E. coli'den Rekombinant Protein Dolu Veziküllerin Optimize Edilmiş Üretimi ve Analizi

Canlı hücrelerdeki moleküller arasındaki dinamik etkileşimleri anlamaya çalışıyoruz. Biyokimyasal analiz için, büyük miktarlarda rekombinant protein kullanmak gerekebilir. Bunların doğru katlanmış ve işlevsel bir biçimde ifade edilmesi son derece zor olabilir.

Bir proteinin bakterilerde eksprese edildiğinde yanlış katlandığı veya çözünmez olduğu tespit edilirse, araştırmacılar ya pahalı ve nispeten yavaş olan memeli hücrelerine başvurmak ya da sentetik polipeptitler kullanmak zorunda kalacaklardı. Protokolümüz, yüksek verim ifadesinin yanı sıra E.coli'den zorlu proteinlerin ihracatına da izin verir. Proteinin amino terminüsüne kısa bir bölünebilir peptid dizisi eklemek, sadece bugüne kadar test ettiğimiz her proteinin üretimini ve verimini arttırmakla kalmaz, aynı zamanda proteini hücreden ortama ihraç eder.

Protein ekspresyonunu basitleştirmenin yanı sıra, aşağı akış protein saflaştırmasını da basitleştirir.