O trabalho foi realizado com o apoio financeiro do EPSRC sob Grant EP/K027956/2. Todos os dados subjacentes por trás deste artigo podem ser acessados do autor correspondente.

1. preparação de amostras para o domínio de imagem com medição de BH In Situ <ol><li>máquina dois em forma de U partes (partes A e B) do aço de interesse, como mostrado na Figura 1, por Descarga elétrica, usinagem (EDM). Observe a diferença entre as duas partes, ou seja, 1 mm mais grosso parte horizontal e a 1 mm chanfrar na parte A, é projetado para garantir um conhecido e precisava de espessura (1,5 mm neste trabalho), após a amostra (parte A) é montada e à terra (ver Figura 1 para as dimensões e procedimentos 2.1-2.4 para mais detalhes).</li>
</ol> 2. Preparação de amostras Metalográficas <ol><li>quente-compressão montar A parte, de preferência usando os compostos que produzem uma montagem transparente. 
	Atenção: Utilize a quantidade correta de compostos para evitar danificar a amostra durante a montagem de compressão. A espessura final da montagem deve ser maior que a altura da amostra de 5-10 mm. É importante notar que pode haver tensão residual causada pela montagem de compressão, que então pode levar a alguns efeitos sobre a estrutura de domínio.
	<ol><li>A parte do lugar, com as duas pernas para cima, no molde da compressão-montagem máquina.</li>
		<li>Adicionar cerca de 20 mL de metacrilato de metila, composto em pó no molde.</li>
		<li>Iniciar um ciclo de montagem com os seguintes parâmetros: aquecimento tempo - 4,5 min, resfriamento tempo - 4 min, pressão - 290 Bar e temperatura - 180 ° C.</li>
		<li>Tirar a montagem, quando o ciclo está terminado e verificar a espessura. Deve ser entre 20 a 25 mm.</li>
	</ol></li> <li>Moer o lado da amostra montada com os dois pés da amostra em forma de U enfrenta-lo usando o grão 320 SiC papel em uma máquina de moer até a base das pernas são revelados na superfície de. 
	Nota: Moagem automatizado é recomendado para garantir as duas superfícies planas do monte são paralelas após a moagem.</li>
	<li>Grind do outro lado do monte e mostra de seleção frequentemente até a parte plana da superfície da amostra em forma de U, moer até a superfície retangular é revelada.</li>
	<li>Medir o comprimento da amostra revelada usando uma pinça e continuar a moedura cuidadosamente e medir frequentemente. O comprimento de amostra revelou inicialmente aumentará com moagem (normalmente um pouco mais de 23 milímetros quando é revelada a forma retangular inicial). Pare de moagem, assim o comprimento atinge 25.05 ± 0,05 mm. Neste ponto, a amostra polida terá as mesmas dimensões que a parte do sensor (parte B na Figura 1) ou seja, 25 mm de comprimento e 1,5 mm de espessura. Este procedimento, juntamente com a chanfradura projetado da amostra (parte A Figura 1), dá a espessura da amostra conhecida e necessárias, dentro de uma tolerância de cerca de dezenas de micra, após a moagem.</li>
	<li>Polonês a amostra de acordo com os procedimentos de preparação de amostra metalográfica padrão para aços macios 14. 
	Cuidado: Não re-moer a amostra, pois isso irá alterar a espessura da amostra e, portanto, causar medição imprecisa de BH.</li>
	<li>Etch a amostra polida, usando um cotonete com reagente apropriado (por exemplo, 2% nital para puro ferro ou o aço de baixo carbono) para 1-5 s até a superfície lustrada vira fosco.</li>
	<li>Verificar a amostra sob um microscópio óptico. Uma gravura eficaz irá revelar a microestrutura da amostra claramente.</li>
	<li>Polonês a amostra novamente usando 1 µm diamante, agente de polimento, até a camada de superfície gravada é completamente removida. Verifique sob o microscópio, se não tem certeza.</li>
	<li>Repeat passo 2.6-2.8, 4 - 6 vezes. Isso remove qualquer camada de superfície endurecida trabalho.</li>
	<li>Terminar o polimento usando suspensão de alumina por 2 min. 
	Nota: O experimento pode ser pausado aqui.</li>
</ol> 3. Preparação da bobina de medição da densidade de fluxo (B) <ol><li>fazer o sensor utilizando a parte B, mostrado na Figura 1.
	<ol><li>Envoltório, uma camada de fita dupla face ao longo da base da forma U (ou seja, o lado mais comprido) da parte B.</li>
		<li>Usando fio de cobre esmaltado de diâmetro 0,20 mm, enrole uma única camada, 50 vire bobina enrolada em volta da parte B, deixando cerca de 100 mm de fio em cada extremidade da bobina, o lado mais comprido.</li>
		<li>Remover o esmalte da última 20 mm de cada extremidade do fio usando a lixa de grão 800.</li>
	</ol></li> <li>Verificar se há curto-circuitos elétricos entre a bobina e amostra.
	<ol><li>Pegar um multímetro e configurá-lo para testar a continuidade. Toque uma sonda a parte B e o outro à extremidade de um fio. 
		Nota: Não deve haver nenhuma continuidade entre a bobina e a amostra, se há continuidade entre a bobina e a amostra, o fio tem em curto com a amostra e a bobina deve ser removida e reaplicada.</li>
	</ol></li></ol> 4. Set Up the domínio Imaging Rig <ol><li>instalação/conserto as amostras na plataforma teste mostrado na Figura 2.
	<ol><li>Coloque a placa dianteira, mostrada na Figura 2 (a) sobre uma superfície plana e encaixe no furo na placa dianteira montada amostra.</li>
		<li>Aplicar quente do derretimento de uma pistola de cola em toda a circunferência da amostra montada para prendê-lo no lugar.</li>
		<li>Bobinas de inserir parte B através da excitação para o fundo do porta-amostras; a amostra deve sobressair da parte superior do porta-amostras por cerca de 1 mm.</li>
		<li>Consertar a placa traseira na parte de trás do porta-amostras e vagamente, aperte as porcas de fundo, assegurando que o sensor Hall está alinhado com a amostra por inspeção visual.</li>
		<li>Aplicar corrente excitante para a bobina de excitação, que forma um eletroímã, de fácil montagem e alinhamento.</li>
		<li>Alinhar parte superior da parte A, com a parte inferior da parte B, como ilustrado na Figura 2, com a ajuda da força magnética do eletroímã acima mencionado (força máxima em perfeito alinhamento), bem como por inspeção visual, se a amostra de montar é transparente. Acoplamento exato da parte A e parte B é importante para a precisão da medição de laço a BH. Consulte a discussão para uma explicação mais detalhada.</li>
		<li>Parafuso placa superior para porta-amostras.</li>
		<li>Aperte as porcas de fundo para aplicar pressão entre a parte A e parte B. É interessante notar que o aperto excessivo pode causar estresse dentro dos materiais e, portanto, induzida por estresse efeitos sobre a estrutura de domínio. O equipamento de teste agora deve ser semelhante a Figura 2b.</li>
	</ol></li> <li>Nível da amostra para uma focagem consistentemente bom do outro lado do campo de visão. Esta etapa é altamente recomendada se um objectivo lente 50 vezes ou superior é usado e deve ser feito antes de aplicar o ferro-fluido.
	<ol><li>Colocar um pedaço de argila de modelagem do tamanho de uma cereja numa lâmina de vidro limpa.</li>
		<li>o equipamento de teste em cima da argila de modelagem com a amostra aproximadamente centro alinhando-se com o equipamento de lugar.</li>
		<li>Colocar três folhas de papel de lente em cima da superfície de amostra para proteção.</li>
		<li>Nível center o equipamento de teste inteiro usando uma imprensa de nivelamento para microscopia com a amostra aproximadamente alinhado com a imprensa.</li>
	</ol></li></ol> 5. Imagem de domínio magnético <ol><li>diluição de ferro-fluido à base de óleo.
	<ol><li>Desenhar 1 mL de à base de óleo ferro-fluido com uma pipeta e adicioná-lo para um frasco de 5 mL.</li>
		<li>Adicionar 0,5 mL do solvente original (óleo de hidrocarboneto) para o ferro-fluido dentro do frasco.</li>
		<li>Agitar durante 10 s.</li>
	</ol &gt;</li> <li>aplicação de ferro-fluido na amostra.
	<ol><li>Desenhar uma gota (cerca de 0,25 mL) do ferro-fluido com uma pipeta e aplicar sobre a superfície da amostra.</li>
		<li>Colocar uma lâmina de microscópio limpa na amostra e deslize lentamente a lâmina de vidro fora da superfície de amostra para formar uma camada fina e uniforme. Um bom acabamento deve ser semi transparente com uma cor ambarina.</li>
	</ol></li> <li>Imagem de domínio estático <ol><li>observar o padrão de domínio sob um microscópio de luz, antes que o ferro-fluido desseca. Use a ampla iluminação e uma abertura pequena (ajustando o diafragma de abertura) para contraste ideal. 
		Atenção: Evite exposição do ferro-fluido à luz forte mais do que o necessário como este pode secar o ferro-fluido.</li>
		<li>Limpe ou lave com acetona para remover o ferro-fluido depois de imagem domínio.</li>
		<li>Limpe a superfície da amostra e secar a amostra após experiências.</li>
	</ol></li> <li>Imagem de domínio dinâmico <ol><li>anexar uma câmera de vídeo de alta velocidade para o microscópio.</li>
		<li>Aplicam-se a um campo magnético à amostra para mudar a DWs. O presente equipamento de teste pode ser usado para aplicar a um campo de kA/m até 4 em paralelo com a superfície da amostra. Um campo perpendicular pode ser aplicado usando uma bobina com seu eixo perpendicular à superfície.</li>
		<li>Fixar firmemente a amostra para o equipamento de teste. Aplica o derretimento quente ao redor da amostra usando uma pistola de cola, se necessário. A cola solidificada pode ser facilmente removida após os experimentos. 
		Nota: Etapas 5.1-5.2 também se aplicam aqui.</li>
	</ol></li></ol> 6. medições de BH In Situ e domínio Imaging <ol><li>conectar-se até o domínio in situ, sistema de imagem, como mostrado na Figura 3.
	<ol><li>Connect bobinas de excitação do sensor para a potência de saída do analisador BH. Usamos um in-house analisador de BH, desenvolvido pela Universidade de Manchester. Uma descrição detalhada pode ser encontrada em nosso anterior publicação 15.</li>
		<li>Conectar o sensor Hall com o canal de entrada H do analisador BH.</li>
		<li>Ligar as bobinas do sensor B para o canal de entrada B do analisador BH.</li>
		<li>Ligue as saídas de H e B do analisador BH para dois canais de entrada analógicas da caixa Midas DA BNC Breakout (referidos como DA caixa daqui em diante) respectivamente, garantindo que ambas as entradas são definidas como a fonte de terra (GS).</li>
		<li>Conectar o Sync In da câmera de alta velocidade para a sincronização do DA caixa.</li>
		<li>Conectar-se o gatilho da câmera de alta velocidade para o gatilho da caixa DA.</li>
	</ol></li> <li>Os parâmetros de teste do software de analisador de BH de entrada. A área exposta da amostra deve ser inscritas no m 2; Neste caso, 6 x 10 – 6 m 2.</li>
	<li>Definir os parâmetros de sincronização de dados conforme as instruções do software DA.
	<ol><li>Definir a sincronização taxa (2.000/s) para ser a taxa de quadros (500 quadros/s) da câmara de alta velocidade, multiplicada pelo número de pontos de dados por quadro (4 por quadro).</li>
		<li>Definir o comprimento do pre-disparador (em percentagem) para ser o mesmo que o da câmera.</li>
	</ol></li> <li>Definir a câmara de vídeo de alta velocidade pronto para gravação. Ou seja, a câmera vai começar à espera de ser disparada.</li>
	<li>Ligar o analisador de BH e aplicar uma corrente senoidal de excitação de 1 Hz para medir o loop principal, será exibida uma imagem do loop BH.</li>
	<li>Verificar que o loop de BH a medida é mais ou menos como esperado em termos de coerciva remanência, saturação magnética, etc. Se não for, o acoplamento mecânico entre a parte A e parte B deve ser inspecionado.</li>
	<li>Acionar a câmera ou através do envio de um disparador do sinal do analisador a BH ou clicando no botão disparador na interface do software DA.</li>
	<li>Parar gravação de dados e vídeo após pelo menos um BH laço ciclo no software DA.</li>
	<li>Desativar o analisador BH. 
	PRECAUÇÃO: Não mantenha o elétrico atual correndo através da amostra por um longo tempo especialmente se uma corrente contínua (DC) é usada, como a corrente vai aquecer a amostra e secar rapidamente o ferro-fluido.</li>
	<li>Limpar a amostra e atualização para análise futura.</li>
</ol>

<ol>
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Os autores não têm nada para divulgar.

A preparação da amostra metalográfica é fundamental para a qualidade do padrão de domínio pelo método amargo. O dano de subsuperfície herdado de moagem grossa inicial pode obscurecer a estrutura de domínio real. Estes efeitos artificiais geralmente resultam em contraste pobre da DWs e muitos recursos de menor domínio associados a tensão devido o danos e, por vezes, um padrão de tipo labirinto. Uma camada de superfície amorfa pode formar devido a sérios danos superficiais, que em seguida dará uma estrutura de domínio não representativos. Portanto, é importante tomar muito cuidado durante a moagem de amostras Metalográficas para domínio de imagens para minimizar os danos de subsuperfície em primeiro lugar. Procedimentos adicionais, tais como os ciclos etch-polimento recomendados nesse papel ou uma química muito polimento mecânico são muitas vezes necessários para remover o restante danificada a camada de superfície. É preciso tomar cuidado extra para preparação de amostras para a medição de BH in situ como moagem excessiva ou re-moagem vai mudar a espessura da amostra; conhecimento de espessura exata é necessário para determinar os valores corretos de B , como a densidade de fluxo na parte A é inferida pela medição da densidade do fluxo na parte B. Os valores de B emitidos pelo software são diretamente proporcionais à área transversal fornecida, então um erro de 10% na espessura conduzirá a um erro de aproximadamente 10% nos valores de B ; no entanto, o relacionamento é não-linear, por uma simples calibração após a medição não é possível. Amostras excessivamente terra ainda podem ser usadas para imagens de domínio, mas note-se que os loops de BH a medida não será quantitativamente representante da curva real de BH para a parte da amostra sendo inspeccionada. As medições de H ainda devem estar aproximadamente representante dos valores reais, enquanto os valores de B são menores devido a espessura reduzida e, portanto, a área de seção transversal da parte plana. No caso de overgrinding, pode-se tomar a amostra fora a montagem para medir a espessura após todas as imagens de domínio são concluídas e, então, escala os valores de B em situ medidos (para o sensor) por um fator igual à espessura final/projetado para aproxima os valores reais de B (para o exemplo), apenas como uma medida de remédio.
A atividade do ferro-fluido é particularmente importante para a imagem latente de domínio dinâmico. Se o grau de movimentos DW fica aquém expectativa um deve verificar o desempenho de ferro-fluido numa amostra familiar usando um DC aplicada a campo. Se o problema permanece, o ferro-fluido precisa substituir. Ferro-fluido fresco é mais ativo e instala-se durante o armazenamento. É aconselhável fazer uma pequena quantidade de ferro-fluido fresco por diluição com solvente original para cada experimento. Os dados sobre a atividade de ferro-fluido ou o tempo de resposta (para a mudança da estrutura da amostra em análise de domínio) não estão disponíveis, enquanto o último é acreditado para ser na faixa de microssegundos, de acordo com o fornecedor (Rene V, 2016). A frequência na qual o campo magnético é aplicado para a imagem latente de domínio dinâmico nesta investigação foi 1 Hz, que também é a frequência ideal para a medição de laço grande BH . O desempenho do ferro-fluido com maior frequência de magnetização ainda está para ser avaliado.
Enquanto o método amargo é conveniente e sensível a sua resolução é relativamente baixa (cerca de 1 µm) 11. Isto limita a aplicação do método para os padrões de domínio estático para aços que mostram DWs separadas por &#62; 2 µm. No entanto, ainda é de valor para a imagem latente de domínio dinâmico como o domínio de tamanho aumenta sob a ação dos campos aplicadas. O presente ensaio de máquina só pode ser aplicada a um campo em paralelo com a superfície da amostra para medições in-situ BH . Para estudar o efeito da textura cristalográfica ou os processos de movimentação de DW de aços orientada para o grão, é preciso considerar a orientação de textura ou grãos na fase de amostragem de amostra para assegurar-se de que uma orientação adequada da amostra é escolhida.
A importância da medição in situ BH laço é duplo. Primeiro, ele permite que a interpretação quantitativa dos processos de movimentação de DW em função do campo aplicado e propriedades magnéticas. Em segundo lugar, ajuda a estabelecer uma ligação fundamental entre comportamentos de laço de BH , propriedades magnéticas e as microestruturas dos aços e, finalmente, ajuda a interpretar os sinais do sensor EM para avaliação da microestrutura. É ainda um desafio e de grande importância para os processos de movimentação de DW e/ou a estrutura de domínio Hiperligação microestruturas complexas, particularmente grãos orientações cristalográficas. No futuro, elétron volta análise de difração dispersas (EBSD) das amostras será realizada e mapeado para os padrões de domínio estático e dinâmico. Os resultados ajudarão a interpretar os diferentes tipos de padrões de domínio observados em grãos diferentes e os processos de movimento de parede domínio diferente associados com as orientações do grão em relação as direções de campo aplicado.
Quando implementado corretamente, o loop de BH , produzido por este método deve ser próximo ao produzido usando uma amostra de anel de circuito magnético fechado, como partes A e B formam um circuito magnético fechado. No entanto, se ambas as partes não são cabidas perfeitamente juntos, será introduzido um espaço de ar no circuito magnético e os resultados serão distorcidos. Esta distorção se apresentará como BH laço de corte; um efeito bem conhecido, caracterizado por um aumento máximo H, uma diminuição da remanência magnética e o loop aparecendo mais 'diagonal'. É aconselhável para usar o sistema de medição de malha de BH para adquirir um loop de BH usando o A parte antes da montagem para comparar com os loops adquiridos durante o teste, assim o acoplamento magnético pode ser avaliado e repetibilidade otimizado.
Nós escolhemos as dimensões da parte A e parte B, considerando os seguintes fatores e requisitos. A razão para as diferenças da parte A e parte B é explicada no passo 2.1. O processo de montagem descrito na etapa 2, principalmente dita o comprimento horizontal (25 mm, ver Figura 1) das amostras utilizadas para esses testes. Uma grande área de superfície polida, determinada pelo comprimento horizontal e a profundidade (4mm, Figura 1) é benéfica para a microscopia óptica, bem como a preparação da amostra. A espessura da amostra deve ser o mínimo necessário para produzir uma amostra suficientemente rígida do material sob a inspeção; 1,5 mm neste caso. A praticidade e o custo de usinagem também devem ser considerados ao escolher a espessura. Quanto menor a transversal seção transversal da amostra, quanto maior a densidade de fluxo que pode ser gerada pela excitação bobinas para uma determinada corrente. Correntes mais elevadas levam a mais calor sendo gerado e o ferro-fluido rapidamente secando. Um grande número de espiras das bobinas de excitação é desejável. O comprimento das duas pernas (15mm, Figura 1) determina a altura da plataforma. O segundo deve ser menor do que o espaçamento máximo entre a fase de amostra e a lente objetiva do microscópio. A densidade de fluxo máxima e o campo aplicado melhor são decididas pelo usuário e são específicas do aplicativo. É evidente a partir da observação quando o loop de BH está perto de saturação (loop BH exibe uma pequena dB/dH), mas esta seção da curva estende-se desde muito baixos campos aplicados aos campos aplicados muito altos e pode exigir valores se aproximando kA/100m antes que o material poderia realmente ser dito para ser saturado magneticamente. De nossa experiência máxima aplicada campo de kA/m 2 (para o ferro puro ou aços macios, por exemplo, todos os aços estudados neste paper) - 10 kA/m (para duro aços, por exemplo, um aço martensítico) deve magnetizar a amostra para além do 'joelho' do mesmo grande loop de BH , durante a qual domínio mais significativo movimentos de parede são esperados para ocorrer.
Em resumo, o sistema actual para a imagem latente de domínio com medição de BH in-situ provou estar funcionando para ligar o movimento DW processa diretamente para o loop de BH de aços. Este método está previsto para se tornar uma ferramenta útil para o estudo fundamental das relações de propriedade microestrutura-magnética em aços, em conjunto com mais Caracterização microestrutural.

Uma variedade de sensores de eletromagnética (EM) foram desenvolvidos ou comercializados para a avaliação e monitoramento de microestrutura, propriedades mecânicas ou danos de fluência em aços ferríticos durante processamento industrial, tratamento térmico ou exposição de serviço1 ,2. Estes sensores operam em uma forma não-destrutiva e sem contato e baseiam-se no princípio de que mudanças microestrutural em aços ferríticos alteram suas propriedades elétricas e magnéticas. A fim de interpretar os sinais EM termos de microestruturas, é preciso vincular os sinais EM suas propriedades magnéticas causais e em seguida a microestrutura dos materiais. Relações entre os sinais do sensor EM diversos tais como indutância mútua para sensores de EM múltiplas frequências e as propriedades EM (por exemplo, a relativa permeabilidade e condutividade) estão bem estabelecidas na pesquisa de electromagnetics com analítico relacionamentos, tendo sido relatados por vários sensor típico geometrias3. No entanto, as relações entre a EM ou propriedades magnéticas (por exemplo, a permeabilidade inicial, coercividade) e microestruturas específicas ainda permanecem mais ou menos empírica, qualitativa ou, em muitos casos, indisponíveis, particularmente quando há mais de um tipo de características microestrutural de interesse que afetam o comportamento magnético4.
Materiais ferromagnéticos contêm domínios magnéticos, consistindo de alinhados momentos magnéticos, separados por paredes de domínio (DWs). Como um campo magnético é aplicado, domínios será re-alinhados através do movimento de DW, nucleação de domínio e crescimento, ou rotação de domínio. Mais detalhes sobre a teoria do domínio podem ser encontradas em outro lugar5. Microestrutural características tais como precipitados ou limites de grão podem interagir com esses processos e, consequentemente, afetam as propriedades magnéticas dos materiais ferromagnéticos4,6,7,8 . As diferentes características microestrutural em aços e suas propriedades magnéticas podem afetar as estruturas de domínio e o processo de movimentação de DW quando um campo magnético é aplicado. É preciso olhar para a estrutura de domínio magnético e a interação entre DWs e microestrutura características sob diferentes campos aplicados e frequências a fim de estabelecer uma ligação fundamental entre a microestrutura e propriedades magnéticas em aços.
Laços de histerese magnética ou loops de BH podem descrever as fundamentais propriedades magnéticas dos materiais tais como a coercividade, remanência, permeabilidade diferencial e incremental, entre outros. Análise de loop de BH tornou-se um útil técnica teste não-destrutivos (NDT) para avaliação da microestrutura e propriedades mecânicas dos aços ferríticos9,10. O loop de BH é uma trama da densidade do fluxo magnético no material sob inspeção (B) contra o campo magnético aplicado (H). Como um campo magnético é induzido na amostra por uma bobina de excitação fornecido com um tempo variando atual, B é medido utilizando uma segunda bobina circundando a amostra sob inspeção, enquanto H é medido utilizando um sensor de campo magnético (geralmente um Hall sensor) colocados perto da superfície da amostra. A medição mais precisa das características de um material BH pode ser feita usando um circuito magnético fechado, assim apresentado por uma amostra de anel, mas outros métodos, tais como o uso de um núcleo de excitação separada pode produzir resultados satisfatórios. É de dois grande significado científico e valor prático para ser capaz de realizar em situ observação do movimento DW processos durante as medições magnéticas e link diretamente estas à microestrutura e propriedades magnéticas. Entretanto, é muito difícil fazer a observação de domínio ou as medidas magnéticas sem afetar o outro.
Entre o domínio de várias técnicas de imagem, o método amarga, ou seja, usando finas partículas magnéticas para revelar DWs magnética, tem algumas vantagens óbvias, incluindo uma instalação rápida e de alta sensibilidade11. Devido ao uso de um médio, por exemplo, ferro-fluido, é preciso muita experiência e tempo para obter padrões de alta qualidade e resultados consistentes, usando métodos amargos. Preparação da amostra metalográfica padrão, intenção e otimizado para microscopia óptica (OM) e microscopia eletrônica de varredura (MEV), geralmente gera padrões amargos insatisfatórios para muitos aços porque o método amargo é menos tolerante ao residual subsuperficial danos e os efeitos associados artificiais do que OM e SEM. Existem possíveis efeitos artificiais devido à deficiente aplicação de ferro-fluido. Este documento detalha procedimentos de preparação de amostra adicionais, em comparação com a preparação e aplicação de ferro-fluido, normais metalográfica, observação de estruturas de domínio usando microscópios óticos e o método em situ magnético medição.
Muitos estudos sobre a observação de estruturas de domínio em cristais (por exemplo, Si-ferro12) ou grãos orientados Si aços elétricos têm sido relataram13. Com estes materiais, envolveram-se apenas um pequeno número de características microestrutural (ou seja, grão/cristal orientação e grão fronteiras) e as estruturas de domínio são relativamente grossas (com a largura de domínio sendo da ordem de 0,1 mm12). Neste trabalho, padrões de domínio em aços ferríticos policristalino, incluindo um aço de baixo teor de carbono simples (0,17 wt % C) foram observados e relatados. O aço de baixo carbono tem granulometria muito mais fina (aproximadamente 25 µm em média de diâmetro circular equivalente) e estrutura de domínio mais fina (com a largura do domínio da ordem de micrômetros) do que os aços elétricos e daí Mostrar interações complexas entre o várias características microestrutural e processos de movimentação de DW.
Este trabalho propõe um romance equipamento sob medido para a imagem latente de domínio dinâmico usando o método amargo com medições in-situ BH (histerese magnética). O método relatado tira proveito da conveniência e alta sensibilidade do método tradicional de amargo e permite a medição de BH em situ sem interromper ou interferir com os processos de movimento de parede de domínio. Isso facilita que estabelece uma ligação direta e quantitativa entre as domínio parede movimento característica microestrutural de processos de interações em aços ferríticos com seus loops de BH . Este método é antecipado para se tornar uma ferramenta útil para o estudo fundamental das relações de propriedade magnética-microestrutura de aços e para ajudar a interpretação de sinais do sensor eletromagnético para avaliação não-destrutiva de microestruturas de aço.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>EMG 911 ferro-fluid</td>
			<td>Ferrotec</td>
			<td>89U1000000</td>
			<td>Oil based Ferro-fluid for domain imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solvent for EMG 900 series ferro-fluid</td>
			<td>Ferrotec</td>
			<td>89Z5000000</td>
			<td>Original solvent for the EMG 900 series ferro-fluid for diluting the original ferro-fluid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AxioScope polarised light microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>430035-9270-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S-Mize High Speed Camera</td>
			<td>AOS Technologies AG</td>
			<td>160021-10</td>
			<td>High speed camera that can be connected to the microscope for recording videos</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Midas DA Software</td>
			<td>Xcitex, Inc</td>
			<td></td>
			<td>Synchronize the high-speed video with the BH data</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MiDas DA Module BNC Breakout Box</td>
			<td>Xcitex, Inc</td>
			<td>185124H-01L</td>
			<td>The hardware for data synchronizing the video and BH data</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TransOptic mounting compounds</td>
			<td>Buehler</td>
			<td>20-3400-08</td>
			<td>Transparent thermoplastic acrylic mounting material</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetaDi Supreme 9um diamond suspension</td>
			<td>Buehler</td>
			<td>406633128</td>
			<td>9 &#181;m diamond polishing suspension</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetaDi Supreme 3um diamond suspension</td>
			<td>Buehler</td>
			<td>406631128</td>
			<td>3 &#181;m diamond polishing suspension</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetaDi Supreme 1um diamond suspension</td>
			<td>Buehler</td>
			<td>406630032</td>
			<td>1 &#181;m diamond polishing suspension</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MasterPrep polishing suspension</td>
			<td>Buehler</td>
			<td>406377032</td>
			<td>Alumina polishing suspension</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UltraPad polishing cloth</td>
			<td>Buehler</td>
			<td>407122</td>
			<td>For 9 &#181;m diamond polishing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TriDent polishing cloth</td>
			<td>Buehler</td>
			<td>407522</td>
			<td>For 3 &#181;m diamond polishing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ChemoMet polishing cloth</td>
			<td>Buehler</td>
			<td>407922</td>
			<td>For 1 &#181;m diamond polishing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MicroCloth polishing cloth</td>
			<td>Buehler</td>
			<td>407222</td>
			<td>Final polishing using the alumina polishing suspension</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nital 2%</td>
			<td>VWR International</td>
			<td>DIUKNI4307A</td>
			<td>For etching</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BH analyzer</td>
			<td>University of Manchester</td>
			<td>Not applicable</td>
			<td>An in-house system for BH analysis</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

optimized setup and protocol for magnetic domain imaging with in situ hysteresis measurement

Este livro elabora os protocolos de preparação de amostra necessários para obter os padrões ideais de domínio usando o método amargo, focando as etapas extras em comparação com os procedimentos de preparação de amostra metalográfica padrão. O livro propõe um romance sob medida o equipamento para domínio dinâmico da imagem latente com BH in situ (histerese magnética) medições e elabora os protocolos para a preparação do sensor e o uso da plataforma garantir a medição exata de BH . Os protocolos para a imagem latente de domínio dinâmico estático e ordinário (sem medições in-situ BH ) também são apresentados. O método relatado tira proveito da conveniência e alta sensibilidade do método tradicional de amargo e permite uma medição in situ BH sem interromper ou interferir com os processos de movimento de parede de domínio. Isso facilita que estabelece uma ligação direta e quantitativa entre as domínio parede movimento característica microestrutural – processos de interações em aços ferríticos com seus loops de BH . Este método é antecipado para se tornar uma ferramenta útil para o estudo fundamental das relações de propriedade microestrutura – magnética em aços e para ajudar a interpretar os sinais do sensor eletromagnético para avaliação não-destrutiva de microestruturas de aço.

A Figura 4 mostra dois exemplos de padrões de domínio estático de alta qualidade sem qualquer campo magnético aplicado para um ferro puro da industrial-classe e um aço de baixo carbono, respectivamente. Um pode ver a DWs claramente em ambos os materiais e diferentes tipos de padrões, incluindo , por exemplo, pacotes de paralelo (ou 180 °) e 90 ° DWs, em grãos diferentes. Devido à boa qualidade do polimento, não há sinais de distorção aleatória dos padrões de domínio devido a subsuperfície danos causados por moagem; e os resultados mostram uma forte ligação com a microestrutura. Por exemplo, o espaçamento de 180° DW (normalmente cerca de 10 µm para ferro puro) e cerca de 5 µm para o aço de baixo teor de carbono aumenta com o tamanho de grão (cerca de 200 µm para ferro puro) e 25 µm para o aço de baixo carbono em diâmetro circular equivalente médio e o domínio de padrões de um Re, depende da orientação cristalográfica grão. Note-se que a espessura de DW, como observado em padrões amargos não reflete a espessura real de DW Bloch, que é estimada para ser aproximadamente 30 nm para ferro puro5. A elevada uniformidade da qualidade padrão indica que o aplicativo do ferro-fluido foi otimizado.
A Figura 5 ilustra alguns exemplos de resultados insatisfatórios devido à má preparação de superfície, Figura 5um e 5b, ou se um falhar para corrigir a amostra com segurança durante a imagem latente dinâmica ou para nivelar a amostra. Note que mesmo um movimento muito pequeno deslocamento é óbvio ao microscópio. O vídeo vai fora de foco, sob a ação do campo aplicado perpendicular à superfície de amostra, conforme ilustrado na Figura 5c; ou a amostra irá oscilar lateralmente na frequência do campo aplicado no caso de um campo de AC paralelo a ser aplicado.
A Figura 6 mostra uma série de imagens de domínio extraído o processo de movimentação de DW vídeo em pontos diferentes do loop em situ medidos BH . O vídeo mostra claramente uma forte ligação entre os processos de movimentação de DW e a posição sobre o loop de BH . Por exemplo, a transição de 180° DWs em 90° queridos em ocorrem região A perto do joelho do loop BH, ou seja, entre os pontos 1 e 50 durante a magnetização; e o processo se inverte entre pontos 225 e 250 durante desmagnetização, que indica os domínios de giro na direção do campo aplicado. É interessante que a maioria dos DWs 180° na série de imagens de fundo não mover significativamente. A razão para isto está clara. Uma possibilidade que pode ser que a direção do campo aplicado, que passa a ser aproximadamente perpendicular às direcções de domínio e, portanto, nenhum dos dois pode causar o 180° DWs para mover ou girar os domínios para alinhar com a direção do campo. No entanto, os segmentos marcados no bojo da região B para a esquerda e para a direita durante a magnetização e desmagnetização respectivamente na região C bojos apenas ligeiramente para a esquerda. Esses fenômenos parecem indicar que pode haver partículas subsuperficiais ou inclusões perturbar as direções de domínio local para ter o componente paralelo com o campo aplicado e mover-se, portanto, sob sua ação. Também é indicativo de que a magnetização não está totalmente saturada. É necessário uma análise mais aprofundada da direção de domínio e Caracterização microestrutural de orientação cristalográfica dos cereais e de quaisquer partículas de subsuperfície.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56376/56376fig1.jpg"> 
Figura 1: desenhos das partes sensor e espécime para imagens de domínio em situ (unidade: mm). <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56376/56376fig1large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56376/56376fig2.jpg"> 
Figura 2: Desenho do domínio em situ imagem do equipamento 4 montagem esquemática. (a) partes separadas antes de ser montado (b) terminou a montagem. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56376/56376fig2large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56376/56376fig3v3.jpg"> 
Figura 3: esquemática dos componentes e a conexão do sistema de imagem domínio em situ . <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56376/56376fig3v3large.jpg">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56376/56376fig4v2.jpg"> 
Figura 4: padrões de domínio estático para ferro puro e um 0,2 wt % de carbono aço. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56376/56376fig4v2large.jpg">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56376/56376fig5v2.jpg"> 
Figura 5: exemplos de padrões de domínio insatisfatório resultante da falha ao seguir os protocolos corretamente. (a) desordenada links falta de domínio padrão (mesma amostra de aço de baixo carbono, como na Figura 3) para microestrutura devido a preparação de superfície de amostra pobre; (b) obscuro padrão com contraste pobre devido a deficiente aplicação do ferro-fluido sobre uma amostra de como elenco extra aço de baixo carbono; (c) padrões de domínio indo fora de foco, sob a ação do campo perpendicular de uma amostra de ferro puro <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56376/56376fig5v2large.jpg">clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56376/56376fig6v2.jpg"> 
Figura 6: uma série de imagens de domínio extraídas o vídeo de processo de movimento de parede domínio em frames correspondente a uma série de pontos sobre o loop de BH em situ medidos com marcado regiões de interesse, mostrando a rotação de domínio e prováveis interações com características microestrutural de uma amostra de como elenco extra baixo carbono aço. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56376/56376fig6v2large.jpg">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>

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Optimized Setup and Protocol for Magnetic Domain Imaging with In Situ Hysteresis Measurement

Configuração otimizada e protocolo para a imagem latente magnética domínio em Situ histerese medicão

Este papel elabora a amostra e os procedimentos de preparação do sensor e os protocolos para usar o equipamento de teste particularmente para a imagem latente de domínio dinâmico com medições in-situ BH para atingir o ideal de domínio padrão qualidade e precisão BH medições.

This paper elaborates the sample preparation protocols required to obtain optimal domain patterns using the Bitter method, focusing on the extra steps ...

optimized-setup-protocol-for-magnetic-domain-imaging-with-situ

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Optimized Setup and Protocol for Magnetic Domain Imaging with In Situ Hysteresis Measurement

9.3K visualizações.  University of Warwick. Este papel elabora a amostra e os procedimentos de preparação do sensor e os protocolos para usar o equipamento de teste particularmente para a imagem latente de domínio dinâmico com medições in-situ BH para atingir o ideal de domínio padrão qualidade e precisão BH medições.

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High-resolution Fiber-optic Microendoscopy for in situ Cellular Imaging

Many biological and clinical studies require the longitudinal study and analysis of morphology and function with cellular level resolution. Traditionally, multiple experiments are run in parallel, with individual samples removed from the study at sequential time points for evaluation by light microscopy. Several intravital techniques have been developed, with confocal, multiphoton, and second harmonic microscopy all demonstrating their ability to be used for imaging in situ 1. With these systems, however, the required infrastructure is complex and expensive, involving scanning laser systems and complex light sources. Here we present a protocol for the design and assembly of a high-resolution microendoscope which can be built in a day using off-the-shelf components for under US$5,000. The platform offers flexibility in terms of image resolution, field-of-view, and operating wavelength, and we describe how these parameters can be easily modified to meet the specific needs of the end user.
We and others have explored the use of the high-resolution microendoscope (HRME) in in vitro cell culture 2-5, in excised 6 and living animal tissues 2,5, and in human tissues in vivo 2,7. Users have reported the use of several different fluorescent contrast agents, including proflavine 2-4, benzoporphyrin-derivative monoacid ring A (BPD-MA) 5, and fluoroscein 6,7, all of which have received full, or investigational approval from the FDA for use in human subjects. High-resolution microendoscopy, in the form described here, may appeal to a wide range of researchers working in the basic and clinical sciences. The technique offers an effective and economical approach which complements traditional benchtop microscopy, by enabling the user to perform high-resolution, longitudinal imaging in situ.

High-resolution Fiber-optic Microendoscopy for in situ Cellular Imaging

In many biological and clinical situations it is advantageous to study cellular processes as they evolve in their native microenvironment. Here we describe the assembly and use of a low-cost fiber-optic microscope which can provide real time imaging in cell culture, animal studies, and clinical patient studies.

De alta resolução de fibra óptica para Microendoscopy In situ Celular imagem

Many biological and clinical studies require the longitudinal study and analysis of morphology and function with cellular level resolution.  ...

Bioengenharia

Magnetic Tweezers for the Measurement of Twist and Torque

Single-molecule techniques make it possible to investigate the behavior of individual biological molecules in solution in real time. These techniques include so-called force spectroscopy approaches such as atomic force microscopy, optical tweezers, flow stretching, and magnetic tweezers. Amongst these approaches, magnetic tweezers have distinguished themselves by their ability to apply torque while maintaining a constant stretching force. Here, it is illustrated how such a &#8220;conventional&#8221; magnetic tweezers experimental configuration can, through a straightforward modification of its field configuration to minimize the magnitude of the transverse field, be adapted to measure the degree of twist in a biological molecule. The resulting configuration is termed the freely-orbiting magnetic tweezers. Additionally, it is shown how further modification of the field configuration can yield a transverse field with a magnitude intermediate between that of the &#8220;conventional&#8221; magnetic tweezers and the freely-orbiting magnetic tweezers, which makes it possible to directly measure the torque stored in a biological molecule. This configuration is termed the magnetic torque tweezers. The accompanying video explains in detail how the conversion of conventional magnetic tweezers into freely-orbiting magnetic tweezers and magnetic torque tweezers can be accomplished, and demonstrates the use of these techniques. These adaptations maintain all the strengths of conventional magnetic tweezers while greatly expanding the versatility of this powerful instrument.

Magnetic tweezers, a powerful single-molecule manipulation technique, can be adapted for the direct measurements of the twist (using a configuration called freely-orbiting magnetic tweezers) and torque (using a configuration termed magnetic torque tweezers) in biological macromolecules. Guidelines for performing such measurements are given, including applications to the study of DNA and associated nucleo-protein filaments.

Pinças magnéticas para a Medição do Twist and Torque

Single-molecule techniques make it possible to investigate the behavior of individual biological molecules in solution in real time. These techniques ...

Protocol for Biofilm Streamer Formation in a Microfluidic Device with Micro-pillars

Several bacterial species possess the ability to attach to surfaces and colonize them in the form of thin films called biofilms. Biofilms that grow in porous media are relevant to several industrial and environmental processes such as wastewater treatment and CO2 sequestration. We used Pseudomonas fluorescens, a Gram-negative aerobic bacterium, to investigate biofilm formation in a microfluidic device that mimics porous media. The microfluidic device consists of an array of micro-posts, which were fabricated using soft-lithography. Subsequently, biofilm formation in these devices with flow was investigated and we demonstrate the formation of filamentous biofilms known as streamers in our device. The detailed protocols for fabrication and assembly of microfluidic device are provided here along with the bacterial culture protocols. Detailed procedures for experimentation with the microfluidic device are also presented along with representative results.

Protocols for the study of biofilm formation in a microfluidic device that mimics porous media are discussed. The microfluidic device consists of an array of micro-pillars and biofilm formation by Pseudomonas fluorescens in this device is investigated.

Protocolo para a formação de biofilme Streamer em um dispositivo micro com micro-pilares

Several bacterial species possess the ability to attach to surfaces and colonize them in the form of thin films called biofilms. Biofilms that grow in ...

Rapid Scan Electron Paramagnetic Resonance Opens New Avenues for Imaging Physiologically Important Parameters In Vivo

We demonstrate a superior method of 2D spectral-spatial imaging of stable radical reporter molecules at 250 MHz using rapid-scan electron-paramagnetic-resonance (RS-EPR), which can provide quantitative information under in vivo conditions on oxygen concentration, pH, redox status and concentration of signaling molecules (i.e., OH&#8226;, NO&#8226;). The RS-EPR technique has a higher sensitivity, improved spatial resolution (1 mm), and shorter acquisition time in comparison to the standard continuous wave (CW) technique. A variety of phantom configurations have been tested, with spatial resolution varying from 1 to 6 mm, and spectral width of the reporter molecules ranging from 16 &#181;T (160 mG) to 5 mT (50 G). A cross-loop bimodal resonator decouples excitation and detection, reducing the noise, while the rapid scan effect allows more power to be input to the spin system before saturation, increasing the EPR signal. This leads to a substantially higher signal-to-noise ratio than in conventional CW EPR experiments.

Rapid Scan Electron Paramagnetic Resonance Opens New Avenues for Imaging Physiologically Important Parameters In Vivo

A new electron paramagnetic resonance (EPR) method, rapid scan EPR (RS-EPR), is demonstrated for 2D spectral spatial imaging which is superior to the traditional continuous wave (CW) technique and opens new venues for in vivo imaging. Results are demonstrated at 250 MHz, but the technique is applicable at any frequency.

Rápida digitalização ressonância paramagnética eletrônica abre novos caminhos para criação de imagens fisiologicamente parâmetros importantes<em&gt; In Vivo</em

We demonstrate a superior method of 2D spectral-spatial imaging of stable radical reporter molecules at 250 MHz using rapid-scan ...

Polyelectrolyte Complex for Heparin Binding Domain Osteogenic Growth Factor Delivery

During reconstructive bone surgeries, supraphysiological amounts of growth factors are empirically loaded onto scaffolds to promote successful bone fusion. Large doses of highly potent biological agents are required due to growth factor instability as a result of rapid enzymatic degradation as well as carrier inefficiencies in localizing sufficient amounts of growth factor at implant sites. Hence, strategies that prolong the stability of growth factors such as BMP-2/NELL-1, and control their release could actually lower their efficacious dose and thus reduce the need for larger doses during future bone regeneration surgeries. This in turn will reduce side effects and growth factor costs. Self-assembled PECs have been fabricated to provide better control of BMP-2/NELL-1 delivery via heparin binding and further potentiate growth factor bioactivity by enhancing in vivo stability. Here we illustrate the simplicity of PEC fabrication which aids in the delivery of a variety of growth factors during reconstructive bone surgeries.

Self-assembled polyelectrolyte complexes (PEC) fabricated from heparin and protamine were deposited on alginate beads to entrap and regulate the release of osteogenic growth factors. This delivery strategy enables a 20-fold reduction of BMP-2 dose in spinal fusion applications. This article illustrates the benefits and fabrication of PECs.

Complexo polielectrólito de ligação à heparina de entrega osteogénica Factor de Crescimento Domínio

During reconstructive bone surgeries, supraphysiological amounts of growth factors are empirically loaded onto scaffolds to promote successful bone ...

Magnetic Levitation Coupled with Portable Imaging and Analysis for Disease Diagnostics

Currently, many clinical diagnostic procedures are complex, costly, inefficient, and inaccessible to a large population in the world. The requirements for specialized equipment and trained personnel require that many diagnostic tests be performed at remote, centralized clinical laboratories. Magnetic levitation is a simple yet powerful technique and can be applied to levitate cells, which are suspended in a paramagnetic solution and placed in a magnetic field, at a position determined by equilibrium between a magnetic force and a buoyancy force. Here, we present a versatile platform technology designed for point-of-care diagnostics which uses magnetic levitation coupled to microscopic imaging and automated analysis to determine the density distribution of a patient's cells as a useful diagnostic indicator. We present two platforms operating on this principle: (i) a smartphone-compatible version of the technology, where the built-in smartphone camera is used to image cells in the magnetic field and a smartphone application processes the images and to measures the density distribution of the cells and (ii) a self-contained version where a camera board is used to capture images and an embedded processing unit with attached thin-film-transistor (TFT) screen measures and displays the results. Demonstrated applications include: (i) measuring the altered distribution of a cell population with a disease phenotype compared to a healthy phenotype, which is applied to sickle cell disease diagnosis, and (ii) separation of different cell types based on their characteristic densities, which is applied to separate white blood cells from red blood cells for white blood cell cytometry. These applications, as well as future extensions of the essential density-based measurements enabled by this portable, user-friendly platform technology, will significantly enhance disease diagnostic capabilities at the point of care.

We present a magnetic levitation technique coupled with automated imaging and analysis in both a smartphone-compatible device and a device with embedded imaging and processing. This is applied to measure the density distribution of cells with two demonstrated biomedical applications: sickle cell disease diagnosis and separating white and red blood cells.

Levitação magnética Juntamente com imagem Portátil e Análise para a doença Diagnostics

Currently, many clinical diagnostic procedures are complex, costly, inefficient, and inaccessible to a large population in the world. The requirements for ...

Protocol for MicroRNA Transfer into Adult Bone Marrow-derived Hematopoietic Stem Cells to Enable Cell Engineering Combined with Magnetic Targeting

While CD133+ hematopoietic stem cells (SCs) have been proven to provide high potential in the field of regenerative medicine, their low retention rates after injection into injured tissues as well as the observed massive cell death rates lead to very restricted therapeutic effects. To overcome these limitations, we sought to establish a non-viral based protocol for suitable cell engineering prior to their administration. The modification of human CD133+ expressing SCs using microRNA (miR) loaded magnetic polyplexes was addressed with respect to uptake efficiency and safety as well as the targeting potential of the cells. Relying on our protocol, we can achieve high miR uptake rates of 80&#8211;90% while the CD133+ stem cell properties remain unaffected. Moreover, these modified cells offer the option of magnetic targeting. We describe here a safe and highly efficient procedure for the modification of CD133+ SCs. We expect this approach to provide a standard technology for optimization of therapeutic stem cell effects and for monitoring of the administered cell product via magnetic resonance imaging (MRI).

This protocol illustrates a safe and efficient procedure to modify CD133+ hematopoietic stem cells. The presented non-viral, magnetic polyplex-based approach may provide a basis for the optimization of therapeutic stem cell effects as well as for monitoring the administered cell product via magnetic resonance imaging.

Protocolo para transferência de MicroRNA na medula óssea-derivado hematopoiéticas células-tronco adultas para habilitar celular engenharia combinada com alvo magnético

While CD133+ hematopoietic stem cells (SCs) have been proven to provide high potential in the field of regenerative medicine, their low retention rates ...

Measuring the Spin-Lattice Relaxation Magnetic Field Dependence of Hyperpolarized [1-13C]pyruvate

The fundamental limit to in vivo imaging applications of hyperpolarized 13C-enriched compounds is their finite spin-lattice relaxation times. Various factors affect the relaxation rates, such as buffer composition, solution pH, temperature, and magnetic field. In this last regard, the spin-lattice relaxation time can be measured at clinical field strengths, but at lower fields, where these compounds are dispensed from the polarizer and transported to the MRI, the relaxation is even faster and difficult to measure. To have a better understanding of the amount of magnetization lost during transport, we used fast field-cycling relaxometry, with magnetic resonance detection of 13C nuclei at ~0.75 T, to measure the nuclear magnetic resonance dispersion of the spin-lattice relaxation time of hyperpolarized [1-13C]pyruvate. Dissolution dynamic nuclear polarization was used to produce hyperpolarized samples of pyruvate at a concentration of 80 mmol/L and physiological pH (~7.8). These solutions were rapidly transferred to a fast field-cycling relaxometer so that relaxation of the sample magnetization could be measured as a function of time using a calibrated small flip angle (3&#176;-5&#176;). To map the T1 dispersion of the C-1 of pyruvate, we recorded data for different relaxation fields ranging between 0.237 mT and 0.705 T. With this information, we determined an empirical equation to estimate the spin-lattice relaxation of the hyperpolarized substrate within the mentioned range of magnetic fields. These results can be used to predict the amount of magnetization lost during transport and to improve experimental designs to minimize signal loss.

Measuring the Spin-Lattice Relaxation Magnetic Field Dependence of Hyperpolarized [1-13C]pyruvate

We present a protocol to measure the magnetic field dependence of the spin-lattice relaxation time of 13C-enriched compounds, hyperpolarized by means of dynamic nuclear polarization, using fast field-cycled relaxometry. Specifically, we have demonstrated this with [1-13C]pyruvate, but the protocol could be extended to other hyperpolarized substrates.

Medindo a dependência do campo magnético do abrandamento da girar-estrutura de Hyperpolarizado [1-13C] piruvato

The fundamental limit to in vivo imaging applications of hyperpolarized 13C-enriched compounds is their finite spin-lattice relaxation times. Various ...

Lipidico Injection Protocol for Serial Crystallography Measurements at the Australian Synchrotron

A facility for performing serial crystallography measurements has been developed at the Australian synchrotron. This facility incorporates a purpose built high viscous injector, Lipidico, as part of the macromolecular crystallography (MX2) beamline to measure large numbers of small crystals at room temperature. The goal of this technique is to enable crystals to be grown/transferred to&#160;glass syringes to be used directly in the injector for serial crystallography data collection. The advantages of this injector include the ability to respond rapidly&#160;to changes in the flow rate without interruption of the stream. Several limitations for this high viscosity injector (HVI) exist which include a restriction on the allowed sample viscosities to &#62;10 Pa.s. Stream stability can also potentially be an issue depending on the specific properties of the sample. A detailed protocol for how to set up samples and operate the injector for serial crystallography measurements at the Australian synchrotron is presented here. The method demonstrates preparation of the sample, including the transfer of lysozyme crystals into a high viscous media (silicone grease), and the operation of the injector for data collection at MX2.

The goal of this protocol is to demonstrate how to prepare serial crystallography samples for data collection on a high viscous injector, Lipidico, recently commissioned at the Australian synchrotron.

Protocolo de injeção de lipidico para medições de cristalografia serial no Síncrotron Australiano

A facility for performing serial crystallography measurements has been developed at the Australian synchrotron. This facility incorporates a purpose built ...

Electric and Magnetic Field Devices for Stimulation of Biological Tissues

Electric fields (EFs) and magnetic fields (MFs) have been widely used by tissue engineering to improve cell dynamics such as proliferation, migration, differentiation, morphology, and molecular synthesis. However, variables such stimuli strength and stimulation times need to be considered when stimulating either cells, tissues or scaffolds. Given that EFs and MFs vary according to cellular response, it remains unclear how to build devices that generate adequate biophysical stimuli to stimulate biological samples. In fact, there is a lack of evidence regarding the calculation and distribution when biophysical stimuli are applied. This protocol is focused on the design and manufacture of devices to generate EFs and MFs and implementation of a computational methodology to predict biophysical stimuli distribution inside and outside of biological samples. The EF device was composed of two parallel stainless-steel electrodes located at the top and bottom of biological cultures. Electrodes were connected to an oscillator to generate voltages (50, 100, 150 and 200 Vp-p) at 60 kHz. The MF device was composed of a coil, which was energized with a transformer to generate a current (1 A) and voltage (6 V) at 60 Hz. A polymethyl methacrylate support was built to locate the biological cultures in the middle of the coil. The computational simulation elucidated the homogeneous distribution of EFs and MFs inside and outside of biological tissues. This computational model is a promising tool that can modify parameters such as voltages, frequencies, tissue morphologies, well plate types, electrodes and coil size to estimate the EFs and MFs to achieve a cellular response.

This protocol describes the step-by-step process to build both electrical and magnetic stimulators used to stimulate biological tissues. The protocol includes a guideline to simulate computationally electric and magnetic fields and manufacture of stimulator devices.

Dispositivos de campo elétrico e magnético para estimulação de tecidos biológicos

Electric fields (EFs) and magnetic fields (MFs) have been widely used by tissue engineering to improve cell dynamics such as proliferation, migration, ...

Configuração otimizada e protocolo para a imagem latente magnética domínio em Situ histerese medicão

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