Протокол здесь предназначен для построения сложной животной модели ишемии миокарда. Сочетается с атеросклерозом и острым воздействием ТЧ. Это более надежная животная модель для исследования связанных заболеваний.
Эта животная модель может лучше моделировать такие заболевания в реальной ситуации. Кроме того, этот метод имеет высокий уровень успеха и его легко выполнить. Модель может быть использована для патологического исследования и разработки лекарств при заболеваниях со сложными факторами.
Эта модель может обеспечить платформу для сердечно-сосудистых и экологических токсикологических исследований, а также вносит идеи и ссылки для исследований многофакторного заболевания. Оротрахеальная интубация, трещина в грудной клетке и правильное положение перевязки являются ключами к успеху этой модели. Важно поддерживать инструктаж мыши и предотвращать кровоизлияния.
Начните с выбора двух-трех мышей случайным образом и проверьте, есть ли бляшка в дуге аорты, с помощью ультразвуковой визуализации или прямого анатомического наблюдения. Обезболить выбранную мышь и поместить ее в лежачее положение на доске мыши. Прицепите верхние резцы к резинке.
Сфокусируйте небольшой светодиодный прожектор с гибкой трубой на трахее, которая находится вокруг средней точки подмышечной линии. Положите небольшой стерильный ватный тампон в рот мыши, а затем сверните тампон, чтобы высунуть язык. Держите язык и осторожно подтяните его вверх, чтобы сделать ротовую полость, глоток и трахею в том же продольном направлении.
Голосовую щель, которая является входом в трахею, можно рассматривать как яркое пятно, которое открывается и закрывается с каждым вдохом. Вставьте рапс 22 калибра в трахею мыши, целясь в голосовую щель, а затем вытащите сердцевину иглы. Используйте пипетку с небольшим количеством обычного физиологического раствора, чтобы проверить, правильно ли находится трубка в хрипах.
Если трубка находится в правильном положении, столб жидкости в пипетке будет подпрыгивать с каждым вдохом. Опустите 50 микролитров подвески DPM в трубку с помощью пипетки. Удалите внутреннюю иглу для домашних животных после воздействия ПМ.
Держите мышь на грелке, пока она не придет в сознание, а затем поместите мышь обратно в домашнюю клетку. Поместите мышь в положение лежа на спине на платформе интубации и зафиксируйте мышь. Удалите волосы левой грудной клетки и часть прилегающей правой груди кремом для удаления волос.
Затем свяжите иглу для домашних животных с вентилятором животного. Протрите кожу йодоформом и спиртом для дезинфекции. Сделайте обрез кожи примерно на один сантиметр офтальмологическими ножницами и подтяжите мышцы, чтобы обнажить ребра.
Зажмите ребро офтальмологическим пинцетом зубом и сделайте небольшой разрез в третьем межреберном пространстве. Сделайте рабочее окно с помощью самодельных инструментов для открывания грудной клетки, а затем разорвите перикардиальные мембраны. Удерживайте стерильный шестинулевой шелковый шов иглой с помощью микрососудистых гемостатических щипцов.
Пропустите шелк через ширину миокарда шириной два миллиметра в той области, где расположена коронарная артерия. Поместите короткий кусочек стерильного шелка с пятью нулями между лигатурой и тканями миокарда, чтобы предотвратить разрыв тканей. Завяжите левую переднюю нисходящую коронарную артерию и небольшой пучок миокарда вокруг нее плотно.
Легация считается успешной, когда передняя стенка левого желудочка бледнеет. Осторожно выдавите воздух из груди. Затем зашить межреберные мышцы и кожу последовательно стерильным пятинулевым шелком.
Очистите все пятна крови после операции, а затем поместите мышь на грелку в боковое лежачее положение. Постоянно контролируйте признаки мышей в течение примерно пяти-20 минут, пока они не восстановятся после анестезии. Как только корректирующий рефлекс будет восстановлен, переведите мышь в чистую клетку восстановления на грелке с бутылкой с едой и водой.
Продолжайте наблюдение в течение 15-30 минут, чтобы обеспечить выживание мыши. Наконец, вводят пенициллин натрия внутримышечно в соответствии с желаемой дозой для предотвращения раневой инфекции. Степень ишемии исследовали методом окрашивания TTC.
Нормальные ткани становятся красными, когда TTC реагирует с сукцинатдегидрогеназой. В то время как ишемизированные ткани остаются бледными из-за снижения активности дегидрогеназы. Репрезентативные изображения показывают ткани сердца, которые не перенесли операцию ИМ или воздействие ТЧ, перенесли операцию ИМ, но не подверглись воздействию ТЧ, а также перенесли операцию ИМ и воздействие ТЧ.
Воздействие ПМ усугубляет ишемию миокарда. Масло Red O может точно окрашивать нейтральные жиры, такие как триглицериды в тканях. Красные пятна на снимке указывают на бляшки.
Бляшки в аорте мышей дикого типа с регулярной диетой, нокаутирующих мышей APO E с диетой с высоким содержанием жиров и нокаутирующих мышей APO E с диетой с высоким содержанием жиров и страдающих от воздействия PM, показаны здесь окрашиванием маслом красного O. Высокое содержание жиров привело к атеросклерозу у нокаутирующих мышей APO E, а воздействие PM усугубило атеросклероз. Важно убедиться, что эндотрахеальная трубка правильно вставлена во время серомиотомии.
Оператор должен завершить операцию интубации быстро, точно и всегда обращать внимание на состояние дыхания животного во время операции. Наш метод помогает исследователям, которые обеспокоены пересечением загрязнения воздуха и сердечно-сосудистых заболеваний. Здесь мы приводим идею.
Конечно, исследователи также могут напрямую проводить исследования на основе животной модели, которую мы описали.
