Diferansiyel taramalı kalorimetri ve x-ışını kırınımının kombinasyonu, lipit bazlı farmasötik ürünlerin araştırılan katı hal değişiklikleri için altın standarttır. Kombine metodoloji, lipitlerin polimorfizmini, kristal büyümesini ve yüz geçişini, tarama, terminal davranış ve lipit matrisi ile ilacın görünürlüğünü taramak için güçlü bir araçtır. Bu metodoloji, lipitin katı hali ile farmasötik ürününün performansı arasındaki etkileşimi anlamak için kullanılabilir.
Bu tür ürünler nano lipit formülasyonlarından matris tabletlere kadar değişebilir. Prosedür Gerfried Luschin-Ebengreuth tarafından gerçekleştirilecektir. Gerfried laboratuvarımızdan bir bilim adamı.
Başlamak için azot gazı beslemesini açın ve basıncı 0,2 ila 0,5 bar arasında ayarlayın. Diferansiyel taramalı kalorimetriyi veya DSC cihazını ve otomatik numune değiştiriciyi çalıştırın. Yazılımı açın ve bekleme modunu etkinleştirmek için evet düğmesine tıklayın ve ardından sinyalleri görüntüle'ye tıklayın.
Cihazın kalibrasyonuna en az bir saat izin verin. Fırını azotla temizleyin. Yeni yöntem simgesine tıklayın ve yöntem tanımına gidin.
Genel bakış penceresi açıldığında, sıcaklık modülasyonu seçeneğini etkinleştirin. Başlık sekmesine gidin ve örneğe tıklayarak yöntemi seçin. Sekme sıcaklık programına gidin.
İki MFC'yi ve koruyucu MFC'yi dakikada 50 mililitrede temizle'yi seçin. Bekleme modunu 20 santigrat dereceye ayarlayın, ısıtma döngüsünü dakikada beş kelvin'de 20 santigrat dereceden beş dakika boyunca bu sıcaklıkta tutan lipit izotermal tutuşunun erime sıcaklığının üzerine çıkarın. Dakikada beş Kelvin'de sıfır santigrat dereceye kadar soğutma döngüsü.
Son acil durum sıfırlama sıcaklığını, programın en yüksek sıcaklığının 10 santigrat derece üzerinde bir sıcaklığa ve 20 santigrat derece olan son bekleme sıcaklığına ayarlayın. Kalibrasyon sekmesine gidin ve uygun sıcaklık ve hassasiyet dosyasını seçin. Yöntemi kaydedin.
Her numunenin üç ila dört miligramını alüminyum potalara tartın ve her potaya yüklenen tam ağırlığı kaydedin. Alüminyum potayı delinmiş bir kapakla kapatın. Potaları otomatik örnekleyici tepsisine yerleştirin ve yazılımdaki otomatik örnekleyici modunu etkinleştirin ve her örnek için ilgili yöntemi yükleyin.
Her numunenin numune konumunu, numune adını ve ağırlığını ve numune tepsisi görünümü penceresinde referans potanın konumunu doldurun. Ölçümü başlatın. Veri analizi için yazılımı kullanarak ham verileri açın ve X zaman, X sıcaklık düğmesine tıklayarak ısıya karşı sıcaklığı yerleştirin.
Açılan pencerede, izotermal segmentleri gizle'yi tıklayın. Ekranın sol tarafında, yalnızca analiz edilecek eğrileri seçin. Lipitlerin termal davranışını, sıcaklığın bir fonksiyonu olarak sırasıyla ısı şeklinde emilen veya salınan enerjinin endotermik ve ekzotermik olayları olarak kontrol edin.
Eğriye ve ardından değerlendirme ve alana tıklayın. Füzyon entalpisi, endotermlerin eğrisi altındaki alan olarak hesaplamak için. Dikey çizgileri zirvenin başlangıcından ve bitiş noktasından önce ve sonra iki ila üç santigrat derece arasında hareket ettirerek entegrasyon sınırlarını seçin.
En yüksek entegrasyon için doğrusal bir taban çizgisi seçin. Eğri ve taban çizgisi arasındaki alan, entalpi değişimi ile orantılıdır. Hesaplamayı tamamlamak için uygula'ya tıklayın.
Benzer şekilde, kristalleşmenin entalpisini, ekzotermlerin eğrisi altındaki alan olarak hesaplayın. Analiz edilecek eğriye tıklayarak erime sıcaklığının başlangıcını veya T başlangıcını belirleyin. Ve sonra değerlendirme ve başlangıçta.
Dikey çizgileri eğrinin en düz bölümüne taşıyarak nicelik sınırlarını seçin. Bu genellikle zirveden önce ve sonra beş ila 10 santigrat derece civarındadır. Daha sonra analiz edilecek eğriye tıklayarak erime sıcaklığını veya TM'yi belirleyin.
Değerlendirme ve zirvenin ardından elde edilen değer, tepe maksimumudur. Kapalı bir tüp x-ışını jeneratörüne sabitlenmiş ve bir kontrol ünitesi ve ilgili yazılımla donatılmış bir nokta odaklama kamerasından oluşan bir x-ışını saçılma sistemi kullanın. Hem küçük hem de geniş açılı X-ışını saçılma bölgelerini kapsayacak şekilde doğrusal olarak konumlandırılmış iki hassas dedektör kullanın.
Kontrol ünitesindeki soğutma suyu sistemini, vakum pompasını, gaz vanalarını ve güç ve güvenlik kontrol sistemini açın. Ardından, dedektörler için voltaj kontrol ve temizleme valflerini dakikada 10 ila 20 mililitre arasında bir gaz akışında açın. X-ışını tüpü ve bekleme seçeneğini açın ve yaklaşık 10 dakika bekleyin.
Bekleme modunu kapatın ve x-ışını tüpünü 50 kilovolttan daha büyük olan tam güce açın. En az 30 dakika bekleyin. Kontrol yazılımını başlatın ve TPF'yi sıfırla'ya tıklayın.
Ardından Tungsten filtresini seçin ve konumu ayarlayın. Tungsten filtresinin konumunu sabitlemek için konuma gidin. Numuneleri, kılcal damarlarda herhangi bir hava sıkışmasını önlemek için yaklaşık iki milimetre dış çapa sahip özel cam kılcal damarlara doldurun.
Cam kılcal damarı balmumu ile kapatın ve kılcal tutucuya dikkatlice yerleştirin. Numune dönüşü için motoru açın ve vakum valfini kapatın ve basınç beş milibarın altına düşene kadar bekleyin. Yazılımda, her iki dedektör için de 1024 konum çözünürlüğü seçin ve pozlama süresini 1.200 saniye olarak ayarlayın.
Enerji sınırlarını ayarlamak için dokunma araçlarına tıklayın, ardından enerji sınırlarını ve çözünürlüklerini ayarla'ya tıklayın ve yeniden başlatın. Enerji sınırlarını 400 ila 900 arasında uygun bir aralığa ayarlayın. Güvenlik deklanşörünü açın ve ölçümü başlatın.
Ölçüm penceresinin saniyede maksimum 80 sayım gösterdiğinden emin olun. Bu verilmezse, filtre konumunu ayarlayın. Verileri P00 dosyaları olarak dışa aktarın.
Veriler, kanal numarasına karşı iletim ve emilim yoğunluğundan oluşur. Değerlendirme için verileri istatistiksel bir yazılıma aktarın ve Tungsten filtresi ile ölçülen saçılma kütlesini kullanarak yoğunlukları normalleştirerek verileri düzeltin. Kırınım açısının iki katına karşı normalleştirilmiş yoğunlukta bir grafik oluşturun.
Hem küçük açılı x-ışını saçılması hem de SAXS ve geniş aralıklı x-ışını saçılması veya WAXS bölgelerindeki kırınım tepe noktalarını bulmak için ekran okuyucunun işlevini kullanın. Maksimum yoğunluğa etkileşim veya aralıklara ulaşılan kırınım zirvelerini hesaplamak için övünme denklemini uygulayın. Lipitlerin kristal simetrisini bulmak için SAXS bölgesinin tepe konumunun oranlarını hesaplayın ve kristalit kalınlığını ölçmek için SAXS bölgesinin ana kırınım zirvesini kullanın.
Klasik kiralık kareler aracılığıyla zirveyi bir Gauss fonksiyonuna sığdırın ve analiz tepe noktaları ve taban çizgileri, tepe analizörü, açık diyaloga tıklayarak maksimum yarıda tam genişlik elde edin. Açılan pencerede, Fit Peaks Pro seçeneğini belirleyin.
SAXS bölgesinin ana kırınım zirvesini seçin. En yüksek uyum parametrelerini seçmek için sığdırma kontrolüne tıklayın. Gauss Amp işlevini seçin.
Y sıfır XC1 ve A1 parametrelerini sabit olarak ayarlayın ve verileri sığdırın. Tam genişliği, uyumdan maksimum yarıya kadar elde edin. Son olarak, kristalin kalınlığı hesaplamak için surer denklemini kullanın.
Bir Triasilgliserol molekülünün, alt hücrenin, Lamel'in ve kristalin trombositin melodi çatalı ve sandalye konfigürasyonları burada gösterilmiştir. Temsili görüntü, Tripalmitin ve WAXS ve SAXS bölgelerinin alfa formunun kısa aralıklarını ve uzun aralık desenlerini göstermektedir. Beta formu için de aynısı bu resimde gösterilmiştir.
Gliserol monostearat ile kodlanmış aktif farmasötik bileşen veya API kristalleri, kaplamadan hemen sonra ve hızlandırılmış koşullar altında üç aylık depolamadan sonra DSC ve x-ışını ile ölçülür. Hızlandırılmış altında üç aylık depolamadan sonra örneklerin DSC verileri, T-başlangıcında bir endotermin, kalan alfa formunun erimesi için 60.2 santigrat derecede üst üste binen iki olayla 55.7 santigrat dereceye eşit olduğunu ve TM'de beta formunun erimesi için ana olay olarak 63.8 santigrat dereceye eşit olduğunu göstermektedir. Polimorfik geçiş, moleküler eğilme nedeniyle Lamel kalınlığındaki azalma ile birlikte beta formu için tipik olan kısa D aralıklarını tespit ederek x-ışını verileriyle doğrulanır.
Salınım profillerinde de önemli değişiklikler gözlenmiştir ve bu da alfa formunun beta formuna belirgin polimorfik dönüşümü ile daha yoğun bir alt hücre düzenlemesi ile su itici bir yüzey ile sonuçlanabilir. DSC verileri, X-ışını verileri ve PG13C16C18 ile kodlanmış API Kristallerinin API salınım profili, kodlamadan hemen sonra ve hızlandırılmış koşullar altında üç aylık depolamadan sonra burada gösterilmektedir. Depolanan örneklerin DSC analizi, polimorfizm ve faz ayrımı göstermeyen değişmemiş termogramları ortaya çıkardı.
PG3C16C18 parsiyelinin kararlı katı hali x-ışını modelleri tarafından doğrulandı. WAXS bölgesi, alfa formuyla ilişkili depolanmış örneklerde 4.15 angstrom ve T0'a eşit kısa bir D aralığına karşılık gelen bir tepe noktası gösterir. SAXS bölgesi, iki L konfigürasyonuna sahip bir lamel yapısına karşılık gelen 63.7 angstroma eşit olan uzun bir D aralığında değişmemiş bir ana tepe noktası ortaya çıkardı.
Lipid matrisinin kararlı katı hali, kodlamadan API'nin kararlı salım profili ile sonuçlanır. Yüksek kaliteli x-ışını verileri sağlamak için, kılcal damarları doldururken parçacıklar arasında sıkışmayı önlemek önemlidir. Ayrıca, numunenin türüne ve mevcut ekipmana bağlı olarak bir pozlama süresi seçmek için.
Yeni farmasötik ürünlerin geliştirilmesi sırasında, lipitlerin katı hallerinin taranması ve API ile etkileşimi, uygun üretim sürecini seçmek ve ürün stabilitesini tahmin etmek için kullanılır.
