Cees Verlaan, Joyce Visser, Merel Schurink ve Grace Croft nazik hayvan deneyleri ile mükemmel teknik yardım için kabul edilmiştir.

All in vivo deneyler Laboratuar Hayvan Kaynakları Enstitüsü tarafından hazırlanan Laboratuar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı için Kılavuzu&#39;na uygun olarak yapılmıştır. Deneyler Yerel Hayvan Deneyleri Komitesi tarafından onaylandı. 1.. İlaçlar, Anestezi, Venöz Erişim ve Entübasyon <ol><li> İlaç ve Anestezi <ol><li> Premedikasyon <ol><li> Amiodaron 150 mg / Başlat aritmileri önlemek için 10 gün önce ameliyat kg. 28 gün. 29. günde 50 mg / kg doz azaltmak ve çalışmanın sonuna kadar devam kadar prosedürün gün ila 100 mg / kg &#39;lık bir dozda amiodaron devam edin. </li><li> Anti-trombosit tedavi, 1 mg / ameliyattan önce günde 3 kg klopidogreli ve 4.5 mg / kg, ameliyattan önce asetilsalisilik asit 1 güne başlayın. Klopidogrel gün ve asetilsalisilik asit 80 mg / günde 1 mg / kg devam edin. </li><li> Başlangıç ​​ağrı ilaç 1 gün ameliyattan önce Fentanil yama ile, 25~ 70 kg domuz ug / sa. &#39; Yeterli ağrı ilaç sağlamak için 24 saat post-operatif için Fentanil yamalar kullanımına devam. Ayrıca, varsayılan rahatsızlık belirtileri ağrı ilaç artırmak için (yani davranış, solunum, yürüme, hareketlilik, vb) günlük monitör. </li><li> 12 saat boyunca hayvan oruç, suya sınırsız erişim sağlamak. </li></ol></li><li> Anestezi <ol><li> Gereksiz stres ve rahatsızlığı önlemek için, midazolam 0.4 mg / kg ketamin 10 mg / kg, ve atropin 0.014 mg / kg &#39;lik bir karışımının kas içi enjeksiyon ile istikrarlı olarak domuz sakinleştirici. </li><li> 18 G iv kanül ile kulak ven cannulating venöz erişim elde. 5 mg / kg sodiumthiopental intravenöz ile anestezi neden, ve enfeksiyonları önlemek için 1,000 / 100 mg amoksisilin / klavulanik asit verir. Domuz antibiyotik tedavisi gibi cerrahi sonrası gün 1000/100 mg amoksisilin / klavulanik asit alacaksınız. </li><li> Bir endotrach kullanarak domuz entübeeal tüp (boy ~ 70 kg ağırlığındaki domuzlar için 8.5). Gerekirse 12/min bir frekans ile balon-havalandırma gerçekleştirmek ve faaliyet tiyatroya domuz taşımak. </li><li> Ameliyathane üzerine varış, hemen FiO2 0.50, 10 ml / kg tidal volüm ile mekanik pozitif basınçlı ventilasyon başlar ve 12/min under frekans Kapnografi devam ediyor. </li><li> İşlem için 0.5 mg / kg / saat, sufentanil 2.5 mikrogram / kg / saat ve pankuronyum bromid, 0.1 mg / kg / st &#39;lik bir arada intravenöz infüzyonu devam dengeli bir anestezi başlayın. Tüm operasyon sırasında sürekli EKG, anestezi derinliğini ölçmek için arteriyel kan basıncı, sıcaklığı ve Kapnografi izlemek. Bir sinüs taşikardisi varsa ağrı kesici ve / veya anestezi yeterli Örneğin, kontrol edin. </li><li> Intravenöz% 6 venofundin 500 ml amiodaron 4.3 mg / kg &#39;infüze. </li><li> Bir 5 kalp ritmini izlemek EKG yol açar. </li><li> Boyun ve arka lim tıraş ve temizb alanı. </li><li> Foley kateter yerleştirin. </li></ol></li></ol></li></ol> 2.. Transtorasik Ekokardiyografi <ol><li> Sağ lateral pozisyonda hayvan yerleştirin. Böyle Dalland domuzlar gibi landrace domuzlarda sadece Parasternal görünümleri (uzun ve kısa eksen) elde edilebilir. Nedeniyle toraks şekline, apikal görünüm elde etme uygun değildir. </li><li> Orient ve 2D (B-mod) parasternal uzun eksen görünümü edinin. M-modda son diastole ve bitiş sistol de LV boyutlarını belirleyin. </li><li> Mitral kapak papiller kas ve apeks düzeyde LV kısa eksen görüşlerini elde etmek için onun Parasternal konumunu korurken yankı sonda 90 ° saat yönünde döndürmek. Papiller kas ve apeks kısa eksen görünümü yankı prob yerleştirilmesi gerekebilir mitral kapak kısa eksen görünümü için konumuna göre daha düşük bir veya iki interkostal boşluk. </li></ol> 3. Cerrahi Hazırlık ve Damar Girişi <ol><li> Disiniyot% 2 ile cerrahi alanları fect ve domuz steril olmayan kısımlarını örtecek şekilde steril bir cerrahi örtü kullanın. </li><li> Boyunda bir medial kesi yapmak. Kas hasarı en aza indirmek ve açık açık karotis arter ve trakea yanında juguler ven yaklaşım linea alba geçmek. </li><li> Dikkatle karotid arter ve juguler ven izole. Vagus sinir hasarsız olduğundan emin olun. Damar kontrolünü kazanmak için her iki damarlarının etrafında vicryl 2-0 sütür koyun. Seldinger tekniği kullanılarak 8F kılıf ile internal karotis arter cannulating arteriyel erişimini sağlamak. Artere kılıf Fix arter tamamen sütür tarafından tıkalı olmadığından emin olun. Venöz erişim bir 9F kılıf da Seldinger tekniği ile şah damarını cannulating tarafından elde edilebilir. Kılıf emin olun güvence önce damar bağlanır. Seçenek olarak ise, femoral arter, arter erişim için kullanılabilir. </li><li> Hemen kılıf ile kaplanırlar taktıktan sonra 100 IE / kg heparin uygulayıntrombüs oluşumunu inhibe etmek için hs. </li><li> Istikrarlı ve sürekli tansiyon ölçümü için, arter üzerinde küçük bir kesi yaparak arka bacaklarda birinde küçük arterlerin birini cannulate. Arter derinin hemen altında bulunan, pulsasyonları deri yoluyla hissedilebilir. Onun çevresindeki dokudan arteri izole. Geminin yaklaşık 2 vicryl 2-0 sütür, 1 proksimal ve 1 distal yerleştirin. Distal tarafı bağlanır ve 18 G iv kanül takın ve baskı bağlayın sıkıca sabitleyin. </li></ol> 4. İnvaziv Basınç Hacim Döngüsü Analizi <ol><li> Juguler ven önceden yerleştirilen kılıf üzeri Swann-Ganz kateter (SG) takın. </li><li> Proksimal lümen içinde doruğa SG kısmına bir kardiyak çıkış aygıtı bağlayın. </li><li> SG proksimal lümen içine% 0.9 serum fizyolojik 5 ml enjekte edilir ve kardiyak output ölçümü; Bu üç kez tekrarlayın ve endeksleri ortalama. </li><li> Önceden kullanarak PV sistem kalibresaptanan kardiyak çıktı. </li><li> Floroskopi altında sol ventrikül içine karotis arter yoluyla 7F iletkenlik kateter yerleştirin. </li><li> Hacim ölçümleri için LV büyük segment mevcut seçin ve bir temel apnesi altında tarama gerçekleştirin. </li><li> Hacim kalibrasyon tamamlandıktan sonra, rekor 10-15 apnesi altında yener. </li><li> Kaldır SG ve floroskopi altında diyafram seviyesinde alt kaval ven bir balon kateter yerleştirebilir. </li><li> Apne altında balon şişirme preload azalma gerçekleştirin ve gelen PV-Loops kaydedebilirsiniz. </li></ol> 5.. İntrakoroner Basınç ve Debi Ölçümü <ol><li> Ml 100 ug / konsantrasyonunda nitrogliserin seyreltin ve 30 ug / ml &#39;lik bir konsantrasyonda adenozin seyreltin. </li><li> Sol koroner arter ostiyumunda 8F kılavuz kateter yerleştirin. </li><li> Sol koroner arterin proksimalinde kombine basınç / akım teli yerleştiriny. </li><li> Nitrogliserin intrakoroner 200 ug yönetme ve arter basıncı ile, tel ile ölçülen distal basınç (Pd), normalize. </li><li> Sol ön inen arter (LAD) orta kısmında teli yerleştirin. </li><li> Bazal basınç ve debi ölçümü başlatın. Tuz 2 ml ile aynı hizada adenozin Intrakoroner ile 60 ug verilerek hiperemi neden ve hiperemik basıncını ve akışını ölçmek. Başlangıç ​​değerlerine geri akışı için bekleyin. Iki ölçümü tekrarlayın. </li><li> Başka bir 200 mikrogram nitrogliserin intrakoroner aşılamak ve tekrar sol sirkumfleks koroner arter için 1.6 ve 1.7 adımları. </li></ol> MI 6. İndüksiyon <ol><li> Venöz kılıf kullanarak sağ ventrikül intrakardiyak defibrilasyon kateter yerleştirin. Distal elektrotlar ventrikül apeks, atriyum ve / veya daha kaval damar yakın elektrotlar olmalıdır. Defibrilatöre kateter bağlayın ve 50 olarak ayarlayınJ. </li><li> İkinci AP (D2) diyagonal ve Lao 30 ° görünümünden LAD distalinde çapını ölçün. </li><li> D2&#39;den LAD distal (Şekil 1) çapına göre bir çapı olan bir anjiyoplasti balonu seçin. </li><li> Distale LAD kılavuz kateter yoluyla bir kılavuz tel yerleştirin. </li><li> Kılavuz tel üzerinden balon kateteri. D2 gelen balon distalinden yerleştirin. </li><li> 30 IE / kg heparin yönetmek. </li><li> Basınç LAD sağ çapına kadar balonu şişirmek. </li><li> Anjiyografi ile LAD tam tıkalı (Şekil 1) kontrol edin. </li><li> Steril çalışma alanını ve steril örtüler bezler ile boyun yarayı örtün. Göğüs kompresyonu veya transtorasik defibrilasyon için kullanılabilir yapmak için herhangi bir kapsama göğüs özgür. </li><li> Sonraki 90 dakika boyunca balonunda basıncını kontrol edin ve gerekirse basıncını geri. </li><li> Ventriküler fibrilasyon durumda:<ol><li> Hemen 100/dk bir frekans ile göğüs masajına başlayın. </li><li> Hızlı bolus (~ 1 dak) olarak intravenöz 300 mg amiodaron yönetmek. </li><li> Intrakardiyak defibrilasyon başlayın, 50 J. şokları vermek </li><li> 5 başarısız şoklara sonra, göğüs kompresyonu yeniden başlatın. Başarısız şok durumunda 150 J. ile transtorasik defibrilasyon ve şok intrakardiyak defibrilasyon değiştirin, 200 J. değiştirmek </li><li> Gerekirse, 150 mg amiodaron gibi ilaçlar ve / veya 1 mg adrenalin bir doz tatbik. Gerekli 3-5 dakika aralıklar ile iki kere adrenalin tekrarlayın. </li><li> Transtorasik defibrilatör ile serpiştirilmiş göğüs masajına devam </li></ol></li></ol> Cerrahi Prosedür Terbiye (Uzun Süreli Takip Up) <ol><li> Anjiyografi ile 90 dakika onay LAD hala tam tıkalı ise sonra. </li><li> Başka bir 30 IE / kg heparin yönetmek ve balon deflate. Reperfüzyon için kontrol edin. GUID ile Sönük bir balon çıkarıncarotica&#39;nın gelen kateter ing. </li><li> Dikkatle arteriyel kılıfı çıkarın ve bir anastomoz kelepçe (Şekil 1) ile hemen karotis arter kelepçe. Kullanım karotis arter kapatmak için dikiş (6-0 prolen) devam ediyor. Kelepçeyi çıkarın ve sızıntı açısından kontrol edin. </li><li> Dahili defibrilasyon kateteri çıkarın ve juguler venden kılıfı çıkarın. Kılıf giriş ligate yakın. </li><li> 2-0 Vicryl kullanarak iki kat boyun deri altı ve deri kapatın. </li></ol> 7. Kardiyak Manyetik Rezonans Görüntüleme <ol><li> Sürekli anestezi altında sırtüstü yatar pozisyonda ilk MRG tablo kafasına hayvan yerleştirin. </li><li> Hayvanın göğüs üzerinde bir adanmış fazlı dizi kardiyak bobin yerleştirin. </li><li> Görüntü planlaması için kısa eksen ve iki odacıklı uzun eksen görünümlerinde izci görüntüler elde. </li><li> EKG-kapılı kararlı durum serbest devinim kısa ekseni (SSFP) cine (apeks LV tabanına) ve iki Chambe Edinmeuzun eksen bakıldı r. </li><li> Geç gadolinyum (LGE) bir inversiyon kurtarma 3D-turbo-gradyan-eko-teknik gadolinyum bazlı kontrast madde çift doz iv bolus enjeksiyondan sonra 15 dakika kullanılarak elde edilebilir. </li><li> Fonksiyonel parametrelerin geçerliliği yazılımı ile çevrimdışı analiz gerçekleştirin. Sol ventrikül ejeksiyon fraksiyonu (LVEF), LV kitle, diyastol sonu hacmi, sistol sonu hacmi, strok hacmi, kardiyak output ve skar kitle değerlendirin. </li></ol> Çalışma ve Enfarktüs Boyutu 8. Sonu <ol><li> Çalışmanın sonunda, takip ölçümleri elde etmek Protokolleri 1-5 ve 7 izleyin. </li><li> Sadece kılıç şeklinde bir süreç altında bir noktaya sadece suprasternal aşağıdan medyan 30-40 cm kesi olun. Sternum aşağı linea alba ilerlemek. Kılıç şeklinde bölünmüş ve dikkatli perikarttan posterior sternumu ayırmak için Klinkenberg makas kullanın. Açık açık makas kullandıktan sonra tekrar ayrılmasını devam ediyor. Bir sternotomi b gerçekleştiriny, örneğin, bir çekiç ve Lebsch bıçak kullanarak. Kemik iliği kanama iliği kemik balmumu sürtünme minimize edilir. Bir sternum ekartör ile göğüs kafesi açın. </li><li> 3. plevral boşluk girin ve mediastende alt kaval ven bulun. </li><li> Insanca derin anestezi altında alt kaval ven keserek hayvan euthanize. Bir emme cihazı ile kan çıkarın. Ventriküler fibrilasyona yol için apeks üzerinde 9 V pil yerleştirin. </li><li> Kalbin eksizyonu, sağ kesilmiş ve tepe tabanından beş dilimler halinde sol ventrikül ve 15 dakika boyunca 37 ° C &#39;de% 0.9 tuzlu su içinde çözülmüş% 1 trifenil tetrazolyum klorid-inkübe edildi. Daha sonra,% 0.9 tuzlu su içinde dilimleri yıkayın ve her iki taraftan dilimleri fotoğraf. </li></ol>

<ol>
	<li>Roger, V. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics-2012+update:+a+report+from+the+American+Heart+Association.">Heart disease and stroke statistics-2012 update: a report from the American Heart Association.</a> Circulation. 125 (1), (2012).</li><li>Mosterd, A., Hoes, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+epidemiology+of+heart+failure.">Clinical epidemiology of heart failure.</a> Heart. 93 (9), 1137-1146 (1136).</li><li>vander Spoel, T. I. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+relevance+of+pre-clinical+studies+in+stem+cell+therapy:+systematic+review+and+meta-analysis+of+large+animal+models+of+ischaemic+heart+disease.">Human relevance of pre-clinical studies in stem cell therapy: systematic review and meta-analysis of large animal models of ischaemic heart disease.</a> Cardiovasc. Res. 91 (4), 649-658 (2011).</li><li>Crick, S., Sheppard, M., Ho, S., Gebstein, L., Anderson, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+of+the+pig+heart+:+comparisons+with+normal+human+cardiac+structure.">Anatomy of the pig heart : comparisons with normal human cardiac structure.</a> J. Anat. 193 (1), 105-119 (1998).</li><li>Stubhan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+cardiovascular+and+ECG+parameters+in+the+normal,+freely+moving+G&#246;ttingen+Minipig.">Evaluation of cardiovascular and ECG parameters in the normal, freely moving G&#246;ttingen Minipig.</a> J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 57 (3), 202-211 (2008).</li><li>Heusch, G., Skyschally, A., Schulz, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+in-situ+pig+heart+with+regional+ischemia/reperfusion+-+ready+for+translation.">The in-situ pig heart with regional ischemia/reperfusion - ready for translation.</a> J. Mol. Cell Cardiol. 50 (6), 951-963 (2011).</li><li>Skyschally, A., van Caster, P., Iliodromitis, E. K., Schulz, R., Kremastinos, D. T., Heusch, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemic+postconditioning:+experimental+models+and+protocol+algorithms.">Ischemic postconditioning: experimental models and protocol algorithms.</a> Basic Res Cardiol. 104 (5), 469-483 (2009).</li><li>Iekushi, K., Seeger, F., Assmus, B., Zeiher, A. M., Dimmeler, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+cardiac+microRNAs+by+bone+marrow+mononuclear+cell+therapy+in+myocardial+infarction.">Regulation of cardiac microRNAs by bone marrow mononuclear cell therapy in myocardial infarction.</a> Circulation. 125 (14), 1765-1773 (2012).</li><li>Sijbesma, R. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+polymers+formed+from+self-complementary+monomers+using+quadruple+hydrogen+bonding.">Reversible polymers formed from self-complementary monomers using quadruple hydrogen bonding.</a> Science. 278 (5343), 1601-1604 (1997).</li><li>van Slochteren, F. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advanced+measurement+techniques+of+regional+myocardial+function+to+assess+the+effects+of+cardiac+regenerative+therapy+in+different+models+of+ischaemic+cardiomyopathy.">Advanced measurement techniques of regional myocardial function to assess the effects of cardiac regenerative therapy in different models of ischaemic cardiomyopathy.</a> Eur. Heart J. Cardiovasc. Imaging. 13 (10), 808-818 (2012).</li><li>McCall, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+infarction+and+intramyocardial+injection+models+in+swine.">Myocardial infarction and intramyocardial injection models in swine.</a> Nature Protoc. 8 (7), 1479-1496 (2012).</li><li>Roussi, J., Andre, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+functions+and+haemostasis+parameters+in+pigs:+absence+of+side+effects+of+a+procedure+of+general+anaesthesia.">Platelet functions and haemostasis parameters in pigs: absence of side effects of a procedure of general anaesthesia.</a> Thromb Res. 81 (3), 297-305 (1996).</li></ol>

Bu çalışma HGG Group BV (SK), &quot;Wijnand M. Pon Stichting&quot; (SC, SK) tarafından desteklenmiştir. Bu araştırma, Hollanda Ekonomik İşler Bakanlığı, Tarım ve İnovasyon (SJL, JG) tarafından cofunded Biyomedikal Malzemeler enstitü, Proje P1.04 SmartCare parçasını oluşturur. Tüm yazarlar ifşa etmek hiçbir ilişkileri olduğunu bildirdi.

LAD intrakoroner balon oklüzyon güvenliği ve yakından insani durumu taklit eden yeni bir kardiyovasküler tedavilerin etkinliğini araştırmak için kullanılabilecek domuzlarda bir tekrarlanabilir ve tutarlı klinik öncesi MI modeli sağlar. Şekil 5&#39;te gösterildiği gibi, sunulan iskemi / reperfüzyon enfarktüs modeli bundan başka, ilk iskemi / reperfüzyon hasarı her ikisi için de aynıdır iken MI ve MI sonrası yeniden farklı aşamalarını araştırmak için uygun olabilir platform sağlar. Burada özetlenen açıklanan protokole başarısı protokol en kritik faz olarak miyokart iskemisi bağlıdır. LAD ikinci çapraz dala balon distalinde Doğru yerleştirme yüksek hayatta kalma oranı sağlarken yeterli enfarktüs boyutunu ulaşmak için çok önemlidir. Bu MI modeline dayanarak, bir ~% 15 ölüm oranı, gözlenirken geniş orta ve anterior, septal ve Inferi apikal segmentlerindenCMR ve TTC lekeleme (Şekil 2A ve 2B) üzerinde görüldüğü gibi ya da duvarları enfarkte edilmiştir. Iskemi süresi arzu edilen enfarkt boyutunda göre uyarlanabilir. Bu protokolde Landrace domuzları kullanmış olsa da, mini-domuzlarda (yani Göttingen domuzcuklar), genellikle miyokard iskemi (örneğin, 150 dakika tıkanması) daha uzun süreler gerektirir. Klinik öncesi ve klinik MI çalışmalarda sonuç analizi genellikle LVEF dayanmaktadır. Düşük EF sıkıca kardiyovasküler mortalite riski ile ilişkili olmasına rağmen, bu tür ön yük 9 gibi hemodinamik parametrelere bağlıdır kalır. Muhtemelen, birçok kavramsal ve pratik sınırlamalar LVEF LV sistolik fonksiyon küresel bir önlem olmaktan ziyade yerel gelişme 10 yansıtan ilgili, ortalama LV sadece% 10-15 enfarkte olduğunu verilmiştir. Bu nedenle, bu modelde kullanılan sonucun önerilen tedbirlerin farklı yönlerine ışık tutacak<html> MI ve MI sonrası yeniden böylece araştırmacılar, doğru çoklu seviyelerde yeni tedavilerin etkinliğini değerlendirmek için araçlar sağlar. Klinik pratikte klinik öncesi modellerden çeviri optimize etmek için, biz büyük domuz yerine domuzcuklar kullanarak seçin. Hemodinamik ölçümler, ilaç dozları ve cerrahi cihazlar kolaylıkla klinik uygulama ile değiş tokuş edilebilir. Mini-domuzlarda karşılaştırıldığında, büyük domuzlar nispeten çok kilo. Bu uzun vadede bir sorun seri sonuçlarının karşılaştırılabilirliği açısından, takip neden olabilir. Kadın Dalland Landrace domuzları 6 aylık bir yaşta yaklaşık 70 kg ağırlığında. Takipler sırasında bol miktarda kilo alımını önlemek için, hayvanlar kısıtlı diyet tutulur. (: Proteinler% 15,6, yağ% 2.0, lifler% 14.8, külleri% 8.8, kalsiyum% 0,9, fosfor% 0.57,% 0.29 magnezyum, potasyum ve% 0.18 içeren) bir gün ve iki kez domuz özel yapılmış düşük kalorili gıda 750 gr alırsınız 4 hafta içinde ağırlıkça yaklaşık 10 kg kazanır. e_content &quot;&gt; McCall ve arkadaşları daha önce domuzlarda 11, miyokard enfarktüsü için benzer bir protokol yayınlamıştır. Önemli örtüşme LAD için tercih ziyade sol sirkumfleks arter (LCX) veya sağ koroner arter (RCA vurgulayarak, bu protokol ve onların arasında var RCA enfarktüs yüksek istenmeyen ileti bozukluklarının şans (yani sinüs düğümü disfonksiyonu, AV düğüm disfonksiyonu) ile birlikte iken). Bizim tecrübelerimize göre, lcx kullanarak toplam sol ventrikül enfarktüs büyüklüğü daha az bir ölçüde var. arasındaki bir fark Biz tıkanmış koroner arterde hemostaz, 90 dakika bir sonucu olarak trombüs oluşumu göre-akış-olmamasına daha yüksek oranda görülen gibi iki protokol Bu protokolde artan trombosit farmakolojik inhibisyonu kullanımı ile ilgilidir. bu gözlem ile uyumludur Bilinen hiperkoagülabilite domuzlarda 12 gözlenmiştir. McCall heparin, thi bir tek, yüksek doz, bolus kullanımında önerilen rağmens protokol trombotik komplikasyonlar en aza indirmek için, cerrahi boyunca yayılan birden çok düşük dozlarda Heparin kullanımına dayanır. Özetle, biz bir ilk-in-man klinik deneme yolunda önemli bir adım olarak yeni ilaçlar çalışma insan hastalığının etkili, tekrarlanabilir ve her şeyden pratik büyük hayvan modelinde yararlanmak için araştırmacılar sağlar bir domuz MI modeli sunuyoruz.

A correction was made to <a href="/video/51269">Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs</a>. An author's middle initial was omitted at publication.
The author's name was updated from:
Sanne Jansen of Lorkeers
to:
Sanne J. Jansen of Lorkeers

A correction was made to <a href="/video/51269">Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs</a>.
The middle initial J. has been added to author Sanne Jansen of Lorkeers.

Erratum: Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Akut miyokard infarktüsü (AMI) ve kronik kalp yetmezliği (CHF) olarak uzun süreli sekeller derinden hasta prognozu ve yaşam kalitesini etkileyebilir, yalnız bizim mevcut sağlık kaynakları 1 dayatılan yüksek maliyet sınırlamalar. Batı dünyasında CHF yaygınlığı vakalarının% 60 birincil nedeni 2 olarak AMI sonucudur ~ olan,% 1-2 olarak tahmin edilmektedir. Sadece ABD&#39;de yaklaşık 5,7 milyon hasta 1. Birlikte ele alındığında, bu rakamlar için güçlü bir argüman 2030 yılda 97000000000 $ yükselen maliyetlerinin öngörülen üç kopya ile, 2008 yılında yıllık sağlık maliyeti yaklaşık 30 $ milyar muhasebe CHF muzdarip , hızlı çeviri için doğru, insan senaryoyu taklit eden bir tekrarlanabilir ve güvenilir büyük hayvan miyokard infarktüsü modeline güveniyor yeni cardioregenerative tedavilerin geliştirilmesi. Domuzlar (Sus scrofa) artan kardiyovasküler kullanılmaktadırfarmakolojik ve toksikolojik test 3 için lar araştırma. Bir öteleme araştırma aracı olarak bu başarı sorumlu özelliklerinden biri insan kalbi, 4,5 ile kalp fonksiyonu ve anatomi kendi benzerlik olduğunu. Örneğin, domuz kalp-to-vücudun ağırlık oranı, kalp boyutu ve koroner arter anatomisi dağıtım tüm 4 insana oldukça benzer olduğu gösterilmiştir. Ayrıca, kardiyomiyosit metabolizması, elektrofizyolojik özellikleri ve bu AMI gibi bir iskemik hasara yanıt insan durum, 6,7 ile uyumlu yüksek düzeyde göstermek için bildirilmiştir. Sonuçta, araştırılan yeni ilaçlar (IND) test için sağlam ve sürdürülebilir MI needed edilir üreten bir standart MI-protokol yukarıda açıklanan kriterleri yerine getirmek. Burada, biz böylece tekrarlanabilir miyokardiyal oluşturarak, reperfüzyon ile sol ön inen arter (LAD) bir 90 dakika kapalı göğüs koroner balon oklüzyon kullanan böyle bir standart model sunuyoruzfarction anteroapikal, septal ve sol ventrikül inferoseptal duvarlarını kaplayan.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="726">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">0.9% Saline</td>
			<td style="width:224px;">Braun</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">6-0 Prolene</td>
			<td style="width:224px;">Ethicon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Acetylsalicylic acid</td>
			<td style="width:224px;">80 mg (Ratiopharm)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Adenosine</td>
			<td style="width:224px;">3mg/ml apotheek UMCU</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">AdVantage PV loop system</td>
			<td style="width:224px;">Transonic Scisence</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="43" rowspan="2" style="height:43px;width:216px;">Amiodarone</td>
			<td style="width:224px;">Cordarone I.V. (Sanofi)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:224px;">Amiodaron HCl (PCH)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Amoxicilline/ clavulaanzuur</td>
			<td style="width:224px;">500/50mg (Sandoz)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Atropinesulfaat</td>
			<td style="width:224px;">0,5 mg/ml (PCH)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Bone Marrow Wax</td>
			<td style="width:224px;">Syneture</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Cardiac Defibrillator</td>
			<td style="width:224px;">Philips</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Clopidogrel</td>
			<td style="width:224px;">Clopidrogel 75A (Apothecon B.V.)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Contrast agent</td>
			<td style="width:224px;">Telebrix</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Endotracheal tube</td>
			<td style="width:224px;">Covidien</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Fentanyl patch</td>
			<td style="width:224px;">Durogesic&#174; 25 mcg/h (Janssen-Cilag)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Fogarty catheter</td>
			<td style="width:224px;">Edwards Lifesciences</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Gadolinium</td>
			<td style="width:224px;">Gadovist</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Guidewire</td>
			<td style="width:224px;">Abbott</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Heparin</td>
			<td style="width:224px;">Leo</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">I.V. cannula</td>
			<td style="width:224px;">Abbocath&#174; (Hospira venisystems)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Iodine</td>
			<td style="width:224px;">Jodiumtictuur 2% (Eurovet)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Ketamine</td>
			<td style="width:224px;">Narketan&#174; 10 V&#233;toquinol</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Midazolam</td>
			<td style="width:224px;">5mg/ml (Actavis)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Nitroglycerin</td>
			<td style="width:224px;">1mg/ml Pohl Boskamp</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Pancuronium bromide</td>
			<td style="width:224px;">2mg/ml</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Seldinger vascular sheath 8F</td>
			<td style="width:224px;">Arrow</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Sufentanil&#160;</td>
			<td style="width:224px;">50 mcg/ml (Sufentanil-hameln)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Swann-Ganz catheter</td>
			<td style="width:224px;">Criticath ref 680078 (Argon)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Synolux</td>
			<td style="width:224px;">250 mg (Pfizer)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Tetra-polar catheter</td>
			<td style="width:224px;">Transonic Scisence</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Thiopental</td>
			<td style="width:224px;">0,5 g (Inresa)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Triphenyl-tetrazolium chloride</td>
			<td style="width:224px;">Merck</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Venofundin</td>
			<td style="width:224px;">Braun</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Vicryl 2-0</td>
			<td style="width:224px;">Ethicon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Volcano ComboMap system</td>
			<td style="width:224px;">Volcano</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

myocardial infarction and functional outcome assessment in pigs

Ilk-in-man denemeler içine yeni keşfedilen kardiyovasküler terapötik tanıtımı kesinlikle düzenlenmiş etik ve yasal yol haritası bağlıdır. Bir önemli ön koşul geçerli olarak miyokard infarktüsü (Mİ), insan senaryoyu yansıtan büyük bir hayvan modelinde elde edilen tüm güvenlik ve etkililiği konularında iyi bir anlayış. Onların kalp büyüklüğü, hemodinamik ve koroner anatomi insanlarınkine yakın olduklarından Domuzlar yaygın olarak bu konuda kullanılmaktadır. Burada, reperfüzyon ardından arter (LAD) sol ön inen bir kapalı göğüs balon koroner oklüzyon kullanılarak domuz MI modeliyle için etkili bir protokol mevcut. Bu yaklaşım, anterior, septal ve inferoseptal duvarların bir sol ventrikül enfarktüsü uyaran, miyokardiyal iskemi, 90 dakika dayanır. Ayrıca, kardiyak sistolik ve diyastolik fonksiyonu, hemodinami gibi kalp üzerinde geniş bir bilgi yelpazesi sunmak sonucu çeşitli önlemler için protokolleri mevcutcs, koroner akım hızı, mikrovasküler direnç ve enfarktüs boyutu. Bu protokol, kolayca farklı aşamalarında roman cardioregenerative biyolojiklerin doğrulama (yani doğrudan akut iskemik ataktan sonra, subakut ortamda ya da kronik MI skar oluşumu tamamlandıktan sonra) için özel gereksinimleri çalışma karşılamak için tasarlanmış olabilir. Bu model, bu nedenle, bir MI incelemek için yararlı bir araç translasyon, daha sonra ters yeniden ve yeni cardioregenerative ajanların potansiyel sağlar.

Ölüm ve Enfarktüs Boyutu Merkezimizde, bu MI protokol, beş (% 15.6) tabi tutuldu 32 Domuzlar (6 aylık Kadın Dalland Landrace, ~ 70 kg) üzerinden iskemi sırasında nedeniyle refrakter ventriküler fibrilasyona öldü. Bu protokol anteroseptal, septal ve inferoseptal duvarları (Şekil 2A) bulunan sol ventrikül yaklaşık% 10-15 kapsayan infarktusunden oluşturur. Enfarkt boyutu seri invaziv olmayan değerlendirme garanti edilir ise, CMR geç gadolinyum (LGE) zamanla cansız enfarktüs alanı (Şekil 2B) takip etmek için kullanılabilir. Kardiyak Fonksiyon ve Tadilat Dört hafta sonra MI, kardiyak fonksiyonunu yansıtan, küresel ve bölgesel parametreleri sağlıklı başlangıç ​​değerlerine göre azaltılmalıdır. Özellikle, LV ejeksiyon fraksiyonu (EF), yaklaşık ~% 35-45, dört hafta post-MI düşmelidir. Küresel sistolik fonksiyonu yanında,MI sonrası ters yeniden yansıtan çeşitli parametreler, aynı zamanda, LV morfolojisi ve CMR ve ekokardiyografi (Şekiller 3A ve 3B) kullanılarak çapları olarak ölçülebilir. MI, olumsuz yeniden bir işareti olarak diyastol sonu hacmi (DSH) bir artış beklenebilir dört hafta sonra (Şekil 3A ve 3B). Koroner akım ve basınç parametreleri Anjiyojenez ve yeni kılcal damarların oluşumu, genellikle iskemik kalp hastalığı 8 önemli tedavi hedefleri olarak kabul edilmektedir. Mikrovasküler direncinin değerlendirilmesi dolaylı içi basınç ve akış hızının kombine ölçümüne dayalı olabilir. Koşulları ve maksimal hiperemi, normal basınç altında Örnek ve akış hızı ölçüm Şekil 4 &#39;de gösterilmiştir. Dört hafta MI sonrası, hiperemik mikrovasküler direnç karşılaştırıldığında enfarktüs ile ilgili koroner arter (LAD) olarak artırılmalıdırmevcut durum 8. <img alt="Şekil 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51269/51269fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51269/51269fig1.jpg" /> . Şekil 1 MI modeli LAD balon tıkanıklığı dayanarak (A) Standart cerrahi aletler: 1). Havlu kelepçeler; 2) sivrisinek; 3) diseksiyon forseps; 4) yuvarlak kap; 5) iğne tutucular (ince ve kaba); 6) Klinkenberg makas; 7) makas diseksiyon (düz ve kavisli); 9) forseps (De-Bakey, ince ve kaba); 10) hortum kelepçesi; 11) anastomoz kelepçe; 12) tüller; 13) elektro kalem; 14) neşter tutucu; 15) Dreesman (emme); 16) geri çekme; 17) lamba tutucular. (B) LAD ve LCX anterior oblik floroskopi Görünüm Sol. (C) ikinci diyagonal dalı görselleştirme sonra, sadece distale D2 balonun iki radyoopak işaretleyiciler (inset bakın, siyah ok başları) yerleştirin. Inflate ve koroner kan akım başarıyla (yıldız bakınız) kontrast enjeksiyonu ile bloke olduğundan emin olun. Intrakardiyak defibrilatör kurşun (beyaz ok ucu bakınız) sağ ventrikül görülebilir. LAD Sol ön inen arter gösterir; LCX sol sirkumfleks arter gösterir; LAO sol ön oblik görünümü gösterir; AP anterior posterior görünümünü gösterir; D1 birinci diyagonal dal gösterir; D2 ikinci diyagonal dal gösterir. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/51269/51269fig1highres.jpg" target="_blank">resmi büyütmek için buraya tıklayın.</a> <img alt="Şekil 2," fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51269/51269fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51269/51269fig2.jpg" /> MI sonrası Şekil 2. Enfarktüs büyüklüğü. (A) LAD 90 dakika balon oklüzyon takip 1 ay TTC boyama tarafından görüntülenmiştir geniş miyokard hasar ve skar oluşumu (beyaz renk), yol açar.(B) şematik enfarktüs dağıtım enfarktüsü, ön kalbin anteroseptal ve inferoseptal segmentleri yer aldığını göstermektedir. (C, D) Kısa ve uzun aks geç gadolinyumdan gelişmiş CMR görüntüleri anterior, kalp anteroseptal ve inferoseptal segmentlerinde lokalize geniş infarkt skar (beyaz sinyal, siyah ok uçları bakınız) göstermektedir. LGE-CMR geç gadolinyum gelişmiş kardiyak manyetik rezonans gösterir. Ölçek çubuğu 3 cm gösterir. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/51269/51269fig2highres.jpg" target="_blank">resmi büyütmek için buraya tıklayın.</a> <img alt="Şekil 3," fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/51269/51269fig3highres.jpg" width="400" /> Inf fonksiyonel bozukluk gösteren uç diyastol ve sistol sonu iskemik MI modellerinde kardiyak fonksiyonu Şekil 3.. Değerlendirme. (A) Temsilcisi CMR cine-loop görüntüleriARCT yara bölümleri. LV dilatasyon (LVIDd artış) MI 1 ay sonra, hem de fonksiyonel bozukluğa (septal kalınlaşma yokluğu) göstererek ekokardiyografi ile 2D parasternal uzun eksen (B) M-Mod görüntü. EDV diyastol sonu hacmini gösterir; ESV sistol sonu hacmi gösterir; LVIDd diastole sol ventrikül iç çapı gösterir ve LVIDs sistol sol ventrikül iç çapı ifade eder. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/51269/51269fig3highres.jpg" target="_blank">resmi büyütmek için buraya tıklayın.</a> <img alt="Şekil 4," fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51269/51269fig4highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51269/51269fig4.jpg" /> Şekil 4. İntrakoroner basınç ve akış hızı parametreleri türetilmiştir. Yüksek yanıt vermeyen öncesinde MI (A) referans değerlerini gösteren Combowire kullanarak İntrakoroner basınç ve akış hızı kayıtlarıhiperemi (siyah ok) e. (B) 1 ay MI sonrası, infarkt ilişkili arter (LAD) koroner akım hızı (siyah ok başları) bir azalma hiperemik cevabı vardır. Sonuç olarak, basınç ve akış hızı gibi türetilen parametreleri (HMR) veya akım hızı rezervi (CFR) başlangıca göre azalmıştır. bAPV bazal ortalama pik hızı gösterir; pAPV zirve ortalama pik hızı gösterir; CFR koroner akım rezervi gösterir; HMR hiperemik mikrovasküler direncini gösterir. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/51269/51269fig4highres.jpg" target="_blank">resmi büyütmek için buraya tıklayın.</a> <img alt="Şekil 5," fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51269/51269fig5highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51269/51269fig5.jpg" /> Araştırılan yeni ilaçlar doğrulamak için birden fazla olası çalışma tasarımları farklı çalışma tasarımlarının Şekil 5. Bakış. (A) şematikBu LAD MI domuz modeli kullanılarak MI çeşitli aşamalarında (IND). Soruşturma altında MI seçilen aşamasında bağımlı, fonksiyonel analiz hemen önce risk alan bazal değerin ve değerlendirme gibi tedavi tahsisi yapılabilir. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/51269/51269fig5highres.jpg" target="_blank">resmi büyütmek için buraya tıklayın.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs at JoVE.com

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Bu protokol reperfüzyon ile sol ön inen arter (LAD) bir 90 dakika kapalı göğüs koroner balon oklüzyon kullanarak domuz miyokard infarktüsü (Mİ) modeli anlatılmaktadır. Ayrıca, bu tür kalp fonksiyonu, hemodinamikler, mikrovasküler direnci ve enfarkt boyutu gibi birçok parametrelerde için protokol de sunulmaktadır.

Domuzlar miyokard enfarktüsü ve Fonksiyonel Sonuç Değerlendirmesi

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

myocardial-infarction-and-functional-outcome-assessment-in-pigs

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Medicine

27.7K Görüntüleme.  University Medical Center Utrecht.  Bu protokol reperfüzyon ile sol ön inen arter (LAD) bir 90 dakika kapalı göğüs koroner balon oklüzyon kullanarak domuz miyokard infarktüsü (Mİ) modeli anlatılmaktadır. Ayrıca, bu tür kalp fonksiyonu, hemodinamikler, mikrovasküler direnci ve enfarkt boyutu gibi birçok parametrelerde için protokol de sunulmaktadır. 

Video: Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Acute Myocardial Infarction in Rats

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular diseases. Animal models that mimic human cardiac disease, such as myocardial infarction (MI) and ischemia-reperfusion (IR) that induces heart failure as well as pressure-overload (transverse aortic constriction) that induces cardiac hypertrophy and heart failure (Goldman and Tarnavski), are useful models to study cardiovascular disease. In particular, myocardial ischemia (MI) is a leading cause for cardiovascular morbidity and mortality despite controlling certain risk factors such as arteriosclerosis and treatments via surgical intervention (Thygesen). Furthermore, an acute loss of the myocardium following myocardial ischemia (MI) results in increased loading conditions that induces ventricular remodeling of the infarcted border zone and the remote non-infarcted myocardium. Myocyte apoptosis, necrosis and the resultant increased hemodynamic load activate multiple biochemical intracellular signaling that initiates LV dilatation, hypertrophy, ventricular shape distortion, and collagen scar formation. This pathological remodeling and failure to normalize the increased wall stresses results in progressive dilatation, recruitment of the border zone myocardium into the scar, and eventually deterioration in myocardial contractile function (i.e. heart failure). The progression of LV dysfunction and heart failure in rats is similar to that observed in patients who sustain a large myocardial infarction, survive and subsequently develops heart failure (Goldman). The acute myocardial infarction (AMI) model in rats has been used to mimic human cardiovascular disease; specifically used to study cardiac signaling mechanisms associated with heart failure as well as to assess the contribution of therapeutic strategies for the treatment of heart failure. The method described in this report is the rat model of acute myocardial infarction (AMI). This model is also referred to as an acute ischemic cardiomyopathy or ischemia followed by reperfusion (IR); which is induced by an acute 30-minute period of ischemia by ligation of the left anterior descending artery (LAD) followed by reperfusion of the tissue by releasing the LAD ligation (Vasilyev and McConnell). This protocol will focus on assessment of the infarct size and the area-at-risk (AAR) by Evan's blue dye and triphenyl tetrazolium chloride (TTC) following 4-hours of reperfusion; additional comments toward the evaluation of cardiac function and remodeling by modifying the duration of reperfusion, is also presented. Overall, this AMI rat animal model is useful for studying the consequence of a myocardial infarction on cardiac pathophysiological and physiological function.

The rat model of acute myocardial infarction (AMI) is useful to study the consequence of a MI on cardiac pathophysiological and physiological function.

Sıçanlarda Akut Miyokard Enfarktüsü

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

Tıp

Induction of Myocardial Infarction in Adult Zebrafish Using Cryoinjury

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and teleost fish retain a remarkable capacity for cardiac regeneration with little or no scarring throughout life2,3. It is not known why only some non-mammalian vertebrates can recreate a complete organ from remnant tissues4,5. To understand the molecular and cellular differences between regenerative responses in different species, we need to use similar approaches for inducing acute injuries.
In mammals, the most frequently used model to study cardiac repair has been acute ischemia after a ligation of the coronary artery or tissue destruction after cryoinjury6,7. The cardiac regeneration in newts and zebrafish has been predominantly studied after a partial resection of the ventricular apex2,3. Recently, several groups have established the cryoinjury technique in adult zebrafish8-10. This method has a great potential because it allows a comparative discussion of the results obtained from the mammalian and non-mammalian species.
Here, we present a method to induce a reproducible disc-shaped infarct of the zebrafish ventricle by cryoinjury. This injury model is based on rapid freezing-thawing tissue, which results in massive cell death of about 20% of cardiomyocytes of the ventricular wall. First, a small incision was made through the chest with iridectomy scissors to access the heart. The ventricular wall was directly frozen by applying for 23-25 seconds a stainless steel cryoprobe precooled in liquid nitrogen. To stop the freezing of the heart, fish water at room temperature was dropped on the tip of the cryoprobe. The procedure is well tolerated by animals, with a survival rate of 95%.
To characterize the regenerative process, the hearts were collected and fixed at different days after cryoinjury. Subsequently, the specimen were embedded for cryosectioning. The slides with sections were processed for histological analysis, in situ hybridization and immunofluorescence. This undertaking enhances our understanding of the factors that are required for the regenerative plasticity in the zebrafish, and provide new insights into the machinery of cardiac regeneration. A conceptual and molecular understanding of heart regeneration in zebrafish will impact both developmental biology and regenerative medicine.

Zebrafish represents a valuable model to study the mechanisms of heart regeneration in vertebrates. Here, we present a protocol for induction of a heart infarct in adult zebrafish using cryoinjury. This method results in massive cell death within 20% of the ventricular wall, similar to that observed in mammalian infarcts.

Yetişkin Zebra balığı Myokard İnfarktüsü İndüksiyon Cryoinjury kullanma

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and ...

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ideal model for testing novel therapeutic strategies.
In vivo magnetic resonance imaging (MRI) gives excellent views of the heart noninvasively with clear anatomical detail, which can be used for accurate functional assessment. Contrast agents can provide basic measures of tissue viability but these are nonspecific. Positron emission tomography (PET) is a complementary technique that is highly specific for molecular imaging, but lacks the anatomical detail of MRI. Used together, these techniques offer a sensitive, specific and quantitative tool for the assessment of the heart in disease and recovery following treatment.
In this paper we explain how these methods are carried out in mouse models of acute myocardial infarction. The procedures described here were designed for the assessment of putative protective drug treatments. We used MRI to measure systolic function and infarct size with late gadolinium enhancement, and PET with fluorodeoxyglucose (FDG) to assess metabolic function in the infarcted region. The paper focuses on practical aspects such as slice planning, accurate gating, drug delivery, segmentation of images, and multimodal coregistration. The methods presented here achieve good repeatability and accuracy maintaining a high throughput.

We describe how to perform MRI and PET imaging of the mouse heart. The protocol is tailored to assess treatment efficacy in models of myocardial infarction and heart failure.

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last decades. For clarification of the underlying mechanisms and the development of new therapeutic strategies, the availability of valid animal models are mandatory. Since we need new insights into pathomechanisms of cardiovascular diseases under in vivo conditions to combat myocardial infarction, the validity of the animal model is a crucial aspect. However, protection of animals are highly relevant in this context. Therefore, we establish a minimally invasive and simple model of myocardial infarction in mice, which assures a high reproducibility and survival rate of animals. Thus, this models fulfils the requirements of the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction) for animal experiments and assure the scientific information needed for further developing of therapeutical strategies for cardiovascular diseases.

A highly reproducible model for myocardial infarction in mice with minimal invasive manipulations is described. The model can be easily performed, resulting in a high reproducibility and survival rate. Thus, the described model will reduce the number of required animals as requested by the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction).

Farelerde Miyokard İnfarktüsü Oluşturan Minimal İnvaziv Cerrahi Prosedür

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

Primary Outcome Assessment in a Pig Model of Acute Myocardial Infarction

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are therefore required to confine cardiac damage, promote survival and reduce the disease burden of heart failure. Large animal experiments are an essential part in the translational process from experimental to clinical therapies. To optimize clinical translation, robust and representative outcome measures are mandatory. The present manuscript aims to address this need by describing the assessment of three clinically relevant outcome modalities in a pig acute myocardial infarction (AMI) model: infarct size in relation to area at risk (IS/AAR) staining, 3-dimensional transesophageal echocardiography (TEE) and admittance-based pressure-volume (PV) loops. Infarct size is the main determinant driving the transition from AMI to heart failure and can be quantified by IS/AAR staining. Echocardiography is a reliable and robust tool in the assessment of global and regional cardiac function in clinical cardiology. Here, a method for three-dimensional transesophageal echocardiography (3D-TEE) in pigs is provided. Extensive insight into cardiac performance can be obtained by admittance-based pressure-volume (PV) loops, including intrinsic parameters of myocardial function that are pre- and afterload independent. Combined with a clinically feasible experimental study protocol, these outcome measures provide researchers with essential information to determine whether novel therapeutic strategies could yield promising targets for future testing in clinical studies.

Reliable and accurate outcome assessment is the key for translation of preclinical therapies into clinical treatment. The current paper describes how to assess three clinically relevant primary outcome parameters of cardiac performance and damage in a pig acute myocardial infarction model.

Akut Miyokard İnfarktüsü bir Domuz Modeli İlköğretim Sonuç Değerlendirmesi

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and regeneration, and to define new targets for therapeutics. For decades, models of complete heart regeneration existed in amphibians and fish, but a mammalian counterpart was not available. The recent discovery of a postnatal window during which mice possess regenerative capabilities has led to the establishment of a mammalian model of cardiac regeneration. A surgical model of mammalian cardiac regeneration in the neonatal mouse is presented herein. Briefly, postnatal day 1 (P1) mice are anesthetized by isoflurane and placed on an ice pad to induce hypothermia. After the chest is opened, and the left anterior descending coronary artery (LAD) is visualized, a suture is placed around the LAD to inflict myocardial ischemia in the left ventricle. The surgical procedure takes 10-15 min. Visualizing the coronary artery is crucial for accurate suture placement and reproducibility. Myocardial infarction and cardiac dysfunction are confirmed by triphenyl-tetrazolium chloride (TTC) staining and echocardiography, respectively. Complete regeneration 21 days post myocardial infarction is verified by histology. This protocol can be used to as a tool to elucidate mechanisms of mammalian cardiac regeneration after myocardial infarction.

This protocol describes a highly reproducible model of cardiac regeneration by surgical induction of myocardial infarction in the left ventricle of postnatal day 1 mice. The method involves induction of hypothermic anesthesia and ligation of the left anterior descending coronary artery.

Yenidoğan Farelerde Miyokard Enfarktüsü, Kalp Rejenerasyon Bir Model

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any potential therapeutic approach directed against acute left ventricular (LV) dysfunction. Current imaging modalities (e.g., echocardiography and magnetic resonance imaging) have several limitations since data on LV pressure cannot directly be measured. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion could serve as a novel method for a real-time evaluation of LV function.
At the beginning of the procedure, mice were anesthetized followed by endotracheal intubation. For LV catheterization, the right carotid artery was exposed via middle-neck incision. The catheter was introduced and placed into the LV cavity. Left thoracotomy was conducted and the left main coronary artery (LCA) was ligated. To induce reperfusion, the suture was released after 45 min. Pressure-volume data was recorded at all times.
Ligation of the LCA caused a decrease in LV systolic function as evidenced by a 30% reduction in stroke volume, LV ejection fraction (EF), and cardiac output. Maximum dP/dt as a parameter for LV contractility was also significantly reduced and diastolic function was severely impaired (minimum dP/dt -40%). Reperfusion over a period of 20 min did not lead to a complete recovery of LV function.
Real-time pressure-volume analysis served as a valid procedure for monitoring cardiac function during acute myocardial infarction in mice. Maintaining stable anesthesia and a standardized surgical approach was crucial to ensure valid results. As the early phase of acute myocardial infarction is critical for morbidity and mortality, the delineated method could be beneficial for preclinical evaluation of new strategies for cardioprotection.

Acute myocardial infarction in mice induces acute but incompletely characterized changes in left ventricular (LV) function. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion serves as a novel method for a real-time evaluation of LV function.

Akut miyokard infarktüsünde farelerde gerçek zamanlı basınç-hacim Analizi

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...

Digital PCR for Quantifying Circulating MicroRNAs in Acute Myocardial Infarction and Cardiovascular Disease

Circulating serum microRNAs (miRNAs) have shown promise as biomarkers for the cardiovascular disease and acute myocardial infarction (AMI), being released from the cardiovascular cells into the circulation. Circulating miRNAs are highly stable and can be quantified. The quantitative expression of specific miRNAs can be linked to the pathology, and some miRNAs show high tissue and disease specificity. Finding novel biomarkers for cardiovascular diseases is of importance for medical research. Quite recently, digital polymerase chain reaction (dPCR) has been invented. dPCR, combined with fluorescent hydrolysis probes, enables specific direct absolute quantification. dPCR exhibits superior technical qualities, including a low variability, high linearity, and high sensitivity compared to the quantitative polymerase chain reaction (qPCR). Thus, dPCR is a more accurate and reproducible method for directly quantifying miRNAs, particularly for the use in large multi-center cardiovascular clinical trials. In this publication, we describe how to effectively perform digital PCR in order to assess the absolute copy number in serum samples.

Circulating microRNAs have shown promise as biomarkers for cardiovascular diseases and acute myocardial infarctions. In this study, we describe a protocol for miRNA extraction, reverse transcription, and digital PCR for the absolute quantification of miRNAs in the serum of patients with cardiovascular disease.

Akut miyokard infarktüsü ve kardiyovasküler hastalık mikroRNA'lar dolaşan miktarının için dijital PCR

Circulating serum microRNAs (miRNAs) have shown promise as biomarkers for the cardiovascular disease and acute myocardial infarction (AMI), being released ...

A Cryoinjury Model to Study Myocardial Infarction in the Mouse

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we demonstrate a murine cryoinjury infarct model that generates precise infarct sizes with high reproducibility and replicability. In brief, after intubation and sternotomy of the animal, the heart is lifted from the thorax. The probe of a handheld liquid nitrogen delivery system is applied onto the myocardial wall to induce cryoinjury. Impaired ventricular function and electrical conduction can be monitored with echocardiography or optical mapping. Transmural myocardial remodeling of the infarcted area is characterized by collagen deposition and loss of cardiomyocytes. Compared to other models (e.g., LAD-ligation), this model utilizes a handheld liquid nitrogen delivery system to generate more uniform infarct sizes.

This article demonstrates a model to study cardiac remodeling after myocardial cryoinjury in mice.

Farede Miyokard Enfarktüsü Çalışması İçin Kriyoyaralanma Modeli

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we ...

Semi-Minimal Invasive Method to Induce Myocardial Infarction in Rats and the Assessment of Cardiac Function by an Isolated Working Heart System

Myocardial infarction (MI) remains the main contributor to morbidity and mortality worldwide. Therefore, research on this topic is mandatory. An easily and highly reproducible MI induction procedure is required to obtain further insight and better understanding of the underlying pathological changes. This procedure can also be used to evaluate the effects or potency of new and promising treatments (as drugs or interventions) in acute MI, subsequent remodeling and heart failure (HF). After intubation and pre-operative preparation of the animal, an anesthetic protocol with isoflurane was performed, and the surgical procedure was conducted&#160;quickly. Using a minimally invasive approach, the left anterior descending artery (LAD) was located and occluded by a ligature. The occlusion can be performed acutely for subsequent reperfusion (ischemia/reperfusion injury). Alternatively, the vessel can be ligated permanently to investigate the development of chronic MI, remodeling or HF. Despite common pitfalls, the drop-out rates are minimal. Various treatments such as remote ischemic conditioning can be examined for their cardioprotective potential pre-, peri- and post-operatively. The post-operative recovery was quick as the anesthesia was precisely controlled and the duration of the operation was short. Post-operative analgesia was administered for three days. The minimally invasive procedure reduces the risk of infection and inflammation. Furthermore, it facilitates rapid recovery. The &#8220;working heart&#8221; measurements were performed ex vivo and enabled precise control of preload, afterload and flow. This procedure requires specific equipment and training for adequate performance. This manuscript provides a detailed step-by-step introduction for conducting these measurements.

This article presents an efficient method to perform myocardial ischemia and subsequent chronic reperfusion in rats using a minimally invasive approach. In addition, left ventricular hemodynamic function of rats is assessed by echocardiography and isolated working heart methods.&#160;

Sıçanlarda Miyokard İnfarktüsü İndükleyen Yarı-Minimal İnvaziv Yöntem ve İzole Çalışan Kalp Sistemi Ile Kardiyak Fonksiyonun Değerlendirilmesi

Myocardial infarction (MI) remains the main contributor to morbidity and mortality worldwide. Therefore, research on this topic is mandatory. An easily ...