We thank Fred Roberts for exemplary technical support. We thank Brigham Women&#8217;s Hospital Cardiovascular Physiology Core for providing with the instrumentation and the funds for this work. This work was supported in part by NHLBI grants HL093148, HL086967, and Departmental Funds from (SUNDRY).

Amerikan Veteriner Hekimleri Birliği (AVMA) kurallara uygun olarak Charles River Laboratuvarları satın ve Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) protokolleri onayladı kullanarak erkek Sprague Dawley sıçanlarda tüm prosedürleri uygulayın. 1. Hayvan Hazırlama ve Cerrahi Yöntemler <ol><li> herhangi bir deneysel işlem öncesi bir hafta boyunca tüm hayvanları alıştırıldı. </li><li> izofluran kullanarak hayvan anestezisi (% 2-3 uyardığı ve% 1.0 korumak için) ve kuruma, tahriş veya ülserasyon önlemek için her iki göze göz merhemi uygulanır. </li><li> 40. bıçak ve gerektiğinde tüy dökücü krem ​​kullanarak hayvanın göğüs saç çıkarın. Biz ventral yüzü görüntüleme elde edilen iyi görüntü verilerini olamaz eğer hayvanın arka formu saç kaldırmak zorunda kalabilirsiniz. </li></ol> 2. Nefrotoksisite Rat Modeli <ol><li> Sisplatin kaynaklı nefrotoksisite modelinde, protokol a kullanarak, Cisplatin yönetmekdaha önce tarif edilen s. 15 </li><li> Başlangıçta, 24 saat Cisplatin uygulamadan önce (Gün 0) de ultrasonografi gerçekleştirin. (Adım 3 Bkz, Görüntüleme Protokolü) </li><li> sıçanları (n = 6) içine iki grup Rastgele. Gün 1 &#39;de, (periton boşluğu içine bir çalışma grubu ve normal tuzlu su içinde, sisplatin hayvanın vücut ağırlığına göre hesaplanmıştır (10 mg / ml) (10 mg / kg vücut ağırlığı tek doz nefrotoksisite indüksiyonu), enjeksiyon hacmi (1 mi / Kg vücut ağırlığı)) tatbik kontrol grubunda NS). </li><li> 24, aşama 1.2, 48, 72, 96, 120, Sisplatin uygulamadan sonra 144 saat hayvan anestezisi. </li><li> hayvanın istikrarlı anestezi aşaması altında yüksek çözünürlüklü ultrason sistemi (Malzeme ve Ekipmanları Masa bakınız) kullanarak görüntüyü alır. tam iyileşme ile anestezi indüksiyonu gelen görüntüleme sırasında hayvanın temel fizyolojik fonksiyonlarını izlemeye devam edin. </li><li> görüntüleme işlemleri sırasında hayvanın hayati işaretleri takip: sıçan-sıcaklık: 35,9-37,5, solunum hızı: 66-144 / dk, kalp hızı: 250-600 / dk.Bizim önerilen çalışmada okuma optimum hayati işaretidir: Sıcaklık: 36,5-37,0, solunum hızı: 80-100 / dk, kalp hızı: 450-550 / dk. NOT: İntravenöz sıvı infüzyon ve ısıtma lamba cerrahi ve anestezi etkilerini en aza indirmek için hayvanın normal fizyolojik durumunu korumak için. Gerekirse işlem sırasında mekanik ventilatör ile solunum Yrd. Bununla birlikte, mekanik ventilasyon nadiren bu deneyde gereklidir. </li></ol> 3. Görüntüleme Protokolü Not: ultrason makinesi sağlayıcı uzun görüntüleme işlemi için ısıtılmış bir platform sağlar. sadece 5 ila 15 dakika sürer, çünkü Ancak, bizim gösterdi deneyde ısıtmalı platformu kullanmayın. Fizyolojisi kontrol anahtarına bağlı bir rektal termometre ile takip vücut sıcaklığı kontrol edilir. <ol><li> Böbrek (B Modu) enine resim: <ol><li> 21 MHz merkez frekans ile MS 250 ultrason kullanarak bağlanmakaktif bağlantı noktasına ed, &quot;General Imaging&quot; uygulama ön ayarı ayarlayın. </li><li> platformda hayvan sırtüstü ile hayvan 21 MHz ultrason raylı sistemi kullanarak prob, orta hattı konumlandırmak ve aorta izole. Bu pozisyonda, prob açısı sternum sol hattı (yatay eksen) karşı 90 derece (Şekil 1A, B). </li><li> Bu pozisyondan sonda renal arter düzeyinde artık öyle ki hayvan ile platformu kaydırın (sol veya sağ ya bir defada görüntü bir can). </li><li> mikromanipülatörler kullanarak, sağ veya sol renal arter ya görüntüleyebilirsiniz. </li><li> ekranın ortasında tam bir böbrek görünümü elde etmek prob y ekseni boyunca hafifçe eğerek prob açısını ayarlayın. </li><li> Şekil 1C ve D, sine deposunda kullanılan prob ile izin verilen en yüksek kare hızı kullanarak görüntü gösterildiği gibi uygun görülecek (renal pelvis, renal arter) belirlendikten sonra. </li&gt; </ol></li><li> Böbrek (Renkli Doppler görüntüsü) Enine resim: <ol><li> klavyede Renk Doppler tuşunu kullanarak, Renkli Doppler akustik pencere açın. Bu renal arter ve renal ven (Şekil 1D) izole etmek için yardımcı olur. (Ve kırmızı renk venöz akışını gösteren Mavi renk arteriyel kan akımı gösterir). </li><li> (Y ekseni üzerinde tarafından ve sarı ok gösterilir) odak derinliği böbrek merkezinde yatıyor emin olun. cine mağaza ile verileri kaydetmek. </li><li> Emin rekor mümkün mümkün olan en yüksek kare hızı (&gt; 200 kare / sn) veri yapın. </li></ol></li><li> Böbrek (Darbeli dalga veya PW görünüm) Enine resim: <ol><li> Renk-Doppler modunda, ekranda (Şekil 1F) sarı bir gösterge hattı (Darbeli dalga Doppler örnek hacmi) getirmek için ise, PW tuşu tıklayın. </li><li> PW açısı anahtarı kullanılarak damar yoluyla akış yönünü paralel bir açıda renal arter sarı hattı yerleştirin. </li><lsağ renal arter akım değerlendirme için i&gt; 60 derece veya daha az Doppler açısı sağlamak (bu Şekil 1 D mavi ve E gösterilir) akış yönünde renal arter boyunca PW sarı gösterge satırı koyun. </li><li> Bu modda, akustik pencere üst ve alt bölüme böler. </li><li> zirve sistol ve diyastol arteriyel akışının hızını gösterir dalga formlarının görüntü yakalamak için Cine mağaza kullanın. </li></ol></li></ol> Görüntüleme sonra 4. Hayvan Taşıma <ol><li> Gün 5 Gün 0 dan, görüntüleme sonrası sternal yatma pozisyonunda (yatak üzerinde temiz bir kağıt havlu ile) temiz bir kurtarma alana hayvan yerleştirin. Biz hayvanlar gibi agresif hayvanlar için &quot;Kuyruk Holding&quot; yöntemi ile son derece dikkatli tüm hayvanları ele Not anestezi kurtarmak. </li><li> anestezik kurtarma sırasında, harici hea ile hayvanın vücut sıcaklığı tutmakt kaynağı ve elektrofizyolojik problar ile monitör hayvanın vital hayvan tamamen anestezi kurtarır kadar. </li><li> Onlar uyanık ve aktif olduğunda dönüş tesis konut odasına hayvanları iyileşti. </li><li> Gün 6 ve hasat böbrekler üzerinde kurumsal kurallarına göre tüm fareler euthanize adım 4.5 gibi histolojik değerlendirme için (adım 4.7 bakınız). </li><li> böbrek fonksiyonlarını kontrol etmek için kreatinin testi için metabolik kafeste ekli toplama tüpleri gelen hayvanın idrarı toplayın. </li><li> Hayvan böbrek parafin bölümünü gerçekleştirmek ve nefrotoksisiteyi (detay için adım 4.7 bakınız) kontrol etmek için boyama HE (hematoksilen ve eozin) yürütmek. </li><li> hayvanlar kurban sol ventrikül ile% 10 tamponlu formalin fiksasyonu takiben% 0.9 NaCI çözeltisi ile asıl bulbus olfaktoryusları alındı. % 0.9 NaCl çözeltisi ile kan kaybından sonra, histolojik değerlendirme 16 sıçan böbreklerinin, kaldırın. <ol><li> Parafin böbrek Morphol gözlemlemek için 6 mm bölümleri embedogy ve nefrotoksisite. 4 ° C&#39;de 48 saat süre ile, fosfat-tamponlu salin (PBS) içinde% 30 sakroz böbrek dokusu kurutmak. Sonra 4 ° C&#39;de 24-48 saat süreyle% 10 tamponlu formalin bölümleri düzeltmek. </li><li> Sonraki, parafin böbrek dokusunu gömmek ve kesit kadar oda sıcaklığında doku parafin blokları saklayın. Ayrıntılı bölüm dokusu parafin kesit makine kullanarak blokları ve kaplamalı cam slayt bölümleri yerleştirin. </li><li> bölümünü Deparrafinize ve rehidre ve 3 dakika boyunca Eosin, ardından 10 dakika için hematoksilin ile boyanmıştır. bir slayt bölümleri monte edin ve onları bir kemirgen patolog tarafından değerlendirilmiştir. </li></ol></li></ol> 5. Veri Hesaplama ve Analiz <ol><li> Adım 3.2 elde edilen renkli Doppler görüntüleri renal arter pik hızlar hesaplayın. Hız saatler sistolik ve diyastolik hız doruklarına iz İntegral (VTI) aracını seçin. </li><li> equatio hesapla Dirençli İndeks (RI) ve Pulsatil İndeksi (PI)Aşağıdaki ns. RI = (pik sistolik hız-end diastolik hız) / pik sistolik hız PI = (sistolik hız-end diastolik hız) / ortalama hız. </li><li> Üç döngü ölçümlerin ortalama ve standart sapmalar RI ve PI sonuçların istatistiksel analiz gerçekleştirin. diğer standart parametreler için, (Malzeme ve Ekipmanları Masa bakınız) özel yazılım kullanarak veri analizi gerçekleştirmek için üreticiden kılavuzuna başvurun. </li></ol>

<ol>
	<li>Bonventre, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosis+of+acute+kidney+injury:+from+classic+parameters+to+new+biomarkers.">Diagnosis of acute kidney injury: from classic parameters to new biomarkers.</a> Contrib Nephrol. 156, 213-219 (2007).</li><li>Lerman, L. O., Textor, S. C., Grande, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+tissue+injury+in+renal+artery+stenosis:+ischemia+and+beyond.">Mechanisms of tissue injury in renal artery stenosis: ischemia and beyond.</a> Progress in cardiovascular diseases. 52 (3), 196-203 (2009).</li><li>Karas, M. G., Kizer, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiographic+assessment+of+the+right+ventricle+and+associated+hemodynamics.">Echocardiographic assessment of the right ventricle and associated hemodynamics.</a> Progress in cardiovascular diseases. 55 (2), 144-160 (2012).</li><li>Milman, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodynamic+response+magnetic+resonance+imaging:+application+for+renal+hemodynamic+characterization.">Hemodynamic response magnetic resonance imaging: application for renal hemodynamic characterization.</a> Nephrol Dial Transplant. 28, 1150-1156 (2013).</li><li>Anavekar, N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Usefulness+of+right+ventricular+fractional+area+change+to+predict+death,+heart+failure,+and+stroke+following+myocardial+infarction+(from+the+VALIANT+ECHO+Study).">Usefulness of right ventricular fractional area change to predict death, heart failure, and stroke following myocardial infarction (from the VALIANT ECHO Study).</a> Am J Cardiol. 101 (5), 607-612 (2008).</li><li>Lindqvist, P., Calcutteea, A., Henein, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiography+in+the+assessment+of+right+heart+function.">Echocardiography in the assessment of right heart function.</a> Eur J Echocardiogr. 9 (2), 225-234 (2008).</li><li>Sullivan, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+use+of+ultrasound+to+examine+regional+blood+flow+in+the+mouse+kidney.">Novel use of ultrasound to examine regional blood flow in the mouse kidney.</a> American journal of physiology. Renal physiology. 297, F228-F235 (2009).</li><li>Bonnin, P., Sabaa, N., Flamant, M., Debbabi, H., Tharaux, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasound+imaging+of+renal+vaso-occlusive+events+in+transgenic+sickle+mice+exposed+to+hypoxic+stress.">Ultrasound imaging of renal vaso-occlusive events in transgenic sickle mice exposed to hypoxic stress.</a> Ultrasound Med Biol. 34 (7), 1076-1084 (2008).</li><li>Desberg, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+artery+stenosis:+evaluation+with+color+Doppler+flow+imaging.">Renal artery stenosis: evaluation with color Doppler flow imaging.</a> Radiology. 177 (3), 749-753 (1990).</li><li>Ciccone, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+clinical+role+of+contrast-enhanced+ultrasound+in+the+evaluation+of+renal+artery+stenosis+and+diagnostic+superiority+as+compared+to+traditional+echo-color-Doppler+flow+imaging.">The clinical role of contrast-enhanced ultrasound in the evaluation of renal artery stenosis and diagnostic superiority as compared to traditional echo-color-Doppler flow imaging.</a> International angiology : a journal of the International Union of Angiology. 30 (2), 135-139 (2011).</li><li>Bauer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiographic+speckle-tracking+based+strain+imaging+for+rapid+cardiovascular+phenotyping+in+mice.">Echocardiographic speckle-tracking based strain imaging for rapid cardiovascular phenotyping in mice.</a> Circ Res. 108 (8), 908-916 (2011).</li><li>Boulikas, T., Vougiouka, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+clinical+trials+using+cisplatin,+carboplatin+and+their+combination+chemotherapy+drugs+(review).">Recent clinical trials using cisplatin, carboplatin and their combination chemotherapy drugs (review).</a> Oncology reports. 11 (3), 559-595 (2004).</li><li>Vaidya, V. S., Ferguson, M. A., Bonventre, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomarkers+of+acute+kidney+injury.">Biomarkers of acute kidney injury.</a> Annu Rev Pharmacol Toxicol. 48, 463-493 (2008).</li><li>Hye Khan, M. A., Abdul Sattar, M., Abdullah, N. A., Johns, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cisplatin-induced+nephrotoxicity+causes+altered+renal+hemodynamics+in+Wistar+Kyoto+and+spontaneously+hypertensive+rats:+role+of+augmented+renal+alpha-adrenergic+responsiveness.">Cisplatin-induced nephrotoxicity causes altered renal hemodynamics in Wistar Kyoto and spontaneously hypertensive rats: role of augmented renal alpha-adrenergic responsiveness.</a> Exp Toxicol Pathol. 59, 253-260 (2007).</li><li>Vaidya, V. S., Bonventre, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanistic+biomarkers+for+cytotoxic+acute+kidney+injury.">Mechanistic biomarkers for cytotoxic acute kidney injury.</a> Expert Opin Drug Metab Toxicol. 2 (5), 697-713 (2006).</li><li>Lu, T. S., Chen, H. W., Huang, M. H., Wang, S. J., Yang, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heat+shock+treatment+protects+osmotic+stress-induced+dysfunction+of+the+blood-brain+barrier+through+preservation+of+tight+junction+proteins.">Heat shock treatment protects osmotic stress-induced dysfunction of the blood-brain barrier through preservation of tight junction proteins.</a> Cell stress, &amp; chaperones. 9 (4), 369-377 (2004).</li><li>Kaya, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Hemodynamics - New Diagnostic and Therapeutic Approaches. , 1-30 (2012).</li><li>Bjornerheim, R., Grogaard, H. K., Kjekshus, H., Attramadal, H., Smiseth, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+frame+rate+Doppler+echocardiography+in+the+rat:+an+evaluation+of+the+method.">High frame rate Doppler echocardiography in the rat: an evaluation of the method.</a> European journal of echocardiography : the journal of the Working Group on Echocardiography of the European Society of Cardiology. 2 (2), 78-87 (2001).</li><li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-frequency,+high+frame+rate+duplex+ultrasound+linear+array+imaging+system+for+small+animal+imaging.">A high-frequency, high frame rate duplex ultrasound linear array imaging system for small animal imaging.</a> IEEE transactions on ultrasonics, ferroelectrics, and frequency. 57, 1548-1557 (2010).</li><li>Frea, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiographic+evaluation+of+right+ventricular+stroke+work+index+in+advanced+heart+failure:+a+new+index?.">Echocardiographic evaluation of right ventricular stroke work index in advanced heart failure: a new index?.</a> J Card Fail. 18 (12), 886-893 (2012).</li><li>Marwick, T. H., Raman, S. V., Carrio, I., Bax, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+developments+in+heart+failure+imaging.">Recent developments in heart failure imaging.</a> JACC Cardiovasc Imaging. 3 (4), 429-439 (2010).</li><li>Pokreisz, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressure+overload-induced+right+ventricular+dysfunction+and+remodelling+in+experimental+pulmonary+hypertension:+the+right+heart+revisited.">Pressure overload-induced right ventricular dysfunction and remodelling in experimental pulmonary hypertension: the right heart revisited.</a> Eur Heart J supplements. 9 (Supplement H), H75-H84 (2007).</li><li>Senechal, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+Doppler+echocardiography+method+to+evaluate+pulmonary+capillary+wedge+pressure+in+patients+with+atrial+fibrillation.">A simple Doppler echocardiography method to evaluate pulmonary capillary wedge pressure in patients with atrial fibrillation.</a> Echocardiography. 25 (1), 57-63 (2008).</li><li>Souders, C. A., Borg, T. K., Banerjee, I., Baudino, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressure+overload+induces+early+morphological+changes+in+the+heart.">Pressure overload induces early morphological changes in the heart.</a> Am J Pathol. 181 (4), 1226-1235 (2012).</li><li>Tanaka, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transthoracic+echocardiography+in+models+of+cardiac+disease+in+the+mouse.">Transthoracic echocardiography in models of cardiac disease in the mouse.</a> Circulation. 94 (5), 1109-1117 (1996).</li></ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Son on yılda, pek çok gelişmeler, yüksek kalite, hassasiyet ve doğruluk ile ultrasonografik verileri sunan yüksek frekanslı mekanik problar, geliştirilmesi de dahil olmak üzere sonografik teknoloji meydana gelmiştir. Bu sondalar, böylece bu tür sıçan ve fareler 18 gibi küçük hayvanları incelemek için güçlü bir araç olarak hizmet edebilir, 5 ila 12 mm ve yüksek kare hızları (fazla 200 kare / sn) bir penetrasyon derinliği yaklaşık 50 mikron eksenel çözünürlük sağlayabilir 19. Ayrıca, aynı zamanda fizyolojik düzeyde vital bulgular ile hafifçe sedasyon veya bilinçli hayvanlar üzerinde ultrasonografik görüntüleri toplamak için izin verir. Buna ek olarak, bu non-invaziv yöntem de hayvanlar 19 ödün vermeden hastalığın ilerlemesi sırasında yapısal ve fonksiyonel değişiklikler boyuna değerlendirmesini yapmak için fırsat sağlar. 1959 yılında, Dr. Rusell ve Fırça ilk Awar yükseltmek için üç &quot;R&quot; kurallarına (Yedek, Azaltma ve Arıtma) tarifAraştırmada hayvan kullanımında etik sorunlar eness. önerilen protokol non-invaziv küçük hayvan sonografi can Nephorotoxicity çalışmasında en az ağrı, acı veya sıkıntı altında hayvanların az sayıda kullanır ilk kez gösterir. Nedenle, deney hayvanları için üç &quot;R&quot; kurallarına karşılamak için potansiyel bir etkili bir yöntemdir. Birçok ultrasonografik çalışmalar kardiyak uygulamalarda odaklanmıştır; Böbrek fonksiyonu değerlendirmeleri genellikle kalp durumu yerine böbrek 20-25 doğrudan çalışma ölçümlerinden elde edilmiştir. Biz gerçek zamanlı olarak böbrekte anatomik ve fonksiyonel değişiklikleri görmenizi bir görüntüleme metodolojisi kurduk. Biz böbrek görünümü için özel tamamlayıcı akustik pencere, gri skala / B Modu ve Renk-Doppler, önceden seçilmiş bir dizi kullanılır. Biz bu endekslerin ve Sisplatin kaynaklı toksisite modelinde böbrek fonksiyon değişiklikleri arasındaki ilişkiyi değerlendirmek için RI ve PI endeksleri kullanılmıştır. <p class=&quot;Jove_content&quot;&gt; Ancak, aşağıdaki gibi önerilen görüntüleme yöntemleri birkaç zorluklar ve sınırlamalar vardır: 1) Uygun anestezik ajan seçimi ve anestezi derecesi kalp ve solunum istikrar açısından büyük önem taşımaktadır. (Solunum ve kalp hızı dalgalanmalar dahil) Tutarsız fizyolojik bir fenomen renal arter akımını, görüntüleme ve böbrek fonksiyon değerlendirme kalitesini etkileyebilir. Biz IACUC görüntüleme ve böbrek fonksiyon değerlendirme sırasında uygun normal fizyolojik fonksiyonu sağlamak için yedek anestezik ajan olarak enjektabl anestezik ajan, Pentobarbital (50 mg / kg vücut ağırlığı, ip), onaylı kullanacak; göğüs kılları varlığı ultrasonografik görüntü kalitesini etkiler olarak 2) Epilasyon, kritik bir adımdır; 3) böbreklerin sonografi eğitimli operatör için görece kolay olmasına karşın; Ortalama operatör için, bireysel hayvanın eşsiz anatomisi tekniği adapte küçük manipülasyonlar yapmak önemlidir; 4) sıçan büyüklüğü oldukça büyük ise, (3, yukarıda50 gram), daha düşük bir frekans probu (Bu çalışmada 21 MHz kullanılan daha az) en görüntüleme için gerekli olabilir. Görüntüleme sisteminin önerilen operasyon öncesi bir eğitim kursu almak ihtiyatlı olabilir. Önerilen sonografik metodoloji ve türetilmiş protokolünü kullanarak ilaca bağlı nefrotoksisite tespit yenilik böbrek hasarı durumunda hemodinamik değişikliklerin erken sağlam tespit edilmesidir. Sonuçlar aslında içi renal vasküler hemodinamik değişiklikler yükselen SCR önce olduğunu göstermektedir. Bu veriler histolojik analizi kullanılarak geleneksel altın standarda karşı benchmarked ve küçük hayvan sonografi hayvan kullanımının asgari şartı olan, invaziv olmayan, duyarlı ve tekrarlanabilir bir yöntemdir olduğunu göstermektedir edilir. Bu nedenle fare modeli kullanılarak ilaca bağlı nefrotoksisite erken tespiti için etkili bir araçtır.

Serum kreatinin (SCR) fazla iki yıl için böbrek fonksiyonunu değerlendirmek için altın standart metrik olmuştur. Son zamanlarda, birçok çalışma böbrek hasarı çok daha önce SCR 1 değişimlerden daha ortaya çıktığını bildirdi. Ancak, erken ilaca bağlı nefrotoksisite de dahil olmak üzere renal hasar sırasında meydana gelen hemodinamik değişikliklerin tespiti için sağlam yöntem vardır. İlaca bağlı akut renal hemodinamik fonksiyon bozukluğu, böbrek yetmezliği 2,3 renal doku hasarı ve daha fazla ilerlemesi yol açar. Son birkaç yılda, çalışmalar, bilgisayarlı tomografi (CAT), Fonksiyonel manyetik rezonans görüntüleme (fMRI) ve sonografi gibi görüntüleme araçları hemodinamik değerlendirmesinde 4 bir rol oynadığını göstermektedir. Geçerli görüntüleme araçları, Renk-Doppler teknikleri ile birleştiğinde gri skala sonografi, en sık böbrek 3,5,6 anatomik durumunu belirlemek ve değerlendirmek için kullanılmaktadır. Sullivan ve. ark. ve Bonnin ve. ark. Son zamanlarda sonografi vazokonstriksiyon ve hipoksi stres hayvan modellerinde 7,8 analiz hemodinamik değişiklikler etkili, güçlü ve non-invaziv bir araç olduğunu bildirdi. Bu teknik aynı zamanda yaygın olarak arteryel stenozu 9,10 tespit etmek için kullanılır. Yüksek çözünürlüklü ultrason görüntüleme alanındaki en son teknik gelişmeler, in vivo 11, araştırmacılar yüksek frekans (25-80 MHz) ve yüksek çözünürlük (&lt;0.03 mm çözünürlük) sondalar kullanılarak kardiyovasküler toksisite ele sağladı. Biz böbrek incelemek için bu yüksek çözünürlüklü sonografi kullanılarak nefrotoksisite erken teşhisi için non-invaziv ve hassas yöntem için görülmemiş bir fırsat sağlayacaktır varsayımında. Sisplatin için diğer ilaçlarla 12-14 ile kombinasyon halinde testis, yumurtalık, mesane, baş, akciğer, boyun kanserleri tedavi etmek için kullanılır. Sisplatin nedeniyle p hücre nekrozuna nefrotoksisite iyi belgelenmiş oldu ettiroximal tübüller (PT) ve toplama kanalları kan üre azotu (BUN) ve SCR 15 yükselen sonuçlandı. Bu yazıda, nefrotoksisite indüklenen İlaç (Sisplatin) sıçan modeli kullanılarak böbrek disfonksiyonu karakterize etmek non-invazif böbrek sonografi kullanılarak ayrıntılı bir adım-adım metodoloji sağlar.

&#160;
<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Depilatory cream</td>
			<td>Miltex, Inc.</td>
			<td>Surgi-Prep</td>
			<td>Apply 24 hours prior to imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cis-Diamineplatinum(II) dichloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>479306</td>
			<td>To induce acute kidney injury at small animals.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Baxter International Inc.</td>
			<td>NDC 10019-773-40</td>
			<td>2-3% for induction, and 1-1.5 % for maintenance; heart beats will be maintained at above 500 beats per minute</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td colspan="2">Table of equipments</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Material Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High Frequency Ultrasound</td>
			<td>FUJIFILM VisualSonics, Inc.</td>
			<td>Vevo 2100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="3">High-frequency Mechanical Transducer</td>
			<td rowspan="3">FUJIFILM VisualSonics, Inc.</td>
			<td rowspan="3">MS250, MS550D, MS400</td>
			<td rowspan="3"></td>
		</tr>
		<tr>
		</tr>
		<tr>
		</tr>
	</tbody>
</table>

early detection of drug-induced renal hemodynamic dysfunction using sonographic technology in rats

Böbrek normalde hemodinamik homeostazı korumak için fonksiyonları ve ilaç toksisitesinin neden olduğu hasarın önemli bir sitedir. İlaca bağlı nefrotoksisite kritik hastalarda akut böbrek hasarı (ABH) tüm klinik vakaların 19-% 25 katkı tahmin edilmektedir. AKI algılama tarihsel böbrek fonksiyon bozukluğu erken dönemde nefrotoksisite tam değerlendirmesinde kanıtlanabilir yetersiz olan serum kreatinin (SCR) ya da kan üre azotu (BUN) gibi ölçütlere güvendi. Şu anda, bu tür değişiklikler aslında, serum biyobelirteç düzeylerindeki artış önce olabilir ederken doğru AKI erken dönemde hemodinamik değişiklik tespit etmek için hiçbir sağlam tanı yöntemi yoktur. Böyle erken teşhis klinisyenlerin doğru bir teşhis yapmak ve tedavi stratejisi için karar verme in yardımcı olabilir. Fareler AKI indükleme Sisplatin ile tedavi edildi. Nefrotoksisite yüksek frekanslı sonografi SCR ölçüm kullanarak altı gün ve histopatolojik üzerine değerlendirildiböbrek. 2D ve Renk-Doppler görüntüleri kullanarak hemodinamik değerlendirme sonografi kullanılarak, seri sıçanlarda nefrotoksisiteyi incelemek için kullanılmıştır. Bizim verilerimiz histolojik inceleme ile erişkin sıçanlarda başarılı ilaca bağlı böbrek hasarı gösterdi. AKI renkli Doppler temelli sonografik değerlendirme rezistif indeks (RI) ve pulsatil-indeksi (PI) tedavi grubunda artmış olduğunu göstermiştir; ve pik sistolik hız (mm / s), diyastol sonu hız (mm / s) ve hız-zaman integrali (VTI, mm) aynı grupta renal arterlerde azalmıştır. Önemlisi, sonografi ile değerlendirildi bu hemodinamik değişiklikler SCR seviyelerinin yükselişi öncesinde. Böyle RI veya PI olarak sonografi tabanlı endeksler, böylece kemirgenlerde böbrek fonksiyonlarının azalması yararlı öngörü belirteçleri olabilir. AKI uygulanan sıçanların böbreklerinde bizim sonografi tabanlı gözlemlerden, bu non-invazif hemodinamik ölçümler erken evre böbrek disfonksiyonu tespit doğru, hassas ve sağlam bir yöntem olarak düşünebilirsiniz gösterdi. TOnun çalışma aynı zamanda araştırma hayvan kullanımı ile ilgili etik konuların önemini vurgulamaktadır.

Bu çalışmada sunulan görüntüler tek bir operatör tarafından alınmıştır. Tüm görüntüler (Malzeme ve Ekipmanları Masa bakınız) yüksek frekanslı ultrason makinesi kullanılarak toplanmıştır. Tüm görüntüleme verileri tek bir araştırmacı tarafından analiz edilmiştir. Sonuçlar Sisplatin ile tedavi edilen hayvanlar 0.5 gün 6 (Şekil 2A) 2,1 (normal &lt;1.1) kadar SCR olduğunu gösterdi. Bununla birlikte, histolojik çalışmalar, normal tuzlu su muamele edilmiş hayvanlara kıyasla, akut tübül geçiş yaralanma tutarlı desenler gösterdi. böbrek hemodinamik değişiklikleri ölçmek için yüksek çözünürlüklü ultrason görüntüleme kullanarak, veri pulsus parvus morfolojisi Cisplain tedavi altı gün sonra hayvanların tespit edilirken, gün 0 ve 6 arasında NS ile tedavi edilen hayvanlarda morfolojisinin bir değişiklik olmadığını göstermiştir. Normal RI ve PI üst sınırı sıçanlarda 17, sırasıyla, 0.7 ve 1.15 bulunmaktadır. hemodinamik değerlendirmek için yukarıdaki endeksleri kullanılarak<html> 6. günde Sisplatin ile tedavi edilen hayvanlarda RI ve PI önemli bir artış olduğunu göstermiştir böbrek değişiklikler. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/52409/52409fig1.jpg" /> Şekil sıçanlarda böbrek görüntü tespit edilmesi için 1. Ultrason aygıtı ayarlar. Sıçan böbrek sonografik görüntüleme çalışması sırasında, hayvan aşama (A) ve bir görüntüleme sensörü konumuna (B) &#39;nin ayarına sahip bir görüntüleme sistemi, grafiksel çizimlerdir. Örnek sonografik görüntüleri yüksek frekanslı, yüksek çözünürlüklü ultrason sistemleri (Malzeme andand Ekipman Tablosuna bakınız) kullanılarak sıçan böbrek elde. (CF). Veriler ayrıca hemodinamik parametre ölçüm ve analiz için yeterli bilgi böbrek damarlarının açık böbrek anatomik yapısını ve kan akışını göstermektedir.09fig1large.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız. <img alt="şekil 2" src="/files/ftp_upload/52409/52409fig2.jpg" /> Şekil 2. Histoloji ve Böbrek Sisplatin tedavi altında sıçanların sonografik görüntüler. Serum kreatinin (SCR) ve histoloji çalışması Sisplatin tedavi sıçan araçla tedavi sıçan ve şiddetli proksimal tübüler böbrek hasarı (sarı ok) normal böbrek dokusunu sunar (A, B). SCR Sisplatin tedavi sonrası bir oranda artmıştır, ancak normal sınırlar (&lt;1.1) içinde kalmıştır. Aracın ve Sisplatin ile tedavi edilen sıçanlarda (C) sonografi gün 0, 3, Renk-Doppler modunda sıçanların sağ böbreğin görüntüleri ve 6; hemodinamik parametreler, RI ve PI, Renk-Doppler ultrason (D, E) ile değerlendirildi, artan önemli bulunmuştur. Normal RI üst limiti PI 0.7 ve 1.15 olduğunu. Önemli bir şekilde, Tveri üzerinde o bu hemodinamik değişiklikler SCR yükselen öncesinde gösteriyor. Nabız dalga hızı ölçümü histoloji çalışma sonuçları ile korelasyon Sisplatin tedavisi sonrası yavaş ve zayıf nabız (pulsus parvus işareti, sarı daire) göstermektedir. Bu olgu renal arter stenozu, tıkanıklığı ve daha fazla böbrek fonksiyon bozukluğunu gösterir. Histolojik veriler başarılı ilaca bağlı proksimal tübüler böbrek hasarı gösterdi ve sonografik değerlendirme Renk Doppler teknolojisi kullanarak RI, PI ve nabız dalga hızı önemli değişiklikler göstermiştir. N = 3, * p &lt;0.05. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/52409/52409fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="tablo 1" src="/files/ftp_upload/52409/52409table1.jpg" /> İlaca bağlı AKI Tablo 1. Böbrek hemodinamik parametreler

Watch this Scientific Journal Video about Early Detection of Drug-Induced Renal Hemodynamic Dysfunction Using Sonographic Technology in Rats at JoVE.com

Early Detection of Drug-Induced Renal Hemodynamic Dysfunction Using Sonographic Technology in Rats

Early stage hemodynamic dysfunction is critical to the development of kidney disease. Yet, detection methodologies are limited. Recent advances in sonography provide a noninvasive, accurate option for early detection of kidney injury. This study outlines a step-by-step, sonographic methodology for detecting kidney dysfunction using a drug-induced nephrotoxicity rat model.

Sıçanlarda sonografik Teknoloji Kullanımı İlaç Kaynaklı Böbrek Hemodinamik Bozukluğu Erken Tespiti

The kidney normally functions to maintain hemodynamic homeostasis and is a major site of damage caused by drug toxicity. Drug-induced nephrotoxicity is ...

early-detection-drug-induced-renal-hemodynamic-dysfunction-using

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Medicine

12.0K Görüntüleme.  Brigham and Women's Hospital, Harvard Medical School. Early stage hemodynamic dysfunction is critical to the development of kidney disease. Yet, detection methodologies are limited. Recent advances in sonography provide a noninvasive, accurate option for early detection of kidney injury. This study outlines a step-by-step, sonographic methodology for detecting kidney dysfunction using a drug-induced nephrotoxicity rat model. 

Video: Early Detection of Drug-Induced Renal Hemodynamic Dysfunction Using Sonographic Technology in Rats

Cerenkov Luminescence Imaging (CLI) for Cancer Therapy Monitoring

In molecular imaging, positron emission tomography (PET) and optical imaging (OI) are two of the most important and thus most widely used modalities1-3. PET is characterized by its excellent sensitivity and quantification ability while OI is notable for non-radiation, relative low cost, short scanning time, high throughput, and wide availability to basic researchers. However, both modalities have their shortcomings as well. PET suffers from poor spatial resolution and high cost, while OI is mostly limited to preclinical applications because of its limited tissue penetration along with prominent scattering optical signals through the thickness of living tissues.
 Recently a bridge between PET and OI has emerged with the discovery of Cerenkov Luminescence Imaging (CLI)4-6. CLI is a new imaging modality that harnesses Cerenkov Radiation (CR) to image radionuclides with OI instruments. Russian Nobel laureate Alekseyevich Cerenkov and his colleagues originally discovered CR in 1934. It is a form of electromagnetic radiation emitted when a charged particle travels at a superluminal speed in a dielectric medium7,8. The charged particle, whether positron or electron, perturbs the electromagnetic field of the medium by displacing the electrons in its atoms. After passing of the disruption photons are emitted as the displaced electrons return to the ground state. For instance, one 18F decay was estimated to produce an average of 3 photons in water5. 
 Since its emergence, CLI has been investigated for its use in a variety of preclinical applications including in vivo tumor imaging, reporter gene imaging, radiotracer development, multimodality imaging, among others4,5,9,10,11. The most important reason why CLI has enjoyed much success so far is that this new technology takes advantage of the low cost and wide availability of OI to image radionuclides, which used to be imaged only by more expensive and less available nuclear imaging modalities such as PET.
 Here, we present the method of using CLI to monitor cancer drug therapy. Our group has recently investigated this new application and validated its feasibility by a proof-of-concept study12. We demonstrated that CLI and PET exhibited excellent correlations across different tumor xenografts and imaging probes. This is consistent with the overarching principle of CR that CLI essentially visualizes the same radionuclides as PET. We selected Bevacizumab (Avastin; Genentech/Roche) as our therapeutic agent because it is a well-known angiogenesis inhibitor13,14. Maturation of this technology in the near future can be envisioned to have a significant impact on preclinical drug development, screening, as well as therapy monitoring of patients receiving treatments.

Cerenkov Luminescence Imaging CLI for Cancer Therapy Monitoring

Use of Cerenkov Luminescence Imaging (CLI) for monitoring preclinical cancer treatment is described here. This method takes advantage of Cerenkov Radiation (CR) and optical imaging (OI) to visualize radiolabeled probes and thus provides an alternative to PET in preclinical therapeutic monitoring and drug screening.

Kanser Tedavisi İzleme Cerenkov Lüminesans Görüntüleme (CLI)

In  molecular imaging, positron emission tomography (PET) and optical imaging (OI)  are two of the most important and thus most widely used modalities1-3. ...

Tıp

Using Continuous Data Tracking Technology to Study Exercise Adherence in Pulmonary Rehabilitation

Pulmonary rehabilitation (PR) is an important component in the management of respiratory diseases. The effectiveness of PR is dependent upon adherence to exercise training recommendations. The study of exercise adherence is thus a key step towards the optimization of PR programs. To date, mostly indirect measures, such as rates of participation, completion, and attendance, have been used to determine adherence to PR. The purpose of the present protocol is to describe how continuous data tracking technology can be used to measure adherence to a prescribed aerobic training intensity on a second-by-second basis.
In our investigations, adherence has been defined as the percent time spent within a specified target heart rate range. As such, using a combination of hardware and software, heart rate is measured, tracked, and recorded during cycling second-by-second for each participant, for each exercise session. Using statistical software, the data is subsequently extracted and analyzed. The same protocol can be applied to determine adherence to other measures of exercise intensity, such as time spent at a specified wattage, level, or speed on the cycle ergometer. Furthermore, the hardware and software is also available to measure adherence to other modes of training, such as the treadmill, elliptical, stepper, and arm ergometer. The present protocol, therefore, has a vast applicability to directly measure adherence to aerobic exercise.

Pulmonary rehabilitation is widely recognized in the management of respiratory diseases. A key component to successful pulmonary rehabilitation is adherence to the recommended exercise training. The purpose of the present protocol is to describe how continuous data tracking technology can be used to precisely measure adherence to a prescribed aerobic training intensity.

Pulmoner Rehabilitasyon Egzersiz Bağlılık Eğitim Sürekli Veri İzleme Teknolojisi Kullanımı

Pulmonary rehabilitation (PR) is an important component in the management of respiratory diseases. The effectiveness of PR is dependent upon adherence to ...

Monitoring of Systemic and Hepatic Hemodynamic Parameters in Mice

The use of mouse models in experimental research is of enormous importance for the study of hepatic physiology and pathophysiological disturbances. However, due to the small size of the mouse, technical details of the intraoperative monitoring procedure suitable for the mouse were rarely described. Previously we have reported a monitoring procedure to obtain hemodynamic parameters for rats. Now, we adapted the procedure to acquire systemic and hepatic hemodynamic parameters in mice, a species ten-fold smaller than rats. This film demonstrates the instrumentation of the animals as well as the data acquisition process needed to assess systemic and hepatic hemodynamics in mice. Vital parameters, including body temperature, respiratory&#160;rate&#160;and heart&#160;rate were recorded throughout the whole procedure. Systemic hemodynamic parameters consist of carotid artery pressure (CAP) and central venous pressure (CVP). Hepatic perfusion parameters include portal vein pressure (PVP), portal flow rate as well as the flow rate of the common hepatic artery (table 1). Instrumentation and data acquisition to record the normal values was completed within 1.5 h. Systemic and hepatic hemodynamic parameters remained within normal ranges during this procedure.
This procedure is challenging but feasible. We have already applied this procedure to assess hepatic hemodynamics in normal mice as well as during 70% partial hepatectomy and in liver lobe clamping experiments. Mean PVP after resection (n= 20), was 11.41&#177;2.94 cmH2O which was significantly higher (P&#60;0.05) than before resection (6.87&#177;2.39 cmH2O). The results of liver lobe clamping experiment indicated that this monitoring procedure is sensitive and suitable for detecting small changes in portal pressure and portal flow rate. In conclusion, this procedure is reliable in the hands of an experienced micro-surgeon but should be limited to experiments where mice are absolutely needed.

This film demonstrates how to acquire systemic and hepatic hemodynamics in mice. The whole monitoring includes acquisition of vital parameters, systemic blood pressure, central venous pressure, common hepatic artery flow rate, and portal vein pressure as well as the portal flow rate in mice.

Farelerde Sistemik ve Karaciğer Hemodinamik Parametrelerin İzleme

The use of mouse models in experimental research is of enormous importance for the study of hepatic physiology and pathophysiological disturbances. ...

Invasive Hemodynamic Characterization of the Portal-hypertensive Syndrome in Cirrhotic Rats

This is a detailed protocol describing invasive hemodynamic measurements in cirrhotic rats for the characterization of portal hypertensive syndrome. Portal hypertension (PHT) due to cirrhosis is responsible for the most severe complications in patients with liver disease. The full picture of the portal hypertensive syndrome is characterized by increased portal pressure (PP) due to the increased intrahepatic vascular resistance (IHVR), hyperdynamic circulation, and increased splanchnic blood flow. Progressive splanchnic arterial vasodilation and increased cardiac output with elevated heart rate (HR) but low arterial pressure characterizes the portal hypertensive syndrome.
Novel therapies are currently being developed that aim to decrease PP by either targeting IHVR or increased splanchnic blood flow &#8212; but side effects on systemic hemodynamics may occur. Thus, a detailed characterization of portal venous, splanchnic, and systemic hemodynamic parameters, including measurement of PP, portal venous blood flow (PVBF), mesenteric arterial blood flow, mean arterial pressure (MAP), and HR is needed for preclinical evaluation of the efficacy of novel treatments for PHT. Our video article provides the reader with a structured protocol for performing invasive hemodynamic measurements in cirrhotic rats. In particular, we describe the catheterization of the femoral artery and the portal vein via an ileocolic vein and the measurement of portal venous and splanchnic blood flow via perivascular Doppler-ultrasound flow probes. Representative results of different rat models of PHT are shown.

Here we describe a detailed protocol for invasive measurements of hemodynamic parameters including portal pressure, splanchnic blood flow, and systemic hemodynamics in order to characterize the portal hypertensive syndrome in rats.

Sirozlu fareleri Portal hipertansif sendromunda invaziv hemodinamik karakterizasyonu

This is a detailed protocol describing invasive hemodynamic measurements in cirrhotic rats for the characterization of portal hypertensive syndrome. ...

Assessment of Kidney Function in Mouse Models of Glomerular Disease

The use of murine models to mimic human kidney disease is becoming increasingly common. Our research is focused on the assessment of glomerular function in diabetic nephropathy and podocyte-specific VEGF-A knock-out mice; therefore, this protocol describes the full kidney work-up used in our lab to assess these mouse models of glomerular disease, enabling a vast amount of information regarding kidney and glomerular function to be obtained from a single mouse. In comparison to alternative methods presented in the literature to assess glomerular function, the use of the method outlined in this paper enables the glomerular phenotype to be fully evaluated from multiple aspects. By using this method, the researcher can determine the kidney phenotype of the model and assess the mechanism as to why the phenotype develops. This vital information on the mechanism of disease is required when examining potential therapeutic avenues in these models. The methods allow for detailed functional assessment of the glomerular filtration barrier through measurement of the urinary albumin creatinine ratio and individual glomerular water permeability, as well as both structural and ultra-structural examination using the Periodic Acid Schiff stain and electron microscopy. Furthermore, analysis of the genes dysregulated at the mRNA and protein level enables mechanistic analysis of glomerular function. This protocol outlines the generic but adaptable methods that can be applied to all mouse models of glomerular disease.

This protocol describes a full kidney work-up that should be carried out in mouse models of glomerular disease. The methods allow for detailed functional, structural, and mechanistic analysis of glomerular function, which can be applied to all mouse models of glomerular disease.

Fare modelleri Glomerular hastalığı böbrek fonksiyonlarının değerlendirilmesi

The use of murine models to mimic human kidney disease is becoming increasingly common. Our research is focused on the assessment of glomerular function ...

Incorporation of a Survivable Liver Biopsy Procedure in Mice to Assess Non-alcoholic Steatohepatitis (NASH) Resolution

Clinical trials assessing therapies for the treatment of non-alcoholic steatohepatitis (NASH) involve a baseline and end of study liver biopsy, and assessment of improvement in disease endpoints, often reflected as a percent of each treatment arm that improved, worsened or remained unchanged. Traditional preclinical rodent studies for putative NASH therapies are often limited by not knowing the level of liver disease/NASH present at the start of therapeutic intervention, instead of randomizing treatment groups on easily measurable endpoints such as body weight, metabolic status or similar. Here, we describe a liver biopsy technique in a diet-induced NASH mouse model, for the assessment of baseline liver disease in order to exclude mice that do not exhibit fibrosis and to equally distribute animals with similar fibrosis between treatment groups. These levels can then be compared to the terminal, post-intervention levels for a truer understanding of in vivo pharmacological effects and thus more accurately reflect clinical trial design strategies. The mouse is properly anesthetized and prepared for the surgery using sterile conditions. A small incision is made in the upper abdomen and the left lateral lobe of the liver is exposed. A wedge of the liver is surgically removed, and a similar-sized piece of absorbable gelatin is put in its place to stop any bleeding. The mouse is surgically sutured and stapled closed and will recover back to normal within 1 day. The entire process takes 5-10 min per mouse. Here we exemplify the utility of this procedure by leveraging the pre-study biopsy to assess the impact of the glucagon-like peptide-1 (GLP-1) receptor agonist liraglutide on NASH endpoints in mice.

Incorporation of a Survivable Liver Biopsy Procedure in Mice to Assess Non-alcoholic Steatohepatitis NASH Resolution

In clinical settings, a liver biopsy is used to assess stages of non-alcoholic steatohepatitis (steatosis, inflammation, hepatocyte ballooning, and fibrosis). Here, we illustrate a survivable liver biopsy in mice which can be used for histological analyses to enable assessment of therapeutic agents in a manner more aligned with clinical trials.

-Alkolsüz Steatohepatitis (NASH) çözünürlük değerlendirmek farelerde hayatta kalınabilir karaciğer biyopsisi yordam eklenmesi

Clinical trials assessing therapies for the treatment of non-alcoholic steatohepatitis (NASH) involve a baseline and end of study liver biopsy, and ...

An In Vitro Hemodynamic Loop Model to Investigate the Hemocytocompatibility and Host Cell Activation of Vascular Medical Devices

In this study, the hemocompatibility of tubes with an inner diameter of 5 mm made of polyvinyl chloride (PVC) and coated with different bioactive conjugates was compared to uncoated PVC tubes, latex tubes, and a stent for intravascular application that was placed inside the PVC tubes. Evaluation of hemocompatibility was done using an in vitro hemodynamic loop model that is recommended by the ISO standard 10993-4. The tubes were cut into segments of identical length and closed to form loops avoiding any gap at the splice, then filled with human blood and rotated in a water bath at 37 &#176;C for 3 hours. Thereafter, the blood inside the tubes was collected for the analysis of whole blood cell count, hemolysis (free plasma hemoglobin), complement system (sC5b-9), coagulation system (fibrinopeptide A), and leukocyte activation (polymorphonuclear elastase, tumor necrosis factor and interleukin-6). Host cell activation was determined for platelet activation, leukocyte integrin status and monocyte platelet aggregates using flow cytometry. The effect of inaccurate loop closure was examined with x-ray microtomography and scanning electron microscopy, that showed thrombus formation at the splice. Latex tubes showed the strongest activation of both plasma and cellular components of the blood, indicating a poor hemocompatibility, followed by the stent group and uncoated PVC tubes. The coated PVC tubes did not show a significant decrease in platelet activation status, but showed an increased in complement and coagulation cascade compared to uncoated PVC tubes. The loop model itself did not lead to the activation of cells or soluble factors, and the hemolysis level was low. Therefore, the presented in vitro hemodynamic loop model avoids excessive activation of blood components by mechanical forces and serves as a method to investigate in vitro interactions between donor blood and vascular medical devices.

Presented here is a protocol for a standardized in vitro hemodynamic loop model. This model allows to test the hemocompatibility of perfusion tubes or vascular stents to be in accordance with ISO (International Organization for Standardization) standard 10993-4.

Vasküler Tıbbi Cihazların Hemositokomisyonla uyumluluğunu ve Konak Hücre Aktivasyonunu Araştırmak için Bir In Vitro Hemodinamik Döngü Modeli

In this study, the hemocompatibility of tubes with an inner diameter of 5 mm made of polyvinyl chloride (PVC) and coated with different bioactive ...

Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, including ischemia-reperfusion injury (IRI) of extrahepatic organs. This model requires numerous experiments and devices. The duration of anhepatic phase is closely related to the time to develop IRI after transplantation. In this experiment, we used hemodynamic changes to induce extrahepatic organ damage in rats and determined the maximum tolerance time. The time until the most severe organ injury varied for different organs. This method can easily be replicated and can also be used to study IRI of the extrahepatic organs after liver transplantation.

This paper provides a detailed description of how to build an animal model of the anhepatic phase (liver ischemia) in rats to facilitate basic research into ischemia-reperfusion injury after liver transplantation.

Sıçan Karaciğer Nakli Modelinde Hemodinamik Değişiklikleri Simüle Ederek Organ İskemi-Reperfüzyon Yaralanması

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, ...

Direct Drug Delivery to Kidney via the Renal Artery

There is a need for directed injections to enable increased and specific renal exposure for efficient evaluation of drug targets in the renal research field. Accumulation of drugs in certain organs may give rise to adverse and unwanted effects, depending on the nature of injectate. To minimize spillover and/or accumulation in other tissues, the herein described method directs the formulation into the renal artery bloodstream by inserting a catheter in the infra renal aorta, just below where it branches into the renal artery, resulting in the kidney as first reached organ and distributing of formulation throughout the kidney.
This manuscript provides a detailed description of the method, as well as its challenges and difficulties. It guides the experimenter to become skillful with this type of microsurgery that requires accuracy under sterile conditions. Speed is crucial for minimizing the ischemia and practicing the procedure will increase the chance of successful injections without adverse effects. By modulating the time between injection and reperfusion as well as the injected volume, the risk of spillover to other organs is mitigated. 
Note that this technique is suitable for single dosing strategies.

This manuscript describes a method for targeted delivery to a single kidney via a catheter placed in the infrarenal abdominal aorta in the mouse.

Böbrek Atardamarı Ile Böbreğe Doğrudan İlaç Verilmesi

There is a need for directed injections to enable increased and specific renal exposure for efficient evaluation of drug targets in the renal research ...

Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats

The kidneys play a crucial role in maintaining the homeostasis of body fluids. The regulation of renal blood flow (RBF) is essential to the vital functions of filtration and metabolism in kidney function. Many acute studies have been carried out in anesthetized animals to measure RBF under various conditions to determine mechanisms responsible for the regulation of kidney perfusion. However, for technical reasons, it has not been possible to measure RBF continuously (24 h/day) in unrestrained unanesthetized rats over prolonged periods. These methods allow the continuous determination of RBF over many weeks while also simultaneously recording blood pressure (BP) with implanted catheters (fluid-filled or by telemetry). RBF monitoring is carried out with rats placed in a circular servo-controlled rat cage that enables the unrestrained movement of the rat throughout the study. At the same time, the tangling of cables from the flow probe and arterial catheters is prevented. Rats are first instrumented with an ultrasonic flow probe placement on the left renal artery and an arterial catheter implanted in the right femoral artery. These are routed subcutaneously to the nape of the neck, and connected to the flowmeter and pressure transducer, respectively, to measure RBF and BP. Following surgical implantation, rats are immediately placed in the cage to recover for at least one week and stabilize the ultrasonic probe recordings. Urine collection is also feasible in this system. The surgical and post-surgical procedures for continuous monitoring are demonstrated in this protocol.

The present protocol describes a long-term continuous measurement of renal blood flow in conscious rats and simultaneously recording blood pressure with implanted catheters (fluid-filled or by telemetry).