Долгосрочный мониторинг интенсивности потребления кислорода в высокодифференцированных и поляризованных культурах пигментного эпителия сетчатки

Дегенерация РПЭ, или пигментного эпителия сетчатки, лежит в основе многих причин потери зрения. Митохондриальная дисфункция лежит в основе этой дегенерации РПЭ во многих случаях. Мы можем измерить функцию митохондрий, глядя на скорость потребления кислорода, или OCR.

Здесь мы представляем новый метод измерения OCR в RPE. Благодаря работе в нескольких лабораториях, теперь хорошо известно, что РПЭ требуется митохондриальная активность для поддержания его здоровья и функции. Исследования в настоящее время больше сосредоточены на том, какие питательные вещества преимущественно использует RPE, и меняется ли это под воздействием стресса.

Предыдущие методы оценки OCR при РПЭ имеют ограничения. Либо СЗД выращивался в неидеальных условиях, либо его нельзя было оценить в течение длительных периодов времени. Таким образом, измерение OCR в культурах высокой точности, которые сохраняют функции in vivo, является одной из основных проблем.

Метод мониторинга OCR, представленный в этой рукописи, позволяет нам измерять OCR в течение недели, манипулируя RPE в условиях нескольких экспериментальных задач. Все это делается в то время, когда РПЭ находится в идеальных условиях культивирования, что позволяет ему имитировать идеальный РПЭ in vivo. Шифр является новым устройством для долгосрочного мониторинга потребления кислорода в клеточных культурах, таких как пигментный эпителий сетчатки.

В отличие от краткосрочных методов, таких как анализатор морских коньков, recipher поддерживает расширенный мониторинг в стандартных условиях, позволяя проводить подробное биоэнергетическое профилирование в течение нескольких недель, сохраняя при этом здоровье клеток.