Yazarlar sıcak teşekkür K. Anderson, J.J. Adamczyk, E. Beren, ben Carstensen, M. Giansiracusa B. Mott, i. Holst ve A.R. Stilwell tartışmalar tasarım ve yürütme ve için için alanında yardımcı olur.

protokolleri takip altında hayvan bakımı yönergelere USDA tarımsal araştırma hizmet açıklanan.
 1. tam değerlendirme Not: tam bir değerlendirme 1 belirlemek için gerekli olan) kapağı, kapak, kutuları, alt kurulu, çerçeveler ve 2) tutarların damızlık ve gıda kaynakları da dahil olmak üzere tüm kovan parçaların ağırlıkları. Tüm kovan parçaları ağırlıkları toplanır ve ne zaman tüm arılar yetişkin arılar ağırlık vermeye hazır bulundu toplam kovan ağırlık çıkartılır. Kapak, alt Kurul ve dosyaların kutuları, gibi büyük ölçüde sabit olan kovan parçaların ağırlıkları verilere muhafaza edilebilir ve gelecekte değerlendirme, değerlendirme böylece hızlandırdığını kullanılır. Çalışmanın başlangıcında ya da tam bir değerlendirme yapmak. Ahşap parçaları nem içerik 24 açısından çok tekrar değişebilir tam değerlendirme uzun süre sonra tavsiye edilir. Diğer kovan bölümlerinde değişiklikleri tahmin etmek için her değerlendirme, kovan, kapak gibi bir parçası ağır. İşçiler etrafında filtrelenmiş bir antre yerleştirin ve yığını değerlendirme sırasında diğer kovan yakınlardadır ve basınç soymaktan bir husustur.
<ol><li>Tartmak tüm kovan parçaları. 1 g veya daha az bir duyarlılığa sahip bir ölçek kullanın.
	<ol><li>Kapak, iç kapak, Kraliçe önleyici, şurubu besleyici ve diğer bölümleri kovan üst tartmak.</li>
		<li>Bir spatula veya kovan aracını kullanarak kaldırın ve protein takviyesi veya yağ patty, kareleri üst kısımları üzerinde dinlenme gibi herhangi bir yiyecek veya tedavi malzeme tartın. Daha sonra gerekirse değiştirin.</li>
		<li>Bir boş kovan kutusu yerleştirin (bundan sonra &#34; geçici kutu &#34;) yanındaki kovan çerçeveleri için geçici konum olarak hizmet verecek. Geçici kutu bir kapak veya bir alt kurulu, arılar ve özellikle Kraliçe, dışarı-in kutu zemin üzerine düşmesini önlemek için gibi düz bir yüzey üzerine yerleştirin.</li>
		<li>Çerçeveler hızla ve yavaşça, tercihen iki ya da üç arı kümeye orijinal kutusunda oldukları gibi aynı sırada karelerdir böylece geçici kutu bölümlerini korumak için gruplar halinde hareket etme. Tüm kareleri alındı, salla bir kez herhangi bir kalan arılar geçici çerçevelerde üzerine kutu ve kovan kutusu tartmak.</li>
		Kutuyu en düşük kutusu olsaydı <li>alt kurulu, giriş Redüktör ve diğer kovan parçaları arılar geçici kutusuna sallayarak sonra tartın. Numara çerçeveler silinmez bir marker ile kendi özgün yönde değiştirilebilir böylece onları taşımadan önce.</li>
		<li>Alt kurulu, giriş Redüktör, damızlık kutusu ve diğer donanımları yeniden yükleyin. Çerçeveleri geçici kutusundan geri orijinal sipariş ve yönlendirme tekrar arı gereksiz karışıklık önlemek için dikkat çekici, özgün damızlık kutusuna gitme.</li>
	</ol></li> <li>Bir çerçeve kutusunun bir ucundan kaldırmak ve her iki Kraliçe varlığı için çerçevenin bakarak kontrol edin. Kraliçe bulduysanız, onu yavaşça bir parçası zaten, daha fazla rahatsızlık önlemek için değerlendirilmiştir kutusuna yerleştirin. İşçi arılar nazikçe ama sıkıca içine belgili tanımlık kutu Çerçeveler arasında yerine üst, mümkünse sallamak.</li>
	<li>Belgili tanımlık çerçevelemek tartmak ve her iki tarafın tüm çerçeve tüm çerçeve dahil olarak yakın mümkün çerçeveye Yani damızlık şapkalı ve bal hücreleri kolayca ayırt edilirler, ancak yeterli bir mesafe getting bir dijital fotoğraf makinesi ile fotoğraf. Bunu başka bir çalışan tutar süre belgili tanımlık çerçevelemek fotoğraf
	<ol><li>Kullan bir &#39; çerçeve tutucu &#39; (çerçeve ölçek üzerinde ise dik tutar ve tarak mar değil herhangi bir şey biter) ölçekte. Kovan içinde şurubu besleyiciler tartmak. 
		Not: Resimdeki çerçevesinin boyutunu göre mutlak önlemler yüzey alanlarını dönüştürmek için kullanılan.</li>
	</ol></li> <li>Özgün konumuna çerçevede ve kovan kutusu yönlendirmesini değiştirin. Arılar kutusu içinde güvenli bir şekilde sallamak için daha fazla alan sağlamak için bir önceki çerçeveyi yeniden önce sonraki çerçeve kaldırma. Kraliçe varlığı için kontrol edin, arılar, tartmak, fotoğraf kaldırmak için sallamak ve tüm çerçeveleri işlenene kadar her sonraki kare yerine.</li>
	<li>Kovan iki veya daha fazla kutusu varsa, tartmak ve fotoğraf çerçeveleri en düşük kutusundan ilk.
	<ol><li>Kaldırmak üst kutuya veya kutulara sırayla, onları ters için özgün sıralarına kovanında yanındaki istifleme. Alttaki kutuda değerlendirilmiştir kez alt kutusunun üstünde değerlendirmeye yer geçici belgili tanımlık kutu üstünde kalan değerlendirilmemiş kutuları ve çerçeveler geçici belgili tanımlık kutu, yukarıdaki gibi ikinci kutuda taşımak için sonraki kutusuna yerleştirin. Çerçeveleri onların orijinal kutusunda özgün yönelimleri geri taşıyın. 
		Not: alt kutuları inceleyerek ilk, sarsılmış arılar artık rahatsız olmayacaktır bir kovan kutusu düşecek.</li>
	</ol></li> <li>Son bir süre işlem yapılmadığında, gece veya erken sabah önce bizim arılar değerlendirme gününde uçuyor gibi sırasında toplam kovan ağırlık elde etmek. Bu ağırlık toplayıcılar dahil olmak üzere tüm koloniyi temsil eder.</li>
	<li>(Woodenware, çerçeveler, arı besleme, vb) tüm kovan parçaları ağırlıkları özetliyor ve bu toplamı üzerinden çıkarılarak yetişkin arı kitle hesaplamak &#34; toplam kovan ağırlık &#34; önceki adımda alınan değeri. İkisi arasındaki fark yetişkin arı bir tahmindir Mass 
	Not: tam değerlendirme yapılır sonra sonraki değerlendirme gibi kutuları ve alt kurulu, çerçeve kovan parçaları kayda değer ağırlık değişti değil varsayarak, kısmi olarak yapılabilir. Kısmi değerlendirme daha az zaman alır.</li>
	Bir kovan ile tek bir kutu için kısmi bir değerlendirme yapmak için <li>kaldırın, fotoğraf, tartmak ve çerçeveleri çerçeveler için geçici bir kutu hareket ettirmeden değiştirin. Birden çok kutusu, (yukarıdaki adım 1.5) açıklanan yordamı izleyin, ancak kovan kutuları ağırlığında bir kovanında.</li>
</ol> 2. Kurdeşen ölçekte yüklenmesini Not: Bu çalışmada kullanılan kovan ölçekler en az 100 kg, 5000 ile sıcaklık tazminat, yaklaşık bir bölümünde bir yük hücre duyarlık maksimum kapasiteli açık elektronik tezgah ölçekler vardır ve bir 460 x 610 mm boyutunu pan. Bu ölçekler 24 VDC göstergesi ve 12-bit datalogger bağlı. Gösterge çıktı dijital ya da analog olabilir; Burada kullanılan ölçek sistemleri çıkış mA ve gerekli kalibrasyon eğrileri kg. için verileri dönüştürmek için
<ol><li>Yükleme ölçekler firma, düz bir yüzeye. 
	Not: ölçek ve toprak ya da su ile temas gelen elektrik bağlantıları tutacak ölçekler beton veya seramik blok veya ahşap fırın kurutulmuş, parçaları kullanarak yerden yükselen.</li>
	<li>Plastik, bez, karton veya aşırı ışık yansıması ve Isıtma kovan girişinin önlemek için diğer malzeme ile üst ölçek tava kapağı.</li>
	<li>Drift kolonileri arasında azaltmak için yüz farklı yönlere birbirine yakın kurdeşen için giriş olduğundan emin olun.</li>
	<li>Ayarla'ya kovan ölçekler üzerine yükleme ve bundan sonra düzenli olarak, özellikle ölçekler taşınırsa.
	<ol><li>Yer ölçek kalibrasyon ağırlıkları ağırlığında üzerinde tava ve ölçek çıkış kaydeder. Toplam ağırlık ölçeğin maksimum kapasite % 50'si aşan olun. 
		Not: ölçek çıkış kitle birimleri yerine voltaj veya geçerli birim ise, o zaman eğimi ve kesişimi kalibrasyon eğrisi (pan ve ölçek çıkış toplam bilinen kilo arasındaki ilişki) ölçek çıkış kitle birimlerine dönüştürmek için kullanın.</li>
	</ol></li></ol> 3. Sıcaklık sensörleri yüklemesini Not: Bu çalışmada kullanılan ısı sensörleri vardı iki tür: 1) thermocouples bağlı doğrudan bir pilli datalogger bağlı kabloları için (hangi yer yerleştirilebilir içinde veya dışında kovanı, kablonun yeterince uzun ise); ve 2) küçük, pil ile çalışan cihazlar ile entegre sensörler ve dataloggers ve hangi gerekli yüklenmek üzere veri kayıt kovanını kaldırılması.
<ol><li>Elde edilir Çerçeveler arasında uygun bir sıcaklık sensörü iç yüksek nem koşullarına dayanıklı bir kovanının ve yeterli pil ve bellek (veya kablolu veya kablosuz bağlantı erişilebilir).</li>
	Balmumu veya kaset (küçük, tek kullanımlık plastik kutu ek-kapa kapaklı ve havalandırma Yuvaları) gömme bir doku gibi koruyucu bir kap içinde propolis tarafından etkilenebilir <li>yer sensörleri. Koruyucu konteyner yapışmasına neden algılayıcı sensör erişim bağlantı noktalarının veya aksi halde veri indirme etkiler balmumu ve propolis birikmesi azaltır.</li>
	<li>Takmak sensör (aşağıya bakın) damızlık yetiştirme bilgilendirici veri sağlamak için kutusunun Merkezi üst çubuğunda altında. 
	Not: Kısa bir parça tel ile duyumsal ve çerçevenin üst kapsayıcı bir tarafı asılı bu yüzden zımbalanmış tel kapsayıcıya bağlı. Doğrudan damızlık kitle üzerinde yerleştirilen sensörler ile damızlık engel ve tarak bakım dış veya iç kapakları veya kaput, yerleştirilmiş yanında kare üzerinde yerleştirilen sensörler etkilenen ve büyük dış koşullar tarafından özellikle serin havalarda.</li>
</ol> 4. Hazırlık şurubu tedavi Not: tedavi çözümleri her sınıf analitik imidacloprid kullanarak beslenme gün taze olun. Imidacloprid son derece suda çözünür ve bu nedenle kolayca dahil şurubu olduğunu; bazı böcek ilacı düşük su çözünürlük var ve diğer araçları kullanarak uygulanmalıdır. Formülasyonları tedavi çözüm 1 kg 1 L plastik şişe aşağıdaki gibi kullanarak uygulandı: <ol><li>Mix kontrol (pestisit) Sükroz çözümü 1:1 w:w (örneğin 500 g Sükroz: 500 mL distile su). Sıcak tabakta karıştırma çubuğu ile büyük bir karıştırma kabı kullanarak distile suda erime Sükroz ısıtmalı en fazla 60 ° C.</li>
	<li>İmidacloprid içeren çözümleri için yukarıdaki gibi Sükroz çözüm mix ama 100 mL kesintisi (böylece &#34; kısa &#34;) ilgili imidacloprid ekledi birim için izin vermek için &#34; spike &#34; çözümleri.
	<ol><li>400 mL distile su 100 mL spike eklenmesi için 1 kg tedavi çözümü elde etmek için izin vermek için şeker dağıtılması 500 g. 900 g çalışma alanında kolaylık sağlamak için aktarım &#34; kısa &#34; şeker çözüm için bir şişe daha sonra Başak için tek tek her şişe ekleyin.</li>
	</ol></li> <li>10 ppm imidacloprid hisse senedi çözüm pestisit bir analitik bakiyesine 1.0 mg ölçüm ve ısı olmadan karıştırma çubuğunu kullanarak distile su 100 ml eriterek hazırlayın. 
	Not: statik elektrik sorunları önlemek için küçük, tepkisiz plastik sepetleri imidacloprid tartmak ve bu kapları doğrudan çözümde yerleştirin. Çözüm karıştırın ve imidacloprid çözünmüş sonra sepetleri kaldırın.</li>
	<li>İçin bir 5 app çözüm, 0.5 mL stok çözeltisi 99.5 mL distile su 100 mL spike çözüm elde etmek için karıştırın. Bu 5 app şurubu 1 kg ulaşmak için kısa Sükroz çözüm için 900 g ekleyin. 20 app çözüm için 2.0 mL stok çözeltisi 98.0 mL distile su 100 mL spike çözüm üretmek için karıştırın. 100 app çözüm mix için hisse senedi 90.0 mL çözümde 10.0 mL distile su spike çözüm.</li>
</ol> 5. Arı Hives ve tedavi uygulama hazırlanması <ol><li>değerlendir kolonileri yetişkin arı ve damızlık nüfus öncesi ve tedavi uygulanması sonra belirlemek için. Örnek malzemelerine bal, arı ekmek, arılar veya balmumu tedavi öncesi temel pestisit düzeylerini belirlemek için gibi ilgi.
	Balmumu örnek, 50 mL santrifüj tüpü açmak, boş tarak bir bölümünü seçin ve toplanan mum istenilen miktar kadar tüp tarak boyunca açık ağız kazımak için <ol><li>. Tüp balmumu dokunmaktan kaçının. Tüp kapağı değiştirin ve tüp etiket. Kovan çerçevede yerine.</li>
		<li>Bal veya nektar örnek, santrifüj tüpü açın ve tüp ağız bal veya nektar içeren tarak bölümü karşı tuşuna basın. Örnek balmumu azaltmak için tüp, kazıma yerine tüp içine akışı malzeme sağlar. Tüp kapağı değiştirin ve tüp etiket. Kovan çerçevede yerine.</li>
		<li>Arı ekmek örnek, arı ekmek içeren bir kare seçin ve arı ekmek birkaç hücrelerin içeriği kaldırmak ve malzeme bir santrifüj Tüpü yerleştirmek için bir temiz metal veya plastik spatula kullanın. Kovan çerçevede yerine. 
		Not: yeterli malzeme toplama genellikle kare başına birkaç dakika sürer. Tipik bir örnek pestisit analizi için en az 3 g malzemenin vardır; Bal, balmumu ve en az 2 veya 3 farklı noktaları her yığın ve o subsamples her yığın için birleştirmek arı ekmek örnek.</li>
	</ol></li> <li>Kısa bir süre sonra değerlendirme, ertesi gün gibi bal ve nektar içeren herhangi bir broodless kareleri kaldırmak ve çerçeveleri Vakfı ya kolaylaştırmak için şurubu depolama boş çizilmiş tarak ile değiştirir. 
	Not: Boş depolama kapasitesi ve nektar talebi artırmak için hedeftir. Tedavi uygulanacak ise gıda çerçeveler kaldırılması gerekli olmayabilir bir protein takviyesi karışık.</li>
	<li>Emin olun kovan bir besleyici vardır. Ön arıtma değerlendirmesinden sonra en kısa zamanda, mümkün olduğunca hızlı bir şekilde besleyiciye şurubu (Adım 4.4) dökerek tedaviyi. Arılar diğer kolonilerden nerede onu kovan dışında herhangi bir şurup dökmek değil için özen 
	Not: İç besleyiciler soymaktan azaltmak için en iyi çalışabilir; bazı pestisitler yetişkin arı etkinlik etkiler ve tedavi kovan arılar 9 soymaktan dan besleyiciler korumak için daha az uyanık olabilir.</li>
</ol> 6. Kovan çerçeve fotoğraf analizi Not: çerçeve fotoğraf her kovan değerlendirme sırasında yapılır. Bilgi aşağıdaki iletişim kuralını kullanarak fotoğraflardan çıkarılan.
<ol><li>Gibi ImageJ, bir şeklin üzerine bir izleme aracı ile bir fotoğraf seçmek ve seçili şeklin alan ölçme için izin veren bir görüntü analiz yazılımı etkinleştirmek.</li>
	<li>Bir çerçeve dijital fotoğrafını almak. Seçin &#39; dosya &#39; ve'ı tıklatın &#39; açık &#39;. Analiz için bir fotoğraf seçmek için fotoğrafları saklandığı klasöre gidin. Görüntü şimdi ImageJ programın içinde açılacak ve ImageJ araç çubuğu etkin olur.</li>
	<li>Select &#39; çokgen &#39; aracı araç çubuğundan. Fareyi kullanarak her köşesinde tarak ile örtülü kare alanını tanımlamak için tıklatın. Başlangıç köşe ulaşıldığında şekli birlikte yaslanacaktır.</li>
	<li>Tarak alan Çokgen aracını kullanarak tanımlandıktan sonra tıklayın &#39; analiz &#39; ve seçin &#39; MeasureƆ yeni bir iletişim kutusu ölçüm ile açılır. Sütun kullanmak &#39; alan &#39; çizilmiş tanımlanmış alanı içinde piksel ölçmek için. 
	Not: ilk kez program kullanıldığında, rapor için istenen sonuçları tanımlayın.
	<ol><li>Tıklayın üzerinde &#39; sonuçları &#39; sonuçları iletişim kutusunda ve seçin &#39; ölçümleri ayarlamak &#39;. Kontrol..... .et ve tüm diğerleri uncheck.</li>
	</ol></li> <li>Tanımlamak için çok Millî olan damızlık tarafından bölgeyi seçin &#39; Freehand &#39; aracı. Bir başlangıç noktası ve izleme damızlık etrafında fare butonuna basın. Başlangıç noktasına ulaşıldığında, fare düğmesini bırakın; şekli yerine oturtun.
	<ol><li>Tıklayın &#39; analiz &#39; ve seçin &#39; ölçü birimi &#39;. Kuluçka Model katı, hastalığı gibi faktörler nedeniyle değil, kullanın &#39; çok noktalı &#39; bunun yerine hücreleri saymak için Seçim aracını. Hücre sayımları cm 2 karşılaştırma kolaylığı için doğrudan dönüştürme; genellikle yaklaşık 4.01 hücreler/cm 2 20 vardır.</li>
	</ol></li> <li>İç kaplama damızlık yüzde çerçeve kapsamında elde etmek için çerçeve değerini izlenen damızlık şekil değeriyle bölmek.</li>
	<li>Ölçmek iç damızlık yüzey alanı cm 2 ' ye dönüştürülebilir böylece bir standart elde etmek için temsilcisi kare. 
	Not: Bir yüzey alanı yaklaşık 880 cm 2 20 tipik bir Langstroth derin çerçeveye sahiptir. Örneğin, damızlık, sonra yüzey ar kapsayacağı Langstroth derin çerçeve iç % 20'si bulunduEA-cekti var olmak 0.20 x 880 cm 2 = 176 cm 2.</li>
	<li>Kovan için kuluçka yüzey alanı toplamı. Bu ölçü ayine dönüştürmek için yüzey alanı 0,77 g/cm 2 20 tarafından çarpın.</li>
	<li>Hesaplamak bal, kapağını nektar ve polen saklı, yüzey alanı, 6,3-6,6 adımlarda açıklanan yöntemi kullanarak. 
	Not: Eğer nektar ve polen birlikte olarak kabul edilir &#34; gıda mağazaları &#34; bu iki için bir çerçeve bileşenleri azaltır (gıda mağazaları ve damızlık). Plastik Vakfı ve boş çizilmiş tarak olan tipik bir Langstroth çerçeveye yaklaşık 556 g 20, yani gıda mağazaları ağırlığını hesaplamak, boş çizilmiş tarak ile çerçeve ağırlığını ve damızlık kütle ağırlık toplamı ve o çıkarmak ağırlığında söz konusu çerçeve gözlenen ağırlığı ağırlığı.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Krupke, C. H., Hunt, G. J., Eitzer, B. D., Andino, G., Given, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+routes+of+pesticide+exposure+for+honey+bees+living+near+agricultural+fields.">Multiple routes of pesticide exposure for honey bees living near agricultural fields.</a> PLoS ONE. 7 (1), e29268 (2012).</li><li>Pochi, D., Biocca, M., Fanigliulo, R., Pulcini, P., Conte, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+exposure+of+bees,+Apis+mellifera+L.,+to+particulate+matter+and+pesticides+derived+from+seed+dressing+during+maize+sowing.">Potential exposure of bees, Apis mellifera L., to particulate matter and pesticides derived from seed dressing during maize sowing.</a> Bull. Environ. Contam. Toxicol. 89, 354-361 (2012).</li><li>Reetz, J., Z&#252;hlke, S., Spiteller, M., Wallner, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neonicotinoid+insecticides+translocated+in+guttated+droplets+of+seed-treated+maize+and+wheat:+a+threat+to+honeybees?.">Neonicotinoid insecticides translocated in guttated droplets of seed-treated maize and wheat: a threat to honeybees?.</a> Apidologie. 42, 596-606 (2011).</li><li>Stoner, K. A., Eitzer, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Movement+of+soil-applied+imidacloprid+and+thiamethoxam+into+nectar+and+pollen+of+squash+(Cucurbita+pepo).">Movement of soil-applied imidacloprid and thiamethoxam into nectar and pollen of squash (Cucurbita pepo).</a> PLoS ONE. 7 (6), e39114 (2012).</li><li>Zhu, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spray+toxicity+and+risk+potential+of+42+commonly+used+formulations+of+row+crop+pesticides+to+adult+honey+bees+(Hymenoptera:+Apidae).">Spray toxicity and risk potential of 42 commonly used formulations of row crop pesticides to adult honey bees (Hymenoptera: Apidae).</a> J. Econ. Entomol. , 1-8 (2015).</li><li>Mullin, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+levels+of+miticides+and+agrochemicals+in+North+American+apiaries:+implications+for+honey+bee+health.">High levels of miticides and agrochemicals in North American apiaries: implications for honey bee health.</a> PLoS ONE. 5, e9754 (2010).</li><li>Cresswell, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+meta-analysis+of+experiments+testing+the+effects+of+a+neonicotinoid+insecticide+(imidacloprid)+on+honey+bees.">A meta-analysis of experiments testing the effects of a neonicotinoid insecticide (imidacloprid) on honey bees.</a> Ecotoxicol. 20, 149-157 (2011).</li><li>Dively, G. P., Embrey, M. S., Kamel, A., Hawthorne, D. J., Pettis, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+chronic+sublethal+effects+of+imidacloprid+on+honey+bee+colony+health.">Assessment of chronic sublethal effects of imidacloprid on honey bee colony health.</a> PLoS ONE. 10 (3), e0118748 (2015).</li><li>Meikle, W. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sublethal+effects+of+imidacloprid+on+honey+bee+colony+growth+and+activity+at+three+sites+in+the+U.S.">Sublethal effects of imidacloprid on honey bee colony growth and activity at three sites in the U.S.</a> PLoS ONE. 11 (12), e0168603 (2016).</li><li>Johnson, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Within-nest+temporal+polyethism+in+the+honey+bee.">Within-nest temporal polyethism in the honey bee.</a> Behav. Ecol. Sociobiol. 62 (5), 777-784 (2008).</li><li>Moritz, R. F. A., Southwick, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Bees as superorganisms: An evolutionary reality. , (1992).</li><li>Schmolz, E., Lamprecht, I., Schricker, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+continuous+direct+calorimetric+measurements+of+energy+metabolism+in+intact+hornet+(Vespa+crabro)+and+honeybee+(Apis+mellifera)+colonies.">A method for continuous direct calorimetric measurements of energy metabolism in intact hornet (Vespa crabro) and honeybee (Apis mellifera) colonies.</a> Thermochem. Acta. 251, 293-301 (1995).</li><li>Southwick, E. E., Mugaas, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+hypothetical+homeotherm:+The+honey+bee+hive.">A hypothetical homeotherm: The honey bee hive.</a> Comp. Biochem. Physiol. 40A, 935-944 (1971).</li><li>Stabentheiner, A., Kovac, H., Brodschneider, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Honeybee+colony+thermoregulation+-+regulatory+mechanisms+and+contribution+of+individuals+in+dependence+on+age,+location+and+thermal+stress.">Honeybee colony thermoregulation - regulatory mechanisms and contribution of individuals in dependence on age, location and thermal stress.</a> PLoS ONE. 5 (1), e8967 (2010).</li><li>Delaplane, K. S., van der Steen, J., Guzman-Novoa, E., Dietemann, V., Ellis, J. D., Neumann, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standard+methods+for+estimating+strength+parameters+of+Apis+mellifera+colonies.">Standard methods for estimating strength parameters of Apis mellifera colonies.</a> The COLOSS BEEBOOK. Volume I: standard methods for Apis mellifera research, (2013).</li><li>Beekman, M., Ratnieks, F. L. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-range+foraging+by+the+honey-bee,+Apis+mellifera+L.">Long-range foraging by the honey-bee, Apis mellifera L.</a> Functional Ecology. 14, 490-496 (2000).</li><li>Buchmann, S. L., Thoenes, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+electronic+scale+honey+bee+colony+as+a+management+and+research+tool.">The electronic scale honey bee colony as a management and research tool.</a> Bee Sci. 1, 40-47 (1990).</li><li>Lecocq, A., Kryger, P., Vejsn&#230;s, F., Bruun Jensen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Weight+watching+and+the+effect+of+landscape+on+honeybee+colony+productivity:+Investigating+the+value+of+colony+weight+monitoring+for+the+beekeeping+industry.">Weight watching and the effect of landscape on honeybee colony productivity: Investigating the value of colony weight monitoring for the beekeeping industry.</a> PLoS ONE. 10 (7), e0132473 (2015).</li><li>Meikle, W. G., Rector, B. G., Mercadier, G., Holst, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Within-day+variation+in+continuous+hive+weight+data+as+a+measure+of+honey+bee+colony+activity.">Within-day variation in continuous hive weight data as a measure of honey bee colony activity.</a> Apidologie. 39, 694-707 (2008).</li><li>Meikle, W. G., Weiss, M., Stilwell, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+colony+phenology+using+within-day+variability+in+continuous+weight+and+temperature+of+honey+bee+hives.">Monitoring colony phenology using within-day variability in continuous weight and temperature of honey bee hives.</a> Apidologie. 47, 1-14 (2016).</li><li>Meikle, W. G., Holst, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+continuous+monitoring+of+honey+bee+colonies.">Application of continuous monitoring of honey bee colonies.</a> Apidologie. 46, 10-22 (2015).</li><li>De Smet, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress+indicator+gene+expression+profiles,+colony+dynamics+and+tissue+development+of+honey+bees+exposed+to+sub-lethal+doses+of+imidacloprid+in+laboratory+and+field+experiments.">Stress indicator gene expression profiles, colony dynamics and tissue development of honey bees exposed to sub-lethal doses of imidacloprid in laboratory and field experiments.</a> PLoS ONE. 12 (2), e0171529 (2017).</li><li>Danka, R. G., Rinderer, T. E., Hellmich, R. A., Collins, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Foraging+population+sizes+of+African+and+European+honey+bee+(Apis+mellifera+L.)+colonies.">Foraging population sizes of African and European honey bee (Apis mellifera L.) colonies.</a> Apidologie. 17 (3), 193-202 (1986).</li><li>Meikle, W. G., Holst, N., Mercadier, G., Derouan&#233;, F., James, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+balances+linked+to+dataloggers+to+monitor+honeybee+colonies.">Using balances linked to dataloggers to monitor honeybee colonies.</a> J. Apic. Res. 45 (1), 39-41 (2006).</li><li>Owens, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The thermology of wintering honey bee colonies. , (1971).</li><li>Szabo, T. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermology+of+wintering+honey-bee+colonies+in+4-colony+packs.">Thermology of wintering honey-bee colonies in 4-colony packs.</a> Am. Bee J. 189, 554-555 (1989).</li><li>Human, H., Nicolson, S. W., Dietemann, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Do+honeybees,+Apis+mellifera+scutellata,+regulate+humidity+in+their+nest?.">Do honeybees, Apis mellifera scutellata, regulate humidity in their nest?.</a> Naturwissenschaften. 93, 397-401 (2006).</li></ol>

Yazarlar hiçbir rakip mali ilgi alanlarına sahip.

Sadece bir ürün bilim adamı doğru ve hassas veriler farklı tedaviler bitki büyüme üzerindeki etkilerini değerlendirmek ve verim gerektirir, bal arı araştırmacılar arı kolonisi büyüme ve etkinliğini değerlendirmek için doğru ve hassas verileri gerektirir. Tedavisinin etkileri ince ve uzun vadeli olabilir, arılar tarım ilaçları düşük konsantrasyonda maruz kaldığında gibi beklenebilir veri bu tür özellikle önemlidir.
Sürekli kovan ağırlık verilerini büyüme ve etkinliği, yanı sıra bu koloniler cevaben eksojen bozuklukları gibi arılar soymaktan ve besleyici9şeker şurubu ilavesi okudu kolonileri hakkında fazla bilgi içerir. Ancak, sürekli ağırlık ve sıcaklık verilerini doğru biçimde yorumlayabilmek koloni büyüklüğü hakkında bazı bilgilere bir dönemsel olarak gerekir. Yetişkin arı nüfus büyüklüğü değişimleri saatlik veri genlikleri günlük artan forager trafik nedeniyle bir nektar akışı sırasında tahmin edilebilir bir nektar akışı dışında ilişki iyi20basılı tutarak değil. Aynı şekilde, koloni ağırlık yiyecek başarı, gıda tüketim ve arı nüfus nedeniyle değişiklikleri artar ve azalır (örneğin arı öldürür) kısmen koloni boyutu bir fonksiyonu vardır. Daha küçük koloniler sağlıklı ama düşük büyüme oranları ve daha az forager kitle, örneğin, sadece bir küçük forager nüfus göstermek.
Kovan içinde sıcaklık sensörü için tutarlı ve bilgilendirici sabit pozisyon belirlenmesi özellikle ile geçirdikleri tekrarlanabilir sonuçlar üretmek için önemlidir. Önceki araştırmalar, damızlık (alt) kutusunda Merkezi bir çerçevenin üst Ray, sıcaklık izleme daha az ile ortam (dış) sıcaklığı kovan birkaç diğer konumlarda daha ilişkili ve daha koloni kendisi etkisinde göstermiştir 20. kışın, sıcaklık koloni arı küme farklılıklar ve ortam yüksek olması bekleniyor ve çok kovan içindeki pozisyonlar arasında farklılıklar aynı şekilde sıcak aylarda daha büyük olması bekleniyor. Buna ek olarak, arı küme kovan içerisinde farklı yerlerde yiyecek kaynakları25,26yararlanmak için hareket edecektir. Burada açıklanan kış çalışma orta çerçeve üzerinde dikey farklılıklar iken değil yatay konumdan üst dış çerçeve, üst orta sıcaklıkta önemli ölçüde farklı olduğunu gösterdi. Bir çerçeve boyunca dikey hareket iken değil, dikey karıştırma büyük olması beklenir yatay hava hareketi Yani Çerçeveler arasında nispeten sınırlı var. Bu sonuçlar Orta Çerçeve bir sensör konumunu üst ray üzerinde koloni sıcaklık etkileri ile ilgili bilgilendirici olma olasılığı olduğunu doğrulayın.
Onlar burada açıklandığı gibi kovan değerlendirme bazı bu sorunları gidermek. Kovan toplamını çıkararak toplam kovan ağırlık yerlerinden etkinlik sırasında gibi geceleri, tahmin ölçülen yetişkin arı kitle yiyecek arılar sayısı ve böylece değerlendirme zaman duyarsız bağımsızdır. Öznellik için küçük bir oda bir ölçek verilerden kayıt imkanı sunan ve damızlık veya gıda yüzey alanlarını analizlerini gerekirse, böylece eğitim analizleri yapan kişinin bağımlılığını azaltarak revisited kalıcı bir kayıt çerçeve fotoğraf sağlamak.
Burada açıklanan yöntemleri hata kaynakları değildir. Kovan parçaları arıdan mümkün ve tarak veya kaldırılır diğer belgeleri önemli herhangi bir adet daha önce tartılması kadar özgür olmaya gerek atılır. Nem içeriği ahşap bileşenlerin zamanla değişebilir ve boş kovan içinde ağırlık Ortam bağıl nemi24günlük değişiklikler nedeniyle ölçülebilir günlük salınımlar sergilemek. Bal arıları ortam etkilerini azaltmak kovan27içinde nispeten sabit bir nem korumak için çünkü bir koloni içeren bir kovan kadar bir değişiklik olmayacaktır muhtemelen. Bu yöntemler de hızla çalışmaya bağlı. Bir kez bir kovan dışında alınan, sıcaklık ve gaz koşullar büyük ölçüde değiştirmek ve sıcaklıklara serin damızlık sağlık14etkisi. Bir kovan arı kolonileri komşu gelen dışarı tutmak için bir ekran olmadan parçalıyor, özellikle nektar Kıtlık zamanlarında soymaktan yükseltebilirsiniz.
Değişiklikler bu yordamlardan birini zaman zaman gereklidir. O otelde birçok kovanlarını kontrol gerekir, ne zaman yüksek basınç soymaktan veya ne zaman hava koşulları uygun, değillerdir gibi bazı durumlarda mümkün olduğunca fazla veri toplamak için araştırmacılar çıkarına olmakla birlikte işçiler hızlı hareket ve bazı veri bırakmak gerekir. Eğer yiyecek depolamak verileri çok önemli değildir, sadece bal ve/veya polen veya sadece balmumu veya vakıf, çerçevelerle bulunduğu çerçeveleri tartılır ancak değil fotoğrafı gerekir. Düzeyde kapağını larva ve yumurta da ilgilendiren bazı araştırmacılar ve sık sık çerçeve fotoğraflarda tespit edilir; Ancak, örnekleme önlemek için önyargı bir araştırmacı onları tüm fotoğraflarda tespit için güçlü olmak emin olmanız gerekir. Genellikle sadece çok Millî olan damızlık alan koşullarında çekilen fotoğraflar üzerinde güvenilir ve tutarlı bir şekilde tanımlanabilir. Tedavi, bazı kurdeşen, uygulanması ile ilgili olarak özellikle de daha yüksek dozlarda imidacloprid beslenen, uyuşuk, hem kendi tüketimini şurubu ve yeteneklerini kendi kovanı savunmak için bir azalma neden olabilir. 5-7 d sonra onun şurubu tüketmeye bir koloni başarısız olursa, şurup gereken kaldırıldı, tartılır ve (fermantasyon nedeniyle kirlenmesini önlemek için) atılır ve taze şurup koloni sunulan. Atılan şurubu Tartma, araştırmacılar tüketilen ne kadar her koloni kaydı bulunmaz ve böylece toplam doz hesaplayabilirsiniz. Son olarak, az ya da hiçbir alternatif nektar kaynağı olduğunda uygulamanın şeker şurubu tedavilerin en etkili olur. Alternatif nektar kaynağı bilinmeyen bir ölçüde tedavi sulandırmak. Araştırmacılar ayı akılda, protokol bölümünde belirttiği gibi pestisitler imidacloprid gibi konsantrasyonu bağlı olarak kovanı koruma da dahil olmak üzere düşük aktivite düzeyleri ile ilişkili. Azaltılmış koloni savunma da artan soymaktan ve olası tedaviler semptomlarıdır yol açabilir.
Sunulan burada gösteri kovan ağırlık ve iç sıcaklık izleme Bu sürekli bile koloni düzey duyarlı davranışlar, çoğu sonuçları davranış değişiklikleri (5 App) çok düşük indüklenen Nörotoksik pestisit konsantrasyonları saygı duyuyorum. Daha fazla uygulama bu yöntemlerin diğer nörotoksinler ve tarım ilaçları, böcek büyüme düzenleyicileri gibi eylem diğer modları ile bal arı kolonileri alan gerçekçi doz etkileri anlayışımızı artıracak.

Tarımsal kimyasallar, özellikle tarım ilaçları düşük konsantrasyonlarda bal arıları maruz hakkında endişeleri son zamanlarda yol. Bal arıları alanında yolu ile yolu tarif etmek kullanma toplayıcılar alanında veya bile koloniler kendilerini tedavi yüzeyler ile temas, tohum tedaviler toz ve polen ve nektar çıktı1 gibi bitki ürünleri tüketim göre üzerinde maruz olabilir , 2 , 3 , 4 , 5. akut toksisite açıkça bal arıları, ama nedenleri % 50 mortalite test böceklerde (LC50) imidacloprid gibi neonicotinoids de dahil olmak üzere birçok pestisit arı ekmek içinde gözlenen daha çok daha yüksek konsantrasyonlarda için zararlı ve6 balmumu ve ne daha yüksek bir "alan gerçekçi" aralığı7kabul. Bununla birlikte, son iş koloni düzey8, 5 milyar (app)9parça olarak düşük konsantrasyonlarda için bile önemli tarım ilaçları sublethal maruz etkileri göstermektedir.
Bal arı kolonileri anılacaktır "superorganisms" bireysel bir hayvan, gıda tedarik, üreme, (hangi bal arı kolonileri kuralları koloni fisyon) dahil olmak üzere birçok işlev ilişkili olduğundan ve sıcaklık kontrolü, tarafından yürütülen Yetişkin işçi arılar10,11,12,13,14grupları. Bal arı kolonileri, organizmalar kabul çalışma için eşsiz bir fırsat koloniler destek yapıları demonte çünkü inceledi ve ile yeniden birleştirilen dikkatle, az veya hiç olumsuz etkileri yapılırsa sunuyoruz. Arıcılar ve araştırmacılar tarafından sökülmesi kurdeşen onları incelemek için diğer şeyler, varlığı ve gıda mağazaları, damızlık ve diğer faktörler15miktarı Kraliçe, zararlıları ve patojenler, yeterliliği durumunu arasında bu avantajlarından yararlanın. Çoğu homeotherms, aksine onlar genellikle sabit ve gıda mesafelerde 10 km16toplayabilir forager arılar dağıtarak kaynakları elde etmek, arı kolonileri başka bir önemli özelliği sahip. Arı kovanlarını böylece elektronik ölçeklerde süresiz olarak korunabilir ve elde edilen sürekli ağırlık veri etkinlik yiyecek arama, başarı yiyecek arama, kaynıyor, şurubu tüketimi, öldürücü ve sublethal tatlım Muhafazası üzerinde bilgi sağlamak için gösterilen böcek ilacı etkileri, haşere istila ve9,17,18,19,20soyuyor. Koloninin damızlık, dahil olmak üzere tüm parçaları erişilebileceği için Algılayıcılar, sıcaklık, nem, CO2, ses ve diğer faktörler için kovan içinde yüklenebilir ve sağlık ve durum koloninin bilgilendirmek sürekli veri elde etmek için kullanılan 21.
Yetişkin arı ve damızlık nüfus tahminleri kritik değil, pek çok sürekli veri yorumlama için yararlıdır. Görsel Değerlendirmeler hızlı ve yaygın olarak alan çalışmaları22 uygulanır ancak eksiklikleri var. Görsel denetimler genellikle gün boyunca yapılır ve böylece önemli bir parçası olan nüfus23oluşturabilirsiniz yiyecek arılar için hesap yapmak. Hassasiyet ve doğruluk tahminleri görsel denetimler üzerinden Ayrıca eğitim ve deneyim denetçi(ler) bağlıdır. Özellikle kovan müfettişleri farkındayız nesnellik diğer bir faktör, kurdeşen hangi tedavi gruplarında olan ise; Dağıtım hata ile ilgili varsayımlar bu tür önlemlerin haklı çıkarmak zor olabilir.
Kovan kilo alımı, yiyecek nüfus ve kovan içinde sıcaklık, birkaç örnek sağlamak için boyutu oranı bu yüzden ölçme ve koloni boyutu için sık sık büyük ölçüde kontrol irili ufaklı kolonileri arasında kantitatif farklı olması beklenen randomize deneyler tedavisinin etkileri algılama kolaylaştırır. Araştırma amaçlı yetişkin arılar kesin ve objektif ölçüsü toplam kovan arasındaki fark ağırlık bir süreyi sırasında gibi gece ve ağırlık (dahil olmak üzere tüm kovan parçaların toplamı ilke tabanlı geliştirilmiştir woodenware, balmumu, bal ve damızlık) toplam yetişkin arı ağırlığı kitle. Çerçeveler tartma ve damızlık yığın çerçeve fotoğraf kullanarak ölçüm, gıda kaynakları aynı şekilde boş çerçeve ve balmumu ağırlıkları için kontrol edildikten sonra damızlık kitle çerçeve ağırlık üzerinden çıkararak tahmin edilebilir. Bu yöntemler görsel Değerlendirmeler alanında beklenen duyarlılık geliştirmek amaçlanmıştır.

<table><tbody><tr><td>Langstroth hive equipment (box)</td><td>Mann Lake Ltd, Hackensack, MN</td><td>KD-700</td><td></td></tr><tr><td>Langstroth hive equipment (frame)</td><td>Mann Lake Ltd, Hackensack, MN</td><td>WW-900</td><td></td></tr><tr><td>Langstroth hive equipment (lid and cover)</td><td>Mann Lake Ltd, Hackensack, MN</td><td>WW-302&lt;br/&gt; &amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Langstroth hive equipment (base)</td><td>Mann Lake Ltd, Hackensack, MN</td><td>WW-316</td><td></td></tr><tr><td>Langstroth hive equipment (internal feeder)</td><td>Mann Lake Ltd, Hackensack, MN</td><td>FD-505</td><td></td></tr><tr><td>Cordovan Italian queens and bee packages</td><td>C.F. Koehnen &amp;amp; Sons, Glenn, CA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Scale, bench (100 kg max. capacity): model B-2418&amp;nbsp;</td><td>TEKFA, Copenhagen, Denmark</td><td>discontinued</td><td></td></tr><tr><td>Scale, bench (100 kg max. capacity): Diamond Series</td><td>Avery Weigh-Tronix , Fairmont, MN</td><td>1824-200</td><td></td></tr><tr><td>Imidacloprid, analytical-grade CAS # 138261-41-3</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO 63103</td><td>37894</td><td></td></tr><tr><td>Electronic scale, precision (precision = 0.1 mg): Adventurer Pro 260</td><td>Ohaus,&amp;nbsp; Parsippany, NJ</td><td>AV264C</td><td></td></tr><tr><td>Electronic scale, portable (15 kg max. cap.): Ranger Count 3000</td><td>Ohaus, Parsippany, NJ</td><td>RC31P15</td><td></td></tr><tr><td>Thermocouple probe: TMC6-HD</td><td>Onset Computer Corp., Bourne, MA</td><td>TMC6-HD</td><td></td></tr><tr><td>Datalogger, 12-bit: Hobo U-12</td><td>Onset Computer Corp., Bourne, MA</td><td>U12-012</td><td></td></tr><tr><td>Temperature and r.h. datalogger: iButton Hygrochron</td><td>Baulkham Hills, NSW 2153, Australia</td><td>DS1923</td><td></td></tr><tr><td>Temperature datalogger: iButton Thermochron</td><td>Baulkham Hills, NSW 2153, Australia</td><td>DS1922L</td><td></td></tr><tr><td>Nalgene plastic bottle</td><td>Thermo Scientific, Rochester, NY</td><td>2104-0032</td><td></td></tr><tr><td>Tissue embedding cassette</td><td>Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA</td><td>B1000731WH</td><td></td></tr><tr><td>Digital camera: Pentax K-01</td><td>Ricoh Imaging Co., Ltd.</td><td>15241</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ version 1.47 software</td><td>W. Rasband, National Institutes of Health, USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge tubes, 50 ml</td><td>Fisher Scientific, Asheville, NC</td><td>14-959-49A</td><td></td></tr></tbody></table>

monitoring colony-level effects of sublethal pesticide exposure on honey bees

Tatlım sublethal pestisit maruz etkileri arı kolonileri önemli ama standart görsel değerlendirme yöntemleri kullanarak alan tespit etmek zor olabilir. Burada yığınlar ve kovan parçaları ağırlığında, kare fotoğraf çekimi ve kurdeşen yükleme ölçeklerde ve İç sensörleri ile yetişkin arılar, damızlık ve gıda kaynakları miktarlarını ölçmek için yöntemleri açıklanmaktadır. Bu periyodik değerlendirme verilerden sonra kovan ağırlık ve iç kovanın sıcaklığı ortalama ve günlük değişimleri veri çalışan ile birleştirilir. Sonuç veri kümeleri milyar başına 5 parça gibi düşük bir şeker şurubu içinde uygulanan imidacloprid koloni düzey etkileri algılamak için kullanılmaktadır. Amaç yöntemlerdir, küçük eğitim gerektirir ve sensör çıktı ve Fotoğraflar şeklinde kalıcı kayıt sağlar.

Bal arı kolonisi büyüme ve fenoloji, sürekli kilo kontrolü ile normal kovanı denetimleri kullanarak ölçülen imidacloprid 100 app, maruz kolonileri arasında önemli ölçüde daha düşük damızlık üretim saptandı. Kovan denetimler yetişkin arı kitleler önemli ölçüde 5 ila 100 app sublethal her iki konsantrasyonları maruz etkilenen değil, ama damızlık kare fotoğraf analizi ortaya 100 app tedavi damızlık üretiminde önemli ölçüde daha düşük (vardı gösterdi Şekil 1). Sürekli kovan ağırlık verilerini farklı koloni imidacloprid farklı konsantrasyonları maruz kovan grupları arasında büyüme oranları gösterdi. Sürekli kovan ağırlık verilerini iki parçaya ayrıldı: 25 koloni büyüme ve yiyecek başarı ve saatlik ham veri ve 25 ortalama çalışan h arasındaki fark ilgilidir, ortalama veri çalıştıran h saat veri değişimleri. Değişimleri veri günlük genlikleri etkinlik19,20 (Şekil 2) yiyecek arama için ilişkilidir. Zaman zaman Ürtiker ağırlığında ortalama ağırlığı farklılıklar bir noktada algılamış olabilir iken, sürekli ağırlığında koloni davranış hakkında bilgi için değişimleri veri sağlanan.
Tipik bir ticari kovanında orta çerçevenin üst Ray sıcaklık sensörleri için etkili bir yerdir. Yetişkin işçi arılar sömürgelerinde oluşturmak ve damızlık14 varlığında özellikle yüksek sıcaklık (33-36 ° C) ve kümenin kendisi gıda yararlanmak için mobil korumak kovan25,26farklı bölümlerinde depolar. Isı kaybını azaltmak için kümeler küme kutusunun üst orta mesafe nadiren büyük bu yüzden kovan, iki tarafın veya alt, gibi dış parçaları ile büyük bir kişi yüzey kaçının. Kuluçka kutusunun üst orta kıyasla kovan, üst orta bir dış çerçeve ve ikinci kutusunun ("süper") gibi diğer yerlerde yaz aylarında sıcaklık değişkenliği azalttı ve koşullar20düşüş olduğu gösterilmiştir. Hangi ortam sıcaklığı ve küme arasındaki farkı en büyük olması bekleniyor kış koşullarında, en yüksek sıcaklık ve düşük değişkenlik gösteren ortam koşullarına göre aynı konuma bulundu Kümenin kendisi (şekil 3 ve 4; en büyük katkı Tablo 1). Sıcaklık rejimleri farklılıkları yetişkin arı kitle (Tablo 2) farklılıkları atfedilen olabilir değil.
Sürekli ısı verileri için uygun sinüs eğrilerinin genlikleri ben de tedavi grubunda kontrol grubundan önemli ölçüde farklı iken önemli ölçüde daha yüksek 5 app tedavisinde 100 app tedavisinde 9 . Kovan içinde bu noktada daha değişken sıcaklıklar yüksek genlikleri gösterir yüzden genlikleri sıcaklık değişkenliği için doğrudan orantılıdır. Alt genlikleri 100 app tedavi grubuna (şekil 5) göre 5 App ve kontrol tedavi grupları daha yüksek damızlık üretiminde yansıtır. Bu kovan denetimler ve sürekli kovan ağırlık verilerini, ile birlikte bu sonuçlar, koloni düzeyi davranışı 100 app imidacloprid maruz önemli ölçüde etkilendi onaylayın.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56355/56355fig1.jpg"> 
Şekil 1: Yetişkin arı ve damızlık Önlemler. 0 (kontrol), içeren şurubu maruz colonies için Mayıs, 2014, için Mart 2015, muayene veri yığını 5 ila 100 app imidacloprid Tucson, AZ. yakınındaki (A)ortalama (+ SEM) toplam yetişkin arı kitle; (B) ortalama (+ SEM) damızlık yüzey alanı kapalı. Gri bölge tedavi dönemi (tedavi Sükroz şurubu 6 hafta boyunca kovan başına haftada 4-6 kg) gösterir. Tedavi grubu başına dört kolonileri; 100 app bir kolonide kış sırasında öldü. Yetişkin arı kitleler Ağustos ayında kaydedilmemiş olan. Veri burada daha önce yayınlandı ve burada izin9ile kullanılır. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56355/56355fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56355/56355fig2.jpg"> 
Resim 2 : Bal arı kovanı ağırlık veri. Aralık, 2014, 0, 5 ila 100 app imidacloprid Tucson, AZ. yakınındaki içeren şurubu maruz bal arı kolonileri için sürekli ağırlık veri Haziran (A)toplam kovan ağırlık (± SEM); (B) genlikleri sinüs eğrilerinin değişimleri ağırlık veri için aynı dönemine uygun. Gri bölge tedavi dönemi (tedavi Sükroz şurubu 6 hafta boyunca kovan başına haftada 4-6 kg) gösterir. Tedavi grubu başına dört kolonileri; 100 app bir kolonide kış sırasında öldü. Veri burada daha önce yayınlandı ve burada izin9ile kullanılır. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56355/56355fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56355/56355fig3.jpg"> 
Şekil 3: Kovan içinde sıcaklıkları farklı yerlerde. 3 sensör yerleri bal arı kovanlarını içinde günlük ortalama (± SEM) sıcaklık (° C). (A) 4 tek-box kurdeşen tutulur bir yüksek irtifa sitede (MLEM: 2412 m); ve (B) 3 kurdeşen tutulur bir daha düşük irtifa sitede (SRER: 719 m) yakınındaki Tucson, AZ Aralık 2013 Şubat 2014 için. Kurdeşen derin kutuları (43.65 l kapasiteli) ahşap iç kapakları ile donatılmış ve metal kaplı kapaklar teleskopik ahşap Langstroth vardı. Isıl ısı probları için kare çubuklar üst bağlı olduğunu ve bir tümleşik datalogger/sıcaklık sensörü orta çerçeve alt ray üzerinde yerleştirildi. Bu veri orta çerçeve sensör konumunda sürekli ortam sensörü konumlara kıyasla daha yüksek ve böylece sıcaklık yönetimi tarafından arı kolonileri hakkında bilgilendirici olduğunu göstermek. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56355/56355fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56355/56355fig4.jpg"> 
Şekil 4 : Kovan içinde farklı yerlerde sıcaklık değişkenliği. Günlük ortalama (± SEM) genlikleri sinüs c içinurves bal arı kovanlarını içinde 3 sensör yerleri için saatlik değişimleri sıcaklık veri için uygun. (A) 4 kurdeşen yüksek irtifa sitesinde yönü muhafaza (MLEM: 2412 m); ve (B) 3 kurdeşen tutulur bir daha düşük irtifa sitede (SRER: 719 m) yakınındaki Tucson, AZ Aralık 2013 Şubat 2014 için. Kurdeşen derin kutuları (43.65 l kapasiteli) ahşap iç kapakları ile donatılmış ve metal kaplı kapaklar teleskopik ahşap Langstroth vardı. Isıl ısı probları için kare çubuklar üst bağlı olduğunu ve bir tümleşik datalogger/sıcaklık sensörü orta çerçeve alt ray üzerinde yerleştirildi. Bu veri orta çerçeve sensör konumunda sürekli değişkenliği (sinüs eğrilerinin saatlik değişimleri veri için uygun genlik olarak ölçülür) daha düşük olduğunu göstermek ortam sensörü konumlara ve böylece hakkında bilgilendirici göre daha Sıcaklık yönetimi arı kolonileri tarafından. Ortam sıcaklığı (düz siyah çizgi) için teraziler her grafik sağ tarafta vardır. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56355/56355fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56355/56355fig5.jpg"> 
Şekil 5: Kovan içinde sıcaklık tedavi colonies için. Sürekli sıcaklık veri Haziran-Aralık, 2014, 0, 5 ila 100 app imidacloprid Tucson, az(a)ortalama kovan sıcaklık (± SEM); yakınındaki içeren şurubu maruz bal arı kolonileri için (B) genlikleri sinüs eğrilerinin değişimleri ısı verileri için aynı dönemine uygun. Gri bölge tedavi dönemi (tedavi Sükroz şurubu 6 hafta boyunca kovan başına haftada 4-6 kg) gösterir. Tedavi grubu başına dört kolonileri; 100 app bir kolonide kış sırasında öldü. Veri burada daha önce basılmış ve burada (Meikle vd izniyle kullanılır 2016a). <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56355/56355fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Karşılaştırma</td>
			<td>t Testi</td>
			<td>s. P</td>
			<td>Site</td>
			<td>Ortalama fark (° C)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poz 2 - poz 1</td>
			<td>2,05</td>
			<td>0.0485</td>
			<td>MLEM</td>
			<td>1.00 ±0.25</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>SRER</td>
			<td>4,38 ±0.12</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 - 3 poz poz</td>
			<td>0,84</td>
			<td>1</td>
			<td>MLEM</td>
			<td>2.05 ±0.21</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>SRER</td>
			<td>0,12 ±0.11</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tablo 1: Ortalama sıcaklık farkları ve farklı sensör durum bal arı kovanlarını zarfında arasındaki öğleden hoc karşılaştırmaları. Pozisyon 1: üst dış çerçeve; Pozisyonu 2: üst orta çerçeve; Pozisyon 3: alt orta çerçeve. 4 tek-box kovan bir yüksek irtifa sitede muhafaza (MLEM: 2412 m) ve 3 kovan bir daha düşük irtifa sitede muhafaza (SRER: 719 m) yakınındaki Tucson, AZ Aralık 2013 Şubat 2014 için. Kurdeşen derin kutuları (43.65 l kapasiteli) ahşap iç kapakları ile donatılmış ve metal kaplı kapaklar teleskopik ahşap Langstroth vardı. Isıl ısı probları 1 ve 2 konumlara bağlı olduğunu ve bir tümleşik datalogger/sıcaklık sensörü 3 konuma eklenir.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Grup</td>
			<td>Tarihi</td>
			<td>Ortalama (± SEM) Yetişkin arı kitle (g)</td>
			<td>Ortalama (± SEM) damızlık yüzey alanı (cm2)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MLEM</td>
			<td>18 Kasım 2013</td>
			<td>2119 ±412</td>
			<td>1372 ±396</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SRER</td>
			<td>15 Kasım 2013</td>
			<td>2270 ±312</td>
			<td>53 ±30</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MLEM</td>
			<td>13 Şubat 2014</td>
			<td>2171 ±105</td>
			<td>0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SRER</td>
			<td>11 Şubat 2014</td>
			<td>2027 ±487</td>
			<td>867 ± 79</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tablo 2: Ortalama yetişkin arı kitleler ve damızlık kitleler, burada, dört kovanlar bir yüksek irtifa sitede muhafaza için açıklanan protokolleri kullanarak tahmini (MLEM: 2412 m); ve üç kovan bir daha düşük irtifa sitede (SRER: 719 m) yakınındaki Tucson, AZ Aralık 2013 Şubat 2014 için. Kurdeşen derin kutuları (43.65 l kapasiteli) ahşap iç kapakları ile donatılmış ve metal kaplı kapaklar teleskopik ahşap Langstroth vardı. Isıl ısı probları 1 ve 2 konumlara bağlı olduğunu ve bir tümleşik datalogger/sıcaklık sensörü 3 konuma eklenir.

Watch this Scientific Journal Video about Monitoring Colony-level Effects of Sublethal Pesticide Exposure on Honey Bees at JoVE.com

Monitoring Colony-level Effects of Sublethal Pesticide Exposure on Honey Bees

Tarım ilaçları sublethal doz koloniler sadece periyodik veya görsel yöntemlerle tespit etmek zordur bir şekilde etkileyebilir. Toplam yetişkin arı kitle, ölçmek için yöntemleri damızlık ve gıda kaynakları yığınlar ve kovan parçaları tartı, kare fotoğraf çekimi ve sensörler, yükleme tarafından sağlanmaktadır. Veri analizi de ele.

Bal arıları üzerinde Sublethal pestisit pozlama koloni düzeyi etkilerinin izlenmesi

The effects of sublethal pesticide exposure to honey bee colonies may be significant but difficult to detect in the field using standard visual assessment ...

monitoring-colony-level-effects-sublethal-pesticide-exposure-on-honey

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Biology

9.0K Görüntüleme.  Carl Hayden Bee Research Center. Tarım ilaçları sublethal doz koloniler sadece periyodik veya görsel yöntemlerle tespit etmek zordur bir şekilde etkileyebilir. Toplam yetişkin arı kitle, ölçmek için yöntemleri damızlık ve gıda kaynakları yığınlar ve kovan parçaları tartı, kare fotoğraf çekimi ve sensörler, yükleme tarafından sağlanmaktadır. Veri analizi de ele.

Video: Monitoring Colony-level Effects of Sublethal Pesticide Exposure on Honey Bees

Empirical, Metagenomic, and Computational Techniques Illuminate the Mechanisms by which Fungicides Compromise Bee Health

Growers often use fungicide sprays during bloom to protect crops against disease, which exposes bees to fungicide residues. Although considered &#34;bee-safe,&#34; there is mounting evidence that fungicide residues in pollen are associated with bee declines (for both honey and bumble bee species). While the mechanisms remain relatively unknown, researchers have speculated that bee-microbe symbioses are involved. Microbes play a pivotal role in the preservation and/or processing of pollen, which serves as nutrition for larval bees. By altering the microbial community, it is likely that fungicides disrupt these microbe-mediated services, and thereby compromise bee health. This manuscript describes the protocols used to investigate the indirect mechanism(s) by which fungicides may be causing colony decline. Cage experiments exposing bees to fungicide-treated flowers have already provided the first evidence that fungicides cause profound colony losses in a native bumble bee (Bombus impatiens). Using field-relevant doses of fungicides, a series of experiments have been developed to provide a finer description of microbial community dynamics of fungicide-exposed pollen. Shifts in the structural composition of fungal and bacterial assemblages within the pollen microbiome are investigated by next-generation sequencing and metagenomic analysis. Experiments developed herein have been designed to provide a mechanistic understanding of how fungicides affect the microbiome of pollen-provisions. Ultimately, these findings should shed light on the indirect pathway through which fungicides may be causing colony declines.

Microbial consortia within bumble bee hives enrich and preserve pollen for bee larvae. Using next generation sequencing, along with laboratory and field-based experiments, this manuscript describes protocols used to test the hypothesis that fungicide residues alter the pollen microbiome, and colony demographics, ultimately leading to colony loss.

Ampirik, Metagenomic ve bilgisayar teknikleri mekanizma hangi mantar ilaçları uzlaşma arı sağlık ile aydınlatmak

Growers often use fungicide sprays during bloom to protect crops against disease, which exposes bees to fungicide residues. Although considered ...

Çevre

Evaluating the Effect of Environmental Chemicals on Honey Bee Development from the Individual to Colony Level

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be brought back to the beehive after the bees have foraged on flowers that have been sprayed with pesticides. Pesticide contaminated food can be exchanged between workers which then feed larvae and therefore can potentially affect the development of honey bees. Thus, residual pesticides in the environment can become a chronic damaging factor to honey bee populations and gradually lead to colony collapse. In the presented protocol, honey bee feeding methods are described and applied to either an individual honey bee or to a colony. Here, the insect growth regulator (IGR) pyriproxyfen (PPN), which is widely used to control pest insects and is harmful to the development of honey bee larvae and pupae, is used as the pesticide. The presenting procedure can be applied to other potentially harmful chemicals or honeybee pathogens for further studies.

Herein we present a method to feed pesticide contaminated food to both an individual honey bee and a beehive colony. The procedure evaluates the pesticide effect on individual honey bees by in vivo feeding of basic larval diet and also on the natural condition of beehive colony.

Koloni Düzeyde Bireysel olan Bal Arısı Kalkınma Çevre Kimyasalların Etkisinin Değerlendirilmesi

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be ...

In Vitro Rearing of Solitary Bees: A Tool for Assessing Larval Risk Factors

Although solitary bees provide crucial pollination services for wild and managed crops, this species-rich group has been largely overlooked in pesticide regulation studies. The risk of exposure to fungicide residues is likely to be especially high if the spray occurs on, or near host plants while the bees are collecting pollen to provision their nests. For species of Osmia that consume pollen from a select group of plants (oligolecty), the inability to use pollen from non-host plants can increase their risk factor for fungicide-related toxicity. This manuscript describes protocols used to successfully rear oligolectic mason bees, Osmia ribifloris sensu lato, from egg to prepupal stage within cell culture plates under standardized laboratory conditions. The in vitro-reared bees are subsequently used to investigate the effects of fungicide exposure and pollen source on bee fitness. Based on a 2 &#215; 2 fully crossed factorial design, the experiment examines the main and interactive effects of fungicide exposure and pollen source on larval fitness, quantified by prepupal biomass, larval developmental time, and survivorship. A major advantage of this technique is that using in vitro-reared bees reduces natural background variability and allows the simultaneous manipulation of multiple experimental parameters. The described protocol presents a versatile tool for hypotheses testing involving the suite of factors affecting bee health. For conservation efforts to be met with significant, lasting success, such insights into the complex interplay of physiological and environmental factors driving bee declines will prove to be critical.

In Vitro Rearing of Solitary Bees: A Tool for Assessing Larval Risk Factors

Fungicide sprays on flowering plants may expose solitary bees to high concentrations of pollen-borne fungicide residues. Using laboratory-based experiments involving in vitro-reared bee larvae, this study investigates the interactive effects of consuming fungicide-treated pollen derived from host and non-host plants.

Vitro Yalnız arı yetiştirme: larva Risk faktörleri değerlendirmek için bir araç

Although solitary bees provide crucial pollination services for wild and managed crops, this species-rich group has been largely overlooked in pesticide ...

Monitoring Acupuncture Effects on Human Brain by fMRI

Functional MRI is used to study the effects of acupuncture on the BOLD response and the functional connectivity of the human brain.  Results demonstrate that acupuncture mobilizes a limbic-paralimbic-neocortical network and its anti-correlated sensorimotor/paralimbic network at multiple levels of the brain and that the hemodynamic response is influenced by the psychophysical response.  Physiological monitoring may be performed to explore the peripheral response of the autonomic nerve function. This video describes the studies performed at LI4 (hegu), ST36 (zusanli) and LV3 (taichong), classical acupoints that are commonly used for modulatory and pain-reducing actions. Some issues that require attention in the applications of fMRI to acupuncture investigation are noted.

FMRI and physiological monitoring is used to study the effects of Acupuncture on the central and peripheral nervous systems. Acupuncture mobilizes a limbic-paralimbic-neocortical network, with great overlap with the default mode network, to modulate neurological activity, possibly related to its autonomic effect in the peripheral nervous system.

FMRI İnsan Beyninin izlenmesi Akupunktur Etkileri

Functional MRI is used to study the effects of acupuncture on the BOLD response and the functional connectivity of the human brain.  Results demonstrate ...

Biyoloji

Evaluating the Effect of Pesticides on the Larvae of the Solitary Bees

Current ecological risk assessments of pesticides on pollinators have primarily considered only laboratory conditions. For the larvae of solitary bees, ingestion of provisions contaminated with pesticides may increase the mortality rate of the larvae, decrease the collection rate and the population of adult solitary bees in the next year from a demographic perspective. But there are limited studies on the effects of pesticides on the larvae of solitary bees. Therefore, understanding how pesticides influence the larvae of solitary bees should be considered an integral part of pesticide ecological risk assessment. This study presents a method to expose the larvae of solitary bee, Osmia excavata, to lethal or sublethal doses of pesticide, tracking larval weight gain, developmental duration, eclosion ability, and food consumption efficiency conversion of ingested food. To demonstrate the effectiveness of this method, the larvae of O. excavata were fed with provisions containing acute lethal and sublethal doses of chlorpyrifos. Then, the above indexes of the treated larvae were investigated. This technique helps to predict and mitigate the risk of pesticides to pollinators.

The present protocol explains a method to feed pesticide-contaminated provisions to the larvae of the solitary bees, Osmia excavata. The procedure examines the ecotoxicity of the pesticide to the larvae of the solitary bees.

Pestisitlerin yalnız arıların larvaları üzerindeki etkisinin değerlendirilmesi

Current ecological risk assessments of pesticides on pollinators have primarily considered only laboratory conditions. For the larvae of solitary bees, ...

Biyokimya

Studying the Effects of Matrix Stiffness on Cellular Function using Acrylamide-based Hydrogels

Tissue stiffness is an important determinant of cellular function, and changes in tissue stiffness are commonly associated with fibrosis, cancer and cardiovascular disease1-11. Traditional cell biological approaches to studying cellular function involve culturing cells on a rigid substratum (plastic dishes or glass coverslips) which cannot account for the effect of an elastic ECM or the variations in ECM stiffness between tissues. To model in vivo tissue compliance conditions in vitro, we and others use ECM-coated hydrogels. In our laboratory, the hydrogels are based on polyacrylamide which can mimic the range of tissue compliances seen biologically12. "Reactive" cover slips are generated by incubation with NaOH followed by addition of 3-APTMS. Glutaraldehyde is used to cross-link the 3-APTMS and the polyacrylamide gel. A solution of acrylamide (AC), bis-acrylamide (Bis-AC) and ammonium persulfate is used for the polymerization of the hydrogel. N-hydroxysuccinimide (NHS) is incorporated into the AC solution to crosslink ECM protein to the hydrogel. Following polymerization of the hydrogel, the gel surface is coated with an ECM protein of choice such as fibronectin, vitronectin, collagen, etc.
The stiffness of a hydrogel can be determined by rheology or atomic force microscopy (AFM) and adjusted by varying the percentage of AC and/or bis-AC in the solution12. In this manner, substratum stiffness can be matched to the stiffness of biological tissues which can also be quantified using rheology or AFM. Cells can then be seeded on these hydrogels and cultured based upon the experimental conditions required. Imaging of the cells and their recovery for molecular analysis is straightforward. For this article, we define soft substrata as those having elastic moduli (E) &lt;3000 Pascal and stiff substrata/tissues as those with E &gt;20,000 Pascal.

The effect of substrata stiffness on cellular function can be modeled in vitro using polyacrylamide hydrogels of varying compliances.

Matrix Rijitlik Akrilamid tabanlı Hidrojeller kullanarak Hücresel Fonksiyon Üzerindeki Etkilerinin incelenmesi

Tissue stiffness is an important determinant of cellular function, and changes in tissue stiffness are commonly associated with fibrosis, cancer and ...

Preparation of Single-cohort Colonies and Hormone Treatment of Worker Honeybees to Analyze Physiology Associated with Role and/or Endocrine System

Honeybee workers are engaged in various tasks related to maintaining colony activity. The tasks of the workers change according to their age (age-related division of labor). Young workers are engaged in nursing the brood (nurse bees), while older workers are engaged in foraging for nectar and pollen (foragers). The physiology of the workers changes in association with this role shift. For example, the main function of the hypopharyngeal glands (HPGs) changes from the secretion of major royal jelly proteins (MRJPs) to the secretion of carbohydrate-metabolizing enzymes. Because worker tasks change as the workers age in typical colonies, it is difficult to discriminate the physiological changes that occur with aging from those that occur with the role shift. To study the physiological changes in worker tissues, including the HPGs, in association with the role shift, it would be useful to manipulate the honeybee colony population by preparing single-cohort colonies in which workers of almost the same age perform different tasks. Here we describe a detailed protocol for preparing single-cohort colonies for this analysis. Six to eight days after single-cohort colony preparation, precocious foragers that perform foraging tasks earlier than usual appear in the colony. Representative results indicated role-associated changes in HPG gene expression, suggesting role-associated HPG function. In addition to manipulating the colony population, analysis of the endocrine system is important for investigating role-associated physiology. Here, we also describe a detailed protocol for treating workers with 20-hydroxyecdysone (20E), an active form of ecdysone, and methoprene, a juvenile hormone analogue. The survival rate of treated bees was sufficient to examine gene expression in the HPGs. Gene expression changes were observed in response to 20E- and/or methoprene-treatment, suggesting that hormone treatments induce physiological changes of the HPGs. The protocol for hormone treatment described here is appropriate for examining hormonal effects on worker physiology.

Here we describe our detailed protocol for the preparation of single-cohort honeybee colonies&#160;&#8211; a useful tool for analyzing the role-associated worker physiology. We also describe detailed protocols for treating workers with juvenile hormone and ecdysone to evaluate the involvement of these hormones in the regulation of worker behavior and/or physiology.

Tek kohort Kolonileri ve İşçi arıların Hormon Tedavisi hazırlanması Rolü ve / veya Endokrin Sistemi Fizyolojisi İlişkili Analiz

Honeybee workers are engaged in various tasks related to maintaining colony activity. The tasks of the workers change according to their age (age-related ...

Nörobilim

SwarmSight: Real-time Tracking of Insect Antenna Movements and Proboscis Extension Reflex Using a Common Preparation and Conventional Hardware

Many scientifically and agriculturally important insects use antennae to detect the presence of volatile chemical compounds and extend their proboscis during feeding. The ability to rapidly obtain high-resolution measurements of natural antenna and proboscis movements and assess how they change in response to chemical, developmental, and genetic manipulations can aid the understanding of insect behavior. By extending our previous work on assessing aggregate insect swarm or animal group movements from natural and laboratory videos using the video analysis software SwarmSight, we developed a novel, free, and open-source software module, SwarmSight Appendage Tracking (SwarmSight.org) for frame-by-frame tracking of insect antenna and proboscis positions from conventional web camera videos using conventional computers. The software processes frames about 120 times faster than humans, performs at better than human accuracy, and, using 30 frames per second (fps) videos, can capture antennal dynamics up to 15 Hz. The software was used to track the antennal response of honey bees to two odors and found significant mean antennal retractions away from the odor source about 1 s after odor presentation. We observed antenna position density heat map cluster formation and cluster and mean angle dependence on odor concentration.

This protocol describes steps for using the novel software, SwarmSight, for frame-by-frame tracking of insect antenna and proboscis positions from conventional web camera videos using conventional computers. The free, open-source software processes frames about 120 times faster than humans and performs at better than human accuracy.

SwarmSight: Gerçek zamanlı izleme böcek anten hareketleri ve hortum uzantısı refleks bir ortak hazırlık ve geleneksel donanım kullanarak

Many scientifically and agriculturally important insects use antennae to detect the presence of volatile chemical compounds and extend their proboscis ...

Collection and Identification of Pollen from Honey Bee Colonies

Researchers often collect and analyze corbicular pollen from honey bees to identify the plant sources on which they forage for pollen or to estimate pesticide exposure of bees via pollen. Described herein is an effective pollen-trapping method for collecting corbicular pollen from honey bees returning to their hives. This collection method results in large quantities of corbicular pollen that can be used for research purposes. Honey bees collect pollen from many plant species, but typically visit one species during each collection trip. Therefore, each corbicular pollen pellet predominantly represents one plant species, and each pollen pellet can be described by color. This allows the sorting of samples of corbicular pollen by color to segregate plant sources. Researchers can further classify corbicular pollen by analyzing the morphology of acetolyzed pollen grains for taxonomic identification. These methods are commonly used in studies related to pollinators such as pollination efficiency, pollinator foraging dynamics, diet quality, and diversity. Detailed methodologies are presented for collecting corbicular pollen using pollen traps, sorting pollen by color, and acetolyzing pollen grains. Also presented are results pertaining to the frequency of pellet colors and taxa of corbicular pollen collected from honey bees in five different cropping systems.

We describe methods for collecting corbicular pollen from honey bees as well as protocols for color sorting, acetolysis, and microscope slide preparation of pollen for taxonomic identification. In addition, we present pellet color and taxonomic diversity of corbicular pollen collected from five cropping systems using pollen traps.

Bal Arısı Kolonilerinden Polenlerin Toplanması ve Tanımlanması

Researchers often collect and analyze corbicular pollen from honey bees to identify the plant sources on which they forage for pollen or to estimate ...

Assessing Agrochemical Risk to Mated Honey Bee Queens

Current risk assessment strategies for honey bees rely heavily upon laboratory tests performed on adult or immature worker bees, but these methods may not accurately capture the effects of agrochemical exposure on honey bee queens. As the sole producer of fertilized eggs inside a honeybee colony, the queen is arguably the most important single member of a functioning colony unit. Therefore, understanding how agrochemicals affect queen health and productivity should be considered a critical aspect of pesticide risk assessment. Here, an adapted method is presented to expose honey bee queens and worker queen attendants to agrochemical stressors administered through a worker diet, followed by tracking egg production in the laboratory and assessing first instar eclosion using a specialized cage, referred to as a Queen Monitoring Cage. To illustrate the method&#39;s intended use, results of an experiment in which worker queen attendants were fed diet containing sublethal doses of imidacloprid and effects on queens were monitored are described.

This protocol was developed to enhance the understanding of how agrochemicals affect honey bee (Apis mellifera) reproduction by establishing methods to expose honey bee queens and their worker caretakers to agrochemicals in a controlled, laboratory setting and carefully monitoring their relevant responses.

ÇiftLeşme Bal Arısı Kraliçeleri için Tarımsal Kimyasal Riskin Değerlendirilmesi

Current risk assessment strategies for honey bees rely heavily upon laboratory tests performed on adult or immature worker bees, but these methods may not ...