Мы разрабатываем тесты на месте оказания медицинской помощи для выявления этих материалов инфекционных заболеваний. В этом тесте используется изотермическая амплификация нуклеиновых кислот и детектирование на основе CRISPR. Обладая высокой осмотической точностью, аналогичной ПЦР, они могут обнаруживать небольшие различия в последовательностях, включая однонуклеотидный полиморфизм, и могут быть множественными.
CRISPR, осмотические реакции содержат множество компонентов и этапов, и их трудно выполнить в месте оказания медицинской помощи. Поскольку осмотики основаны на CRISPR, они очень чувствительны, существует риск переноса загрязнения, что может привести к ложным результатам. К счастью, эту проблему можно смягчить, если мы упростим процедуры реакций.
Мы предлагаем простой в использовании метод выявления возбудителей наших болезней и генетических маркеров с помощью изотермической амплификации рекомбиназы и реагентов на основе CRISPR. Эти реагенты просты в хранении и использовании. Мы также предлагаем советы по устранению распространенных проблем при использовании этих методов и реагентов, чтобы облегчить людям их использование.
В протоколе здесь используются реагенты CRISPR, которые облегчают транспортировку и хранение. Сублимированные реагенты могут быть легко регидратированы в местах использования и сохраняют высокую эффективность амплификации и обнаружения. Мы надеемся применять диагностические технологии CRISPR для выявления эндемических и новых инфекционных заболеваний.
Если этот тест может быть регулярно и правильно выполнен в месте оказания медицинской помощи, это может помочь в выборе противовирусных препаратов и антибиотиков, потенциально спасти жизни, снизить чрезмерное использование лекарств и развитие резистентности.