A fotoluminescência oferece uma ampla gama de aplicações devido à sua sensibilidade e seletividade inerentes. Esta técnica permite análises diretas e indiretas do analito. A análise quantitativa direta é possível quando o analito exibe um rendimento quântico favorável para fluorescência ou fosforescência. No entanto, uma análise indireta pode ser viável se o analito não for fluorescente ou fosforescente, ou se o rendimento quântico for desfavorável. Os métodos indiretos incluem reagir o analito com um reagente para formar um produto fluorescente ou medir a diminuição da fluorescência ao adicionar o analito a uma solução contendo uma molécula fluorescente.
Íons inorgânicos, com algumas exceções como UO_2^+, geralmente não são suficientemente fluorescentes para análise direta. Esses íons podem ser analisados com um ligante orgânico para formar um complexo metal-ligante fluorescente ou fosforescente. Compostos orgânicos contendo anéis aromáticos são tipicamente fluorescentes, enquanto heterociclos aromáticos tendem a ser fosforescentes. Se o analito orgânico não for naturalmente fluorescente ou fosforescente, às vezes ele pode ser incorporado em uma reação química para produzir um produto fluorescente ou fosforescente. Por exemplo, a enzima creatina fosfoquinase pode ser determinada catalisando a formação de creatina a partir da fosfocreatina, que então reage com a ninidrina para produzir um produto fluorescente de estrutura desconhecida.
Os métodos de fosforescência e fluorescência são complementares, pois compostos fortemente fluorescentes exibem fosforescência fraca e vice-versa. A fosforimetria tem sido usada para determinar uma variedade de espécies orgânicas e bioquímicas. No entanto, ela não é tão difundida quanto a fluorometria, possivelmente devido à necessidade de baixas temperaturas e à precisão geralmente mais pobre das medições de fosforescência. Nos últimos anos, um esforço considerável foi feito para desenvolver métodos fosforimétricos que podem ser praticados em temperatura ambiente. Isso inclui métodos em que o analito é ligado a um suporte sólido, como papel de filtro ou sílica gel, ou incorporado ao núcleo de micelas ou moléculas de ciclodextrina. Na maioria dos experimentos em temperatura ambiente, átomos pesados, como Tl(I), Pb(II), Ag(I) e íons haleto, são usados para promover o cruzamento entre sistemas.
Do Capítulo 12:
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