kısaca tMCAO, iskemik inmenin en sık kullanılan hayvan modelidir.
Ağırlıklı olarak sıçanlar ve fareler gibi kemirgenlerde yapılır. Yaygın karotis arter ve eksternal karotis arter yöntemi olmak üzere iki ana ameliyat yöntemi, filament yerleştirilmesi için esas olarak arteriyotomi bölgesine göre farklılık gösterir. Bu videoda, eksternal karotis arter yöntemini kullanarak tam reperfüzyonu sağlamak için modifikasyonlarımızı ve bazı önemli noktaları sunacağız.
Önerilen aletlerden başlayarak, iki adet Dumont tip 5 cımbız, Dumont tip 7 cımbız ve Dumont tip N0 kendiliğinden kapanan cımbız, bir mini kolibri ekartör ve arteriyotomi için düz mikro yaylı makasa ihtiyacınız olacak. Hemostaz için, ilgili bir aplikatör ile birlikte iki parça vasküler mikro klemp kullanacağız. Cerrahi makas, iğne tutucu ve cerrahi forseps, cerrahi yaranın açılması ve kapanması için kullanacağız.
Materyaller için, cerrahi yara için 5/0 monofilament sütür, arter ligatürleri için 6/0 örgülü ipek sütür, hayvanın sabitlenmesi için cerrahi bant, hayvanların gözlerinin korunması için göz merhem jeli ve ek lokal anestezi için lidokain jeli kullanacağız. Son olarak, fazla kanın tahliyesi için sivri uçlu bir kağıt havlu kullanacağız. Bunun gibi bir mikrocerrahi prosedür için stereo ameliyat mikroskobu çok önemlidir.
Anestezi uygulanmış kemirgenler hipotermiye eğilimlidir, bu nedenle bir sıcaklık monitörü kullanacağız. Hayvanın çalışma tarafında, anestezi gazı besleme tüpü ile birlikte temizlenmesi kolay, ısıtılmış bir yüzeye ve işlem sırasında hayvanın sıcaklığını güvenilir bir şekilde izlemenin bir yoluna ihtiyacınız olacaktır. Soldaki masada, kullanacağımız birkaç araç ve daha fazla malzeme var.
Prosedürün belirli bölümlerinin süresinin ölçülmesi, tekrarlanabilirlik nedenlerinin yanı sıra daha sonra veri analizi için çok önemlidir. Hızlı ve kolay kullanım için Betadine cilt dezenfektanı ve dolu şırıngalar. Hayvanın kürkünü tıraş etmek için hayvan saç kesme makinesi.
Anestezinin doğru dozlanması için önemli olan bir tartı terazisi. Ve son olarak, anestezi teşviki için bir nakavt kutusu ile birlikte 2: 1 oranında azot-oksijen gazı karışımı verebilen bir hayvan gazı anestezi sistemi. Bu videoda sunulan tüm hayvan işleme ve prosedürleri, Zagreb Üniversitesi Tıp Fakültesi Etik Lisanslama Komitesi tarafından onaylanmıştır ve eğitimli ve lisanslı personel tarafından yapılmıştır. Protokol.
Hayvanın ve cerrahi bölgenin hazırlanması. Hayvanı ısıtılmış ameliyat masasına yerleştirin ve burnunu anestezi maskesine getirin. Hayvanların gözlerine nemden ve flor gazı kullanımından korumak için göz merhemleri sürün.
Hayvanı sırt üstü çevirin ve hayvanın boynunun altına cerrahi banttan yapılmış küçük bir yastık yerleştirerek boynunu uzatın. Cerrahi bant kullanarak hayvanın uzuvlarını yerine sabitleyin. Ön ayakları çok fazla uzatmamaya, yanlışlıkla omuz eklemi çıkığına neden olmamaya özen gösterin.
Rektal probu petrol beyazı jöle kullanarak yağlayın ve sürekli vücut ısısı ölçümü için rektuma yerleştirin. Hayvanı iyi nemlendirmek ve işlem sırasında acı çekmemek için intraperitoneal olarak ameliyat öncesi salin ve buprenorfin enjeksiyonu uygulayın. Kablosuz hayvan kesme makinesini kullanarak hayvanın kürkünü boyun bölgesinde şekillendirin.
Cerrahi bant parçaları kullanarak tüm traşlı kürkleri toplayın. Alanı tamamen kürksüz hale getirmek için ayrıca bölgeyi ustura ile şekillendirin. Ameliyat masasının üzerine temiz bir cerrahi örtü yerleştirin.
Hayvanın traşlı derisine bir damla Betadine uygulayın. Dezenfektanı içten dışa dairesel bir şekilde cilde sürmek için pamuklu çubuk kullanın. Daha sonra etanole batırılmış bir pamuklu çubukla aynısını yapın.
Her tekrarlama için yeni bir çift steril pamuklu çubukla bu adımı üç kez tekrarlayın. Lokal yara analjezisi için gelecekteki insizyon bölgesinin dezenfekte edilmiş bölgesine bir miktar lidokain jeli uygulayın. İskemi indüksiyon cerrahisi.
Dezenfekte edilmiş cilt üzerinde neşter kullanarak ilk kesi yapılması, cerrahi yaranın daha kolay iyileşmesini sağlamak için cilt kesi vuruşlarının sayısını minimumda tutun. Tip 7 ve 5 forseps kullanarak yüzeysel fasyayı yırtın ve tükürük bezlerini alttaki dokudan ayırın. Tükürük bezlerinin sonraki adımların önüne geçmediğinden emin olarak tel toplayıcıyı başlangıç konumuna getirin.
Tip 7 forseps kullanarak derin boyun fasyasını çıkarın ve ekartörü yeniden konumlandırmak için sternokleidomastoid kasları karotis bölgesinden ayırın. Karotis bölgesine erişim sağlamak için ekartörü sternokleidomastoid kasların altına ulaşacak şekilde yeniden konumlandırın. Karotis bölgesine net bir görsel ve daha kolay bir yaklaşım sağlamak için omohyoid kasını rezeke edin.
Karotis fasyasını karotis triadının yan tarafında sıkıştırın ve arteri, siniri, damarı ve çevresindeki tüm kan damarı dallarını görsel olarak tanımlamak için yavaşça yanal olarak çekin. CCA'nın alt kısmını kavisli tip 7 forseps kullanarak alttaki doku ve fasyadan tamamen ayırın ve sonraki adımlarda klemplemeye hazır olduğundan emin olun. CCA, ilgili iki dalı ile birlikte dikkatlice hazırlanırken, ECA'yı kavisli tip 7 forseps kullanarak kaldırın ve N0 tipi kendiliğinden kapanan forseps ile sıkıştırın ECA kenetlendiğinde ve N0 tipi cımbızla güvenli bir şekilde tutulduğunda, ECA'nın arkasına iki örgülü ipek iplik yerleştirin.
Kalıcı olduğu için kraniyal ipliği tamamen bağlayın ve fazla ipliği makas kullanarak kesin. Kuyruk ipliğini gevşek bir sabitleme düğümüne bağlayın. Vasküler mikro klipsler kullanarak, arteriyotomiden sonra herhangi bir kanamayı önlemek için CCA ve ICA'yı kapatın.
Mikro yaylı makas kullanarak, ECA sıkıştırma bölgesinin hemen altında küçük bir arteriyotomi yapın. ECA'nınkine uygun bir açıyla, filamenti CCA'ya proksimal yönde arteriyotomi bölgesine yerleştirin, ECA'nın dallanma tarafındaki gevşek sabitleme düğümünden geçin ve filament ile CCA'nın lümenine yapışın. ICA mikro klipsini dikkatlice açın ve çıkarın.
Filament kısmen ECA'ya yerleştirildiğinde ve sabitlendiğinde, tam bir arteriyotomi yapın, böylece ECA kütüğünü içindeki MCAO filamenti ile gevşetin. Bu noktada, N0 tipi kendiliğinden kapanan forsepsleri serbest bırakın ve çıkarın. Bir set tip 5 cımbızla ECA kütüğünü sıkıca sıkıştırın ve hafifçe kaldırın.
Kısmen yerleştirilmiş filamenti başka bir forseps ile tutarken, filamentin iç ucunu ICA'ya doğru yönlendirmek için ECA kütüğünü indirin ve hafifçe çekin. Filamentin silikon kısmını asla sıkıştırmayın. Dirençte ani bir artış hissedene kadar MCAO filamentini Willis Çemberi boyunca yavaşça ilerletin.
Bu noktada, filamentin kalan uzunluğunu gözlemlemek önemlidir. Yetişkin bir farede, filament, ICA dallanma noktasından en az yedi milimetre uzakta zahmetsizce ilerlemelidir. İskemi döneminde filamentin yer değiştirmemesini sağlamak için sabitleme düğümünü sıkın.
CCA klipsini çıkarın ve zamanı not edin, bu iskemi başlangıcının başlangıcını işaret eder. Tel toplayıcıyı çıkarın ve cerrahi yaranın kenarlarını birbirine yaklaştırın. Dokunun anatomik konumuna dönmesi için cerrahi bölgenin birkaç saniye oturmasına izin verin.
İskemi döneminden sonra yaranın daha hızlı yeniden açılmasını kolaylaştırmak için cerrahi yarayı bant yara kapakları kullanarak kapatın. İskemi dönemi. MRI veya başka bir kantitatif perfüzyon ölçüm yöntemi kullanarak ameliyatın başarısını doğrulayın.
Filament çekme ameliyatı. Bant sargısı kapatıcılarını çıkarın ve cerrahi yarayı tel ekartör ile yeniden açın. N0 tipi forsepslerle, gerilimi ECA kütüğüne koymak için ECA kütüğünün kenarını ventral olarak sıkıştırın ve çekin.
CCA'yı bir makrovasküler klipsle tekrar sıkıştırın. Filamentin silikon kısmının ECA kütüğünden dışarı çıkmaya başladığı noktaya kadar MCAO filamentini yavaşça geri çekin. Filamentin tamamen çekilmesine hazırlanmak için sabitleme düğümünü hafifçe sıkın.
Filamentin silikon ucuna yaklaştığınızda, sabitleme düğümünü MCAO filamentini dışarı itecek ve ECA kütüğünü tek bir hareketle kapatacak şekilde sıkın. Filament dışarı çıktıktan sonra düğümü tamamen sıkın. Sıkıştırma forsepslerini CCA klipsi ile birlikte açın ve çıkarın.
Ameliyat yarasını çevreden başlayarak aşağı doğru dikin, böylece altta yatan herhangi bir doku görünmeden yarayı tamamen kapatın. Gerekli dikiş sayısı cerrahi yaranın boyutuna bağlıdır. Ameliyat bölgesini alkollü mendiller kullanarak temizleyin ve dezenfekte edin.
Temsili sonuçlar. Başarılı bir prosedürden sonra, MRI taramalarından elde edilen sonuçlar buna benzer görünmelidir. İntraoperatif olarak, iskemi döneminde, perfüzyon ağırlıklı görüntülerde iskemi ile belirgin bir bölge gözlemleyebilmelisiniz.
Görünür difüzyon katsayılı lezyon kabaca aynı alanı kapsamalıdır. Ameliyat sonrası, filamentin çekilmesinden sonra, ideal olarak perfüzyon ağırlıklı görüntülerde hiper perfüze lezyon çekirdeğini gözlemlemelisiniz. İskemik çekirdek dışında, lezyondaki ADC değerlerinde iyileşme ve hafif aşma görmelisiniz.
İşlemden sonraki ikinci gün lezyon tamamen yeniden perfüze edilmelidir. Beyin ödemine bağlı iskemik lezyon çekirdeğinde ADC değerleri tekrar düşmeli ve bu T2 görüntüsünde de görülmelidir. Filament kaynaklı kanama durumunda ameliyat sonrası perfüzyon veya ADC haritalarında herhangi bir düzelme gözlenmez.
Ayrıca, T2 görüntülerinde hem intraoperatif hem de postoperatif dönemde belirgin bir kanama belirtisi görülebilir. Son. Fare beyni damar sistemi ile ilgili son anatomik çalışmalar sayesinde, MCAO modelimizi yeni bilgilere dayanarak ayarlayabiliyor ve değiştirebiliyoruz. Yeşile boyanmış posterior komünikan arterler, en sık kullanılan fare suşlarının sadece% 10'unda bilateral olarak patentlidir.
Bu nedenle, MCA'dan proksimal dallara kan akışı sağlamak için onlara güvenilebilir. Bu nedenle, iskemi döneminde CCA'nın patentli tutulması ve filamentin silikon kısmının uzunluğu üç milimetreyi geçmemelidir. Bu videoda bilgilendirici ve özlü olmayı umuyoruz.
İzlediğiniz için teşekkürler.
