The authors would like to acknowledge funding support from the University of South Florida, Department of Surgery (Mack Wu, MD, PhD).

NOT: Aşağıda sunulan tüm hayvan prosedürleri için onay Güney Florida&#39;nın Hayvan Bakım Komitesi (IACUC) Üniversitesi elde ve Hayvan Refahı Yasası ve Laboratuvar Hayvanları Bakım ve Kullanım Kılavuzu için tüm gereksinimleri uymak edildi. Silikon Levha ve Cerrahi Aletler 1. Hazırlık <ol><li> Hazır kesilmiş şeritler ve (10.5 cm x 3.0 cm) 0.01 kalınlığında, tıbbi silikon çarşaf olmayan takviyeli ve bir otoklav kullanarak sterilize. </li><li> Temizleyin ve (ameliyat sırasında steril bir alan oluşturmak için makas, forseps ve perdeler veya havlu) uygun cerrahi aletler sterilize. </li></ol> 2. Deney Hayvanları <ol><li> Yetişkin erkek veya ticari bir yetiştiriciden edilen 250-350 g aralığında ağırlığındaki dişi farelerin kullanın. Yaşlı sıçan kullanıldı, bunlar daha iyi hayatta kalma ameliyat sonrasında olmak üzere ≥350 gram olması gerekmektedir. Herhangi bir deney başlamadan önce en az seyahati hayvanlar alışmalarıYemek ve su ad libitum ile 12 saatlik bir ışık-karanlık döngüsü standart koşullar altında 7 gün. </li></ol> 3. Anestezi, preoperatif Analjezi ve Operatif Hazırlık <ol><li> Indüksiyon odasında aracılığıyla% 3 -4% izofluran ile genel anestezi øndükle ve cilt hazırlığı ve ameliyat sırasında O 2 ile% 1 (bir burun konisi kullanımı yoluyla) -2% korumak. Oranı ve solunum, interdijital tutam veya palpebral kırpma refleksinin derinliği gözlem yoluyla anestezi derinliği izleyin. NOT: Şu anda, bir veteriner merhem hayvan anestezi altında iken kuruluğu önlemek için göze yerleştirilebilir. </li><li> Steril cerrahi alanında bir konum uzak, yüzüstü pozisyonda sıçan yerleştirin ve aşağı boyun yaklaşık 11 cm tabanından kesme makineleri ile dorsumuna tıraş. Kalıcı bir kalem ile Stencil, 3,0 cm x 10,5 cm flep için anahat (Şekil 1A bakınız). </li><li> Temiz, belirlenen Surgica sıçan taşıonaylanmış bir ısıtma yastığı ve steril cerrahi örtüler ya da havlu ile donatılmış l alanı. Ağrı yönetimi için ilk cerrahi kesiler 5 mg / kg Ketoprofen deri önce enjekte. Gerektiğinde ek sıvıların (tuzlu su), deri altından (5 cc) verilebilir. </li><li> Steril bir alan oluşturmak için steril örtüler uygulamak, sonra,% 70 izopropil alkol ve% 0.2 klorheksidin ile ikinci ilk sürüntü daha da cildi hazırlayın. % 10 povidon-iyodin (Betadinede) de kullanılabilir. NOT: antibiyotik (15 mg / kg ampisilin) ​​deri altından tatbik edilebilir, ama iyi aseptik teknikler kullanılır ise, bu gerekli değildir. </li></ol> 4. Hastaya yaralar ve bipediküllü Kanatçığını oluşturma <ol><li> Steril, tek kullanımlık 6 mm biyopsi yumruk aracını kullanarak, belirlenen flep alanı (Şekil 1B) merkezinde iki dairesel &quot;iskemik&quot; yaraları oluşturun. Yaranın derinliği (değil aracılığıyla) panniculus Carno altında yatan fasya olmalıdırsus kas (Şekil 1B ek). </li><li> Forseps punch biyopsi tarafından oluşturulan yara anahat ortasında cilt kaldırın ve daha sonra (panniculus carnosus kas dahil) doku dairesel parça çıkarılması için (kavisli ipuçları) iris makas kullanın. Sonuç yara üs olarak fasya ile yara tam kalınlıkta olacak. Not: eksize edilen doku (yara fişler) sıvı azot içinde dondurulmuş ya da kontrol olarak, daha sonra işlemci, normal bir cilt için 10% tamponlu formalin O / N sabit ek bileşeni olabilir. </li><li> Ayrı uzunluğu 10,5 cm ve 3.0 cm önceden çizgilerle (Şekil 1C) boyunca iskemik yaraların her bir yanı üzerinde, steril bir bisturi ile insizyon yaparak bipediküllü kanatçık oluşturur. kesiler derinliği aşağı paraspinöz kaslara olmalıdır. Iris makas kullanarak, (6 mm yumruklar &quot;üs&quot; olarak sağlam fasya tutmak için dikkatli olmak, paraspinöz kaslarının F panniculus carnosus fasya ayrıigure 1D). </li><li> 1 steril önceden kesilmiş silikon levha alın ve panniculus carnosus fasya ve levha toka veya kat etmediğini sağlanması paraspinöz kasların (Şekil 1E) arasına yerleştirmek. Siyah, emilemeyen sütürler (boyut 4.0) kullanılarak flep (Şekil 1F ve 1G) uzunluğu boyunca, her iki tarafta en az 8 kesintiye dikiş ile cilt silikon tabakanın demirleme her iki kesiler kapatın. </li><li> Steril, tek kullanımlık biyopsi yumruk aracını kullanarak, 1 cm flep (Şekil 1G) her iki tarafında iskemik yaralara yanal (panniculus carnosus kasının ön fasya aşağı) iki iç kontrol &quot;non-iskemik&quot; yaraları oluşturun. </li><li> Yaralar altında bir cetvel yerleştirin ve yara ölçüm amaçları (Şekil 3A bakınız) dijital fotoğraf çekmek. Bu zamanda, kan akışı (perfüzyon) lazer Doppler ya da yapılan diğer manipülasyonlar (topikal ilaç yerleştirme) kullanılması ile izlenir.</li><li> Kranial ve kaudal yaralara ve nemli ve (steril) temiz yara ortamı tutmak için soyunma şeffaf bir film hem de onaylı bir sıvı yapıştırıcı uygulayın. Ek soyunma en kaudal sütür kaldırmasını hayvan önlemek için flep kaudal ucunda yerleştirilebilir. </li></ol> 5. Post-operatif Prosedürleri <ol><li> Besleyici karşı sürtünme gelen cerrahi siteyi önleyecek şekilde sığ besleyiciler ile donatılmış kafeslere (tek başına ev sahipliği) hayvanları yerleştirin. Hayvanlar katılımsız sol ya da sternum yatma korumak ve maksatlı hareket sergilemek için yeterli bilince yeniden kadar diğer hayvanların şirkete iade edilmemelidir. Isıtma paspaslar kurtarma sırasında en fazla 2 gün kafesin yarısı altına alınmalıdır. </li><li> Operasyon sonrası ağrı yönetmek için, en fazla 48 saat sonrası ameliyat için ertesi sabah ve günde 1x hayvanlara deri altından Ketoprofen (5 mg / kg) yönetmek. Hayvanlar ayrıca, her gün izlenmelidirağrı, kilo kaybı veya cerrahi alan infeksiyonlarının uzun işaretler. </li></ol> 6. sonraki Yara Ölçümleri ve Soyunma Değişiklikler <ol><li> Indüksiyon odasında aracılığıyla% 3 izofluran kullanarak genel anestezi altında sık sık -4% iskemik ve non-iskemik yaraları ölçün ve adım 3.1 gibi O 2 ile% 1 -2% (a burun konisi yoluyla) yapılmaktadır. </li><li> Yapıştırıcıyı deriden çekmeyin olarak yavaşça soyunma çıkarın. Ek dijital fotoğraf yara ölçümleri için alınan bu anda, topikal tedaviler yeniden uygulanan lazer Doppler görüntüleme (LDI) veya araştırmacının ihtiyaçlarını karşılamak üzere yapılan diğer manipülasyonlar. </li><li> Yapışkan ve temiz bir pansuman uygulayın ve hayvan adım 5.1 olarak kurtarmak için izin verir. </li></ol> 7. Yara Toplama ve Ötenazi <ol><li> Hayvan bir ind üzerinden% 3 -4% izofluran kullanarak genel anestezi altında iken Hasat iskemik ve non-iskemik yaralar (günlerde araştırmacı uygun gördüğü)uction bölmesi ve adım 3.1 olarak O 2 ile% 1-% 2 (a burun konisi ile) korunur. </li><li> Bir neşter kullanarak, yaranın etrafındaki sağlıklı dokuların dahil yaranın etrafında bir kare şekilli eksizyon yapmak. 1.5 ml eksizyon yerleştirin başlıklı bir tüp içerisinde ek ve gelecekteki moleküler analiz için (-80 ° C&#39;de saklayın) sıvı azot içinde dondurularak bileşenini veya histolojik inceleme için oda sıcaklığında% 10 tamponlu formalin O&#39;da / N inkübe edin. NOT: yara eksizyon da analiz için daha fazla örnek sağlamak için yarıya olabilir. </li><li> Yara doku çıkarıldıktan sonra, CO 2 inhalasyon onaylanmış yöntemi kullanarak hayvan euthanize. </li></ol>

<ol><li>Ansell, D. M., Holden, K. A., Hardman, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+wound+repair%3A+Are+they+cutting+it%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+dermatology%22%5BJournal%5D)">Animal models of wound repair: Are they cutting it.</a> Experimental dermatology. 21 (8), 581-585 (2012).</li>
<li>Dorsett-Martin, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+models+of+skin+wound+healing%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+repair+and+regeneration+%3A+official+publication+of+the+Wound+Healing+Society+%5Band%5D+the+European+Tissue+Repair+Society%22%5BJournal%5D)">Rat models of skin wound healing: a review.</a> Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 12 (6), 591-599 (2003).</li>
<li>Davidson, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+wound+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Dermatol+Res%22%5BJournal%5D)">Animal models for wound repair.</a> Arch Dermatol Res. 290 (S1-11), (1998).</li>
<li>Finn, G., Magnus, S. A., Tonny, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+for+use+in+wound+healing+research%3A+A+survey+focusing+on+in+vitro+and+in+vivo+adult+soft+tissue%29%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair+and+Regeneration%22%5BJournal%5D)">Models for use in wound healing research: A survey focusing on in vitro and in vivo adult soft tissue).</a> Wound Repair and Regeneration. 8, (2000).</li>
<li>Gould, L. J., Leong, M., Sonstein, J., Wilson, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+and+validation+of+an+ischemic+wound+model%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+repair+and+regeneration+%3A+official+publication+of+the+Wound+Healing+Society+%5Band%5D+the+European+Tissue+Repair+Society%22%5BJournal%5D)">Optimization and validation of an ischemic wound model.</a> Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 13 (6), 576-582 (2004).</li>
<li>Loots, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differences+in+cellular+infiltrate+and+extracellular+matrix+of+chronic+diabetic+and+venous+ulcers+versus+acute+wounds%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+investigative+dermatology%22%5BJournal%5D)">Differences in cellular infiltrate and extracellular matrix of chronic diabetic and venous ulcers versus acute wounds.</a> The Journal of investigative dermatology. 111 (5), 850-857 (1998).</li>
<li>Schwartz, D. A., Lindblad, W. J., Rees, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+collagen+metabolism+and+delayed+healing+in+a+novel+model+of+ischemic+wounds%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair+Regen%22%5BJournal%5D)">Altered collagen metabolism and delayed healing in a novel model of ischemic wounds.</a> Wound Repair Regen. 3 (2), 204-212 (1995).</li>
<li>Chen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+and+mechanistic+validation+of+delayed+healing+rat+wounds+as+a+model+for+human+chronic+wounds%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair+and+Regeneration%22%5BJournal%5D)">Molecular and mechanistic validation of delayed healing rat wounds as a model for human chronic wounds.</a> Wound Repair and Regeneration. 7, (1999).</li>
<li>Zhang, Q., Chang, Q., Cox, R. A., Gong, X., Gould, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperbaric+oxygen+attenuates+apoptosis+and+decreases+inflammation+in+an+ischemic+wound+model%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+investigative+dermatology%22%5BJournal%5D)">Hyperbaric oxygen attenuates apoptosis and decreases inflammation in an ischemic wound model.</a> The Journal of investigative dermatology. 128 (8), 2102-2112 (2008).</li>
<li>Zhang, Q., Gould, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperbaric+oxygen+reduces+matrix+metalloproteinases+in+ischemic+wounds+through+a+redox-dependent+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+investigative+dermatology%22%5BJournal%5D)">Hyperbaric oxygen reduces matrix metalloproteinases in ischemic wounds through a redox-dependent mechanism.</a> The Journal of investigative dermatology. 134 (1), 237-246 (2013).</li>
<li>Moor, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Consequences+of+age+on+ischemic+wound+healing+in+rats%3A+altered+antioxidant+activity+and+delayed+wound+closure%5BTitle%5D)+AND+%22Age+%28Dordrecht%2C+Netherlands%29%22%5BJournal%5D)">Consequences of age on ischemic wound healing in rats: altered antioxidant activity and delayed wound closure.</a> Age (Dordrecht, Netherlands). 36 (2), 733-748 (2014).</li>
<li>Roy, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+a+preclinical+model+of+chronic+ischemic+wound%29%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+genomics%22%5BJournal%5D)">Characterization of a preclinical model of chronic ischemic wound).</a> Physiological genomics. 37 (3), 211-224 (2009).</li>
<li>Biswas, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia+inducible+microRNA+210+attenuates+keratinocyte+proliferation+and+impairs+closure+in+a+murine+model+of+ischemic+wounds%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Hypoxia inducible microRNA 210 attenuates keratinocyte proliferation and impairs closure in a murine model of ischemic wounds.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (15), 6976-6981 (2010).</li>
<li>Winocour, S., Vorstenbosch, J., Trzeciak, A., Lessard, L., Philip, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD109%2C+a+novel+TGF-beta+antagonist%2C+decreases+fibrotic+responses+in+a+hypoxic+wound+model%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Dermatol%22%5BJournal%5D)">CD109, a novel TGF-beta antagonist, decreases fibrotic responses in a hypoxic wound model.</a> Exp Dermatol. 23 (7), 475-479 (2014).</li>
</ol>

The authors have nothing to disclose.

<html> Sıçanlarda yara iyileşmesi nedeniyle genellikle enfekte yaralar ve interanimal değişkenlik 5 yüksek oranda iyileşmek için kendi yeteneklerine tartışma konusu olmuştur. Gelişimi sırasında modelin orijinal hedeflerinden biri bu varyasyonu azaltmak oldu. Belirli yerleştirme ile yaraların sayısını azaltarak kanadın genişliği Değişiklikler, silikon levha ve giriş (tutarlı kranyokaudal konumu ile kapağın merkezli) Bu hedefe gerçekleştirmiştir. Daralma Yara iyileşmesi de insanla...

Etkili ilaç geliştirme ve diğer yara iyileştirici terapötik insan tedavilere 1 hayvan modellerinde bulguları çevirisinde bilinen sorunlara rağmen, in vivo modellerde uygun gerektirir. Aşağıda mekanizmaları patolojik yara iyileşmesi daha anlayış araştırmak için iskemik deri yara iyileşmesi bir sıçan modelinde kullanımı için detaylı bir protokol bir açıklama. fare türleri, genellikle geniş kullanılabilirliği, boyuta bağlı olarak kullanılan ve kesik ve eksizyon yaralama, görüntüleme ve doku toplanması 2 için uygun bir deri alanı sağlamak için yeterince büyük olduğu uysal yapısı yara iyileşmesi çalışmaları için kullanılır. Ancak sıçanlar, gevşek derili hayvanlar ifade edilen ile, fare ve insan cilt anatomik farklı dikkatli dikkate alınmalıdır. Bu farklı karakteristik sıçan derisi kapanış w ölçüde katkıda yerine epitelizasyona çok yara kasılması sağlarbileşiklerdir 2. Buna ek olarak, sıçanlarda deri altından istemsiz kas carnosus varlığı, hem de daralma ve kolajen oluşumunda 3,4 ile iyileşmeye katkıda bulunur. Bunlar çok önemli anatomik farklar sıçan iskemik deri yara modelinin geliştirilmesi dikkate alınmıştır ve belirli değişiklikler yara daralma azaltmak ve panniculus carnosus kas 5 etkisini azaltmak için uygulanmıştır. Diyabetik ayak ülserleri, venöz bacak ülseri ve basınç ülserlerinde, şifa gecikir ve bu yaralar, kronik olarak kabul edilir. yaralar yara onarımı 6 sonraki aşamalarında dönüşmesini engeller yara aşırı enflamasyon ile karakterize edilir. Kronik yara gelişiminde en önemli faktörlerden biri iltihabı temizlemek için yetersizlik katkıda lokalize doku iskemisi (düşük kan akışı) 5&#39;tir. Bu model, 2003-4 yılında (geliştirilmiş ve valide ediliyordu sırasında zaman), Yara yatağında, normal yara iyileşmesi sırasında önemli bir aşama ve bu modeli 5 geliştirilmesi için motivasyon anjiyogenez indüksiyonu test etmek için yeterli doku sağlayabilir standart bir hayvan modelleri vardı. Burada sunulan modeli Chen ve arkadaşları tarafından değiştirilmiş bir biçimde kullanılan orijinal Schwartz ve diğerleri., 7 ve daha sonra tarif edilen iskemik yara modeli bir değişiklik, adı geçen. 8 Modifiye iskemik yara modelinde değişiklikler yerine epitelizasyona daha kasılması ile şifa yol sıçan yukarıda belirtilen anatomik özelliklerini aşmak için yapılmıştır: (1) İki tam kalınlıkta eksizyonel yaralar bir bipediküllü dorsal deri flebi ve içinde oluşturulan panniculus carnosus kas sadece kas fasya üzerinde diseksiyon ile yara yatağı çıkarılır. (2) kapağı kendisi t orta noktasında yer alan daha dar bir kan temini rastgele sağlamak boyutları ve yaralar vardırO flep iskemik bulunmaktadır. (3) silikon tabaka, alt dokularla kanadın readherence ve reperfüzyon önlenmesi, dalgalanmanın altına sokulur. Yara daralma ankraj veya silikon tabaka 5 kapağı dikilerek (elimine değil) sınırlıdır. Model son zamanlarda yaşlı sıçanlarda 11 karşı genç iskemik yara iyileşmesi için 9,10 şifa iskemik yara üzerinde hiperbarik oksijen etkileri arasında değişen çalışmalarda kullanılmıştır ve uzun süreli doku iskemi güvenilir bir model olarak kanıtlanmıştır. bipediküllü flep boyutları da domuz 12 ve fareler olmak üzere ve diğer türler, (3,0-3,5 cm genişliğinde 10.5 cm uzunluğunda) ve F344 sıçanlarda (2 cm genişliğinde 11 cm uzunluğunda) Sprague Dawley sıçan dahil olmak üzere farklı suşları, adapte edilmiş 13,14. Bu video iskemik deri yara modeli gösteriye F344 doğuştan sıçan gerginlik kullanır. Aşağıda sunulan tüm hayvan prosedürleri için onay almak olduGüney Florida Hayvan Bakım Komitesi (IACUC) Üniversitesi ed ve Hayvan Refahı Yasası ve Bakım Kılavuzu ve Laboratuvar Hayvanları Kullanım tüm gereksinimleri uymak.

<table><tbody><tr><td>Sil-Tec medical grade sheeting</td><td>Technical Products Inc.</td><td>500-3</td><td>nonreinforced, 0.01 inches in thickness</td></tr><tr><td>Mini Iris scissors, 8 cm, curved, SS</td><td>World Precision Instruments</td><td>#503671</td><td></td></tr><tr><td>Ethilon Nylon Sutures</td><td>Ethicon</td><td>1964G</td><td>black, size 4.0, PC-3 16&amp;nbsp;mm needles (3/8 circle)</td></tr><tr><td>Laser Doppler Imager</td><td>Moor Instruments</td><td>moorLDI2-IR</td><td>Standard blood flow imager: http://us.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8</td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>NIH</td><td>free download</td><td>http://rsb.info.nih.gov/ij/</td></tr><tr><td>Mastisol</td><td>Henry Schein</td><td>Cat # 7289210</td><td>Fisher Scientific NC9774929</td></tr><tr><td>Tegaderm</td><td>Medical Specialties&amp;nbsp;</td><td>3M1624W</td><td>Fisher Scientific NC9922128</td></tr></tbody></table>

demonstration of the rat ischemic skin wound model

İnsanlarda kronik yaralar için eğilimi gibi bağlı hareketsizlik diyabet ve bozulmuş kardiyovasküler fonksiyonu, ve bası gibi yaşlanma, hastalık durumlarında artar. Hayvan modelleri, kronik yaraların karmaşıklığı anlayışını ileri götürmek amacıyla bu koşulları taklit etmek için bu girişimi geliştirilmiştir. Burada açıklanan model, iskemik hale gelir ve kronik yara fenotipi (indirgenmiş vaskülarizasyon, artmış enflamasyon ve gecikmiş yara kapatma) benzer yaralarda elde edilen kan akımının uzun bir azalma sağlayan bir fare iskemik flep modelidir. Bu kontroller olarak flep ile yanal merkezi olarak yerleştirilmiş 2 iskemik yara ve 2 iskemik olmayan yaralar bir bipediküllü dorsal flep oluşur. Bu iskemik deri flep modeli bir roman ilave bir bariyer ve revaskülarizasyon önlemek ve yaralar iyileşecek gibi daralmayı azaltmak için bir atel olarak işlev flep altına silikon tabakanın yerleştirilmesidir. Rağmennedeniyle insanlara kıyasla oldukça farklı anatomik ve fizyolojik farklılıklar çalışmalar yara iyileşmesi için sıçanları kullanarak tartışma (yani, bir panniculus carnosus kas, kısa ömrü varlığı, saç köklerinin sayısı artmış, ve enfekte yaralar iyileşecek onların yeteneği) Bu modelde kullanılan modifikasyonlar daha önce geliştirilen iskemik flep modelleri için değerli bir alternatif yapmak.

verimli yapıldığı takdirde sıçan iskemik yara iyileşmesi modeli protokol hayvan başına yaklaşık 20 dakika sürer. Önce bir Şekil 1G temsil gibi görünmelidir modeli soyunma uygulanması. Bu bipediküllü flep ve yaralar içinde iskemik olduğunu doğrulamak için önemli olacaktır. Yaraların düzeyinde Subkutan oksijen basıncı (PSCO 2) iki iskemik yaralarda arasındaki deri altı dokuda bir polarografik elektrot yerleştirerek bu modelin 5 doğrulama sırasında ?...

Watch this Scientific Journal Video about Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model at JoVE.com

Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model

sıçan nedeniyle onun büyüklüğü, kullanılabilirlik ve oldukça uysal davranış, yıllardır bir araştırma modeli olarak kullanılmıştır. Bu protokolün amacı, kronik yaraların patofizyolojisi değerli bilgiler sağlamak için bir iskemik deri yara iyileşmesi modeli olarak sıçan kullanmaktır.

Sıçan İskemik Cilt Yara Modeli Gösteri

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and ...

demonstration-of-the-rat-ischemic-skin-wound-model

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Medicine

21.3K Görüntüleme.  University of South Florida.  sıçan nedeniyle onun büyüklüğü, kullanılabilirlik ve oldukça uysal davranış, yıllardır bir araştırma modeli olarak kullanılmıştır. Bu protokolün amacı, kronik yaraların patofizyolojisi değerli bilgiler sağlamak için bir iskemik deri yara iyileşmesi modeli olarak sıçan kullanmaktır. 

Video: Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model

Acute Myocardial Infarction in Rats

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular diseases. Animal models that mimic human cardiac disease, such as myocardial infarction (MI) and ischemia-reperfusion (IR) that induces heart failure as well as pressure-overload (transverse aortic constriction) that induces cardiac hypertrophy and heart failure (Goldman and Tarnavski), are useful models to study cardiovascular disease. In particular, myocardial ischemia (MI) is a leading cause for cardiovascular morbidity and mortality despite controlling certain risk factors such as arteriosclerosis and treatments via surgical intervention (Thygesen). Furthermore, an acute loss of the myocardium following myocardial ischemia (MI) results in increased loading conditions that induces ventricular remodeling of the infarcted border zone and the remote non-infarcted myocardium. Myocyte apoptosis, necrosis and the resultant increased hemodynamic load activate multiple biochemical intracellular signaling that initiates LV dilatation, hypertrophy, ventricular shape distortion, and collagen scar formation. This pathological remodeling and failure to normalize the increased wall stresses results in progressive dilatation, recruitment of the border zone myocardium into the scar, and eventually deterioration in myocardial contractile function (i.e. heart failure). The progression of LV dysfunction and heart failure in rats is similar to that observed in patients who sustain a large myocardial infarction, survive and subsequently develops heart failure (Goldman). The acute myocardial infarction (AMI) model in rats has been used to mimic human cardiovascular disease; specifically used to study cardiac signaling mechanisms associated with heart failure as well as to assess the contribution of therapeutic strategies for the treatment of heart failure. The method described in this report is the rat model of acute myocardial infarction (AMI). This model is also referred to as an acute ischemic cardiomyopathy or ischemia followed by reperfusion (IR); which is induced by an acute 30-minute period of ischemia by ligation of the left anterior descending artery (LAD) followed by reperfusion of the tissue by releasing the LAD ligation (Vasilyev and McConnell). This protocol will focus on assessment of the infarct size and the area-at-risk (AAR) by Evan's blue dye and triphenyl tetrazolium chloride (TTC) following 4-hours of reperfusion; additional comments toward the evaluation of cardiac function and remodeling by modifying the duration of reperfusion, is also presented. Overall, this AMI rat animal model is useful for studying the consequence of a myocardial infarction on cardiac pathophysiological and physiological function.

The rat model of acute myocardial infarction (AMI) is useful to study the consequence of a MI on cardiac pathophysiological and physiological function.

Sıçanlarda Akut Miyokard Enfarktüsü

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

Tıp

A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model

One major obstacle in current diabetic wound research is a lack of an ischemic wound model that can be safely used in diabetic animals. Drugs that work well in non-ischemic wounds may not work in human diabetic wounds because vasculopathy is one major factor that hinders healing of these wounds. We published an article in 2007 describing a rabbit ear ischemic wound model created by a minimally invasive surgical technique. Since then, we have further simplified the procedure for easier operation. On one ear, three small skin incisions were made on the vascular pedicles, 1-2 cm from the ear base. The central artery was ligated and cut along with the nerve. The whole cranial bundle was cut and ligated, leaving only the caudal branch intact. A circumferential subcutaneous tunnel was made through the incisions, to cut subcutaneous tissues, muscles, nerves, and small vessels. The other ear was used as a non-ischemic control. Four wounds were made on the ventral side of each ear. This technique produces 4 ischemic wounds and 4 non-ischemic wounds in one animal for paired comparisons. After surgery, the ischemic ear was cool and cyanotic, and showed reduced movement and a lack of pulse in the ear artery. Skin temperature of the ischemic ear was 1-10 &deg;C lower than that on the normal ear and this difference was maintained for more than one month. Ear tissue high-energy phosphate contents were lower in the ischemic ear than the control ear. Wound healing times were longer in the ischemic ear than in the non-ischemic ear when the same treatment was used. The technique has now been used on more than 80 rabbits in which 23 were diabetic (diabetes time ranging from 2 weeks to 2 years). No single rabbit has developed any surgical complications such as bleeding, infection, or rupture in the skin incisions. The model has many advantages, such as little skin disruption, longer ischemic time, and higher success rate, when compared to many other models. It can be safely used in animals with reduced resistance, and can also be modified to meet different testing requirements.

We have developed a minimally invasive technique to create a rabbit ischemic ear wound model by dividing the central artery and nerve and the cranial neurovascular bundle. A subcutaneous tunnel then cuts all subcutaneous tissues. This procedure causes minimal skin disruption and can be safely used in diabetic animals.

Bir İskemik Yara Model üretmek için Basitleştirilmiş Tekniği

One major obstacle in current diabetic wound research is a lack of an ischemic wound model that can be safely used in diabetic animals. Drugs that work ...

Murine Model of Wound Healing

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. Impaired wound healing, which occurs in diabetic patients for example, can lead to severe unfavorable outcomes such as amputation. There is, therefore, an increasing impetus to develop novel agents that promote wound repair. The testing of these has been limited to large animal models such as swine, which are often impractical. Mice represent the ideal preclinical model, as they are economical and amenable to genetic manipulation, which allows for mechanistic investigation. However, wound healing in a mouse is fundamentally different to that of humans as it primarily occurs via contraction. Our murine model overcomes this by incorporating a splint around the wound. By splinting the wound, the repair process is then dependent on epithelialization, cellular proliferation and angiogenesis, which closely mirror the biological processes of human wound healing. Whilst requiring consistency and care, this murine model does not involve complicated surgical techniques and allows for the robust testing of promising agents that may, for example, promote angiogenesis or inhibit inflammation. Furthermore, each mouse acts as its own control as two wounds are prepared, enabling the application of both the test compound and the vehicle control on the same animal. In conclusion, we demonstrate a practical, easy-to-learn, and robust model of wound healing, which is comparable to that of humans.

A murine model of cutaneous wound healing that can be used to assess therapeutic compounds in physiological and pathophysiological settings.

Yara Şifa murin Modeli

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

In situ Transverse Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A Rat Model of Myocutaneous Ischemia Reperfusion Injury

Free tissue transfer is the gold standard of reconstructive surgery to repair complex defects not amenable to local options or those requiring composite tissue. Ischemia reperfusion injury (IRI) is a known cause of partial free flap failure and has no effective treatment. Establishing a laboratory model of this injury can prove costly both financially as larger mammals are conventionally used and in the expertise required by the technical difficulty of these procedures typically requires employing an experienced microsurgeon. This publication and video demonstrate the effective use of a model of IRI in rats which does not require microsurgical expertise. This procedure is an in situ model of a transverse abdominis myocutaneous (TRAM) flap where atraumatic clamps are utilized to reproduce the ischemia-reperfusion injury associated with this surgery. A laser Doppler Imaging (LDI) scanner is employed to assess flap perfusion and the image processing software, Image J to assess percentage area skin survival as a primary outcome measure of injury.

In situ Transverse Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A Rat Model of Myocutaneous Ischemia Reperfusion Injury

Free tissue transfer is widely employed in reconstructive surgery to restore form and function following oncological resection and trauma. Preconditioning this tissue prior to surgery may improve outcome. This article describes an in situ transverse rectus abdominis myocutaneous flap (TRAM) in rats as a means for testing preconditioning strategies.

Miyokutanöz İskemi Reperfüzyon Hasarı Rat Modeli: in situ Enine Rektus abdominis kas deri Flap

Free tissue transfer is the gold standard of reconstructive surgery to repair complex defects not amenable to local options or those requiring composite ...

Ischemic Tissue Injury in the Dorsal Skinfold Chamber of the Mouse: A Skin Flap Model to Investigate Acute Persistent Ischemia

Despite profound expertise and advanced surgical techniques, ischemia-induced complications ranging from wound breakdown to extensive tissue necrosis are still occurring, particularly in reconstructive flap surgery. Multiple experimental flap models have been developed to analyze underlying causes and mechanisms and to investigate treatment strategies to prevent ischemic complications. The limiting factor of most models is the lacking possibility to directly and repetitively visualize microvascular architecture and hemodynamics. The goal of the protocol was to present a well-established mouse model affiliating these before mentioned lacking elements. Harder et al. have developed a model of a musculocutaneous flap with a random perfusion pattern that undergoes acute persistent ischemia and results in ~50% necrosis after 10 days if kept untreated. With the aid of intravital epi-fluorescence microscopy, this chamber model allows repetitive visualization of morphology and hemodynamics in different regions of interest over time. Associated processes such as apoptosis, inflammation, microvascular leakage and angiogenesis can be investigated and correlated to immunohistochemical and molecular protein assays. To date, the model has proven feasibility and reproducibility in several published experimental studies investigating the effect of pre-, peri- and postconditioning of ischemically challenged tissue.

The window of the murine dorsal skinfold chamber presented visualizes a zone of acute persistent ischemia of a musculocutaneous flap. Intravital epi-fluorescence microscopy permits for direct and repetitive assessment of the microvasculature and quantification of hemodynamics. Morphologic and hemodynamic results can further be correlated with histological and molecular analyses.

Mouse Dorsal Skinfold Odası&#39;nda İskemik Doku Yaralanması: Bir Cilt Flap Model Akut Kalıcı iskemisi Araştırma

Despite profound expertise and advanced surgical techniques, ischemia-induced complications ranging from wound breakdown to extensive tissue necrosis are ...

Assessment of Acute Wound Healing using the Dorsal Subcutaneous Polyvinyl Alcohol Sponge Implantation and Excisional Tail Skin Wound Models.

Wound healing is a complex process that requires the orderly progression of inflammation, granulation tissue formation, fibrosis, and resolution. Murine models provide valuable mechanistic insight into these processes; however, no single model fully addresses all aspects of the wound healing response. Instead, it is ideal to use multiple models to address the different aspects of wound healing. Here, two different methods that address diverse aspects of the wound healing response are described. In the first model, polyvinyl alcohol sponges are subcutaneously implanted along the mouse dorsum. Following sponge retrieval, cells can be isolated by mechanical disruption, and fluids can be extracted by centrifugation, thus allowing for a detailed characterization of cellular and cytokine responses in the acute wound environment. A limitation of this model is the inability to assess the rate of wound closure. For this, a tail skin excision model is utilized. In this model, a 10 mm x 3 mm rectangular piece of tail skin is excised along the dorsal surface, near the base of the tail. This model can be easily photographed for planimetric analysis to determine healing rates and can be excised for histological analysis. Both described methods can be utilized in genetically altered mouse strains, or in conjunction with models of comorbid conditions, such as diabetes, aging, or secondary infection, in order to elucidate wound healing mechanisms.

Here, two murine wound healing models are described, one designed to assess cellular and cytokine wound healing responses and the other to quantify the rate of wound closure. These methods can be used with complex disease models such as diabetes to determine mechanisms of various aspects of poor wound healing.

Dorsal Subkutan Polivinil Alkol Sünger İmplantasyonu ve Eksizyonal Kuyruk Deri Yara Modelleri kullanılarak Akut Yara İyileşmesinin Değerlendirilmesi.

Wound healing is a complex process that requires the orderly progression of inflammation, granulation tissue formation, fibrosis, and resolution. Murine ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Rat Burn Model to Study Full-Thickness Cutaneous Thermal Burn and Infection

Burn induction methodologies are inconsistently described in rat models. A uniform burn wound model, which represents the clinical scenario, is necessary to perform reproducible burn research. The present protocol describes a simple and reproducible method to create ~20% total body surface area (TBSA) full-thickness burns in rats. Here, a 22.89 cm2 (5.4 cm diameter) copper rod heated at 97&#160;&#176;C in a water bath was applied to the rat skin surface to induce the burn injury. A copper rod with a high thermal conductivity was able to dissipate the heat deeper in the skin tissue to create a full-thickness burn. Histology analysis shows attenuated epidermis with coagulative damage to the full-thickness extent of the dermis and the subcutaneous tissue. Additionally, this model is representative of the clinical situations observed in hospitalized burn patients following burn injury such as immune dysregulation and bacterial infections. The model can recapitulate the systemic bacterial infection by both Gram-positive and Gram-negative bacteria. In conclusion, this paper presents an easy-to-learn and robust rat burn model that mimics the clinical situations, including immune dysregulation and bacterial infections, which is of considerable utility for the development of new topical antibiotic drugs for burn wound and infections.

A model mimicking the clinical scenario of burn injury and infection is necessary for furthering burn research. The present protocol demonstrates a simple and reproducible rat burn infection model comparable to that in humans. This facilitates the study of burn and infections following burn for developing new topical antibiotic treatments.

Tam Kalınlıkta Kutanöz Termal Yanık ve Enfeksiyonu İncelemek için Sıçan Yanık Modeli

Burn induction methodologies are inconsistently described in rat models. A uniform burn wound model, which represents the clinical scenario, is necessary ...

A Pre-clinical Rat Model for the Study of Ischemia-reperfusion Injury in Reconstructive Microsurgery

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many areas of biomedical research due to its cost-effectiveness and its translation to humans. This protocol describes a method to create a preclinical free skin flap model in rats with ischemia-reperfusion injury. The described 3 cm x 6 cm rat free skin flap model is easily obtained after the placement of several vascular ligatures and the section of the vascular pedicle. Then, 8 h after the ischemic insult and completion of the microsurgical anastomosis, the free skin flap develops the tissue damage. These ischemia-reperfusion injury-related damages can be studied in this model, making it a suitable model for evaluating therapeutic agents to address this pathophysiological process. Furthermore, two main monitoring techniques are described in the protocol for the assessment of this animal model: transit-time ultrasound technology and laser speckle contrast analysis.

Here, we describe a pre-clinical animal model for studying the pathophysiology of ischemia-reperfusion injury in reconstructive microsurgery. This free skin flap model based on the superficial caudal epigastric vessels in the rat may also allow for the evaluation of different therapies and compounds to counteract ischemia-reperfusion injury-related damage.

Rekonstrüktif Mikrocerrahide İskemi-Reperfüzyon Hasarı Nın İnceleştirilmesinde Klinik Öncesi Sıçan Modeli

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many ...

Improved Rodent Model of Myocardial Ischemia and Reperfusion Injury

Myocardial ischemia and reperfusion injury (MIRI), induced by coronary heart disease (CHD), causes damage to the cardiomyocytes. Furthermore, evidence suggests that thrombolytic therapy or primary percutaneous coronary intervention (PPCI) does not prevent reperfusion injury. There is still no ideal animal model for MIRI. This study aims to improve the MIRI model in rats to make surgery easier and more feasible. A unique method for establishing MIRI is developed by using a soft tube during a key step of the ischemic period. To explore this method, thirty rats were randomly divided into three groups: sham group (n = 10); experimental model group (n = 10); and existing model group (n = 10). Findings of triphenyltetrazolium chloride staining, electrocardiography, and percent survival are compared to determine the accuracies and survival rates of the operations. Based on the study results, it has been concluded that the improved surgery method is associated with a higher survival rate, elevated ST-T segment, and larger infarct size, which is expected to mimic the pathology of MIRI better.

Myocardial ischemia-reperfusion model of rat heart is improved by using a self-made retractor, polyvinyl chloride tube, and a unique knotting method. Electrocardiogram, triphenyltetrazolium chloride and histological staining, and percent survival analysis results showed that the improved model group has higher success and survival rates than the already existing model group.

Miyokard İskemisi ve Reperfüzyon Hasarının Geliştirilmiş Kemirgen Modeli

Myocardial ischemia and reperfusion injury (MIRI), induced by coronary heart disease (CHD), causes damage to the cardiomyocytes. Furthermore, evidence ...

A Protocol for Constructing a Rat Wound Model of Type 1 Diabetes

A single high dose of streptozotocin injection followed by full-thickness skin excision on the dorsum of rats is a common method for constructing animal models of type 1 diabetic wounds. However, improper manipulation can lead to model instability and high mortality in rats. Unfortunately, there are few existing guidelines on type 1 diabetic wound modeling, and they lack detail and do not present specific reference strategies. Therefore, this protocol details the complete procedure for constructing a type 1 diabetic wound model and analyzes the progression and angiogenic characteristics of the diabetic wounds. Type 1 diabetic wound modeling involves the following steps: preparation of the streptozotocin injection, induction of type 1 diabetes mellitus, and construction of the wound model. The wound area was measured on day 7 and day 14 after wounding, and the skin tissues of the rats were extracted for histopathological and immunofluorescence analysis. The results revealed that type 1 diabetes mellitus induced by 55 mg/kg streptozotocin was associated with lower mortality and a high success rate. The blood glucose levels were relatively stable after 5 weeks of induction. The diabetic wound healing rate was significantly lower than that of normal wounds on day 7 and day 14 (p &#60; 0.05), but both could reach more than 90% on day 14. Compared with the normal group, the epidermal layer closure of diabetic wounds on day 14 was incomplete and had delayed re-epithelialization and significantly lower angiogenesis (p &#60; 0.01). The type 1 diabetic wound model constructed based on this protocol has the characteristics of chronic wound healing, including poor closure, delayed re-epithelialization, and decreased angiogenesis compared to normal rat wounds.

The streptozotocin-induced diabetic wound model in male SD rats is currently the most widely used model for studying wound healing in type I diabetes mellitus. This protocol describes the methods used to construct this model. It also presents and addresses potential challenges and examines the progression and angiogenic characteristics of diabetic wounds.

Tip 1 Diyabetin Sıçan Yara Modelini Oluşturmak İçin Bir Protokol

A single high dose of streptozotocin injection followed by full-thickness skin excision on the dorsum of rats is a common method for constructing animal ...