Bu sistem, bu uyaranların doku kuvveti gelişimi, yeniden biçimlendirme ve olgunlaşma üzerindeki etkilerini incelemek için, mühendislik lenmiş kalp dokularını farklı afterload rejimlerine maruz bırakmak için kullanılabilir. Tekniğimiz, hücre kültürü plakasını açmaya gerek kalmadan uzun süre boyunca, dayak dokularını çok çeşitli özelleştirilebilir aşırı yük rutinlerine tam olarak tabi kılmanızı sağlar. Yöntemimiz iskelet kası, düz kas veya eksiltilmiş papiller kas gibi diğer kas dokusu kültür sisteminde ki aşırı yükü kontrol etmek için değiştirilebilir.
Bizim sistem yaklaşımı oldukça benzersiz ve birçok bilim adamı aşina olmayan teknik yönleri özellikleri olduğundan, görsel gösteri bizim kurulum yeniden yardımcı olabilir. Manyetik duyarlı silikon raflar üretmek için, 24 iyi plaka metin protokolünde açıklanan silikon direkleri raflar kürek olabilir elde. Sabit bir polarite kullanarak mıknatısları suyla yağlayın ve silikon rafların en dış direklerine teker teker takın.
Dikkatle içi boş sonrası boşluğun altına itmek için paslanmaz çelik diş tel karışımı bir parça kullanın. En fazla beş mıknatıslar her yazı yığılmış olabilir. Paslanmaz çelik diş telini 11,25 milimetre genişliğinde ve 15 milimetre uzunluğunda ki paranteziçine bükmek için yuvarlak burun lu permalar kullanın.
Doğru boyutlarda elde emin olmak için, bir tel bükme yardımcı olmak için kendi kendine yapılmış jig kullanabilirsiniz, sonra kesme yüzeyi düzeltmek için parantez ve dosya kesmek için tel kesiciler kullanabilirsiniz. Ayraçları veya direkleri suyla yağlayın ve işlemde ikinci ve üçüncü direğe sabitleme silikon rafa takın. Metin protokolünde açıklandığı gibi alet sonrası alet hazırlamaya başlayın, manyetik olmayan bir malzeme kullanarak piezoelektrik aşamaya mıknatıs tutucu eklemek, bu alüminyum Bir L şeklinde bir parça kullanılarak elde edilebilir.
Dokuların görsel analizini sağlamak için, afterload atonlama cihazına bir ışık kaynağı yükleyin. Burada ledler bir dizi aşağıdan kalp dokuları için mühendis aydınlatmak için kullanılmıştır. Afterload ayar sistemini kalibre etmek için, silikon raflardan birini monte edin ve manyetik olmayan malzemeler kullanarak dikey olarak manyetik duyarlı silikon direkleri yatay olarak yönlendirilir.
Şimdi yatay olarak hareket eden doğrusal bir aşamada ki eksenli olarak manyetik duyarlı direk ile hizalanır plaka mıknatıslar monte. Kalibrasyon mıknatısını yatay aşamayı kullanarak manyetik duyarlı silikon direğinden tanımlı bir mesafe yerleştirin. Test yüklerinin etkisi altında gönderi saptırmasını optik olarak kaydedebilmek için bu kurulumun yan tarafına bir kamera yerleştirin.
Ekli yüklerin serbestçe asması için gönderinin altında yeterli alan olduğundan emin olun. Gönderiler nötr pozisyon için bir referans olarak kullanmak için herhangi bir ağırlık yokluğunda gönderinin bir resim alın. Kameranın bakış açısını değiştirmeden, yüklerden birini silikon direğin in sonuna takın, ardından ağırlığın etkisi altında bükülen yazının fotoğrafını çekin.
Şimdi, x eksenindeki silikon direğinin yönünü y eksenindeki her test ağırlığının çekim kuvvetine göre grafikle çizin. Bu kuvvet ve sapma arasında doğrusal bir ilişki vermelidir. 00'dan geçen doğrusal bir regresyon işlevini ve elde edilen verileri çizin.
Bu fonksiyonun eğimi, test edilen mıknatıs boşluğundaki manyetik duyarlı silikon direğinin sertliği, k'sıdır. Dmax ve dmin arasındaki birkaç aralıkta bu adımları tekrarlayın. Burada yaklaşık 31 milimetre ile yaklaşık beş milimetre arasında değişen sekiz farklı mıknatıs pozisyonundaki sapmalar analiz edildi.
Bu değerler üzerinden bir çok regresyon fonksiyonu. Örneğin, çözümleme yazılımında doğrusal olmayan uyum, bir faz bozma işlevi kullanın. Bu regresyon fonksiyonu mıknatıs aralığı ve afterload arasındaki ilişkiyi açıklar.
Afterload atoklama cihazını deneylere hazırlamak için piezoelektrik sahne motorunu hareket kontrol cihazına bağlayın ve hareket kontrol cihazını bilgisayara bağlayın. Hareket kontrol cihazının da bir güç kaynağına bağlı olduğundan emin olun. Ardından hareket kontrol platformu yazılımını başlatın, hareket kontrol yazılımının kurulumu sırasında sahne tahtası olarak belirlenen bağlantı noktasını seçerek yazılımı piezo sahne motoruna bağlayın ve ardından açık bağlantı noktası düğmesini tıklatın.
Sistem paneline gidin, döngü açılır menüsünde açık döngüseçin. Mıknatıs plakasını el ile en yüksek konumuna, mümkün olan en yakın mıknatıs aralığı dmin'e taşıyın. Mıknatıs plaka kültür plaka montaj ile temas etmelidir.
Şimdi hareket paneline gidin, piezo sahnesinin mevcut konumunu sıfırlamak için sıfır düğmesi gibi. Mıknatıs lı bıçağı mümkün olan en düşük konuma manuel olarak taşıyın, piezoelektrik sahne motorunun hareket aralığını belirlemek için kodlayıcı konumunu yazın. Sistem panelindeki seyahat limitlerini bir önceki adımda belirlenen hareket aralığındaki değerlere ayarlayın.
Bu, mıknatıs bıçağının kültür bıçağına veya afterload atoklama cihazının altına çarpmasını önler. Bir kez daha, mıknatıs lı bıçağı en yüksek konumuna taşıyın ve sıfır düğmesine tıklayın. Sistem paneline gidin ve geri bildirim döngüsü modunu kapalı döngü olarak değiştirin, bunu yapmak, sahne alanının konumlandırmasındaki hatalar için düzeltilmesini sağlar.
Bu ayarları sistemde depolamak için mağaza parametreleri kutusundaki kaydet düğmesini tıklatın. Şimdi kültür plaka montaj üzerinde manyetik duyarlı silikon raflar üzerinde mühendislik kalp dokuları içeren 24 iyi kültür plaka yerleştirin. İstenilen bir sonrayük elde etmek için gerekli olan mıknatıs aralığını hesaplamak için, d için daha önce belirlenen doğrusal olmayan regresyon fonksiyonunu çözün.
Hesaplanan mıknatıs aralığından dmin çıkar, d. Sonuç, mıknatıs plakasının istenilen afterload'ı elde etmek için sıfır konumundan geçmesi gereken mesafedir. Bu değeri Hareket panelindeki Hedef Konum giriş alanına yazın ve mühendislik teki kalp dokusunun art yükünü hesaplanan değere ayarlamak için Git'i tıklatın.
Fare kalplerinden üretilen mrehts kontrol kontraktil kuvvet bir plato ulaşılınana kadar manyetik afterload yokluğunda kültürlü edildi. Bu gün, MREHTs ve kontrollü EHTs benzer ortalama güçleri vardı. Sonraki hafta boyunca, MREHTs uygulanan afterload kademeli olarak dokuz noktadan altı nokta sekiz milimetre başına beş milinewton artmıştır, EHTs kontrol için afterload sabit kalırken.
Ortalama kontraktil kuvvet, dokuz beş milinewton noktasına kadar artan artarak, kontrollü EHT'ler için ölçülen ortalama değere kıyasla üç kat daha fazla kuvvet artışına işaret eder. Öte yandan kontrol dokularına göre post sapma azaldı. Kültürün son gününde MREHT'ler için ölçülen ana sapma sadece bir milimetre, kontrol EHT's için nokta dört sekiz milimetre ile karşılaştırıldığında.
Manyetik duyarlı silikon direkler üzerindeki Rad EHT'ler, plato ve kontraktil kuvvete ulaşılıncaya kadar milimetre başına 9 milimetrelik en az bir noktadan daha az bir şekilde kültürlendi. Bu günden itibaren MREHTs, EHT'leri milimetre başına dokuz nokta bir ve altı nokta sekiz milimetre arasında değişen afterload döngülerine maruz bırakan yedi günlük bir afterload rejimi geçirdi. Kontrol EHT's sonrayük kültür tüm süre boyunca milimetre başına altı sıfır milimetre noktasında sabit tutuldu.
Gözlenen farklılıklar istatistiksel olarak anlamlı değildi. Optik kontraktilite analizi ile birlikte, bu yöntem fizyolojik kas özellikleri araştırmak için yararlı olabilir afterload dalgalanan büyüklükleri için kısa vadeli kontraktil yanıt gerçek zamanlı ölçüm sağlar. Güçlü mıknatıslar aniden birbirlerine tutunabilir, kullanıcıya zarar verebilir ve mıknatısların kendilerine zarar verebilir, bunu önlemek için mıknatısı güvenli bir mesafede ayrı tutarlar.
