Farelerde akciğer hastalığı nı modellemek için deneysel ajanlar genellikle intratrakeal enjeksiyon yoluyla uygulanır. Ancak bu yaklaşım seçici olarak bir akciğeri hedefleyemez ve dağılım akciğerler arasında asimetrik olabilir. Tek bir akciğeri anestezili bir fareye benzeterek, tek taraflı olarak deneysel ajanlar uygulayabiliriz.
Modifikasyon ile bu yaklaşım, her iki akciğerde birikintisi simetrisini geliştirerek bilateral olarak kullanılabilir. Parlatma, hafif angülasyon ve etiketleme gibi kateter hazırlama başarı için anahtar unsurdur. Tabii ki, bu tekniği uygulama da gereklidir.
Prosedürü gösteren Sumei Liao, benim laboratuvar profesyonel araştırma görevlisi olacaktır. Parmak sıkışmasına yanıt eksikliğini doğruladıktan sonra, bir dikiş oryantasyonunda dökümlü bir dikiş çizgisi üzerindeki kesici dişlerden sekiz ila 10 haftalık, C57-Siyah/6 fareyi askıya alın. Fareyi iki ila üç parça kancayla sabitleyin ve havalandırma kısıtlamasını önleyerek bandı döndürün ve ışık yayan diyot fiber optik aydınlatıcıyı açın.
Operatörü platformun arkasına, dorsal'ı fareye yerleştirin. Aydınlatıcının kaz yakasını fareden 2-3 santimetre uzağa yönlendirin, böylece gırtlak alanını deriden geçirin. Baskın elde steril forseps kullanarak, ağız boşluğundan dil çekin.
Yaygın orofarenks ortaya çıkarmak için dilin kökdüzleştirmek için baskın olmayan el ve steril depressor kullanın. Forseps serbest bıraktıktan sonra, oral kavite yoluyla trakea içine genişletilmiş kateter entübe etmek için baskın el kullanın. Şırıngadaki kabarcığın her nefeste yukarı ve aşağı hareket edip etmediğini gözlemleyerek yerleşimi onaylayın.
Distal sağ akciğerin selektif lobar kanülasyonu için, intratal entübasyondan sonra plastik tahtayı 30 derece döndürün ve kateterin merkezini, tabloda belirtildiği gibi farenin orta çizgisine paralel olarak uygun ağırlık tabanlı derinliğe doğru yönlendirin. Bir jel yükleme ucu kullanarak, kateter içine% 0.3 Evans mavi boya 20 mikrolitre teslim, cam damlalık tarafından hava bir ila iki 100 mikrolitre aliquots takip. Daha sonra kateteri çekin ve hayvanı Tam iyileşmeye kadar izleyerek, hayvanı ısınma battaniyesine yerleştirmeden önce fareyi 30 saniye boyunca pozisyonda takın.
Distal sol akciğerin selektif lobar kanülasyonu için, intratrakeal entübasyondan sonra, plastik tahtayı eksi 74 derece döndürün ve kateteri yavaşça sol mainstem bronşlarına doğru ilerletin ve mütevazı basıncı 90 derece aşağı ve kitap ucuna doğru hareket ettirin. Sol alt akciğer segmentleri cannulating sonra, plastik tahta eksi 30 derece döndürmek ve bir jel yükleme ucu ile 0,3% Evans mavi boya 40 mikrolitre teslim. Daha sonra, cam damlalık üzerinden bir ila iki 100-300 mikrolitrelik hava aliquots teslim ve fare kurtarmak için izin vermek için kateter çekin, gösterildiği gibi.
Sağ akciğer yönetimi için, intratrakeal entübasyon dan sonra, plastik tahta30 derece döndürün ve sağ taraflı distal lobar kanülasyonu için gerekli derinliklere ulaşan, fare orta hattına paralel kateter kılavuzu. Takyofenişaretinin görünümünü onaylayın ve ajan teslimatı için yerçekimi yardımı sağlamak için fareyi eksi 74 derece döndürün. Kateteri sağ mainstem bronşlarının kalkışına karşılık gelen bir pozisyona çekin ve kateterin gövdesinin aşağıya dönük olduğundan emin olun.
Sağ akciğere %0,3 Evans mavi boyasının 30 mikrolitresini, ardından 1 ila 2 ila 300 mikrolitre lik hava maddelerini iletin. Ardından kateteri geri çekin ve farenin kurtarılmasına izin verin. Sol akciğer yönetimi için, intratrakeal kanülasyon sonra, plastik tahta eksi 74 derece döndürmek ve yavaşça sol mainstem bronş içine kateter ilerlemek mütevazı basınç hem 90 derece aşağı ve bookend doğru yerleştirerek.
Tachypnea işaretini onaylayın ve ajan yönetimi ile yerçekimi yardımı sağlamak için fareyi 86 derece döndürün. Kateteri sol mainstem bronşlarına çekin ve kateterin gövdesini aşağıya bakacak şekilde döndürün. Sol akciğere jel yükleme ucu ile % 0.3 Evans mavi boya 30 mikrolitre teslim, hava bir ila iki 100-300 mikrolitre aliquots takip.
Daha sonra, farenin gösterildiği gibi toparlanmasını sağlamak için kateteri geri çekin. HEM intratrakeal hem de simetrik intrabronşiyal uygulama ile FITC-dekstran bilateral doğum sol akciğerde daha fazla göreceli konsantrasyonları ile asimetrik akciğer parenkimal FITC floresan yol açar. Bu, intratrakeal uygulama sonrası deneysel ajanların asimetrik akciğer tesliminin bu ajanların her mainstem bronşlara asimetrik olarak sunumunun bir sonucu olmadığını, ancak eşit mainstem iletiminin akciğer ağırlığı ve kütlesindeki farklılıklarla seyreltildiğini göstermektedir.
Doza göre ayarlanmış intrabronşiyal uygulama akciğer parankimal ajan doğumunun simetrisini artırır. Ancak bu düzeltmeye rağmen sağ akciğerin farklı loblarda kalıcı heterojenite gözlenmektedir. İntratrakeal bleomisin indüklenen fibrotik akciğer hasarından 21 gün sonra, inflamasyon ağırlıklı olarak sol akciğerde görülür ve sağ akciğerde daha az yaralanma görülür.
Tersine, doza göre ayarlanmış intrabronşiyal bleomisin uygulaması sol akciğerde hafif bir azalma ve sağ akciğerde artmış yaralanma ile sonuçlanır, en büyük yaralanma orta ve üst loblarda belirgindir. Tüm akciğer yönetimi sırasında, kateteri geri çekmek ve kateter yüz aşağı eğimli eğilimindedir unutmayın.
