이 프로토콜은 출생 후 초기 연령에서 심장 기능 및 관상 동맥 흐름에서 유전 적 변형 또는 약리학 적 개입의 역할을 연구하는 데 사용할 수 있습니다. 이 기술의 가장 큰 장점은 다른 마우스 모델에서 좌심실 혈류 역학 및 관상 동맥 흐름 매개 변수에 대한 심장 병리학 및 종단 추적 연구의 조기 인식입니다. 신생아 마우스의 심 초음파 연구는 기술적으로 어렵습니다.
이 프로토콜은 신생아 마우스에서 심혈관 질환의 조기 발병을 연구하여 연구자가 적절한 치료 방법을 설계 할 수 있도록 설계되었습니다. 예열 된 플랫폼 전극 패드에 ECG 젤을 놓는 것으로 시작하십시오. 전극 패드 위에 알루미늄 호일 스트립을 놓아 전극 범위를 확장하고 테이프로 고정합니다.
그런 다음 ECG 젤을 알루미늄 스트립 위에 놓습니다. 알루미늄 호일 스트립 아래의 젤이 절차 중에 마르지 않도록하십시오. 그런 일이 발생하면 전도성을 유지하기 위해 젤을 더 첨가하십시오.
마취된 강아지를 이미징 플랫폼의 앙와위 자세에 놓고 잘라낸 장갑 손가락을 강아지의 코 주위에 고정합니다. 알루미늄 호일 패드 위에 발을 놓고 테이프로 고정하십시오. 전기 회로가 완전하고 ECG가 기록되고 있는지 확인하십시오.
두 개의 거즈 롤을 사용하여 초음파 젤을 제자리에 유지하십시오. 강아지의 상체 위에 예열 된 초음파 젤의 두꺼운 층을 놓습니다. 가열 램프를 사용하여 강아지의 정상 체온을 유지하십시오.
성인 마우스 심 초음파 프로토콜에 따라 B- 모드의 경우 40 메가 헤르츠, 도플러의 경우 32 메가 헤르츠의 선형 배열 변환기가 장착 된 심 초음파 기기를 사용하여 경 흉부 심 초음파를 수행합니다. 강아지의 오른쪽 어깨를 향한 인덱스 표시가 있는 홀더에 변환기를 놓습니다. 변환기가 젤과 접촉할 때까지 변환기를 내리고 B-모드에서 좌심실 유출로를 시각화합니다.
심 초음파 영상 획득 중에 에코 변환기를 배치 할 때 강아지의 흉강에 과도한 압력을 가하지 마십시오. 좌심실, 좌심실 유출로 및 좌심방의 흉골 장축 뷰를 캡처합니다. 대동맥 전단지에서 M-모드를 사용하여 N-수축기에서 좌심방 최대 직경을 측정합니다.
씨네 스토어 버튼을 눌러 데이터를 기록합니다. 변환기를 흉골 장축의 시계 방향으로 약 90도 회전시켜 흉골 단축 보기를 얻습니다. 좌심실의 흉골 단축 보기를 캡처하여 챔버 치수, 벽 두께, 대동맥 흐름 및 폐 흐름을 측정합니다.
프로브를 유두근 수준에 놓고 M-모드를 사용하여 수축기 및 이완기 동안 좌심실 내경과 벽 두께를 측정합니다. 씨네 스토어 버튼을 눌러 데이터를 기록합니다. 변환기를 심장 기저부로 이동하고 컬러 도플러를 사용하여 폐동맥을 시각화합니다.
맥파 도플러를 눌러 폐 피크 유속, 폐 흐름 프로파일, 폐 박출 시간 및 폐 가속 시간을 정량화합니다. 씨네 스토어 버튼을 눌러 데이터를 기록합니다. 변환기를 베이스쪽으로 더 이동하고 컬러 도플러를 사용하여 대동맥 흐름을 시각화합니다.
맥파 도플러를 사용하여 혈류를 시각화하고 대동맥 박출 시간을 측정하십시오. 씨네 스토어 버튼을 눌러 데이터를 기록합니다. 정점 4 챔버보기를 캡처하려면 플랫폼을 Trendelenburg 위치에 놓고 왼쪽으로 기울인 다음 프로브를 조정하여 4 개의 챔버를 시각화합니다.
컬러 도플러를 사용하여 혈류를 시각화하고 승모판 오리피스 중앙의 승모판 전단지 끝에있는 맥파 도플러를 사용하여 승모판 흐름을 기록합니다. 씨네 스토어 버튼을 눌러 데이터를 기록합니다. 4 챔버보기에서 승모판 고리의 중격 쪽에있는 조직 도플러를 사용하여 초기 이완기 충전 및 후기 이완기 충전의 최대 심근 이완 속도와 최대 수축기 심근 수축 속도를 측정하십시오.
씨네 스토어 버튼을 눌러 데이터를 기록합니다. 수정된 흉골 장축 보기를 캡처하여 왼쪽 전방 하행 관상동맥을 검사합니다. 변형 된 흉골 장축보기를 사용하여 변환기를 옆으로 움직입니다.
프로브를 이동하고 컬러 도플러를 사용하여 대동맥에서 생성되는 왼쪽 주 관상 동맥의 기원을 시각화합니다. 왼쪽 주 관상 동맥에서 생성되어 좌심실 전벽과 우심실 유출로 사이를 달리는 좌측 전방 하행 동맥을 확인하십시오. 이 위치에서 맥파 도플러를 눌러 왼쪽 전방 하행 관상 동맥 흐름을 측정합니다.
씨네 스토어 버튼을 눌러 데이터를 기록합니다. 이소 플루 란 농도를 2.5 %로 높이고 최대 흐름을 얻기 위해 5 분 동안 기다리십시오. 씨네 스토어 버튼을 눌러 데이터를 기록합니다.
흉골 장축 뷰에서 M-Mode는 좌심방 직경을 측정하는 데 사용되었습니다. 흉골 짧은 축도는 좌심실 챔버 치수 및 벽 두께, 폐 흐름 및 대동맥 흐름을 측정하는 데 사용되었습니다. 정점 4 챔버보기는 승모판을 가로 지르는 혈류 속도와 승모판 고리의 심근 이완 및 수축 속도를 검사하는 데 사용되었습니다.
수정 된 흉골 장축보기는 좌측 전방 하행 관상 동맥 흐름 매개 변수를 검사하는 데 사용되었습니다. 이소플루란 증가 후 피크 관상 동맥 유속, 평균 관상 동맥 유속 및 적분 속도/시간의 증가된 값은 신생아 마우스에서 충혈에 대한 예상 반응을 확인했습니다. 새끼의 크기가 작기 때문에 정상 체온을 유지하고 팔다리에 알루미늄 호일 스트립을 부착하여 전기 패드에 도달하고 ECG 회로를 만드는 것이 중요합니다.
