Name: spatiotemporal mapping of motility in ex vivo preparations of the intestines
Uploaded: 2016-01-27T16:00:00.000+00:00
Duration: 12 min
Description: Watch this Scientific Journal Video about Spatiotemporal Mapping of Motility in Ex Vivo Preparations of the Intestines at JoVE.com

DMK Virginia Commonwealth University NIGMS (K12GM093857) bir IRACDA hibe ile desteklenmiştir. Bu çalışma John R. Grider için NIDDKD hibe DK34153 tarafından desteklenmiştir.

Virginia Commonwealth Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) Bu protokolde kullanılan tüm hayvan ve ötenazi prosedürleri onayladı. Çözümler 1. Hazırlık <ol><li> Krebs tamponu 4 L hazırlayın ([mM] oluşan: 118 NaCl, 4.75 KCl, 1.19 KH 2 PO 4, MgSO 4 1.2, 2.54 CaCl2, 25 NaHCO 3, 11 glukoz). Deiyonize su hacmine uygun koymak her katı kimyasal, uygun miktarlarda tartılır ve çözüm netleşene kadar bir vorteks kullanarak karıştırın. </li><li> Daha sonra, carboxygen (% 95 O2,% 5 CO2) 30 dakika süre ile ısıtılarak 37 ° C ile çözelti havalandırır. </li><li> HCI kullanılarak ve gerekirse 37 ° C (organ banyosunda aynı sıcaklık), pH 7.4 ayarlarken çözeltinin pH belirler. Deneyin uzunluğu boyunca Krebs tampon sürekli carboxygenated ve 37 ° C &#39;de muhafaza edin. </li><li> Koymakperistaltik pompa tampon rezervuar ve dönüş içine peristaltik pompalar giriş ve çıkış boruları boru ve organ banyosu sisteminde tampon perfüzyon başlayacak. Not: Tampon ilk perfüzyon tamponuna organ banyoları veya kimyasal madde içine ya da doku ilave kadar orijinal kabına geri pompalanabilir. Bu deney için gerekli olan tampon miktarını azaltır. Hava parası ve giden tamponlar karışmaz, böylece daha sonra giden tampon perfüzyon hatları boş bir kaba yerleştirin konulmalıdır. </li><li> Organ banyoları içinde arabellek olur ve deney süresince 37,0 ± 0,5 ° C kalacak şekilde su sirkülasyonu ısıtma sistemi sıcaklık kalibre edin. Onay ve gerekirse, en az bir kez daha adım 2.8 banyo doku segmentleri yerleştirmeden önce, Krebs tampon pH değiştirin. </li></ol> Dokuların 2. Hazırlık <ol><li> Euthanizekapalı bir odacık veya yerel hayvan bakımı ve kullanımı komitesi tarafından onaylanmış bir başka ötenazi yönteminde karbondioksit inhalasyon / boğulma kullanımı ile kobay. </li><li> Hayvanın ötenazi onayladıktan sonra, diseksiyon makas ile uzunlamasına karın duvarı açın ve bağırsakları yerini kesti. Çekum maruz yardımcı olmak için ince bağırsağa bağlı mezenter kesin. NOT: Bir hayvan bakımı ve kullanımı komitesi tarafından onaylanmış olarak ötanazi gibi iki taraflı torakotomi gibi ikincil yordamı gerçekleştirmek onaylamak için. </li><li> Çekum distal ucunu bulun ve çekum ile bağlantısı hemen distalinde proksimal kolon transect. Sonra proksimal kolonda ilk transection tekrar ~ 8 cm distalinde transect. </li><li> Daha fazla diseksiyon için (bölüm 1 anlatılmıştır) ısıtılmış ve carboxygenated Krebs çözeltisi içine kolon doku yerleştirin. Diseksiyon banyoya kolon Pin ve mümkün olduğunca mezenter ve yağ çıkarmak için makas küçük bir kümesi kullanın. </li><li> H iseeated diseksiyon tepsi (doku perforasyonu önlemeye yardımcı olmak için) bir kör uç katetere bağlanmış bir şırınga kullanılarak lümen boyunca Krebs tamponu hafifçe perfüzyon tüm lümen içi içerik kaldırmak. Bu perfüzyon işlemi sırasında parçanın aşırı distansiyonu kaçının. </li><li> İki yangın cilalı cam tüp kateterler (3 mm çapında) edinin ve doku lümen giren cam tüp kısmı etrafında polietilen boru kısa bir parça (~ 3 mm uzunluğunda ve ~ 3 mm çapında) yerleştirin. NOT: Bu dikiş güvenliğin sağlanması için, doku ve cam tüpün etrafına yerleştirilir ve hazırlama organ banyosu içine ve doku uzunluk değişimleri sırasında yerleştirilir olarak kayma kullanılmasını sağlar. </li><li> Doku hazırlık sözlü ucunu tek kateter takın ve bir cerrahın düğüm kullanarak kateteri çevreleyen borunun küçük bir parça etrafında bir dikiş kravat. Yavaşça düğüm rahat olduğundan emin olmak için tekrar dışarı kateteri çekmeye çalışmayın. Ardından, diğer kateter giren t aynı eylemi gerçekleştirmekO doku ucunu aboral. </li><li> Kateterler güvencesindedir sonra organ banyolarına birine diseksiyonu tepsiden tüm hazırlık (doku artı kateterler) hareket ettirin. Kullanıcıya uzak olan ağız ucu banyosuna hazırlık yerleştirin. </li><li> Sonraki iki önerilen yöntemlerden biri ile organ banyosuna cam tüp kateterlerini / montaj sabitleyin. NOT: Tüpler deneme sırasında uzunluğunu değiştirme veya banyosunda Krebs tampon yüzey seviyesinden gelen doku segmenti engellemek cam Güvenliğini. <ol><li> Seçenek A: kalıpçı kil veya plastik klibin kullanımı yoluyla plastik bir organ banyosunun tarafının üstüne cam tüp üst kısmını sabitleyin. </li><li> Seçenek B: plastik klipsler kullanılarak organ banyosu hazırlık yukarıdaki kameralar tutun metal direklere cam tüpler sabitleyin. </li></ol></li><li> Kateterler banyo tespit edildikten sonra, her bir kateterin açık ucuna bir boru 5 cm&#39;lik parça eklemek. Oral kediheter, proksimal kolon segmentinin lümeni içine tampon enjekte etmek için kullanılacak bir 10 ml şırınga, bu boru ekleyin. Aboral kateter için, boru bu parça lümen çıkış, bir toplama konteynerine (50 mi beher, hazne, vs.) içine yönlendirilir sağlayacaktır. </li><li> Oral ucuna bağlanmış bir şırınga kullanarak, yavaş çalkalama doku içinden akabileceği bir sıvı sağlamak için doku lümen yoluyla Krebs tampon ısıtıldı. Akış sıvı aboral kateter çıkan ile teyit edilir. Doku 30 dakika boyunca equilibrates ise video kayıt sistemi (protokol bölüm 3) kalibre. </li></ol> Video kayıt sistemi 3. Kalibrasyon <ol><li> Parlaklık ve kontrast ve yazılımı kullanarak yatay mesafe için kamera yüksekliği yerleştirme, video ayarlarını ayarlayın. NOT: intraluminal perfüzyon kurulumları için en iyi ayarları pelet sevk 13 hızını belirlemek için kullanılan ayarlardan daha farklıdır. </li><li> CliKamera için deney sekmesinde ck kalibre edilmesi. Ardından &#39;Dosya&#39; menüsünden &#39;Kalibre&#39; seçeneğini tıklayın. </li><li> Video &#39;iş istasyonu kalibre&#39; penceresinde göründüğünde, görüntü kolon lümen içine yerleştirilen kateter uçlarını içeren bir yükseklikte kamerayı ayarlayın. </li><li> Sonra, her banyo bağlı saydam cetvel sticker kullanılarak görüntüde inceledi yatay mesafeyi kalibre. NOT: Bu kalibrasyon lümen çapı ve kasılma dalgalarının hızı, daha sonra yazılım hesaplamalar için çok önemlidir. </li><li> Onlar kamera görüntüsünde cetvele göre 10 mm aralıklı böylece aynı &#39;kalibre iş istasyonu&#39; penceresinde, kırmızı dikey kurallar ayarlayın. Ardından, &#39;mesafe imleçleri&#39; penceresine uygun mesafeyi (10 mm) yazıp &#39;CAL&#39; düğmesine tıklayın. </li><li> Sonraki kazanç, parlaklığını ayarlayın ve böylece kamera görüntüsünü değiştirmek için &#39;iş istasyonu kalibre&#39; pencere içinde sürgü kepenkDoku segmenti hafif bir arka plan üzerinde koyu silueti olarak görünür. NOT: Şekil 4 bu kalibrasyon prosedürünün iyi ve kötü örnekleri gösterilmektedir. </li><li> Düzgün Görüntüyü ayarlamak için, aynı zamanda kameranın kendisi odak ve diyafram düğmeleri ayarlayın. </li><li> Kalibrasyon tamamlanmıştır. Ardından &#39;EXIT&#39; düğmesini tıklayın nihayet pop-up &#39;Tamam&#39; ı tıklatın ve &#39;Kaydet&#39; seçeneğini tıklayın. </li></ol> 4. Genel deney prosedürleri <ol><li> Kamera kalibrasyon prosedürleri ve doku dengeleme 30 dakika tamamlandıktan sonra, her bir deney protokolünde denemeler adlandırın. Deneme adları adı ve bileşik ve sıvı hacmi konsantrasyonu dayalı olabilir lümen deney bölümü sırasında doku parçasının içine perfüze edilir. </li><li> Daha sonra, boru kelepçesinin kullanımı ile aboral kateterden çıkan boru tıkamak. NOT: Bu fu sırasında aboral ucu çıkmadan lümen sıvı engellerrther deney, şişkinlik çeşitli düzeylerde kışkırtmak için lümen belirli birimlerin kullanımına izin veren (Şekil 1). </li><li> Kobay ex vivo hazırlık içinde itici kasılmalar başlatmak için yeterli distansiyonu sağlamak için proksimal kolon lümeninde yaklaşık 0.7 ml Krebs tampon enjekte edilir. NOT: Bu birim biraz farklı olabilir (0,1-0,2 ml) olduğu gibi segmentin toplam uzunluğu ve organ banyosu içinde segmente uygulanan germe miktarı ile ilgili olarak. </li><li> Bölüm luminal sıvı tarafından şişmiş sonra, fotoğraf makinesini açın ve sonra zaman önceden belirlenmiş bir süre (örneğin, 10 dakika) için motilite kaydedin. <ol><li> Özellikle, deneysel kamera görünümünü açmak ve daha sonra kamera alanını görüntülemek için &quot;ON&quot; konumuna geçiş anahtarı tıklatın uygun adlı deneme çift tıklatın. Bir (kamera kayıt ise kayıt tuşu kırmızı kalacaktır) Sonra, kayıt başlatmak için kayıt düğmesini tıklatınnd Kaydı durdurmak için tekrar kayıt düğmesine tıklayın. </li></ol></li><li> Bu ilk kontrolü şişme deneme sonunda, doku segmenti lümen dışında distending sıvıyı itmek için izin aboral kateterin kapatılmasıy kelepçeyi çıkarın / gevşetin. </li><li> Bir 10 dakika yeniden dengeleme döneminden sonra, kısmın (örneğin, kısa zincirli yağ asitleri veya dekanoik itici motilitesini değiştirmek için lümen sıvısı içindeki besin, biyolojik olarak aktif ajanlarla, ilaçlarla ya da agonist / antagonistleri, çeşitli herhangi biri ile bu işlemi tekrar edin asit) 10,18. <ol><li> Kabarcık ilerleme lümen Kolon yeni çözümün perfüzyon üzerine kullanıcı zaman deneysel sıvıyı bilmek sağlayacak, böylece yeni deneysel sıvı kolon segmenti girdiğinde göstergesi yardımcı olmak için, şırınga limanı yakınlarında bir hava kabarcığı bırakın lümen ulaşmıştır. </li><li> Kabarcık sayesinde tamamen itti kadar açık aboral kateter lümen içi perfüzyon devamlümen perfüzyon sistemi (perfüzat 2-3 ml gerektirebilir). Daha sonra, doku kademeli kadar 5 dakika boyunca açık aboral kateterden sıvı çıkarmak için izin verir. NOT: Bu işlemden sonra, lümen lümeni içine sıvının bilinen hacimde bir perfüzyon sağlayan sıvı ihmal edilebilir bir hacmi içerir. </li></ol></li><li> Yeniden tıkamak, bir boru kelepçesi kullanılarak aboral lümen kateter tüpü (adım 4.3 gibi) şırınga yoluyla kontrol koşulu olarak sıvıyı distending aynı hacimde enjekte. (Adım 4.5 gibi) kontrol Krebs durumuna daha sonra analiz ve karşılaştırma için deney süresince motilite desenleri kaydedin. </li><li> Tekrar bölümler 4.4 - Farklı lümen bileşikler veya aynı lümen bileşiğinin farklı konsantrasyonları ile protokol 4,7. </li></ol> Spatiotemporal Maps 5. İnşaatı (stmaps) <ol><li> Denemeyi Kayıt tamamlandıktan sonra, analiz rüzgar açmak için belirli bir davanın adını çift tıklatınow bir STmap inşası için. </li><li> Video oynatma alanı içinde, analiz için görüntü uygun hale getirmek için analiz penceresindeki kontrast ve parlaklık sürgü ayarlamak (Açık zemin üzerine siyah doku silüet; Şekil 4). NOT: Kamera kalibrasyon görüntüsü yalnızca bu noktada daha az bir ölçüde değiştirilebilir deney başlamadan önce uygun şekilde yapılmamışsa. </li><li> Görüntü düzgün tezat sonra, analiz için doku bölgesini izole etmek ve eserler içeren alanları kaldırmak için video görüntüsü penceresindeki yatay ve dikey kırmızı kurallar ayarlayın. Ayrıca, başlangıç ​​belirleyerek kayıt uygun zaman dilimini seçmek ve analiz için zaman noktaları durdurun. <ol><li> Özellikle, analiz yazılımı içinde yeşil &#39;A&#39; ve sarı &#39;B&#39; düğmelerini kullanarak video içinde başlangıç ​​ve bitiş noktalarını işaretleyin. Analiz etmek, video segmentinin başında ve zaman kaydırıcısını ayarlayınn yeşil &#39;A&#39; düğmesine tıklayın. Ardından, analiz ve sarı &#39;B&#39; düğmesine tıklayın segmentinin sonuna kadar kaydırıcıyı ayarlayın. </li></ol></li><li> Sonraki, STmap penceresini açın ve &#39;kronometre&#39; düğmesine tıklayın &#39;Motor analizi&#39; sekmesini tıklayın. Kronometre tıkladıktan sonra, bir sonraki nesil STmap başlamak için kaydedilen filmin içindeki doku siyah silueti içinde çapraz imleci tıklayın. </li><li> Doku silueti crosshair&#39;i tıkladıktan sonra yazılım üretir ve video o bölge için STmap görüntüler. NOT: Bu analiz için seçilen videonun uzunluğuna bağlı olarak birkaç dakika sürebilir. </li><li> Görüntüyü ayarlamak için STmap ve kontrollerin büyütülmüş görüntüsünü görüntülemek için &#39;zoom&#39; tıklayın. <ol><li> Renk yerine gri tonlamalı olarak STmap görüntülemek için yeni oluşturulan pencerede &#39;renk&#39; seçeneğini tıklayın. Ayrıca, harita ve v içinde belirli piksel bir imleci edebilmek için &#39;Enable&#39; seçeneğini tıklayınspesifik doku bölgesi için lümen çapı değişimin bir izleme iew. Bittiğinde &#39;Çık&#39; ı tıklatın. </li></ol></li><li> Gazetelerde veya sunumlarda kullanılmak üzere bir STmap ihraç veya ardından &#39;Meta Dosyası&#39; İhracat Verileri &#39;seçerek ve ardından&#39; Dosya &#39;menüsünden seçerek ImageJ daha analiz etmek. Sonra bir .emf dosyası olarak kaydedilir STmap, isim ve &#39;Kaydet&#39; düğmesine tıklayın. </li><li> Alternatif olarak, ekran yakalayarak STmap görüntüleri kaydedin. Bu STmap sözde renkli sürümlerini kaydetmek için gereklidir. </li></ol> Stmaps içinde Kontraktil Dalga Hızının 6. Analizi <ol><li> Kasılma yayılması veya kasılma süresinin hızı analiz etmek, öncelikle tiff, gif, jpg, ya da seçtiğiniz bir dosya dönüştürme programı aracılığıyla ImageJ kabul olan bmp formatları STmap .emf dosyasını dönüştürmek. NOT: ImageJ yazılım stmaps bir .emf biçimi çıkışını açmıyor. <ol><li> Alternatively, kullanım ekran yakalama yazılımı ekranda bir STmap bir resim çekmek ve uygun bir dosya biçiminde kaydedebilirsiniz. </li></ol></li><li> Sonra ImageJ yeniden biçimlendirilmiş STmap açın ve ardından &quot;Eklentiler &#39;menüsünü seçerek&#39; açılış GIMMProcessor tarafından GIMMProcessor eklentisi açmak GIMMProcessor &#39;ve&#39; Ölçümleri Tablo &#39;pencereleri&#39;. Bu, hem açılacaktır. &#39; </li><li> Tıklayıp STmap sağ üst köşesindeki ölçek çubuğu ve tüm alanı sürükleyerek anahat kullanın, sonra ImageJ pencere içinde &#39;dikdörtgen seçim aracını tıklayın ve. O bölge seçildikten sonra, eklenti &#39;set kalibrasyon&#39; düğmesine tıklayın. Son olarak, ölçek çubuğu üzerindeki değerlere göre kalibrasyon kutusu içine uygun mesafeyi (mm) ve zaman (sn) takın ve &#39;Bitti&#39; düğmesine tıklayın. </li><li> Sonra, ImageJ penceresindeki çizgi çizim aracını tıklatın. Th açı boyunca yayılan bir daralma merkezinden geçen STmap bir çizgi çizintıklayıp STmap resmin üzerine sürükleyerek e eğimi. Alternatif olarak, kasılma süresini belirlemek için non-yayılan kasılma bir grup ile dikey bir çizgi çizin. </li><li> Hat uygun çekildikten sonra (tek satır bir anda çekilmiş olabilir), hattın yatay mesafe, dikey mesafenin ve eğimi bir okuma-out üretmek için eklenti &#39;ölçü almak&#39; düğmesine tıklayın; sırasıyla uzunluk (mm), zaman (sn) ve hız (mm / sn) karşılık gelir. Bu veriler &#39;Ölçümleri Tablo&#39; penceresinde görüntülenir. </li><li> Çizgi çizme tekrarlayın ve analiz verilen STmap içinde birden çok kez birkaç adım ve bir .gmd dosyası olarak kaydedebilirsiniz. Eklenti &#39;Kaydet&#39; düğmesini tıklayın ve dosyayı adlandırın. İşlemi tamamlamak için yeniden &#39;Kaydet&#39; i tıklatın. Bu veriler daha sonra başka çalışma verilerine kıyasla veya STmap çizgiler çekme yeniden kullanılabilir. </li></ol>

Catamount Research and Development, Inc., creator of the GIMM system, covered publication fees for this manuscript.

Intestinal motilite inceledi ve kayıt altına parametrelerin niteliğine göre bakış açılarının bir dizi tarif edilmiştir. Video kayıt ve uzaysal haritalama segmenti boyunca belirli noktalarda gut uzun kesimleri üzerinde genel hareketi ve / veya sevk analizinin yanı sıra faaliyet analizine olanak değerli bir araç olduğunu kanıtlamıştır. Yaklaşım iki kat olabilir video kayıt ve uzaysal haritalama alınan ve incelenen bölge ve lümen içeriğinin doğası yansımasıdır. Içerikleri daha çok yarı-katıdırlar burada lümen içeriği daha fazla sıvı ve proksimal kolonda olduğu bağırsak bölümlerinde, etkinlik bolus veya enfüzyon yolu ile sıvının lümen içi giriş yolu ile indüklenir. Bu, video kayıtları elde edilen uzaysal harita yukarıda tarif edildiği gibi, tüm segment hareketini temsil etmek üzere tasarlanmıştır. Buna karşılık, içerik daha sağlam olan uzak kolona ortalarından, aktivitesi bir dışkı Pelle sokulması ile başlatılırt (epoksi, doğal ya da suni pelet pelet kaplı) ve uzaysal harita Hoffman ve ark., 13 JOVE makalesinde tarif edildiği gibi kolon üzerinden topak hareketi yansıtacak şekilde tasarlanmıştır. Böylece deney ve analiz kurulumu çok önemlidir ve çalışılan uyaran ve bölgenin türüne bağlıdır. Bu nedenle, üretim ve sıvı kaynaklı bağırsak motilite Spatiotemporal haritaların analizi için kritik adımlar şunlardır: disseke dokudan mezenter 1) uygun kaldırma; 2) Kayıt önce uygun görüntü kalibrasyonu; STmap üretimi ve analizi sırasında eserler 3) Doğru kaldırma; 4) Analiz sisteminin düzgün kurulum; ve 5) kateterize ve onlara zarar vermeden kesimleri dikilmeye el becerisi kazanıyor. Lümen çapı stmaps kullanımı bağırsağın bir bölge üzerinde tam motilite kalıplarını görselleştirmek ve analiz etme yeteneği gelişmiş olsa da ile birleştiğinde, tekniği en iyi şekilde kullanılırbasınç veya kas fonksiyonel ölçümleri 2,15,20 daralma. Bazı kas kasılmaları hafif lümen çapı değiştirmek ve bazı stmaps (yani, myojenik dalgaların) görünür olabilirken Örneğin, aslında bağırsak içeriği 25 herhangi bir tahrik ya da karıştırma neden olmayabilir. Bu diğer fonksiyonel ölçümlere Bu tekniğin kapling olmadan bilinemez. Aynı zamanda, (bir pompa sistemi ile, yani kapalı bir lümen sistemi veya sabit lümen perfüzyon) Bu tür bir sistemde bir çok doku preparatları doğası stmaps içindeki eserler yol açar. Böylece, kullanıcı nedeniyle dokusunun yetersizlik kendi spesifik organ hazırlama ve deney verileri ve önlemek veya bu veri analizinde eserler (örneğin, mezenter kaynaklı dikey çizgiler veya koyu pikselleşmeyi dışlamak için şekillerde eserler yol açabilir nasıl farkında olmalıdır ) kapalı bir luminal hazırlık sisteminden sıvı sınırdışı. Bir luminal perfüzyon için birden fazla yöntem vardırkapalı bir sistem dışında bağırsak segmenti başvurunuz. Bir yöntem, bunun yerine hazırlama 8-10,30 anal ucunda yükseltilmiş bir boru ve / veya tek yönlü bir valf aracılığıyla sabit bir lümen içi / arka basınç sağlar açık bir sistem kullanılmasıdır. Bu sıvı itici kasılmalar sırasında hazırlık dışına hareket etmesine olanak sağlar. Sistem kurulumu lümen çapı değişiklikleri algılamak için esas olduğundan, büyük ölçüde lümen çapı etkilemez bu kasılmalar veya motilite desenleri genellikle bu protokolü tarafından görselleştirmek için zordur. STmap içinde piksel gölgelendirme değişiklikler lümen çapı değişikliklere dayalı olduğundan güçlü kasılmalar aynı kayıt içinde varsa, çapı büyük değişikliklere neden olmaz motilite desenleri bu yöntemde iyi görsel olmayacaktır. Yakın t kayıt video analiz hatları ayarlama, görselleştirme ve dalga-tipi daralma analizi (Şekil 3) anlatıldığı gibio doku duvar bu sorunu ortadan olabilir. Sadece minimal doku çapını değiştirmek kasılmaları görülebilmesi Bu yöntem, STmap içinde görüntülenen maksimum çapı azaltır. Bu sorunu çözmek için bir başka seçenek daha küçük kasılmalar daha kolayca görülebilir, böylece büyük ölçüde lümen çapı etkileyen kasılmalar dışlamak için, analiz video segment süresini değişiyor. Bu minimal kasılmalar ölçüde lümen çapı değiştirildi ayrı STmap benzer görünümlü lümen çapı değiştirir hareketlilik potansiyel probleme yol açar. Haritası üzerinde beyaz piksel belirlenmesi, belirli bir video en küçük çapa dayalı olmasıdır. Video (az veya dairesel kasın kasılması hiçbir) Başka bir videodan peristaltik kasılmalar benzer bakabilirsiniz ölçüde hazırlık çapını değiştirmez çok küçük kasılmalar içinde çapı çok değişkenlik yoksa. Bu nedenle, şekil dikkate almak önemlidirHaritanın sağ üst köşesindeki efsane. Maksimum ve minimum çapları arasındaki fark küçük ise o STmap gösterildiği gibi piksel gölge değişikliği geçerliliğini belirlemek için oluşturulan video STmap karşılaştırmak için önemlidir. Bu durumda, fiili, kayıtla ilgili olarak ölçek çubuğu incelenmesi harita yorumlanmasını düzeltmek için kritik öneme sahiptir. , 19 - kobay, 33 5,6,8,13 - 30, sıçan 7,9,30 - Video kayıt bağırsak ve kolon bölümlerinin uzaysal eşleme zebra balığı 26 de dahil olmak üzere çeşitli türlerde fare 25,27 uygulanmıştır 24,30,32,34,35, brushtail opossum 12,36, tavşan 2,30,37,38, tavuk 39, domuz 40,41 ve insan 42. En çok çalışılan türler kobay olduğunu. Kobay sinir sistemi h enterik çünkü bu şaşırtıcı değildirçoğu tamamen karakterize edilmiş ve tarihsel olarak en bağırsak 43 itici motilite ile ilgili in vitro okudu hayvan olmuştur. Spatiotemporal haritalama çoğunlukla küçük hayvanlardan bağırsak tübüler kesimleri uygulanmıştır; Ancak, tavşan ve domuz kullanılarak modifiye sistemlerde çalışmalar büyük hayvanlara bu metodolojinin uygulanmasını göstermektedir. Tavşan durumunda, yaklaşımın geniş segmentleri ve organ banyoları 30 kullanılması dışında küçük hayvanlar ile özdeştir. Domuz kullanılan bir yaklaşım, bir organ banyosu içine parçalanmış doku parçasının anestezi altında domuz yerine daldırma bağırsağın batın döngü kullanmaktı. Ayrıca, stmaps çapraz korelasyon yerine çoğu çalışmada 40 kullanılan transillüminasyon yöntemi ile üretilmiştir. Video kayıt ve uzaysal haritalama için izole edilmiş perfüze vascularly köprüsü preparasyon ayrıca örneğin sıçan gibi daha küçük türlere uygulanmış <sup&gt; 33. Kuizenga ve arkadaşlarının yeni bir çalışma. Videonun stmaps ilk kullanımı, insan bağırsak 42 ex vivo bölümlerine motilite desenleri kaydedilmektedir; STmapping yaklaşımlar vivo 3,44 insanlarda manometrik (basınç) Kayıtların analizine uygulanmıştır rağmen. Insan dokusunda kaydedilen motilitesi desenleri benzer teknikler kullanılarak insan dokuları için bu yaklaşım uzantısı doğrulamak hayvan modellerinde kaydedilen benzerdir. Bu çalışmada kombine stmaps kuvvet dönüştürücüler tarafından kaydedilen kas kasılması ölçümü ile video kayıtları elde edilen dikkat çekicidir. Ex vivo kesimi içine sokulmuş bir fiber optik, manometrik kateter yoluyla lümen içi basınç ölçümü de luminal çapındaki değişikliklerden daha görselleştirmek için STmap kullanışlılığını gösteren bir STmap dönüştürülmüştür. Bu kombine yaklaşım ilişkilendirilmesi kas gerginliği, intraluminal basınç ve duvar hareketi veriyorVideo kaydından oluşan stmaps daha derinlemesine fonksiyonel analiz için. Duvar hareketleri ve (aynı zamanda Dmaps denir) lümen çapı değişikliklerden kaynaklanan stmaps çalışmalar gibi itici peristaltik dalgalar ve lokalize segmental kasılmaları olarak hareketlilik desen ayrıntılı açıklamalarını sağladı. Bu desenler önceki deneysel metotlarla tespit edilirken, şimdiki yaklaşım, dalgalar ve yeni anti-peristaltik kasılmalar 9,24,25,30,31,42 olarak lokalize kasılma hareketleri daha rafine bir tanım verir. Stmaps motilite desen değişikliklerin analizi yapım bağırsak ve kolon mide-bağırsak motilitesindeki önemli sorular uygulanmıştır. Bunlar: nörojenik ve miyojen kasılmaların farklılaşması ve interstisyel Cajal 6,9,11,12,16,24,26,27,29 hücrelerinin rolünü tanımlayan - 31,33,37 - 40,42, karmaşık anlamakÇeşitli motilite desenleri üzerinde intraluminal besin 10,18,19 etkileri inceleyerek dairesel ve uzunlamasına kas katmanları 2,7,8,11,12,32,39,40 arasındaki etkileşimler, mikrobiyal suşlar 34 ve viskoziteler 12,36, 7,9,10,13 - - nesil 17,28,35,40 ve motilite modifikasyonu ve çeşitli endojen nörohormonal ajanları ve 2,4 eksojen farmakolojik ajanların rolü anlamak. Bu tekniğin gelecekte basıncı, elektrofizyoloji ve gerginlik / kontraktilite dahil olmak üzere diğer ölçümleri ile bağlamaya dayanır. Son çalışmalar, genellikle ek bağıntılı ayrıntıları 2,42 sağlamak video kayıt ve uzaysal haritalama ile bağlantılı olarak, bu ölçümlerin bir veya daha fazla ihtiva ederler. Ayrıca, sistem, diğer boru şekilli olan ve olmayan boru şekilli organlarda hareketliliğini ölçmek için kullanılabilir. Örneğin, denemeler kullanılarak gastrik motilitenin ölçülmesi yapılmıştırBöyle bir sistem ancak teknik ve yazılım iyi bir tüp şeklinde olmayan bir organ 45 hareketlilikten ölçmek için arıtma gerekir. Zamanmekansal haritalama teknikleri tek başına ve analiz daha geleneksel yöntemlerle birlikte kullanılmasının daha derinlemesine ve gelecekte gastrointestinal motilite kapsamlı bir anlayış yol açacağı kuşkusuzdur.

Kayıt ve bağırsak motilite analiz çeşitli yöntemler son 150 yıldır üzerinde 1 geliştirilmiştir. Bu ilk arasında değişmektedir in vivo ölçüm ve kas gerginliği, intraluminal basınç ve / veya potansiyel membran çoklu kayıt yorumlanması daha yeni yöntemlerle William Beaumont ve Walter Cannon gözlemleri ve tanımları (yani, kavşak potansiyeller) 2 - 6. Bu son yaklaşımlar genel motilite desenleri bir anlık sağlar, ancak kayıt sitelerin sayısı ve kayıt siteleri arasında yer alanlara veri enterpolasyon geçerliliği ile sınırlıdır. Video kayıt ve uzaysal haritalama (STmap) tekniklerinin son gelişmeler mümkün gözlemlemek ve kolon ve bağırsak ex vivo tüm segmentlerde karmaşık motilite kalıplarını analiz yaptık. İlk mide- için tarif edilen ilk yaklaşım,Video kaydını analiz etmek araştırmacı tasarlanmış bir yazılım bağlı 1990&#39;ların sonlarında 7,8 yılında intestinal segmentler; birkaç grup şimdi oluşturulan veya bu amaçla 2,8 yazılımı değiştirdiniz - 12. Birçok gruplar kendi yazılım paketleri ya da eklentileri meydana getirirken, hepsi bir doku parçasının çapları analiz ve gri tonlama temsil için bu değişik çaplarda dönüştürün. Bir piyasada mevcut kayıt ve analiz sistemi gastrointestinal motilite İzleme Sistemi (Gimm) kobay Distal kolon 13 yanı sıra itici ve karıştırma motilite desen analizi dışkı pelet hız tespiti yoluyla itici motilite hem analiz sağlayan bir anahtar teslimi yaklaşım sağlar denilen 19 - bozulmamış bağırsak segmentlerinde 4,5,14 bir sıvı uyaran. Bu yaklaşım stmaps üretilmesi ve analiz bağlıdır ve bu yazıda açıklanmıştır. Bu yöntemin amacı, t arttırmakO yetenek nitelik ve nicelik bağırsakta bulunan çeşitli motilite kalıplarını analiz etmek. Diğer gruplar kendi yazılım aracılığıyla motilite analizi için STmap kullanmış olsa da, bu stmaps nesil tarafından motilite kalıplarını analiz etmek Gimm nasıl kullanılacağı ilk açıklaması. Doku çapı değişiklikleri tespit etmek için yetenek, stmaps oluşturulmasını maksimize etmek video kayıt, video kayıt parametrelerinin doğru ayarı için bağırsak dokularının hazırlanması yanı sıra: Bu yazıda, biz ayrıntılı adım adım talimatları sağlamak yorumlanması ve Gimm sistemi ve ImageJ yazılımı kullanarak stmaps analizi. Burada açıklanan yöntem sıvıları veya intestinal motilite modelini etkileyebilir bileşikleri ihtiva eden yarı-katı luminal perfüzyon analizi özgüdür. Dışkı pellet tahrik analizi için bir yöntem olup Mawe ve arkadaşlarının 13 tarafından bir sayfa halinde tarif edilmektedir. Burada tarif edilen genel yöntem olabilirgibi diğer düz kas boru şekilli organlara Uygulanan kendi başına bu yöntem basınç veya kas gerginliği değişikliklere verileri sağlamaz, ancak vb ince bağırsak, kan damarları, üretra, üreter, bu, basınç kullanarak bağlanabilir; dönüştürücüler, kuvvet dönüştürücüler veya elektrofizyolojik ölçümler diğer bazı gruplar gibi motilite desen daha tam bir resim 2,15,20,21 göstermiştir sağlamak.

<table><tbody><tr><td>Sodium Chloride (NaCl)</td><td>Fisher</td><td>BP358</td><td>For Krebs buffer.</td></tr><tr><td>Potassium Chloride (KCl)</td><td>Fisher</td><td>BP366</td><td>For Krebs buffer.</td></tr><tr><td>Potassium Phosphate (KH&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;PO&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt;)</td><td>Fisher</td><td>P285</td><td>For Krebs buffer.</td></tr><tr><td>Magnesium Sulfate (MgSO&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt;)</td><td>Sigma</td><td>M2643</td><td>For Krebs buffer.</td></tr><tr><td>Calcium Chloride (CaCl&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;)</td><td>Sigma</td><td>C7902</td><td>For Krebs buffer.</td></tr><tr><td>Sodium Bicarbonate (NaHCO&lt;sub&gt;3&lt;/sub&gt;)</td><td>Fisher</td><td>BP328</td><td>For Krebs buffer.</td></tr><tr><td>Glucose</td><td>Sigma</td><td>G7021</td><td>For Krebs buffer.</td></tr><tr><td>Carboxygen (95% O&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;/5% CO&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dissecting pins</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dissecting trays/dishes</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dunkin Hartley Guinea Pigs</td><td>Charles River</td><td>Strain 051</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td></td><td>http://imagej.nih.gov/ij/</td><td>Freely available online.</td></tr><tr><td>GastroIntestinal Motility Monitor (GIMM)</td><td>Catamount Inc., St. Albans, Vermont</td><td></td><td>Includes parts listed below.</td></tr><tr><td>Peristaltic Pumps</td><td></td><td></td><td>Included with GIMM.</td></tr><tr><td>Bath Cameras</td><td></td><td></td><td>Included with GIMM.</td></tr><tr><td>Bath TransIllumination Backlights</td><td></td><td></td><td>Included with GIMM.</td></tr><tr><td>Organ Baths</td><td></td><td></td><td>Included with GIMM.</td></tr><tr><td>Backlight Intensity Controls</td><td></td><td></td><td>Included with GIMM.</td></tr><tr><td>GIMM Processor ImageJ Plugin</td><td></td><td></td><td>Included with GIMM.</td></tr><tr><td>Polyethylene Tubing</td><td></td><td></td><td>Included with GIMM.</td></tr><tr><td>Tubing Connectors</td><td></td><td></td><td>Included with GIMM.</td></tr><tr><td>Masterflex tubing for Peristaltic Pumps</td><td></td><td></td><td>Included with GIMM.</td></tr><tr><td>Heating Bath/Water Circulator</td><td></td><td></td><td>Included with GIMM.</td></tr></tbody></table>

spatiotemporal mapping of motility in ex vivo preparations of the intestines

Kayıt kas gerginliği değişiklikler, intraluminal basınç ve membran potansiyeli: Birden çok yaklaşımlar da dahil olmak üzere kayıt ve mide-bağırsak motilitesini değerlendirmek için kullanılmıştır. Bu yaklaşımların hepsi daha sonra genel motilite desen duygusu sağlamak için yorumlanır aynı anda bağırsak boyunca bir veya birden fazla noktada faaliyet ölçümü bağlıdır. Son zamanlarda, video kayıt ve uzaysal haritalama (STmap) tekniklerin geliştirilmesi mümkün gözlemlemek ve kolon ve bağırsak ex vivo tüm segmentlerde karmaşık desenleri analiz yaptık. Bir kez kaydedildi ve dijital video kayıt lümen çapı gri ya da dönüştürüldüğü stmaps dönüştürülebilir rengi [adı çapı haritaları (Dmaps)]. Stmaps motilite yönünde (yani, kırtasiye, peristaltik, antiperistaltik), hız, süresi, sıklığı ve kasılma motilite kalıplarının gücü verileri sağlayabilir. Bu yaklaşımın avantajları şunlardır: Analysietkileşim veya aynı segmentte farklı bölgelerinde farklı motilite desenleri eşzamanlı gelişme s, motilite desen görselleştirme zamanla değişir ve başka bir bölgede bir bölge etkiler aktivitede nasıl faaliyeti analizi. Ayrı stmaps ve motilite desenleri daha detaylı olarak analiz edilebilir, böylece Video kayıtları, farklı zaman çizelgeleri ve analiz parametreleri ile oynatılabiliyor. Bu protokol, özellikle motilite nesil etkileyen intraluminal sıvı distansiyonu ve intraluminal uyaranların etkisini ayrıntıları. Lümen reseptör agonistleri ve antagonistlerinin kullanımı, bir model bir desen dönüştürülebilir kadar belirli bir desen başlatılır ve ilgili mekanik bilgi sağlar. Bu teknik sadece intraluminal basınç değişiklikleri veya kas gerginliği verileri vermeden, lümen çapı değişikliklere sebep olur ve deney düzeneği dayalı eserler kuşak tarafından hareketliliğini ölçmek için yeteneği ile sınırlıdır; Her ne kadar, analizleri:s yöntemleri bu konularda sorumlu olabilir. Önceki tekniklere göre video kayıt ve STmap yaklaşımı gastrointestinal motilite daha kapsamlı bir anlayış sağlar zaman.

Anlamak Spatiotemporal Haritalar Çap Maps gibi (stmaps) (Dmaps) Bu teknik ile oluşturulan haritalar uzaysal olmakla birlikte, dokunun luminal çap değişimi, özellikle mesafe ve zaman hem de görsel bir parametredir. STmap altındaki üst ve bitiş zaman başlayan zaman (sn) y-ekseni üzerinde, yatay (mm olarak), x-ekseni üzerinde, doku bölmesi boyunca mesafeyi ve zamanı tasvir eder. Sağ üst köşede x ve y eksenleri (Şekil 1-4) hem de ölçekleme yanı sıra asgari ve azami lümen çapları görüntüleyen bir efsane vardır. Böylece, gri tonlu görüntü içinde farklı piksel tonları farklı lümen çapları karşılık gelir. Koyu piksel geniş çaplarda karşılık ve hafif piksel küçük çaplarda karşılık gelmektedir. Böylece, dairesel kasın kasılma dalgaları (nedeniyle lümen çapı azalmasına hafif pixelation bölgeleri olarak görünecektir <strong&gt; Şekil 1 siyah oklar). Bunun aksine, bağlı dairesel kas gevşeme veya sıvı büyük bolus luminal distansiyon STmap / DMAP (Şekil 1C, beyaz oklar) bir lümen çapı artışı ve koyu piksel neden olur. Stmaps oluşum ve anlam diğer bir tartışma Lammers grubunun 11 bir yazıda bulunabilir. Luminal Distansiyon Bağlı Çoğaltım Kasılmaları Şekil 1 &#39;de, kobay proksimal kolon, her birim, 5 dakika boyunca Krebs tamponu, 0.5, 1.0, 1.5, ve 2.0 ml şişmiş edildi. Yayma kasılmaları ≥1.0 tüm birimlerdeki tarafından ml ortaya ve STmap (Şekil 1) olarak ince beyaz şeritler görünür bulundu. Bağırsak lümen distansiyonu yayılan kasılmalar başlatılmasını neden olur. Şekil 1 &#39;de gösterildiği gibi, daha büyük bir lümen içi hacimli lümen çapı arttığında ve STmap pikselBu çapına tekabül genel bir koyu arkaplan oluştururken koyu olur. Gerilmenin belli bir düzeyde en peristaltik refleks aktive edilir; lümeninin çapını azaltmak ve parçanın Anal ucuna doğru hareket Oral ucunda daralma itici dalgaları başlatır (1.0 mi Şekil 1), (a, beyaz bantlar olarak gösterilen Şekiller 1 ve 4) &#39;de. Beyaz bant temsil daralma genellikle öncesinde peristaltik dalga (Şekil 1C beyaz oklar) aboral gevşeme temsil eden bir karanlık bant, önce gelmelidir. Bunlar beyaz ve koyu pikseller artan daralma ve sırasıyla 22,23 peristaltik refleksin inen gevşeme bileşenlerine karşılık gelir. Şekil 1 Panel A STmap içinde, 0.0 ml 0 itici dalgalar, 0.5 ml şişkinlik de 0 itici dalgalar, 1.0 ml şişkinlik 3 itici dalgalar, 1.5 ml şişkinlik 6 itici dalgalar ve 5 itici dalgalar vardırt 2.0 ml şişkinlik. Besin-Kaynaklı Sabit / Karıştırma Kasılmaları Kasılmayı yayma Dalgalar stmaps tarafından görüntülenmiştir olabilir tek hareketlilik desen değil. Böyle segmentasyon olarak motilite Karıştırma desenleri de stmaps ve ilgili görüntü (Şekil 2A) görülebilir. Bu model kasılmaları propaganda farklıdır. Birçok küçük, sabit kasılmalar aynı anda farklı alanlarda meydana gelen desenleri karıştırma sırasında (birden küçük beyaz aynı yatay çizgide kareler, ancak birbirlerine dokunmadan değil görüntülendi). Her segmental kasılma sabit ve propaganda kasılmaları için anlatıldığı gibi anal tarzda oral hareket etmese de, uzun süreler boyunca karmaşık kasılma desenleri göstermek için stmaps yeteneği (Şekil 2A anally zamanla kasılmaları yavaş ilerlemesi görselleştirme sağlar siyah ok). Süresiher bir daralma ImageJ ve ilgili eklentisi (Şekil 2A) ile beyaz bir daralma kare boyunca dikey bir çizgi çizerek belirlenir. (: 1.9 2.1 sn aralığında), kısa zincirli yağ asitlerinin içi kolon perfüzyon üretilen bu özel STmap, ortalama sabit kasılma süresi ~ 2 sn. Doku kesimi üzerinde kalan mezenter analizinde eserler neden olabilir, mezenter (Şekil 1B, 2B) tarafından oluşturulan dikey çizgi eserler uzunlamasına kas hareketlerini tespit etmek için kullanılabilir. Şekil 1B ve 2B siyah dikey çizginin yatay hareket kasılması uzunlamasına kasının gevşemesine kaynaklanmaktadır. Uzunlamasına kas bu yanal hareket yatay mezenter eserler tarafından oluşturulan dikey bantlar hareketleri (Şekil 1B, 2B) olarak stmaps görsel olabilir. ImageJ ve Plugin stmaps Analizi Hem yayılan bir dalga (Şekil 3) ve kasılma süresi (Şekil 2) hızı ImageJ ve GIMMProcessor eklentisi kullanarak belirlenebilir. (: 0.21 0.35 mm / sn aralığında) Şekil 3&#39;te, ortograd ve retrograd hem dalgaların yayılma hızı ~ 0.25 mm / sn idi. ST harita üzerindeki video görüntüsünde görüldüğü gibi, analiz hatları (video görüntüsü üzerinde bir kutu oluşturan kırmızı çizgi), doku bölümünün bir kenar çevresinde tamamı yerine segmentte tam olarak belirlenmiştir. Bu yazılımda rehberlerin önemli bir kullanımıdır. Bu kılavuzların hassas ayar olarak daha tartışma bölümünde analiz videonun düzgün analiz için çok önemlidir. Bu Miyojenik dalgalanma kasılmalar 24 görüntüler bir STmap üretimi sağlar. Bu kasılmalar kökenli miyojenik ve büyük lümen çapı değişmez. Aynı zamanda, farklı dirdalgaların için ortak yayılım ections (ortograd veya retrograd), bu tekniği (Şekil 3) kullanılarak analiz edilebilir. Şekil 2&#39;de gösterildiği gibi, daralma süresi doku parçasının farklı bölgelerinde değişiklik gösterebilir. Stmaps Uygun Analizi Stmaps oluşturulması ile potansiyel bir sorun nedeniyle deneysel metodoloji mümkün eser kuşaktır. Örneğin, doku dışında sol mezenter (2B, Şekil 1) STmap üzerinde dikey siyah çizgi oluşturarak doku bu segment için okuma çapını artacaktır. Mezenterde varlığı yapay ölçek kontrast ölçümleri küntleşmesi sonuçlanır geniş lümen ölçümü, artırarak gri tonlama haritayı genişletmektedir. Bu nedenle doku delinmeden kesimden mümkün olduğu kadar tamamen mezenterin kaldırmak için en iyisidir. Bir<html> Diğer olası STmap artefaktı bağlı siyah (Şekil 4B) tezat edilemez lümen sıvısı içindeki kabarcıkların bir beyaz dikey bir çizgidir. Bu kabarcıklar lümen çapı analiz yazılımı küçük görünmesi veya STmap içinde motilite desenleri beyaz / hafif bölgeleri bindirmek olabilir. Bu nedenle, analizden önce video kayıt doku segmenti ve uygun kontraslanmada kurulum stmaps (Şekil 4) inşa başarı açısından kritik öneme sahip. Uygun ve uygun olmayan zıt kurulumları Şekil 4&#39;te gösterilmiştir. Bu ön-deney makinesi kalibrasyonu ve sonrası deneyi analiz pencere yapacakları STmap üretimi ve analiz için çok önemlidir bu video ayar düğmeleri dikkat etmek önemlidir. Uygun olmayan görüntülü ayarlama gereksiz verilerin (Şekil 4A) stmaps yol açabilir. 700 &quot;/&gt; Şekil Proksimal Colon 1. Çoğaltım Dalgalar. (A) (kobay proksimal kolonda gerçekleştirilen) bir şişme-tepki eğrisi bu segmentte (beyaz yatay şeritler) dalgalar yayılan başlatmak için uygun intraluminal sıvı hacmini belirlemek için kullanılmıştır. Siyah oklar, tam uzunluktaki yayılan dalgaların örneklerini göstermektedir. Beyaz oklar eksik mezenterik kaldırılması nedeniyle hat artifakı. (B) Panel A benzer bir deneyden STmap nesil elde kasılmaları yayma yakından görünümü, ama kısa süreli bir video göstermektedir. Bu kasılmalar Anal yöne sözlü ilerleme unutmayın ve önümüzdeki beyaz şeridin Bu harita aynı zamanda mezenter eserler başka görünüm sağlar paneli A. kıyasla karanlık bir alan olarak temsil önceki aboral gevşeme tanımlamak daha kolaydır. Kırmızı kutu Panel C. (C) genişletilmiş Bu STmap bölgesi Bu panel daha yakın bir görünüm o göstermektedir tanımlarf aynı video ve yayılan dalga sıvı aboral tarafından distansiyonu lümen nedeniyle karanlık piksel &#39;Sıvı Distansiyon&#39; nokta etiketli paneli B. Beyaz oklar gibi harita. Bunlar dairesel kas gevşemesi dairesel kas kasılması için aboral meydana bölgelerdir. Yayılan kasılmalar nedeniyle haritanın uzun zaman ölçeği panel A&#39;da tamamen yatay çizgiler gibi bakmak unutmayın. Zaman panelleri B ve C ölçekler kasılma dalgası ölçülmüş ve dalga hareketinin hızı olarak rapor edilebilir bir eğim vardır. Bu nedenle giderek daha <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/53263/53263fig1highres.jpg" target="_blank">kısa, bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/53263/53263fig2highres.jpg" width="700" /> STmap tarafından Daralma Süre 2. belirlenmesi Şekil. (A) Kobay proksimal kolon shkısa zincirli yağ asidi (bütirat) ve lümen içi perfüzyon yanıt olarak bir karıştırma / segmental motilite desen akımları. Dikey kırmızı çizgiler Görüntü J ve GIMMProcessor eklentisi kullanarak daralma süresini belirlemek için daralma dönemlerinde çizilmiştir. Siyah ok sabit kasılmaları yayılma aboral yönünü gösterir. (B) fare ileumda yayılan kasılmalar genellikle sürekli kasılma bölgeleri göstermektedir. Dikey oklar daha ağız bölgeleri daha uzun bir süre için sözleşmeli kaldı haritayı göstermek çizilmiş. Bu hazırlık, hazırlık anal ucu doku kasılmalar sırasında kapalı sistem bırakarak sıvı önlemek için kapatıldı. Panelin üst kısmındaki görüntü tüm anal ucu (STmap üzerinde siyah) akışkan tarafından tahrip edilirken dokusunun tüm ağız ucu, (STmap üzerine beyaz) sözleşmeli bir zaman gösterir. B Paneli STmap ortasında dikey siyah yatay / yanal hareket hareketini gösteriruzunlamasına kas tabakası. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/53263/53263fig2highres.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/53263/53263fig3highres.jpg" width="400" /> Şekil 3. Çift Yönlü Motilite Desenleri. Yayılan dalgalar yönde (oral, anal) (anal, oral) ve retrograd hem de, dik taşıyabilirsiniz. Katı siyah oklar, normal ortograd yayılmasını göstermek ve kesik siyah oklar retrograd yayılmasını gösterir. Bu STmap hem de, dik yayılma ve retrograd kasılmaların hızı ImageJ analizi ile belirlenir ve 0.25 mm / sn olduğu bulundu. Görüntü analizi hatları (STmap yukarıdaki video görüntüsü üzerinde bir kutu oluşturan kırmızı çizgiler) sık sık, dik odaklı düşük genlikli olan miyojenik dalgalanma kasılmaları, sığ kasılmalar görselleştirmek yakın dokuda bir kenarına kuruldu, retrograde veya iki yönde. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/53263/53263fig3highres.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/53263/53263fig4highres.jpg" width="700" /> STmap Nesil Uygun Görüntü Kontrast 4. Önemi Şekil. Panel B uygun bir şekilde tezat görüntü ve STmap gösterirken (A), uygun olmayan şekilde tezat görüntü ve STmap gösterir. (A) düzgün bir tezat görüntüde (B) elde edilen yatay beyaz şeritler olarak açık değildir ve yüzünden ilk görüntü gri tonlarında olmak üzere çok sayıda eserler (beyaz gölgeleme) vardır. Düzgün tezat görüntü (B) elde edilen STmap içinde gri tonlama beyaz gölgeleme eserler kaybolur ve yayılan dalgalar daha belirgindir. Ayrıca, siyah gölgeleme gevşeme ah temsilçoğaltım kasılma dalgasının ead kasılması her dalga ile STmap anal sonunda görülebilir. Panel B&#39;de beyaz oklar doğru tezat edilemeyen görüntüsünün bir bölgesi tarafından oluşturulan bir STmap objeyi göstermektedir. Dışlayıcı Bu tip bazen deneysel protokol sırasında hazırlanmasında meydana lümen baloncuklar çoğunlukla kaynaklanmaktadır. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/53263/53263fig4highres.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için buraya tıklayınız.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Spatiotemporal Mapping of Motility in Ex Vivo Preparations of the Intestines at JoVE.com

Spatiotemporal Mapping of Motility in Ex Vivo Preparations of the Intestines

Recently available video recording and spatiotemporal mapping (STmap) techniques make it possible to visualize and quantify both propagating and mixing patterns of intestinal motility. The goal of this protocol is to explain the generation and analysis of STmaps using the GastroIntestinal Motility Monitoring (GIMM) system.

Hareketliliği zamanmekansal Haritalama içinde<em&gt; Ex Vivo</emBağırsakların&gt; Hazırlıklar

Multiple approaches have been used to record and evaluate gastrointestinal motility including: recording changes in muscle tension, intraluminal pressure, ...

spatiotemporal-mapping-motility-ex-vivo-preparations

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Biology

Spatiotemporal Mapping of Motility in Ex Vivo Preparations of the Intestines

10.3K Görüntüleme.  Virginia Commonwealth University. Recently available video recording and spatiotemporal mapping (STmap) techniques make it possible to visualize and quantify both propagating and mixing patterns of intestinal motility. The goal of this protocol is to explain the generation and analysis of STmaps using the GastroIntestinal Motility Monitoring (GIMM) system.

Video: Spatiotemporal Mapping of Motility in Ex Vivo Preparations of the Intestines

Functional Assessment of Intestinal Motility and Gut Wall Inflammation in Rodents: Analyses in a Standardized Model of Intestinal Manipulation

Inflammation of the gastrointestinal tract is a common reason for a variety of human diseases. Animal research models are critical in investigating the complex cellular and molecular of intestinal pathology. Although the tunica mucosa is often the organ of interest in many inflammatory diseases, recent works demonstrated that the muscularis externa (ME) is also a highly immunocompetent organ that harbours a dense network of resident immunocytes.1,2 These works were performed within the standardized model of intestinal manipulation (IM) that leads to inflammation of the bowel wall, mainly limited to the ME. Clinically this inflammation leads to prolonged intestinal dysmotility, known as postoperative ileus (POI) which is a frequent and unavoidable complication after abdominal surgery.3 The inflammation is characterized by liberation of proinflammatory mediators such as IL-64 or IL-1&beta; or inhibitory neurotransmitters like nitric oxide (NO).5 Subsequently, tremendous numbers of immunocytes extravasate into the ME, dominated by polymorphonuclear neutrophils (PMN) and monocytes and finally maintain POI.2 Lasting for days, this intestinal paralysis leads to an increased risk of aspiration, bacterial translocation and infectious complications up to sepsis and multi organ failure and causes a high economic burden.6
In this manuscript we demonstrate the standardized model of IM and in vivo assessment of gastrointestinal transit (GIT) and colonic transit. Furthermore we demonstrate a method for separation of the ME from the tunica mucosa followed by immunological analysis, which is crucial to distinguish between the inflammatory responses in these both highly immunoactive bowel wall compartments. All analyses are easily transferable to any other research models, affecting gastrointestinal function.

Postoperative ileus (POI) is a complication of abdominal surgery leading to increased morbidity and a prolonged hospital stay. Because prophylactic or therapeutic strategies are lacking intensified research is necessary. Therefore we established a standardized and feasible mouse model to investigate the pathophysiology of POI and to study potential therapeutic options.

Bağırsak Manipülasyon bir Standart Model Analizleri: Kemirgenler Barsak Motilite ve Gut Duvar İnflamasyon İşlevsel Değerlendirilmesi

Inflammation of the gastrointestinal tract is a common reason for a variety of human diseases. Animal research models are critical in investigating the ...

Tıp

The C. elegans Intestine As a Model for Intercellular Lumen Morphogenesis and In Vivo Polarized Membrane Biogenesis at the Single-cell Level: Labeling by Antibody Staining, RNAi Loss-of-function Analysis and Imaging

Multicellular tubes, fundamental units of all internal organs, are composed of polarized epithelial or endothelial cells, with apical membranes lining the lumen and basolateral membranes contacting each other and/or the extracellular matrix. How this distinctive membrane asymmetry is established and maintained during organ morphogenesis is still an unresolved question of cell biology. This protocol describes the C. elegans intestine as a&#160;model for the analysis of polarized membrane biogenesis during tube morphogenesis, with emphasis on apical membrane and lumen biogenesis. The C. elegans twenty-cell single-layered intestinal epithelium is arranged into a simple bilaterally symmetrical tube, permitting analysis on a single-cell level. Membrane polarization occurs concomitantly with polarized cell division and migration during early embryogenesis, but de novo polarized membrane biogenesis continues throughout larval growth, when cells no longer proliferate and move. The latter setting allows one to separate subcellular changes that simultaneously mediate these different polarizing processes, difficult to distinguish in most polarity models. Apical-, basolateral membrane-, junctional-, cytoskeletal- and endomembrane components can be labeled and tracked throughout development by GFP fusion proteins, or assessed by in situ antibody staining. Together with the organism&#39;s genetic versatility, the C. elegans intestine thus provides a unique in vivo model for the visual, developmental, and molecular genetic analysis of polarized membrane and tube biogenesis. The specific methods (all standard) described here include how to: label intestinal subcellular components by antibody staining; analyze genes involved in polarized membrane biogenesis by loss-of-function studies adapted to the typically essential tubulogenesis genes; assess polarity defects during different developmental stages; interpret phenotypes by epifluorescence, differential interference contrast (DIC) and confocal microscopy; quantify visual defects. This protocol can be adapted to analyze any of the often highly conserved molecules involved in epithelial polarity, membrane biogenesis, tube and lumen morphogenesis.

The C. elegans Intestine As a Model for Intercellular Lumen Morphogenesis and In Vivo Polarized Membrane Biogenesis at the Single-cell Level: Labeling by Antibody Staining, RNAi Loss-of-function Analy

The transparent C. elegans intestine can serve as an "in vivo tissue chamber" for studying apicobasal membrane and lumen biogenesis at the single-cell and subcellular level during multicellular tubulogenesis. This protocol describes how to combine standard labeling, loss-of-function genetic/RNAi and microscopic approaches to dissect these processes on a molecular level.

C. elegans bağırsak olarak bir Model hücreler arası Lumen morfogenez ve In Vivo polarize membran Biyogenez tek hücre düzeyinde için: etiketleme antikor boyama, işlev RNAi kaybı çözümleme ve görüntüleme

Multicellular tubes, fundamental units of all internal organs, are composed of polarized epithelial or endothelial cells, with apical membranes lining the ...

Gelişim Biyolojisi

Real-time Imaging of Myeloid Cells Dynamics in ApcMin/+ Intestinal Tumors by Spinning Disk Confocal Microscopy

Myeloid cells are the most abundant immune cells within tumors and have been shown to promote tumor progression. Modern intravital imaging techniques enable the observation of live cellular behavior inside the organ but can be challenging in some types of cancer due to organ and tumor accessibility such as intestine. Direct observation of intestinal tumors has not been previously reported. A surgical procedure described here allows direct observation of myeloid cell dynamics within the intestinal tumors in live mice by using transgenic fluorescent reporter mice and injectable tracers or antibodies. For this purpose, a four-color, multi-region, micro-lensed spinning disk confocal microscope that allows long-term continuous imaging with rapid image acquisition has been used. ApcMin/+ mice that develop multiple adenomas in the small intestine are crossed with c-fms-EGFP mice to visualize myeloid cells and with ACTB-ECFP mice to visualize intestinal epithelial cells of the crypts. Procedures for labeling different tumor components, such as blood vessels and neutrophils, and the procedure for positioning the tumor for imaging through the serosal surface are also described. Time-lapse movies compiled from several hours of imaging allow the analysis of myeloid cell behavior in situ in the intestinal microenvironment.

Real-time Imaging of Myeloid Cells Dynamics in ApcMin/+ Intestinal Tumors by Spinning Disk Confocal Microscopy

By using transgenic reporter mice and injectable fluorescent labels, long-term intravital spinning disk confocal microscopy enables direct visualization of myeloid cell behavior into intestinal adenoma in the ApcMin/+ colorectal cancer model.

Miyeloid hücrelerin Dynamics Gerçek zamanlı Görüntüleme<em&gt; Süm<sup&gt; Min / +</sup</em&gt; Bağırsak Tümörleri Disk Eşodaklı Mikroskopi Spinning tarafından

Myeloid cells are the most abundant immune cells within tumors and have been shown to promote tumor progression. Modern intravital imaging techniques ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

In Situ Ca2+ Imaging of the Enteric Nervous System

Reflex behaviors of the intestine are controlled by the enteric nervous system (ENS). The ENS is an integrative network of neurons and glia in two ganglionated plexuses housed in the gut wall. Enteric neurons and enteric glia are the only cell types within the enteric ganglia. The activity of enteric neurons and glia is responsible for coordinating intestinal functions. This protocol describes methods for observing the activity of neurons and glia within the intact ENS by imaging intracellular calcium (Ca2+) transients with fluorescent indicator dyes. Our technical discussion focuses on methods for Ca2+ imaging in whole-mount preparations of the myenteric plexus from the rodent bowel. Bulk loading of ENS whole-mounts with a high-affinity Ca2+ indicator such as Fluo-4 permits measurements of Ca2+ responses in individual neurons or glial cells. These responses can be evoked repeatedly and reliably, which permits quantitative studies using pharmacological tools. Ca2+ responses in cells of the ENS are recorded using a fluorescence microscope equipped with a cooled charge-coupled device (CCD) camera. Fluorescence measurements obtained using Ca2+ imaging in whole-mount preparations offer a straightforward means of characterizing the mechanisms and potential functional consequences of Ca2+ responses in enteric neurons and glial cells.

In Situ Ca2+ Imaging of the Enteric Nervous System

The enteric nervous system (ENS) is a network of neurons and glia located in the gut wall that controls intestinal reflexes. This protocol describes methods for recording the activity of enteric neurons and glia in live preparations of ENS using Ca2+ imaging.

Enterik Sinir Sistemi Yerinde Ca 2+ Görüntüleme

Reflex behaviors of the intestine are controlled by the enteric nervous system (ENS). The ENS is an integrative network of neurons and glia in two ...

Nörobilim

Gastrointestinal Motility Monitor (GIMM)

The Gastrointestinal Motility Monitor (GIMM; Catamount Research and Development; St. Albans, VT) is an in vitro system that monitors propulsive motility in isolated segments of guinea pig distal colon. The complete system consists of a computer, video camera, illuminated organ bath, peristaltic and heated water bath circulating pumps, and custom GIMM software to record and analyze data. Compared with traditional methods of monitoring colonic peristalsis, the GIMM system allows for continuous, quantitative evaluation of motility. The guinea pig distal colon is bathed in warmed, oxygenated Krebs solution, and fecal pellets inserted in the oral end are propelled along the segment of colon at a rate of about 2 mm/sec. Movies of the fecal pellet proceeding along the segment are captured, and the GIMM software can be used track the progress of the fecal pellet. Rates of propulsive motility can be obtained for the entire segment or for any particular region of interest. In addition to analysis of bolus-induced motility patterns, spatiotemporal maps can be constructed from captured video segments to assess spontaneous motor activity patterns. Applications of this system include pharmacological evaluation of the effects of receptor agonists and antagonists on propulsive motility, as well as assessment of changes that result from pathophysiological conditions, such as inflammation or stress. The guinea pig distal colon propulsive motility assay, using the GIMM system, is straightforward and simple to learn, and it provides a reliable and reproducible method of assessing propulsive motility.

Gastrointestinal Motility Monitor GIMM

Evaluation of colonic motility in the guinea pig distal colon with the Gastrointestinal Motility Monitor (GIMM) is a straightforward and simple to learn approach to quantitatively evaluate propulsive motility in the gastrointestinal tract.

Gastrointestinal Motilite Monitör (Gimm)

The Gastrointestinal Motility Monitor (GIMM; Catamount Research and Development; St. Albans, VT) is an in vitro system that monitors propulsive motility ...

Biyoloji

Video Imaging and Spatiotemporal Maps to Analyze Gastrointestinal Motility in Mice

The enteric nervous system (ENS) plays an important role in regulating gastrointestinal (GI) motility and can function independently of the central nervous system. Changes in ENS function are a major cause of GI symptoms and disease and may contribute to GI symptoms reported in neuropsychiatric disorders including autism. It is well established that isolated colon segments generate spontaneous, rhythmic contractions known as Colonic Migrating Motor Complexes (CMMCs). A procedure to analyze the enteric neural regulation of CMMCs in ex vivo preparations of mouse colon is described. The colon is dissected from the animal and flushed to remove fecal content prior to being cannulated in an organ bath. Data is acquired via a video camera positioned above the organ bath and converted to high-resolution spatiotemporal maps via an in-house software package. Using this technique, baseline contractile patterns and pharmacological effects on ENS function in colon segments can be compared over 3-4 hr. In addition, propagation length and speed of CMMCs can be recorded as well as changes in gut diameter and contraction frequency. This technique is useful for characterizing gastrointestinal motility patterns in transgenic mouse models (and in other species including rat and guinea pig). In this way, pharmacologically induced changes in CMMCs are recorded in wild type mice and in the Neuroligin-3R451C mouse model of autism. Furthermore, this technique can be applied to other regions of the GI tract including the duodenum, jejunum and ileum and at different developmental ages in mice.

This article describes a video imaging technique and high-resolution spatiotemporal mapping to identify changes in the neural regulation of colonic motility in adult mice. Subtle effects on gastrointestinal (GI) function can be detected using this approach in isolated tissue preparations to advance our understanding of GI disease.

Video Görüntüleme ve Spatiotemporal Haritalar Fare Gastrointestinal Motilite Analiz

The enteric nervous system (ENS) plays an important role in regulating gastrointestinal (GI) motility and can function independently of the central ...

Intravital Imaging of Intraepithelial Lymphocytes in Murine Small Intestine

Intraepithelial lymphocytes expressing &#947;&#948; T cell receptor (&#947;&#948; IEL) play a key role in immune surveillance of the intestinal epithelium. Due in part to the lack of a definitive ligand for the &#947;&#948; T cell receptor, our understanding of the regulation of &#947;&#948; IEL activation and their function in vivo remains limited. This necessitates the development of alternative strategies to interrogate signaling pathways involved in regulating &#947;&#948; IEL function and the responsiveness of these cells to the local microenvironment. Although &#947;&#948; IELs are widely understood to limit pathogen translocation, the use of intravital imaging has been critical to understanding the spatiotemporal dynamics of IEL/epithelial interactions at steady-state and in response to invasive pathogens. Herein, we present a protocol for visualizing IEL migratory behavior in the small intestinal mucosa of a GFP &#947;&#948; T cell reporter mouse using inverted spinning disk confocal laser microscopy. Although the maximum imaging depth of this approach is limited relative to the use of two-photon laser-scanning microscopy, spinning disk confocal laser microscopy provides the advantage of high speed image acquisition with reduced photobleaching and photodamage. Using 4D image analysis software, T cell surveillance behavior and their interactions with neighboring cells can be analyzed following experimental manipulation to provide additional insight into IEL activation and function within the intestinal mucosa.

We describe a method to visualize GFP-labeled &#947;&#948; IELs using intravital imaging of murine small intestine by inverted spinning disk confocal microscopy. This technique enables the tracking of live cells within the mucosa for up to 4 h and can be used to investigate a variety of intestinal immune-epithelial interactions. &#160;

Murine Ince bağırsak INTRAEPİTELYAL lenfosit intravital görüntüleme

Intraepithelial lymphocytes expressing &#947;&#948; T cell receptor (&#947;&#948; IEL) play a key role in immune surveillance of the intestinal ...

Studying Murine Small Bowel Mechanosensing of Luminal Particulates

Gastrointestinal (GI) motility is critical for normal digestion and absorption. In the small bowel, which absorbs nutrients, motility optimizes digestion and absorption. For this reason, some of the motility patterns in the small bowel include segmentation for mixing of luminal contents and peristalsis for their propulsion. Physical properties of luminal contents modulate the patterns of small bowel motility. The mechanical stimulation of GI mechanosensory circuits by transiting luminal contents and underlying gut motility initiate and modulate complex GI motor patterns. Yet, the mechanosensory mechanisms that drive this process remain poorly understood. This is primarily due to a lack of tools to dissect how the small bowel handles materials of different physical properties. To study how the small bowel handles particulates of varying sizes, we have modified an established in vivo method to determine small bowel transit. We gavage live mice with fluorescent liquid or tiny fluorescent beads. After 30 minutes, we dissect out the bowels to image the distribution of fluorescent contents across the entirety of the GI tract. In addition to high-resolution measurements of the geometric center, we use variable size binning and spectral analysis to determine how different materials affect small bowel transit. We have explored how a recently discovered "gut touch" mechanism affects small bowel motility using this approach.

To study how the small bowel handles particulates of varying sizes, we have modified an established in vivo method to determine small bowel transit.

Luminal Partiküllerin Murine İnce Bağırsak Mekanosenizasyonunun İncelenmesi

Gastrointestinal (GI) motility is critical for normal digestion and absorption. In the small bowel, which absorbs nutrients, motility optimizes digestion ...

Applications of Spatio-temporal Mapping and Particle Analysis Techniques to Quantify Intracellular Ca2+ Signaling In Situ

Ca2+ imaging of isolated cells or specific types of cells within intact tissues often reveals complex patterns of Ca2+ signaling. This activity requires careful and in-depth analyses and quantification to capture as much information about the underlying events as possible. Spatial, temporal and intensity parameters intrinsic to Ca2+ signals such as frequency, duration, propagation, velocity and amplitude may provide some biological information required for intracellular signalling. High-resolution Ca2+ imaging typically results in the acquisition of large data files that are time consuming to process in terms of translating the imaging information into quantifiable data, and this process can be susceptible to human error and bias. Analysis of Ca2+ signals from cells in situ typically relies on simple intensity measurements from arbitrarily selected regions of interest (ROI) within a field of view (FOV). This approach ignores much of the important signaling information contained in the FOV. Thus, in order to maximize recovery of information from such high-resolution recordings obtained with Ca2+dyes or optogenetic Ca2+ imaging, appropriate spatial and temporal analysis of the Ca2+ signals is required. The protocols outlined in this paper will describe how a high volume of data can be obtained from Ca2+ imaging recordings to facilitate more complete analysis and quantification of Ca2+ signals recorded from cells using a combination of spatiotemporal map (STM)-based analysis and particle-based analysis. The protocols also describe how different patterns of Ca2+ signaling observed in different cell populations in situ can be analyzed appropriately. For illustration, the method will examine Ca2+ signaling in a specialized population of cells in the small intestine, interstitial cells of Cajal (ICC), using GECIs.

Applications of Spatio-temporal Mapping and Particle Analysis Techniques to Quantify Intracellular Ca2+ Signaling In Situ

Genetically encoded Ca2+ indicators (GECIs) have radically changed how in situ Ca2+ imaging is performed. To maximize data recovery from such recordings, appropriate analysis of Ca2+ signals is required. The protocols in this paper facilitate the quantification of Ca2+ signals recorded in situ using spatiotemporal mapping and particle-based analysis.

Kendisinin geçici eşleme ve parçacık analiz teknikleri intrasellüler Ca sinyal2 + in Situ ölçmek için uygulamaları

Ca2+ imaging of isolated cells or specific types of cells within intact tissues often reveals complex patterns of Ca2+ signaling. This activity requires ...

<meta charset="utf8"></head><body>Gastrointestinal Dinamikleri ve İlaçların Motilite Üzerindeki Etkilerini İnceleme Protokolü

Using An In Vitro Tissue Perfusion System to Detect the Functional Activities of Isolated Intestinal Tubes in Real Time

Gastrointestinal diseases, which have a high incidence, pose considerable challenges for humans. The small intestine is integral to food and drug digestion and absorption and plays a crucial role in treating these diseases. The intestinal tube movement experiment, a common and essential in vitro method, is utilized to study gastrointestinal dynamics. This includes the preparation of the isolated intestinal tube, as well as the suspension of the prepared intestinal tube in the bath and its connection to a signal detector. This is followed by the recording and analysis of a series of parameters, such as tension, which can be used to assess intestinal motor function, as well as considerations for keeping the intestinal tube active in vitro. The standardized program from sampling to data collection greatly improves the repeatability of the experimental data and ensures the authenticity of the recording of intestinal tension after physiological, pathological, and drug intervention. Here we present the key problems in experimental operation and a valuable reference experimental protocol for studying drugs that regulate gastrointestinal motility.

<meta charset="utf8"></head><body>Yazar Spotlight: Sıçan Bağırsak Tüpleri Üzerindeki İlaç Etkisinin Güvenilir ve Tekrarlanabilir İn Vitro Değerlendirmesi

We present a method for isolating rat intestinal tubes and assessing the impact of drugs on their tension, frequency, and amplitude in vitro. This method offers a valuable approach for researchers investigating intestinal tubes.

Hareketliliği zamanmekansal Haritalama içinde

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Bağırsak Manipülasyon bir Standart Model Analizleri: Kemirgenler Barsak Motilite ve Gut Duvar İnflamasyon İşlevsel Değerlendirilmesi

C. elegans bağırsak olarak bir Model hücreler arası Lumen morfogenez ve In Vivo polarize membran Biyogenez tek hücre düzeyinde için: etiketleme antikor boyama, işlev RNAi kaybı çözümleme ve görüntüleme

Miyeloid hücrelerin Dynamics Gerçek zamanlı Görüntüleme

Enterik Sinir Sistemi Yerinde Ca ²⁺ Görüntüleme

Gastrointestinal Motilite Monitör (Gimm)

Video Görüntüleme ve Spatiotemporal Haritalar Fare Gastrointestinal Motilite Analiz

Murine Ince bağırsak INTRAEPİTELYAL lenfosit intravital görüntüleme

Luminal Partiküllerin Murine İnce Bağırsak Mekanosenizasyonunun İncelenmesi

Kendisinin geçici eşleme ve parçacık analiz teknikleri intrasellüler Ca sinyal^{2 +} in Situ ölçmek için uygulamaları

İzole Edilmiş Bağırsak Tüplerinin Fonksiyonel Aktivitelerini Gerçek Zamanlı Olarak Tespit Etmek için İn Vitro Doku Perfüzyon Sistemi Kullanma