O escopo da pesquisa é o reparo ósseo endocondral mandibular. Nosso objetivo é desenvolver uma técnica para fratura mandibular não estabilizada com perda óssea mínima e lesão de tecidos moles para melhor representar o processo de reparo ósseo endocondral. O processo de reparo ósseo é influenciado pelas forças exercidas sobre o calo ósseo e depende dos locais anatômicos.
Poucos autores relatam o estudo do reparo ósseo mandibular. A difusão do nosso protocolo facilitará o desenvolvimento de pesquisas neste campo específico. Nosso protocolo tem a vantagem de evitar perda óssea excessiva e danos aos tecidos moles no local da fratura óssea mandibular para melhor representar o reparo ósseo endocondral.
Para começar, coloque o camundongo anestesiado de costas em uma placa de aquecimento coberta por um campo estéril mantido a 37 graus Celsius durante todo o procedimento. Aplique lubrificante ocular em ambos os olhos para evitar o ressecamento causado pela anestesia geral. Coloque uma máscara no focinho para inalação contínua de isoflurano.
Em seguida, prenda as extremidades do mouse com fita adesiva. Depois de colocar luvas estéreis, desinfete a pele com vários toques de solução de iodopovidona a 10% e álcool. Para realizar a abordagem cutânea submandibular, utilizando microtesoura, fazer uma incisão na pele desde o ângulo mandibular até a junção do ramo horizontal da mandíbula.
Disseque os tecidos subcutâneos para expor o músculo masseter. Agora use um elevador periosteal para separar as inserções do músculo masseter da borda inferior da mandíbula. Eleve o músculo masseter em um plano subperiosteal ao longo do ramo mandibular com o elevador.
Usando o dispositivo de cirurgia óssea piezoelétrica com irrigação de soro fisiológico anterior ao ângulo mandibular na parte posterior da concavidade, crie uma pequena osteotomia na borda inferior da mandíbula. Localize a borda posterior da mandíbula e a incisura coronoide. Em seguida, complete a fratura usando uma pequena tesoura reta inserida ao longo do ramo mandibular para evitar abertura e lesão muscular adicional do músculo.
Coloque a tesoura perpendicular à borda inferior da mandíbula para permitir a orientação correta da fratura. Agora verifique a mobilidade total entre os dois segmentos ósseos durante a manipulação suave com fórceps para garantir a fratura completa. Feche a incisão na pele usando pontos separados.
Faça radiografias laterais cefálicas para verificar a direção da fratura. Prepare uma gaiola de rato sem ração e enriquecimento duro para evitar forças mastigatórias. Isole o camundongo operado em uma única gaiola durante a primeira semana até que a pele esteja completamente curada.
Administre buprenorfina por injeção subcutânea 4, 24, 48 e 72 horas após o procedimento. Alimente os camundongos com um gel de dieta macio desde o dia zero até o final do período de consolidação para evitar dor e deslocamento secundário da fratura. Pese os camundongos diariamente do dia zero ao quarto dia pós-fratura pela manhã antes da injeção de buprenorfina e depois três vezes por semana até o sacrifício do animal.
As imagens histológicas confirmam o desenvolvimento de um calo mole com um molde cartilaginoso 14 dias após a fratura em um camundongo selvagem.
