Name: a piglet model of neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy
Uploaded: 2015-05-16T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 30 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy at JoVE.com

The authors would like to thank John Kristensen and S&#248;ren Braad Andersen from the Department of Communication, Aarhus University Hospital, Denmark, for their exceptional help with filming and editing. Animal technician Diana Gyldenl&#248;ve and veterinarian Birgitte Kousgaard, Institute of Clinical Medicine Aarhus University Hospital, Denmark for assisting with animal care. This study was supported by the Lundbeck Foundation, the Laerdal Foundation for Acute Medicine, Central Denmark Region&#8217;s Research Foundation, Augustinus Foundation, Aase and Ejnar Danielsens Foundation, the Institute of Clinical Medicine Aarhus University Hospital, Br&#248;drene Hartmanns Foundation, Karen Elise Jensens Foundation, Fonden til L&#230;gevidenskabens Fremme, and Marie Dorthea og Holger From, Haderslevs Fond.

Mevcut protokol Danimarka Hayvan Deneyleri Müfettişliği tarafından onaylandı. Tüm test hayvanları prosedürler boyunca anestezi uygulandı. Bu protokolün çoğaltılması, ulusal etik ve hayvan refahı kurallarına uygun olarak yürütülen ve yerel etik komiteleri tarafından onaylanmalıdır. 1. Hayvanlar <ol><li> 2.000 gr - yaklaşık 1.500 ağırlığında Danimarkalı Landrace domuz yavrusu &lt;24 saat eski. </li></ol> 2. Anestezi ve Bakım Sıvıları <ol><li> Sevofluran yönetim, alkol bezlerden, periferik damar içi kateter, lastik bant, tuzlu su ile şırıngalar, propofol (5 mg / kg) için bir maske, fentanil (10 ug / kg) ve prokain benzilpenisilin: anestezi için gerekli olan ekipman (Şekil 1) hazırlayın (15,000 IU / kg). </li><li> Bir solunum maskesi ile% 1-2 sevofluran sunarak anestezi neden olur. <ol><li> Palpebral ve çekilme refl için değerlendirerek anestezi derinliğini değerlendirmekgiderler. Piglet derinden anestezi olduğunu zaman belli, perkütan kulak damar içine periferik intravenöz kateter yerleştirin. </li><li> Periferik damar içi kateter açıklığını onaylamak için, steril% 0.9 tuzlu su 1-2 ml kateteri yıkayın. Propofol (5 mg / kg) ve fentanil (/ kg 10 ug) bolus enjeksiyonları uygulayın. Bolus enjeksiyon yönetimine müteakiben steril% 0.9 tuzlu su 1-2 ml kullanarak intravenöz kateter ikinci kez yıkayın. </li><li> Iki ayrı bir şırınga infüzyon pompalarında propofol (10 mg / ml) ve fentanil (10 ug / mi) ile bir yer şırınga. Intravenöz kateter bağlı olan tek bir satır halinde infüzyon katılarak üç yollu iki şırınga pompaları iv tüpleri bağlayın. Sürekli propofol infüzyonu (4-12 mg / kg / saat) ve fentanil (10 ug / kg / st) başlatın. Sürekli infüzyon çalışan sonra, propofol ve fentanil ek bolus enjeksiyonları vermeyin. </li><li> Sevofluran gaz ANEST durdurulmalıdır yönetimilerine. </li><li> Antibiyotik profilaksisi için yerel kurallar uyarınca intramüsküler prokain benzilpenisilin (15,000 IU / kg) deri altından veya enjekte edilir. Günlük tekrarlayın. Video domuz yavruları im tatbikat ile karşılaştırıldığında daha yüksek bir plazma konsantrasyonu ve daha uzun yarı ömür ile sonuçlandığı gösterilmiştir SC uygulamasına göstermektedir. </li><li> Gözlerin kurumasını önlemek için göz yağlama merhem sürün. Bir cep şeklindeki açıklık oluşturmak için yavaşça alt göz kapağını aşağı çekin. Cebin içinde merhem küçük bir miktar sıkın. Kapat göz merhemi dağıtmak için. Kuruluk saatlik kontrol edin ve gerekirse yeniden uygulayın. </li><li> % 5 dekstroz, sürekli bir infüzyon hızı / 10 ml / kg / saat% 0.45 NaCl iv başlatın. Sırasında ve hipoksi sonrasında 5 ml / kg / saat hızını azaltın. 2-10 mmol / L arasında kan şekeri düzeylerini korumak için infüzyon hızı ayarlayın. </li></ol></li></ol><img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/52454/52454fig1.jpg" /> Figuanestezi ve entübasyon 1. donatım yeniden. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/52454/52454fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> 3. Entübasyon ve Havalandırma <ol><li> Entübasyon için gerekli ekipman (Şekil 1) hazırlayın: açılması için roküronyum bromür (1 mg / kg) kas gevşemesi için, bir halat sapan (Şekil 1&#39;de gösterildiği gibi aynı 4 mm naylon halat iki ucunu kravat birlikte bir daire oluşturacak şekilde) ağız, pamuklu bir düz bıçak Xylocaine sprey (100 mg / ml), manşon olan çeşitli büyüklükte endotrakeal tüpler, 500 mi kendinden şişen torba (3.0 mm, 2.5 mm, 2.0 mm tipleri) (torba valf bezi ve veteriner larengoskop uçlu havalandırma, manşet enflasyon ve stetoskop için 2 ml şırınga için) maske. </li><li> Aşağıdaki adımları izleyerek entübe: <ol><li> Her taraftan boynunu destekleyen yatar pozisyonda yerleştirin piglet düz bir laringeal pas güvenlientübasyon için adaçayı. </li><li> Sternal çentik (genellikle yaklaşık 13 cm) burun ucundan ölçerek endotrakeal tüpün uzunluğu tahmin edin. </li><li> Üst çene etrafında Yeri halat sapan (aşağı bakan) ve açık ağzı tutmak için yukarı alt çene ve dil tutun. </li><li> Kas gevşemesini teşvik etmek için rokuronyum bromür (1 mg / kg), iv uygulayın. </li><li> Yukarı dilini kaldırmak için laringoskop kullanın. </li><li> Pamuk ya da yemek borusuna retrovert veya yumuşak damak arkasında yakalanmış olabilir Piglet uzun epiglottis, ücretsiz bez uçlu kullanın. </li><li> Aritenoid kıkırdaklar ve ses tellerinin tam görünüm sağlayan dil kökünde karşı kaldırdı epiglottis tutmak için laringoskop Advance. </li><li> Laringeal spazmları önlemek için larinks topikal xylocaine spreyi (100 mg / ml) uygulayın. </li><li> Ses tellerinin sayesinde endotrakeal tüp ilerletin. Dar trakea kıkırdaklarının geçişini yardımcı olmak için bir dönme hareketi kullanın. Peşin tüp maille Hesapönceden ölçülmüş mesafe rding ve manuel ventilasyon için kendi kendine şişen torba (poşet valf maske) bağlanın. Xylocaine spreyi ile endotrakeal tüpün distal 1/3 sprey entübasyon sırasında sürtünmeyi azaltmak için. </li><li> Doğru endotrakeal tüp yerleştirme onaylamak için: nefes almada zorluk herhangi bir endikasyon için gözlemlemek, her iki akciğerde içine ikili hava girişi için dinleme göğüs ausculate, görsel endotrakeal tüpün proksimal yönünde yoğunlaşma varlığını teyit ve end tidal karbon varlığını doğrulamak kolorimetrik karbondioksit dedektörü ile veya varsa mekanik ventilatöre bağlı ekspiratuar CO 2 okuma ile dioksit. Normal end tidal karbondioksit% 5 civarında olduğunu. Bir normal görünümlü dalga ile birlikte% 2 üzerinde bir değer endotrakeal tüp trakea olduğunu teyit edecektir. </li><li> Aspirasyonu önlemek için endotrakeal tüp şişirin. Olmalıdır Kol hava basıncı en az 25 cm iskemik hasarı engellemek için H2O<html> çevredeki dokuya. Yerinde endotrakeal tüpü tutarak, tüpün etrafında bant parçası rüzgar, çene kapatın ve yerine tüp sabitlemek için burnu etrafında bantlama devam edin. Yavaşça yerinde kalmasını sağlamak için tüp çekin. </li><li> Mekanik ventilatöre endotrakeal tüp bağlayın. </li></ol></li><li> Ventilatör ayarlarını yapma: hacim kontrollü ventilasyon, tidal volüm (TV): 10 ml / kg [veya tepe inspiratuar basıncı 15 cm basınç kontrollü ventilasyon ile (PIP)]. Pozitif ekspirasyon sonu basınç (PEEP): 5 cm. I: E oranı 1: 2. Solunum hızı: 35 (4.5-5.5 kPa arasındaki end-tidal CO 2 korumak için hızını ayarlamak). </li></ol> 4. İzleme ve Vücut Sıvısı Örnekleme <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/52454/52454fig2.jpg" /> Izlemek için 2. Ekipman rakam.ank &quot;&gt; bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız. <ol><li> Sürekli rektal sıcaklık ölçümü, elektrokardiyografi (EKG) elektrotlar, pulse oksimetre, jilet ve EEG elektrotları için yapışkan bant, steril yağlayıcı, sonda: izleme (Şekil 2) için gerekli ekipman hazırlayın. <ol><li> Bir arka bacak üzerine yerleştirin doygunluk probu, rektal sıcaklık probu yağlayın ve rektum içine 6 cm yerleştirin 38,5-39 ° C fizyolojik düzeyde rektal sıcaklığı korumak için havai radyant ısıtıcı ve / veya ısıtılmış şişme hava yatağı yerleştirin ve yer EKG elektrotlar. </li><li> Derialtı iğne EEG elektrotları yerleştirilmesi için 1 cm x 1 cm alanlarını tıraş yüzüstü pozisyonda piglet yerleştirin; Her kulağın önünde tek ve sadece gözlerinin arkasında orta hatta referans elektrot. Alkollü bir bezle temizleyin elektrot sitesini, daha sonra iğne elektrot deri altına yerleştirin. Sırtüstü po yapışkan bant ve dönüş domuz yavrusu ile güvenli elektrotlarlan de. </li><li> AEEG monitörü açın. NOT: EEG entegre genlik üst ve alt kenar boşlukları ile yoğun bir iz oluşur. Bu modelde Alt ve üst kenar boşlukları genellikle bebeklerde görülen genellikle daha yüksektir 15-50 mV vardır. Hipoksi sırasında EKG o eser yanlış aEEG iz yükseltebilir, dikkat etmek önemlidir. Bolus ilaçlar (propofol veya fentanil) da geçici aEEG iz baskılayabilir ve deney sırasında mümkünse kaçınılmalıdır. Ilaç ve klinik olayların İdaresi aEEG izi yorumlanmasını kolaylaştırmak için işaretlenmiş olmalıdır. </li></ol></li><li> Steril eldiven, steril örtü, neşter, alkol bezlerden, steril mendil, göbek ven kateteri (5 Fr), umbilikal arter kateteri (3.5 Fr: merkezi arteriyel kan basıncı takibi ve kan örneklemesi (Şekil 3) için göbek kateterleri yerleştirmek için gerekli olan ekipman hazırlayın ), dikiş forseps, kavisli mikro forseps, makas, iğne tutucu ve sütür (setiÖrneğin, boyut 3-0), şeffaf yapışkan yama, kan örneklemesi için 5 ml şırınga. </li></ol><img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/52454/52454fig3.jpg" /> Göbek hatları ve kan örneklemesi için 3. Ekipman rakam. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/52454/52454fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <ol start="3"><li> Sterilize ve göbek çevresi asmak. Mümkün olduğunca cilde yakın göbek bağını kesmek için bir neşter kullanın. Bu anestezi Piglet umbilikal damarların maruz etmezse, damarları ortaya çıkarmak için göbek cilde göbek kordonu altında 2 mm kesti. Iki küçük göbek arterler ve daha büyük bir göbek ven (Şekil 4) belirleyin. </li><li> Arter (Şekil 4) dilate ve umbilikal arter kateter eklemek için kavisli mikro forseps kullanın(3.5 Fr). 3 x ağırlık cm Tahmin ekleme uzunluğu (kg) + 10 (otopsi renal arterlerin üzerinde inen aorta doğru yerleştirme dayalı ampirik formülü). </li><li> İkinci 5 Fr kateter göbek ven içine 5 cm (Şekil 4) yerleştirin. Kan dönüşü ile intravasküler kateter yerleştirme doğrulayın. Göbek etrafında bir çanta-string sütür koyarak Güvenli kateterler, dikiş göbek kateterleri her etrafında biter geçmesine ve bir düğüm. Yapışkanlı örtü ile kateterler örtün. </li><li> Önceden belirlenmiş zaman noktalarında kan örnekleri toplamak: 45 dakika hipoksik hasara 4) hipoksik saldırıdan sonra 2 st sonunda hipoksik hasara 3) içine 1) derhal hipoksi önce 2) 30 dakika. Kan örnekleri için deney diğer zaman noktaları amacına bağlı olarak seçilebilir. </li><li> Hipoksi-iskemi (Tablo 1) yol açtığı kan gazı değişiklikleri doğrulamak için hipoksi esnasında alınan kan örneklerinden arter kan gazı analizi kullanın. Domuz yavrusu düşük hemoglobin a sahip olduğunu unutmayınt doğum ve (8 g / dL civarında) sık kan örnekleme anemik hale gelebilir. 24 saat içinde beraberlik başına en az 2 ml kan / kg vücut ağırlığı, en az 5 ml kan / kg vücut ağırlığı çekiniz ve kan örneklemesi için yerel yönergelere uygun. Anemi belirtileri hematokrit ve taşikardi azalan içerir. </li><li> Intra-arteriyel kan basıncı izleme (MABP) devam için bir monitöre arteriyel hattı bağlayın. Sıvı ve ilaç uygulaması için venöz hattını kullanın. </li></ol><img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/52454/52454fig4.jpg" /> 4. Göbek damarları Şekil. Umbilikal ven (sağda) ve iki göbek arterler (solda) birini. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/52454/52454fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> 5. hipoksi <ol><li> Izleme tamamladıktan sonra 60 dakika bekleyin. % 4 O 2 geçerek hipoksi øndükle </sub&gt; /% 96 N 2 gaz karışımı. Yakından hayati parametreleri ve aEEG izlemek ve 45 dk hipoksi devam ediyor. </li><li> AEEG iz (üst kenar boşluğu &lt;7 mV) düz sonra, ilham oksijen fraksiyonu (FiO 2) değiştirerek oksijenasyonu ayarlayın ve Şekil 5&#39;te gösterilen akış şemasına göre aEEG düz bir iz muhafaza yüksek FiO 2 seviyesine ortalama hava yolu basıncı. En az 10 dakika süreyle bazal% 70 altında MABP için Amaç ve alt FiO 2 gerekirse hipotansiyon ve iskemi sağlamak. Hipotansiyon tarif edilen seviyesi daha önce ilgili hipoksik iskemik beyin yaralanması meydana getirmek için diğer 19,13,30 tarafından gösterilmiştir. </li><li> Ciddi hipotansiyon durumunda (MABP &lt;25 mm Hg) aşağıdaki şekilde kademeli olarak tedavi: kısa bir süre için% 1-5 FiO 2 geliştirmek, tuzlu su, bolus (10 ml / kg), dopamin infüzyonu (5-20 ug / kg / dk), ve noradrenalinin (20 ng-1 ug / kg / dak) infüzyonu. </li><li> &gt; 10 dakika süren nöbetler halinde (klonik, tonik or miyoklonik nöbetler, genellikle fokal veya aEEG genliği ani değişiklikler) tarafından belirtildiği gibi () aşağıdaki enjeksiyon geçmeden önce 30 dakika izin ile adım adım tedavi: fenobarbital iv 20 mg / kg tekrarlayın fenobarbital iv 20 mg / kg yavaş bolus ve midazolam iv 0.5 mg / kg&#39;dır. <ol><li> Nöbetler gelişebilir ve ilaç tedavisi ötanazi yanıt vermeyen iseniz gösterilir. </li></ol></li></ol><img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/52454/52454fig5.jpg" /> Oksijenasyonda ayarlamaları gösteren Şekil 5. hipoksi-iskemi akış şeması. Akış aEEG yanıta göre (F i O 2 ve P aw). Havayolu basıncı (P aw) Ortalama PIP / TV (düşük PIP alt P aw verir) ve solunum hızı değiştirilerek ayarlandı (düşük RR alt P aw verir). AEEG = Üst iz marjı &lt;5 mV ve iz alt marjı&gt; 3 uV (ortalama 4 mV) hedefleyin. HedefKalp atım hızı (KAH) =&gt; 80. Hedef ortalama arteriyel kan basıncı (MABP) = MABP&gt; 25. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/52454/52454fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> 6. 72 saat sağkalım <ol><li> Hipoksik hakaret sonra yakından piglet Monitör ve yavaş yavaş propofol ve fentanil infüzyon oranlarını azaltmak. Hayvan gönüllü nefes edildiği noktada Tüpü. </li><li> Yaşam süresi boyunca, yoğun bakım ve izleme eğitimli personel tarafından 24 saat seyretmek ile bir hayvan tesisinde domuz yavrusu tutun. Iv glukoz infüzyonları 20 ml yönetme / saatlik 2-3 kg. Hipoksi-iskemi kısmi şişe beslenme sonrası 26-48 saat sonra başlatılabilir. Öğürme refleksi mevcut değilse trakea ve akciğerlere aspirasyon biberonla besleme yoluyla oluşabilir. </li><li> Deney ile ilgili ise, Thoresen ve ark tarafından geliştirilen puanlama sistemi kullanılarak nörolojik durumlarını değerlendirmek., TarifOrijinal yayında 17 ayrıntı. </li></ol> 7. Sonuç Değerlendirmesi <ol><li> 72 saat sonra, uyutmak ve 2. bölümde açıklanan ve 3. Munkeby ark 31 ve diğerleri 2 tarafından açıklandığı gibi MR ilgili görüntüleme yöntemleri ile tarama gerçekleştirin tekrar havalandırın. </li><li> Deneyin sonunda pentobarbitalin letal dozu ile domuz yavrusu euthanize (5 g / kg, iv). </li><li> Deneyin amaca göre muayene için beyin hazırlayın. <ol><li> Formalin sabit doku beyin histoloji için.:. Robertson ve diğ 2 tarafından tarif edildiği gibi paraformaldehid diseksiyon ve sonrası sabitleme ardından PBS içinde% 4 paraformaldehit ile kardiyak perfüzyon, kullanım Chakkarapani ark 1 veya Liu ve diğerleri, 18 ya da beyin kaldırmak Andresen ve arkadaşları tarafından tarif edildiği gibi ve% 4 paraformaldehid içinde bırakın. 32 </li><li> Analiz için Snap-dondurulmuş doku gerektiren (örneğin, RNAAnaliz veya enzim aktivitesi deneyleri, 33). ilgi beyin bölgelerini teşrih, beyin çıkarın ve ek dondurularak azami 1 cm&#39;lik doku blokları sıvı azot içinde x 1 cm Munkeby ve arkadaşları tarafından tarif edildiği gibi 33 </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Chakkarapani, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenon+enhances+hypothermic+neuroprotection+in+asphyxiated+newborn+pigs.">Xenon enhances hypothermic neuroprotection in asphyxiated newborn pigs.</a> Annals of. 68, 330-341 (2010).</li><li>Robertson, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Melatonin+augments+hypothermic+neuroprotection+in+a+perinatal+asphyxia+model.">Melatonin augments hypothermic neuroprotection in a perinatal asphyxia model.</a> Brain : a journal of neurology. 136, 90-105 (2013).</li><li>Lawn, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Every+Newborn:+progress,+priorities,+and+potential+beyond+survival.">Every Newborn: progress, priorities, and potential beyond survival.</a> Lancet. 384, 189-205 (2014).</li><li>Lee, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrapartum-related+neonatal+encephalopathy+incidence+and+impairment+at+regional+and+global+levels+for+2010+with+trends+from+1990.">Intrapartum-related neonatal encephalopathy incidence and impairment at regional and global levels for 2010 with trends from 1990.</a> Pediatric research. 74, 50-72 (2013).</li><li>Kurinczuk, J. J., White-Koning, M., Badawi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+neonatal+encephalopathy+and+hypoxic-ischaemic+encephalopathy.">Epidemiology of neonatal encephalopathy and hypoxic-ischaemic encephalopathy.</a> Early human development. 86, 329-338 (2010).</li><li>Shankaran, S., Woldt, E., Koepke, T., Bedard, M. P., Nandyal, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+neonatal+morbidity+and+long-term+central+nervous+system+sequelae+of+perinatal+asphyxia+in+term+infants.">Acute neonatal morbidity and long-term central nervous system sequelae of perinatal asphyxia in term infants.</a> Early human development. 25, 135-148 (1991).</li><li>Robertson, C. M., Finer, N. N., Grace, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=School+performance+of+survivors+of+neonatal+encephalopathy+associated+with+birth+asphyxia+at+term.">School performance of survivors of neonatal encephalopathy associated with birth asphyxia at term.</a> The Journal of pediatrics. 114, 753-760 (1989).</li><li>Bennet, L., Booth, L., Gunn, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+biomarkers+for+hypoxic-ischemic+encephalopathy.">Potential biomarkers for hypoxic-ischemic encephalopathy.</a> Seminars in feta., &amp; neonatal medicine. 15, 253-260 (2010).</li><li>Yager, J. Y., Ashwal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+perinatal+hypoxic-ischemic+brain+damage.">Animal models of perinatal hypoxic-ischemic brain damage.</a> Pediatric neurology. 40, 156-167 (2009).</li><li>Buckley, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maturation+of+circulatory+system+in+three+mammalian+models+of+human+development.">Maturation of circulatory system in three mammalian models of human development.</a> Comparative biochemistry and physiology. A, Comparative. 83, 1-7 (1986).</li><li>Dobbing, J., Sands, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+aspects+of+the+brain+growth+spurt.">Comparative aspects of the brain growth spurt.</a> Early human development. 3, 79-83 (1979).</li><li>Dobbing, J., Sands, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+growth+and+development+of+human+brain.">Quantitative growth and development of human brain.</a> Archives of disease in childhood. 48, 757-767 (1973).</li><li>Foster, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+survival+model+of+hypoxia/ischaemia+in+the+piglet+suitable+for+neuroprotection+studies.">An improved survival model of hypoxia/ischaemia in the piglet suitable for neuroprotection studies.</a> Brain research. 919, 122-131 (2001).</li><li>LeBlanc, M. H., Li, X. Q., Huang, M., Patel, D. M., Smith, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AMPA+antagonist+LY293558+does+not+affect+the+severity+of+hypoxic-ischemic+injury+in+newborn+pigs.">AMPA antagonist LY293558 does not affect the severity of hypoxic-ischemic injury in newborn pigs.</a> Stroke; a journal of cerebral circulation. 26, 1908-1914 (1995).</li><li>Andresen, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nicotine+affects+the+expression+of+brain-derived+neurotrophic+factor+mRNA+and+protein+in+the+hippocampus+of+hypoxic+newborn+piglets.">Nicotine affects the expression of brain-derived neurotrophic factor mRNA and protein in the hippocampus of hypoxic newborn piglets.</a> J Perinat Med. 37, 553-560 (2009).</li><li>Cheung, P. Y., Gill, R. S., Bigam, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+swine+model+of+neonatal+asphyxia.">A swine model of neonatal asphyxia.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , (2011).</li><li>Thoresen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+piglet+survival+model+of+posthypoxic+encephalopathy.">A piglet survival model of posthypoxic encephalopathy.</a> Pediatric research. 40, 738-748 (1996).</li><li>Liu, X., Tooley, J., Loberg, E. M., Suleiman, M. S., Thoresen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immediate+hypothermia+reduces+cardiac+troponin+I+after+hypoxic-ischemic+encephalopathy+in+newborn+pigs.">Immediate hypothermia reduces cardiac troponin I after hypoxic-ischemic encephalopathy in newborn pigs.</a> Pediatric research. 70, 352-356 (2011).</li><li>Bjorkman, S. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxic/Ischemic+models+in+newborn+piglet:+comparison+of+constant+FiO2+versus+variable+FiO2+delivery.">Hypoxic/Ischemic models in newborn piglet: comparison of constant FiO2 versus variable FiO2 delivery.</a> Brain research. 1100, 110-117 (2006).</li><li>Robertson, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Which+neuroprotective+agents+are+ready+for+bench+to+bedside+translation+in+the+newborn+infant.">Which neuroprotective agents are ready for bench to bedside translation in the newborn infant.</a> The Journal of pediatrics. 160, 544-552 (2012).</li><li>Jacobs, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cooling+for+newborns+with+hypoxic+ischaemic+encephalopathy.">Cooling for newborns with hypoxic ischaemic encephalopathy.</a> Cochrane Database Syst Rev. 1, CD003311 (2013).</li><li>Andresen, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resuscitation+with+21+or+100%+oxygen+in+hypoxic+nicotine-pretreated+newborn+piglets:+possible+neuroprotective+effects+of+nicotine.">Resuscitation with 21 or 100% oxygen in hypoxic nicotine-pretreated newborn piglets: possible neuroprotective effects of nicotine.</a> Neonatology. 93, 36-44 (2008).</li><li>Karlsson, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+hypothermia+as+selective+head+cooling+or+whole+body+cooling+does+not+protect+brain+or+body+in+newborn+pig+subjected+to+hypoxia-ischemia.">Delayed hypothermia as selective head cooling or whole body cooling does not protect brain or body in newborn pig subjected to hypoxia-ischemia.</a> Pediatric research. 64, 74-78 (2008).</li><li>Kovacs, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asphyxia-induced+release+of+alpha-melanocyte-stimulating+hormone+in+newborn+pigs.">Asphyxia-induced release of alpha-melanocyte-stimulating hormone in newborn pigs.</a> Peptides. 22, 1049-1053 (2001).</li><li>Varvarousi, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asphyxial+cardiac+arrest,+resuscitation+and+neurological+outcome+in+a+Landrace/Large-White+swine+model.">Asphyxial cardiac arrest, resuscitation and neurological outcome in a Landrace/Large-White swine model.</a> Laboratory animals. 45, 184-190 (2011).</li><li>Tammela, O., Pastuszko, A., Lajevardi, N. S., Delivoria-Papadopoulos, M., Wilson, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activity+of+tyrosine+hydroxylase+in+the+striatum+of+newborn+piglets+in+response+to+hypocapnic+hypoxia.">Activity of tyrosine hydroxylase in the striatum of newborn piglets in response to hypocapnic hypoxia.</a> Journal of neurochemistry. 60, 1399-1406 (1993).</li><li>Cote, A., Barter, J., Meehan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-dependent+metabolic+effects+of+repeated+hypoxemia+in+piglets.">Age-dependent metabolic effects of repeated hypoxemia in piglets.</a> Canadian journal of physiology and pharmacology. 78, 321-328 (2000).</li><li>Tichauer, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+the+severity+of+perinatal+hypoxia-ischemia+in+piglets+using+near-infrared+spectroscopy+to+measure+the+cerebral+metabolic+rate+of+oxygen.">Assessing the severity of perinatal hypoxia-ischemia in piglets using near-infrared spectroscopy to measure the cerebral metabolic rate of oxygen.</a> Pediatric research. 65, 301-306 (2009).</li><li>Jasani, M. S., Salzman, S. K., Tice, L. L., Ginn, A., Nadkarni, V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthetic+regimen+effects+on+a+pediatric+porcine+model+of+asphyxial+arrest.">Anesthetic regimen effects on a pediatric porcine model of asphyxial arrest.</a> Resuscitation. 35, 69-75 (1997).</li><li>Chakkarapani, E., Thoresen, M., Liu, X., Walloe, L., Dingley, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenon+offers+stable+haemodynamics+independent+of+induced+hypothermia+after+hypoxia-ischaemia+in+newborn+pigs.">Xenon offers stable haemodynamics independent of induced hypothermia after hypoxia-ischaemia in newborn pigs.</a> Intensive care medicine. 38, 316-323 (2012).</li><li>Munkeby, B. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+piglet+model+for+detection+of+hypoxic-ischemic+brain+injury+with+magnetic+resonance+imaging.">A piglet model for detection of hypoxic-ischemic brain injury with magnetic resonance imaging.</a> Acta radiologica. 49, 1049-1057 (2008).</li><li>Andresen, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Newborn+piglets+exposed+to+hypoxia+after+nicotine+or+saline+pretreatment:+long-term+effects+on+brain+and+heart.">Newborn piglets exposed to hypoxia after nicotine or saline pretreatment: long-term effects on brain and heart.</a> J Matern Fetal Neonatal Med. 22, 161-168 (2009).</li><li>Munkeby, B. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resuscitation+with+100%+O2+increases+cerebral+injury+in+hypoxemic+piglets.">Resuscitation with 100% O2 increases cerebral injury in hypoxemic piglets.</a> Pediatric research. 56, 783-790 (2004).</li></ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Nedeniyle karmaşıklığına, açıklanan model sadece akredite tesislerde uygulanabilir ve hayvan araştırmalarında deneyimli. Yerel etik komiteler tarafından onaylanması öncesinde deneylerin başlamasından alınmalı ve optimum hayvan refahı her zaman sağlanmalıdır. Model test hayvanlarının hayatta kalma dayanmaktadır gibi, steril bir ortam enfeksiyonları önlemek için invazif prosedürler esnasında muhafaza edilmesi önemlidir. tüm anestezik ilaçların potansiyel nöro-...

Perinatal asfiksi Hipoksik-iskemik ensefalopati (HİE) ile ilişkili akut ve sıklıkla öngörülemeyen bir durumdur. Bu protokolün genel amacı, perinatal hipoksik iskemik ensefalopati bir domuz yavrusu hayatta kalma modeli ortaya koymaktır. Bu model yenidoğan beyin üzerinde ve kan, beyin omurilik sıvısı ve idrar gibi vücut sıvılarında nöropatolojisi deneysel tedaviler, manyetik rezonans görüntüleme ve spektroskopi (MRG ve MRS) ve biyobelirteçlerin hipoksi-iskemi çeşitli derecelerde etkisini araştırmak için kullanılabilir . modeli aynı zamanda küresel hipoksi-iskemi etkilenen bütün bunlar kardiyovasküler sistemi, solunum sistemi, böbrek ve karaciğer, soruşturma için yararlı olduğu kanıtlanmıştır. Perinatal asfiksi tehlikeye oksijen kaynağı intrapartum veya hemen doğum sonrası dönemde sonucudur. İntrapartum hipoksik olaylar dünyanın 2.9 değirmen yaklaşık dörtte, dünya çapında 0.660.000 ölüm her yıl için hesap2012 3 iyon neonatal ölümler. 2010 1,15 milyon bebeklerde doğum asfiksi 4 Aşağıdaki neonatal ensefalopati geliştiği tahmin edilmektedir. HIE gebelik 34 haftadan sonra doğan bebeklerde ensefalopati olarak tanımlanan sanayileşmiş dünyada 1-3 / 1000 canlı doğumda 5 oluşur ve 8.5 / 1000 canlı doğumda kadar gelişmekte olan ülkelerde 4. ölüm riski% 10-60 olduğunu ve hayatta kalanların% 30-100 6,7 nörolojik handikap riski. 50200000 sakatlık ayarlanmış yaşam yılları (DALY) intrapartum hipoksik olaylar 4 atfedilir. Halen HIE için destekleyici başka tek tedavi sonrası hipoksik hipotermi olduğunu. Böylece, tanı yöntemleri ve tedavi stratejileri gelişmeler HIE 8 yönetimini geliştirmek için gereklidir. Perinatal asfiksi ve neonatal beyin hasarı yönetiminde sonrası prognozu gelişmeler altta yatan hastalık mekanizmaları bilgisini genişleterek dayalı bird olası tedaviler. Farklı klinik olaylar HİE yol açabilir ve tek bir doğumevinde insidans düşük 5 olarak HIE hayvan modelleri özellikle yararlıdır. Prognostik ve tanılama araçları ve tedavi stratejileri, yeni test ederken biyolojik çeşitliliği etkisi minimize edilebileceği bir deney düzeneği, esastır. Bir hayvan modeli böylece uyarılan yaralanma ve hastalık ve İt&#39;s sonucu 9 katılan dinamik bir süreç altında yatan patolojik mekanizmaların anlaşılmasına katkıda, mümkün olduğunca yakından klinik durum yaklaştığı gerekir. Yenidoğan HIE hayvan modelleri kemirgenler, kuzu, domuz da dahil olmak üzere türlerin bir dizi ihtiva ederler. Buna karşılık, yeni doğmuş domuz yavrusu teslimat 11,12 zamanında boyutu ile ilgili olarak, kalp-damar sistemi 10 ve beyin vadeli insan bebeğe daha fazla benzerliği vardır. Piglet modelinde İzleme, enstrümantasyon ve sonuç değerlendirme tha benzerHİE ile bebeklerin klinik bakımda kullanılan t. Bu duruma göre, bu modelden yenidoğan bakım çevrilmesinden yüksek derecede vardır. Perinatal hipoksi ve HIE domuz yavrusu modelleri çok grup tarafından kullanılan ve alanda 13 bir dizi farklılık göstermektedir. Deneyin amacına göre, çok dikkat ilaçların seçimi ödenmelidir, hipoksi-iskemi, hakaret süresini ve şiddetini, post-hakaret resüsitasyon ve bakımı, ve sonuçları değerlendirme kontrol yöntemi uyarma yöntemi. Randomize bir çalışma tasarımı her zaman girişimsel çalışmalarda kullanılması gereken yanlılığı önlemek için. hipoksik iskemik yaralanma uyaran uygulanacak yöntem önemlidir. HİE giden küresel hipoksi sıklıkla beyin, kalp, akciğerler, böbrek ve karaciğer ile ilgili çoklu organ yetmezliği ile sonuçlanır. Değerlendirilen sonuçlarına göre, HIE modelleri fokal iskemi, örneğin güveniyor ziyade küresel hipoksi ve iskemi dayanmalıdır., Arabanın ligasyonu ileotid arterler 14. Ortalama kan basıncı&gt; 40 mm Hg 2 korurken yeni bir kağıt hipoksi kombinasyonu (FiO 2% 12) ve karotid arter sıkıştırma uyguladı. Başka bir grup negatif baz fazlalığı&gt; 20 mmol / L kadar% 8 O 2 küresel hipoksi kaynaklı veya arteriyel kan basıncı (MABP) &lt;15 mm Hg ortalama ve 4 saat 15 de hayvanların kurban. Hipoksi aynı zamanda kardiyak output ile titre edilmiştir MABP (bazal% 30-40) ve arteriyel pH (6,95-7,05), 16 (30-35 mm Hg). Bu raporda sunulan benzer aEEG bastırma ile titre küresel hipoksi-iskemi, modelleri elektrofizyolojik, klinik olarak ensefalopati gösterdi ve oksijensiz dönem bebek 17,18 bulunan durumuna nöropatolojik karşılaştırılabilir olması. indüklenen HIE derecesi önemlidir. HIE yararlı bir hayvan modeli, aynı zamanda, yeni dia test edilmesi için izin vermelidirusul ve tedavi seçenekleri gnostik. Bunu sağlamak için, modeller, yeni tedaviler değerlendirirken az alakalı olacağını çok az veya hiç tedavi potansiyeline sahip ciddi beyin hasarı gibi tedavi potansiyel var ılımlı HIE neden olmalıdır. Hipoksiye tolerans testi hayvanlar arasında önemli oranda değişmektedir. Önceki çalışmalar daha tutarlı bir beyin hasarı elde edilebileceğini göstermiştir ve daha fazla hayvan genlik entegre elektroensefalografi (aEEG) tarafından değerlendirilir her Piglet serebral yanıta göre uyarılan hipoksi bireyselleştirmekte ziyade boyunca bir dizi FiO 2 değeri kullanılarak 17,19 hayatta olduğunu hipoksik olayı. aEEG bastırma süresi 45 dakika aEEG bastırma &lt;artmaktadır 20 dk aEEG bastırma ve şiddetli nöbetler&gt; az sayıdaki histopatolojik değişikliklerle, beyin hasarının derecesine ilişkilidir. HİE için nöroprotektif tedavilerin bir yeni yorum davranışsal sonuç ölç sağlayan yaşam modelleri için ihtiyaç tespithayvan modellerinde 20 ures. Sunulan HIE Piglet modelinin sayısız avantajı vardır. Bu sonuç, insan fizyolojisine çevirmek için son derece muhtemeldir bir tür dayanmaktadır. AEEG Küresel hipoksi-iskemi modelleri çoklu organ yetmezliği ve hipoksi-iskemi titrasyon biyomarkerler, MR ve davranış ile ilgili zaman noktalarında değerlendirilebilir şekilde hayatta kalma klinik sonuçlarla ilgili beyin hasarı tutarlı bir derecede neden olur. Perinatal asfiksi ve HİE Piglet modelleri HIE patofizyolojisi içine geçerli içgörü önemli katkıda değil, aynı zamanda başarılı bir sonuçta insanlarda yeni tedaviler sonucu, klinik çalışmalar öncesinde var. Piglet model çalışmaları HIE 21 için bir tedavi olarak hipotermi kurulmasında önemli bir rol oynadı ve yenidoğan resüsitasyon araştırması 22 kullanılır. Asfiksi ve HİE, bir araştırma içinde yaparken çeşitli gruplar piglet modelleri kullanmışD çalışmaları hipotermi 23, a-melanosit uyarıcı hormon 24, kalp durması 25, tirozin hidroksilaz aktivitesi 26, tekrar hipoksik maruz 27, NMDA reseptör aktivitesi 14 içerir ve yakın kızıl ötesi spektroskopi 28. prosedür sırasında küçük ayarlamalar çok hafif ya da çok şiddetli beyin hasarı 29,2 ya sebep olabilir, bu raporda sunulan Piglet HIE modeli ile çalışmak teknik açıdan zor. Biz mevcut literatür önce yayınlanmış modeller üretmek için yeterli ayrıntı yoktu bulundu. Böylece, burada HIE çalışmaları için bu gelişmiş modeli kurmak için araştırmacıların sağlayan bu raporda bir domuz yavrusu 72 saat hayatta kalma modelinin kurulması için gerekli teknik prosedürlerin her adımını göstermektedir.

<table><tbody><tr><td>Warm-touch-pediatric blanket</td><td>Covidien</td><td>5030840</td><td></td></tr><tr><td>Adhesive Apertrue Drape</td><td>Barrier</td><td>915447</td><td></td></tr><tr><td>Utility Drape (sterile) 75x80 cm</td><td>Barrier</td><td>800530</td><td></td></tr><tr><td>Neoflon</td><td>BD - Luer</td><td>391350</td><td></td></tr><tr><td>Laryngoscope</td><td>Miller</td><td>85-0045</td><td></td></tr><tr><td>Endotracheal tube 2.5 mm&amp;nbsp;</td><td>Covidien</td><td>111-25</td><td></td></tr><tr><td>Endotracheal tube 3.0 mm with cuff</td><td>Unomedical</td><td>MM61110030</td><td></td></tr><tr><td>Endotracheal tube 3.5 mm with cuff</td><td>Unomedical</td><td>MM61110035</td><td></td></tr><tr><td>Anesthesia machine</td><td>GE Healthcare</td><td>1009-9002-000</td><td></td></tr><tr><td>EEG - electrodes/disposable subdermal needle electrode</td><td>Cephalon</td><td>ACCE120550</td><td></td></tr><tr><td>ECG - electrodes</td><td>medtronic</td><td>3010107-003</td><td></td></tr><tr><td>ECG-electrodes for MR</td><td>philips</td><td>ACCE120550</td><td></td></tr><tr><td>Arterial blood sampler - aspirator</td><td>Radiometer medical ApS</td><td>956552</td><td></td></tr><tr><td>Polyurethane Umbilical vein catheter (5 Fr/Ch)</td><td>Covidien</td><td>8888160341</td><td></td></tr><tr><td>Polyurethane Umbilical vein catheter (3,5 Fr/ch)</td><td>Covidien</td><td>8888160333</td><td></td></tr><tr><td>Suture set (size 3-0)</td><td>Covidien</td><td>8886 623341</td><td></td></tr><tr><td>BD Spinal needle 0.7x38mm</td><td>BD needles</td><td>405254</td><td></td></tr><tr><td>Gas with 96% Nitrogen / 4% oxygen</td><td>Air Liquide</td><td>made on order</td><td></td></tr><tr><td>NeuroMonitor (CFM) system</td><td>Natus Medical Incorporated</td><td>OBM70002</td><td></td></tr></tbody></table>

a piglet model of neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy

Hipoksik-iskemik ensefalopati (HİE) neden Doğum asfiksi, dünya çapında 0.660.000 ölüm her yıl, dünyanın en 2,9 milyon neonatal ölümlerin yaklaşık dörtte oluşturuyor. HİE hayvan modelleri HIE patofizyoloji anlaşılmasına katkıda bulunmuştur ve bağlı perinatal asfiksi beyin hasarı meydana dinamik bir süreç sermiştir. Bu nedenle, hayvan çalışmaları taciz sonrası tedavi stratejileri için bir zaman penceresi sürmüşlerdir. Hipotermi pdiglet modellerinde HIE için bir tedavi olarak test edilmiştir ve daha sonra, klinik testlerde de etkili olmuştur. Modelin Varyasyonları adjuvan nöro-koruyucu yöntemler ve ksenon ve melatoninin domuz yavrusu çalışmaları çalışmada uygulanmıştır klinik faz yol açmıştır I ve II çalışmalarda 1,2. domuz yavrusu HİE modeli daha yenidoğan resuscitation- ve hemodinamik çalışmalar hem de hücresel seviyede serebral hipoksi araştırmalarda kullanılır. Bununla birlikte, teknik olarak zorprotokolde modeli ve varyasyonları ya çok hafif ya da çok şiddetli beyin yaralanmaya neden olabilir. Bu yazıda, yenidoğan HIE istikrarlı bir domuz yavrusu modelinin kurulması için gerekli teknik prosedürleri göstermektedir. İlk olarak, yenidoğan piglet (&lt;24 saat eski, ortanca ağırlık 1500 gr), anestezi entübe ve yenidoğan yoğun bakım ünitesinde bulunan kıyaslanabilir bir kurulumda izlenir. Küresel hipoksi-iskemi küresel hipoksi, hipotansiyon ile iskemi ve serebral hipoksi gösteren düz bir iz genlik entegre EEG (aEEG) ulaşmak için inspirasyon oksijen fraksiyonu düşürerek indüklenir. Hayatta kalma aEEG tepki ve kan basıncına göre oksijen ayarlayarak teşvik edilmektedir. Beyin hasarı 72 saat sonra histopatolojik ve manyetik rezonans görüntüleme ile ölçülür.

kaynaklı hakaret sırasında meydana beyinde hipoksi-iskemi etkileri aEEG izini kaydedilerek belgelenmiştir. Temsili aEEG izi, Şekil 6&#39;da gösterilmiştir. <img alt="Şekil 6," src="/files/ftp_upload/52454/52454fig6.jpg" /> Şekil 6. Temsilcisi aEEG iz. Nedeniyle hipoksi-iskemi Düşük genlik. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/52454/52454fig6large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini ...

Watch this Scientific Journal Video about A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy at JoVE.com

A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

Hypoxic-ischemic encephalopathy following perinatal asphyxia can be studied using animal models. We demonstrate the procedures necessary for establishing a piglet model of neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy.

Yenidoğan Hipoksik-İskemik Ensefalopati A Piglet Modeli

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the ...

a-piglet-model-of-neonatal-hypoxic-ischemic-encephalopathy

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Medicine

19.5K Görüntüleme.  Institute of Clinical Medicine, Aarhus University Hospital. Hypoxic-ischemic encephalopathy following perinatal asphyxia can be studied using animal models. We demonstrate the procedures necessary for establishing a piglet model of neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy. 

Video: A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

Mouse Models of Periventricular Leukomalacia

We describe a protocol for establishing mouse models of periventricular leukomalacia (PVL). PVL is the predominant form of brain injury in premature infants and the most common antecedent of cerebral palsy. PVL is characterized by periventricular white matter damage with prominent oligodendroglial injury. Hypoxia/ischemia with or without systemic infection/inflammation are the primary causes of PVL. We use P6 mice to create models of neonatal brain injury by the induction of hypoxia/ischemia with or without systemic infection/inflammation with unilateral carotid ligation followed by exposure to hypoxia with or without injection of the endotoxin lipopolysaccharide (LPS). Immunohistochemistry of myelin basic protein (MBP) or O1 and electron microscopic examination show prominent myelin loss in cerebral white matter with additional damage to the hippocampus and thalamus. Establishment of mouse models of PVL will greatly facilitate the study of disease pathogenesis using available transgenic mouse strains, conduction of drug trials in a relatively high throughput manner to identify candidate therapeutic agents, and testing of stem cell transplantation using immunodeficiency mouse strains.

We established mouse models of periventricular leukomalacia (PVL), the predominant brain injury in premature infants characterized by periventricular white matter lesions. Hypoxia/ischemia with/without systemic infection are the primary causes of PVL. Unilateral carotid ligation and hypoxia exposure with/without lipopolysaccharide injection creates PVL-like lesions in P6 mice.

Periventriküler lökomalazi Fare Modelleri

We describe a protocol for establishing mouse models of periventricular leukomalacia (PVL). PVL is the predominant form of brain injury in premature ...

Nörobilim

A Swine Model of Neonatal Asphyxia

Annually more than 1 million neonates die worldwide as related to asphyxia. Asphyxiated neonates commonly have multi-organ failure including hypotension, perfusion deficit, hypoxic-ischemic encephalopathy, pulmonary hypertension, vasculopathic enterocolitis, renal failure and thrombo-embolic complications. Animal models are developed to help us understand the patho-physiology and pharmacology of neonatal asphyxia. In comparison to rodents and newborn lambs, the newborn piglet has been proven to be a valuable model. The newborn piglet has several advantages including similar development as that of 36-38 weeks human fetus with comparable body systems, large body size (&tilde;1.5-2 kg at birth) that allows the instrumentation and monitoring of the animal and controls the confounding variables of hypoxia and hemodynamic derangements.
We here describe an experimental protocol to simulate neonatal asphyxia and allow us to examine the systemic and regional hemodynamic changes during the asphyxiating and reoxygenation process as well as the respective effects of interventions. Further, the model has the advantage of studying multi-organ failure or dysfunction simultaneously and the interaction with various body systems. The experimental model is a non-survival procedure that involves the surgical instrumentation of newborn piglets (1-3 day-old and 1.5-2.5 kg weight, mixed breed) to allow the establishment of mechanical ventilation, vascular (arterial and central venous) access and the placement of catheters and flow probes (Transonic Inc.) for the continuously monitoring of intra-vascular pressure and blood flow across different arteries including main pulmonary, common carotid, superior mesenteric and left renal arteries. Using these surgically instrumented piglets, after stabilization for 30-60 minutes as defined by Z&lt;10% variation in hemodynamic parameters and normal blood gases, we commence an experimental protocol of severe hypoxemia which is induced via normocapnic alveolar hypoxia. The piglet is ventilated with 10-15% oxygen by increasing the inhaled concentration of nitrogen gas for 2h, aiming for arterial oxygen saturations of 30-40%. This degree of hypoxemia will produce clinical asphyxia with severe metabolic acidosis, systemic hypotension and cardiogenic shock with hypoperfusion to vital organs. The hypoxia is followed by reoxygenation with 100% oxygen for 0.5h and then 21% oxygen for 3.5h. Pharmacologic interventions can be introduced in due course and their effects investigated in a blinded, block-randomized fashion.

Large animal models have good translational values in the examination of physiology and pharmacology of neonatal asphyxia. Using newborn piglets, we develop an experimental protocol to simulate neonatal asphyxia which has advantages of studying the systemic and regional hemodynamics, oxygen transport with biochemical and pathologic pathways and correlations.

Yenidoğan Asfiksi Bir Domuz Modeli

Annually more than 1 million neonates die worldwide as related to asphyxia. Asphyxiated neonates commonly have multi-organ failure including hypotension, ...

Tıp

The Hypoxic Ischemic Encephalopathy Model of Perinatal Ischemia

Hypoxic-Ischemic Encephalopathy (HIE) is the consequence of systemic asphyxia occurring at birth. Twenty five percent of neonates with HIE develop severe and permanent neuropsychological sequelae, including mental retardation, cerebral palsy, and epilepsy. The outcomes of HIE are devastating and permanent, making it critical to identify and develop therapeutic strategies to reduce brain injury in newborns with HIE. To that end, the neonatal rat model for hypoxic-ischemic brain injury has been developed to model this human condition. The HIE model was first validated by Vannucci et al 1 and has since been extensively used to identify mechanisms of brain injury resulting from perinatal hypoxia-ischemia 2 and to test potential therapeutic interventions 3,4. The HIE model is a two step process and involves the ligation of the left common carotid artery followed by exposure to a hypoxic environment. Cerebral blood flow (CBF) in the hemisphere ipsilateral to the ligated carotid artery does not decrease because of the collateral blood flow via the circle of Willis; however with lower oxygen tension, the CBF in the ipsilateral hemisphere decreases significantly and results in unilateral ischemic injury. The use of 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) to stain and identify ischemic brain tissue was originally developed for adult models of rodent cerebral ischemia 5, and is used to evaluate the extent of cerebral infarctin at early time points up to 72 hours after the ischemic event 6. In this video, we demonstrate the hypoxic-ischemic injury model in postnatal rat brain and the evaluation of the infarct size using TTC staining.

The postnatal rat model for hypoxic-ischemic brain injury is a well-established model of human neonatal hypoxic ischemic encephalopathy (HIE). In this article, we describe the model of HIE in post-natal rat pups.

Perinatal İskemi Hipoksik İskemik Ensefalopati Modeli

Hypoxic-Ischemic Encephalopathy (HIE) is the consequence of systemic asphyxia occurring at birth. Twenty five percent of neonates with HIE develop severe ...

Biyoloji

Modeling Encephalopathy of Prematurity Using Prenatal Hypoxia-ischemia with Intra-amniotic Lipopolysaccharide in Rats

Encephalopathy of prematurity (EoP) is a term that encompasses the central nervous system (CNS) abnormalities associated with preterm birth. To best advance translational objectives and uncover new therapeutic strategies for brain injury associated with preterm birth, preclinical models of EoP must include similar mechanisms of prenatal global injury observed in humans and involve multiple components of the maternal-placental-fetal system. Ideally, models should produce a similar spectrum of functional deficits in the mature animal and recapitulate multiple aspects of the pathophysiology. To mimic human systemic placental perfusion defects, placental underperfusion and/or chorioamnionitis associated with pathogen-induced inflammation in early preterm birth, we developed a model of prenatal transient systemic hypoxia-ischemia (TSHI) combined with intra-amniotic lipopolysaccharide (LPS). In pregnant Sprague Dawley rats, TSHI via uterine artery occlusion on embryonic day 18 (E18) induces a graded placental underperfusion defect associated with increasing CNS damage in the fetus. When combined with intra-amniotic LPS injections, placental inflammation is increased and CNS damage is compounded with associated white matter, gait and imaging abnormalities. Prenatal TSHI and TSHI+LPS prenatal insults meet several of the criteria of an EoP model including recapitulating the intrauterine insult, causing loss of neurons, oligodendrocytes and axons, loss of subplate, and functional deficits in adult animals that mimic those observed in children born extremely preterm. Moreover, this model allows for the dissection of inflammation induced by divergent injury types.

Encephalopathy of prematurity encompasses the central nervous system abnormalities associated with injury from preterm birth. This report describes a clinically relevant rat model of in utero transient systemic hypoxia-ischemia and intra-amniotic lipopolysaccharide administration (LPS) that mimics chorioamnionitis, and the related impact of infectious stimuli and placental underperfusion on CNS development.

Prematüre Modelleme Ensefalopati Sıçanlarda İçi amniyotik Lipopolisakkarid ile Prenatal Hipoksi-iskemi kullanma

Encephalopathy of prematurity (EoP) is a term that encompasses the central nervous system (CNS) abnormalities associated with preterm birth. To best ...

Neurobehavioral Assessments in a Mouse Model of Neonatal Hypoxic-ischemic Brain Injury

We performed unilateral carotid artery occlusion on CD-1 mice to create a neonatal hypoxic-ischemic (HI) model and investigated the effects of neonatal HI brain injury by studying neurobehavioral functions in these mice compared to non-operated (i.e., normal) mice. During the study, Rice-Vannucci&#39;s method was used to induce neonatal HI brain damage in postnatal day 7-10 (P7-10) mice. The HI operation was performed on the pups by unilateral carotid artery ligation and exposure to hypoxia (8% O2 and 92% N2 for 90 min). One week after the operation, the damaged brains were evaluated with the naked eye through the semi-transparent skull and were categorized into subgroups based on the absence (&#34;no cortical injury&#34; group) or presence (&#34;cortical injury&#34; group) of cortical injury, such as a lesion in the right hemisphere. On week 6, the following neurobehavioral tests were performed to evaluate the cognitive and motor functions: passive avoidance task (PAT), ladder walking test, and grip strength test. These behavioral tests are helpful in determining the effects of neonatal HI brain injury and are used in other mouse models of neurodegenerative diseases. In this study, neonatal HI brain injury mice showed motor deficits that corresponded to right hemisphere damage. The behavioral test results are relevant to the deficits observed in human neonatal HI patients, such as cerebral palsy or neonatal stroke patients. In this study, a mouse model of neonatal HI brain injury was established and showed different degrees of motor deficits and cognitive impairment compared to non-operated mice. This work provides basic information on the HI mouse model. MRI images demonstrate the different phenotypes, separated according to the severity of brain damage by motor and cognitive tests.

We performed unilateral carotid artery occlusion on postnatal day 7-10 CD-1 mouse pups to create a neonatal hypoxic-ischemic (HI) model and investigated the effects of HI brain injury. We studied neurobehavioral functions in these mice compared to non-operated normal mice.

Yenidoğan hipoksik-iskemik beyin hasarı, fare modeli neurobehavioral değerlendirmesi

We performed unilateral carotid artery occlusion on CD-1 mice to create a neonatal hypoxic-ischemic (HI) model and investigated the effects of neonatal HI ...

Use of a Piglet Model for the Study of Anesthetic-induced Developmental Neurotoxicity (AIDN): A Translational Neuroscience Approach

Anesthesia cannot be avoided in many cases when surgery is required, particularly in children. Recent investigations in animals have raised concerns that anesthesia exposure may lead to neuronal apoptosis, known as anesthesia-induced developmental neurotoxicity (AIDN). Furthermore, some clinical studies in children have suggested that anesthesia exposure may lead to neurodevelopmental deficits later in life. Nonetheless, an ideal animal model for preclinical study has yet to be developed. The neonatal piglet represents a valuable model for preclinical study, as they share a striking number of developmental similarities with humans.
The anatomy and physiology of piglets allow for implementation of rigorous human perioperative conditions in both survival and non-survival procedures. Femoral artery catheterization allows for close monitoring, thus enabling prompt correction of any deviation of the piglet's vital signs and chemistries. In addition, there are multiple developmental similarities between piglets and human neonates. The techniques required to use piglets for experimentation will require experience to master. A pediatric anesthesiologist is a critical member of the investigative team. We describe, in a general sense, the appropriate use of a piglet model for neurodevelopmental study.

Use of a Piglet Model for the Study of Anesthetic-induced Developmental Neurotoxicity AIDN: A Translational Neuroscience Approach

Anesthesia-induced developmental neurotoxicity (AIDN) research has focused on rodents, which are not broadly applicable to humans. Non-human primate models are more relevant, but are cost-prohibitive and difficult to use for experimentation. The piglet, in contrast, is a clinically relevant, practical animal model ideal for the study of anesthetic neurotoxicity.

Anesteziye Bağlı Gelişimsel Nörotoksisite (AIDN) Çalışması İçin Bir Piglet Modelinin Kullanımı: Bir Translasyonel Sinirbilimi Yaklaşımı

Anesthesia cannot be avoided in many cases when surgery is required, particularly in children.  Recent investigations in animals have raised concerns that ...

A Ferret Model of Inflammation-sensitized Late Preterm Hypoxic-ischemic Brain Injury

There is an ongoing need for clinically relevant models of perinatal infection and hypoxia-ischemia (HI) in which to test therapeutic interventions for infants with the neurological sequela of prematurity. Ferrets are ideal candidates for modeling the preterm human brain, as they are born lissencephalic and develop gyrencephalic brains postnatally. At birth, ferret brain development is similar to a 13 week human fetus, with postnatal-day (P) 17 kits considered to be equivalent to an infant at 32&#8211;36 weeks&#39; gestation. We describe an injury model in the P17 ferret, where lipopolysaccharide administration is followed by bilateral cerebral ischemia, hypoxia, and hyperoxia. This simulates the complex interaction of prolonged inflammation, ischemia, hypoxia, and oxidative stress experienced in a number of neonates who develop brain injury. Injured animals display a range of gross injury severity, with morphological changes in the brain including narrowing of multiple cortical gyri and associated sulci. Injured animals also show slowed reflex development, slower and more variable speed of locomotion in an automated catwalk, and decreased exploration in an open field. This model provides a platform in which to test putative therapies for infants with neonatal encephalopathy associated with inflammation and HI, study mechanisms of injury that affect cortical development, and investigate pathways that provide resilience in unaffected animals.

The method describes inflammation-sensitized hypoxic-ischemic and hyperoxic brain injury in the P17 ferret to model the complex interaction between prolonged inflammation and oxidative brain injury experienced in a number of late preterm infants.

İnflamasyon duyarlıgeç Preterm Hipoksik-iskemik Beyin Hasarı Bir Gelincik Modeli

There is an ongoing need for clinically relevant models of perinatal infection and hypoxia-ischemia (HI) in which to test therapeutic interventions for ...

Continuous Video Electroencephalogram during Hypoxia-Ischemia in Neonatal Mice

Hypoxia ischemia is the most common cause of neonatal seizures. Animal models are crucial for understanding the mechanisms and physiology underlying neonatal seizures and hypoxia ischemia. This manuscript describes a method for continuous video electroencephalogram (EEG) monitoring in neonatal mice to detect seizures and analyze EEG background during hypoxia ischemia. Use of video and EEG in conjunction allows description of seizure semiology and confirmation of seizures. This method also allows analysis of power spectrograms and EEG background pattern trends over the experimental time period. In this hypoxia ischemia model, the method allows EEG recording prior to injury to obtain a normative baseline and during injury and recovery. Total monitoring time is limited by the inability to separate pups from the mother for longer than four hours. Although, we have used a model of hypoxic-ischemic seizures in this manuscript, this method for neonatal video EEG monitoring could be applied to diverse disease and seizure models in rodents.

This manuscript describes a method for continuous video EEG recordings using multiple depth electrodes in neonatal mice undergoing hypoxia-ischemia.

Yenidoğan Farelerde Hipoksi-İskemi Sırasında Sürekli Video Elektroensefalogram

Hypoxia ischemia is the most common cause of neonatal seizures. Animal models are crucial for understanding the mechanisms and physiology underlying ...

Early Pathological and Magnetic Resonance Detection of Cerebral Injury Using a Rat Model of Neonatal Hypoxic Ischemic Encephalopathy

Perinatal hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE) is an acute disease that may afflict newborns, resulting in variable long- and short-term neurodevelopmental outcomes. Early diagnosis is critical to identifying infants who may benefit from intervention; however, early diagnosis relies heavily on clinical criteria. No molecular or radiological tests have shown promise in detecting early cerebral injury. Studies have shown that magnetic resonance imaging (MRI) can show changes in both blood flow/ischemia and metabolic disruption. However, they have all been used to evaluate the secondary phase of the disease (&gt;12 h) after the onset of the injury. Early diagnosis is critical to rapidly starting therapeutic hypothermia in eligible infants, which is currently recommended to be initiated within 6 h of birth. The rat model of hypoxic-ischemic injury was developed in 1981 and has been validated and used extensively to study changes in brain perfusion, cerebral injury markers, and morphology. However, it has primarily been used as a "late model", evaluating injury several days after the initial ischemic insult. The model has been known to have poor sensitivity in evaluating reliable and reproducible early cerebral changes. The objective of this study was to develop a reliable model to study early gross morphological and radiological markers of HIE using pathological staining and cerebral magnetic resonance imaging/magnetic resonance spectroscopy.

The present protocol describes a rodent model of newborn hypoxic-ischemic injury for identifying early changes in cerebral tissue by gross morphology and magnetic resonance imaging. This has benefits over existing models, which can be used to study late injury but do not allow the evaluation of reproducible early changes.

Perinatal hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE) is an acute disease that may afflict newborns, resulting in variable long- and short-term ...

A Piglet Perinatal Asphyxia Model to Study Cardiac Injury and Hemodynamics after Cardiac Arrest, Resuscitation, and the Return of Spontaneous Circulation

Neonatal piglets have been extensively used as translational models for perinatal asphyxia. In 2007, we adapted a well-established piglet asphyxia model by introducing cardiac arrest. This enabled us to study the impact of severe asphyxia on key outcomes, including the time taken for the return of spontaneous circulation (ROSC), as well as the effect of chest compressions according to alternative protocols for cardiopulmonary resuscitation. Due to the anatomical and physiological similarities between piglets and human neonates, piglets serve as good models in studies of cardiopulmonary resuscitation and hemodynamic monitoring. In fact, this cardiac arrest model has provided evidence for guideline development through research on resuscitation protocols, pathophysiology, biomarkers, and novel methods for hemodynamic monitoring. Notably, the incidental finding that a substantial fraction of piglets have pulseless electrical activity (PEA) during cardiac arrest may increase the applicability of the model (i.e., it may be used to study pathophysiology extending beyond the perinatal period). However, the model generation is technically challenging and requires various skill sets, dedicated personnel, and a fine balance of the measures, including the surgical protocols and the use of sedatives/analgesics, to ensure a reasonable rate of survival. In this paper, the protocol is described in detail, as well as experiences with adaptations to the protocol over the years.

This piglet model involves surgical instrumentation, asphyxiation until the cardiac arrest, resuscitation, and post-resuscitation observation. The model allows for multiple sampling per animal, and by using continuous invasive arterial blood pressure, ECG, and non-invasive cardiac output monitoring, it provides knowledge about hemodynamics and cardiac pathophysiology in perinatal asphyxia and neonatal cardiopulmonary resuscitation.

Kardiyak Arrest, Resüsitasyon ve Spontan Dolaşımın Geri Dönüşü Sonrası Kardiyak Hasar ve Hemodinamiği İncelemek İçin Bir Domuz Yavrusu Perinatal Asfiksi Modeli

Neonatal piglets have been extensively used as translational models for perinatal asphyxia. In 2007, we adapted a well-established piglet asphyxia model ...