작품 "미래 위한 투자" LABEX SIGNALIFE 프로그램 (참조 ANR-11-LABX-0028-01) (국립 연구 기관, ANR) 프랑스 정부에 의해 지원 되었다 하 고 공화국을 교부 금에 의해 협회에서 D. W. 부 la Recherche 쉬르 르 암, Fondation 드 프랑스, 고 암 Inserm 계획입니다. D. B.와 A. V. 받은 장학 Fondation 부 라 검색 Médicale에서에서와 니스의 도시에서 각각. 필립스에 의해 제공 되는 echocardiograph와 변환기를 친절 하 게 했다. 우리가 그들의 숙련 된 기술 지원에 대 한 A. Borderie, S. Destree, M. Cutajar Bossert, A. Landouar, A. Martres, A. Biancardini, 및 S. M. 바그너 감사합니다.

여기에 설명 된 실험 관련 기관 및 프랑스 동물 복지 법률, 지침 및 정책에 따라 실시 했다. 그들은 프랑스 윤리 위원회에 의해 승인 되었습니다 (위원회 회의 Institutionnel d &#39; Ethique 부 l &#39; 동물 드 응용; 번호 후부 터/2012-106).
 1. 심장 초음파 <ol><li>꼬리 가볍게 잡고 적절 한 위치를 표준 실험실 균형을 사용 하 여 마우스의 몸 무게를 확인.</li>
	<li>50 mg/kg pentobarbital 25 , 26의 복 (i.p.) 주입에 의해 동물 anesthetize. 
	참고: 연구를 통해 동일한 프로토콜을 사용 하는 경우 마 취의 다른 종류를 사용할 수 있습니다. 장단점은 아래에 설명 될 것 이다.</li>
	<li>마우스 응답 하지 않는 때까지 그것의 자신의 감 금 소 및 대기에 다시, 그것은 보여줍니다 지속적인 호흡, 그리고 후방 발 반사는 결 석. 이 테스트 하려면 약간 발을 짜 내 고 다리는 여전히 리트랙트 여부 관찰.</li>
	<li>왼쪽 흉부와 상업 설치류 면도기를 사용 하 여 왼쪽된 겨드랑이 면도. 
	참고: 전용된 설치류 면도기를 사용 하 여 정밀한 마우스 머리의 완전 한 제거를 위한 echocardiographic 측정에 간섭을 유발 하지 않도록 허용 됩니다. 상업적인 머리 제거 크림 또는 솔루션 피해 야 한다로 그들은 일반적으로 향수, 그것은 일어나 야 후 동물을 방해 합니다. 열 손실을 증가, 과도 한 면도 하지 마십시오.</li>
	<li>따뜻한 패드 12 머리 얕은 왼쪽 양면 위치, 40-42 ° C로 설정 자 고 동물을 넣어 o &#39; 시계와 6 꼬리 o &#39; 시계. 테이프로 왼쪽된 팔, 왼쪽된 다리, 그리고 꼬리 수정.</li>
	<li>적용 사전 예 열 변환기의 머리 면도 가슴에 심장 초음파 젤.</li>
	<li>배치 변환기 parasternal-왼쪽, 젖꼭지 근육의 수준에 2 차원 (2D) parasternal 긴 축 보기를 목의 오른쪽으로 그것을 지시 합니다. Papilary 근육 수준에서 짧은 축 보기를 시계 방향으로 90 ° 변환기를 설정 합니다. 최소 깊이 설정과 확대/축소를 사용 하 여 이미지 품질 및 프레임 속도 최대화 하기 위해. 스윕 속도 최대로 설정.
	이러한 설정, 다른 확대/축소 및 깊이 옵션 설정 <ol><li>컴퓨터와 소프트웨어에 따라 사용할 수 있습니다. 2D 기반 M 모드 이미지를 기록 짧은 축에 27 볼. 그림 1A와 B 27을 참조 하십시오. 
		참고: 주의 가슴에 과도 한 압력을 적용 하지 않도록이 bradycardia을 발생할 수 있습니다.</li>
	</ol></li> <li>각 동물에 대 한 3 마음 이길 시 네 루프의 기록 이상 3 시리즈. 
	참고:이 연구에 사용 된 echocardiograph 소프트웨어에 대 한 누르십시오는 &#34; 취득/저장 &#34; 버튼을 한 번만. 이 방법론은이 특정 소프트웨어와 함께 echocardiograph에 적용 됩니다. 다른 컴퓨터와 다른 소프트웨어 패키지를 사용할 수 있습니다.</li>
	<li>성공적인 기록, 닦아는 심장 초음파 젤 마우스 흉부, 생리대, 및 변환기에서 후. 사지 및 꼬리에서 테이프를 제거.</li>
	<li>관찰 하 난방 패드, 손실을 방지 하기 위해 불필요 한 빛 노출 및 열, 최대 절전 모드 해제 될 때까지 조직으로 덮여에 마우스를 두고</li>
	<li>동물의 장에 다시.</li>
	<li>분석 parasternal 짧은 축 보기 왼쪽된 심 실 (LV) 치수 및 기능 결정에서 M 모드 이미지 기록. Systole와 심장 (LVAWs 및 LVAWd), LV 내부 끝 심장 수축 및 끝 확장기 직경 (LVIDs 및 LVIDd), 및 systole와 심장 (LVPWs 및 LVPWd)를 사용 하 여 LV 후부 벽 두께 (LVPW)에서 LV 앞쪽 벽의 두께 측정 합니다 저장 된 이미지에 조직 혈액 인터페이스의 식별.</li>
	<li>명백한 최대한 LV 확장기 차원 시 확장기 치수를 측정 하 고 끝 심장 수축 차원 LV 후부 벽의 가장 앞쪽 수축 여행 시 LV. 터치 스크린에 꼭지는 &#34; 분석 &#34; 아이콘 다음에 &#34; LVAWd &#34; 아이콘. 오른쪽 심 실 구멍 및 심장에 LV 앞쪽 벽 사이의 인터페이스에 전자 캘리퍼스 위치.</li>
	<li>전자 캘리퍼스 LV 앞쪽 벽와 LV 확장기 앞쪽 벽 두께를 LV 구멍 사이의 인터페이스에 위치, 소프트웨어 직접 LV 내부 끝 확장기 측정으로 전환 됩니다.</li>
	<li>LV 구멍 및 LV 직경 내부 끝 확장기를 LV 후부 벽 사이의 인터페이스에는 캘리퍼스를 위치, 소프트웨어 LV 후부 벽 두께 측정으로 전환 됩니다.</li>
	<li>LV 후부 벽과 LV 확장기 후부 벽 두께를 심장 막 간의 인터페이스에는 캘리퍼스를 배치 합니다. LV 수축 차원에 대 한 스크린에 터치에는 &#34; LVAWs &#34; 아이콘 및 위치 오른쪽 심 실 구멍 및 LV 앞쪽 벽 사이의 인터페이스에 전자 캘리퍼스 systole.</li>
	<li>LV 앞쪽 벽와 LV 수축 앞쪽 벽 두께를 LV 구멍 사이의 인터페이스에 전자 캘리퍼스를 배치 합니다. LV 내부 끝 수축 기 직경 및 LV 수축 후부 벽 두께 대 한 위에서 설명한 대로 프로세스를 반복 합니다. 심장 초음파 검사의 미국 사회에 의해 채택-첨단 규칙을 사용 하 여 추적 endocardial epicardial 테두리 13 , 27. 
	참고: LV 수축 함수 매개 변수 자동으로 계산 됩니다 이전 측정을 사용 하 여. 분수 (FS) 단축 LV FS (%)로 정의 됩니다 [(LVIDd-LVIDs)/LVIDd =] x 100. LV 방출 분수 (EF) 수정된 Teicholz 수식으로 계산 됩니다 어디 EF (%) = [(LVIDd3-LVIDs3)/LVIDd 3] x 100 12. 그림 1A와 B를 참조 하십시오.</li>
	<li>USB 메모리 스틱 또는 콤팩트 디스크에 데이터를 저장 하 고 백업 복사본.</li>
	<li>가져오기, 분석, 그리고 적절 한 소프트웨어를 사용 하 여 데이터를 내보냅니다. 
	참고: 이러한 기준선 측정 후 실험 수 일시 정지 됩니다. 녹아웃 동물 및 야생-타입 littermates 사이 직접적인 비교를 수행 하는 경우 진행 조직학 분석 6. Cre-ERT2;에 대 한 lox/lox 마우스 라인 설명된 5 , 24로 i.p. 주입 tamoxifen 유도 함께 다음 날 계속. Echocardiographic 측정 후 직접 수술을 수행할 수 왼쪽된 관상 동맥 5 , 28의 결 찰 하 여 실험적인 심근 경색을 유도 하는 경우 때 쥐 마 취를 받고 있다입니다. 그렇지 않으면, 1 주일 사이 마 취의 두 라운드의 최소 지연 수술 치의 속도 제한에 유지 되어야 합니다.</li>
</ol> 2. 조직학 평가 위한 심장 샘플의 준비 <ol><li>경부 전위에 의해 동물 희생. 그들의 몸 무게를 측정 합니다. 가슴 및 복 부를 70% 알코올 면봉을 사용 하 여 소독.</li>
	<li>게 가로 절 개 피부 1cm에에서 원심 흉 골. 무딘 집게를 사용 하 여, 가슴, 머리의 방향으로 이동에서 피부를 제거 합니다. 좋은 집게와 흉 골을 가볍게 잡고 하 고 좋은 위의 무뚝뚝한 끝을 삽입 하 여 횡 경 막 엽니다.</li>
	<li>흉 골에 평행 하 게 양쪽에 흉 곽을 잘라. 흉 골의 머리 방향으로 이동 합니다. 가슴에서 마음을 찾습니다. 좋은 집게와 심장의 혈관 트렁크를 누른 좋은 위를 사용 하 여 아래 컷.</li>
	<li>가슴을 열고 삭제할 흉부에서 전체 심장, 심장 무게를 측정 고 설정 마음-몸 무게 비율 4 , , 5 6 , 23 , 29 , 30 .</li>
	<li>수정 2 ml 15 mL 튜브에 10% 중립 버퍼링 된 포 르 말린 솔루션의 심장 4에서 하룻밤 ° C. 
	주의: 위험! 화학 증기 두건;에 말린 솔루션 작업을 수행 해야 합니다. 착용 장갑 및 안전 안경. 
	참고: 말린 솔루션에 대 한 버퍼 구성 다른 공급 업체에 따라 다릅니다, 연구를 통해 동일한 공급 업체 사용.</li>
	<li>다음 날, 마음, 중간에서 가로 평면에서 잘라내어 파라핀 포함, 카세트에 그들을 전송는 자동된 삽입 장치를 사용 하 여 병 리 실험실에서 수행 됩니다.</li>
	<li>단면 수행.
	<ol><li>섹션 파라핀 톰와 40 ° C 물에 포함 된 증류수 목욕 float를 사용 하 여 3 µ m의 두께에서 차단.</li>
		<li>이전 슬라이드에 섹션. 37 ° C 배양 기에서 건조 하룻밤 슬라이드를 허용 하 고 사용을 위해 준비 될 때까지 4 ° C에서 저장. 
		참고: 프로토콜 일시 중지할 수 있습니다 여기 사용자 얼룩 (3 단계)에 대 한 준비가 될 때까지.</li>
	</ol></li> <li>Deparaffinize 및 리하이드레이션 조직 슬라이드.
	<ol><li>얼룩이 지는 파라핀을 녹여 10 분 55 ° C 오븐에 유리 삽입과 함께 항아리에 슬라이드를 놓습니다.</li>
		<li>Deparaffinize 크 실 렌 또는 크 실 렌 대신 5 분의 200 mL의 두 변경에서 슬라이드. 
		주의: 매우 가연성 및 독성! 화학 증기 두건;에서 일 착용 장갑 및 안전 안경.</li>
		<li>는 100% 알코올 200ml에 슬라이드를 전송합니다. 3 분 동안 두 변경 하 고 3 분에 대 한 95% 알콜 200 mL를 통해 한 번 전송 
		주의: 가연성! 멀리 점화;의 소스 금연.</li>
		<li>린스 200 mL의 인산 염 버퍼 염 (PBS) 5 분에 두 번 3, 4, 또는 5 단계를 계속 하 고.</li>
	</ol></li></ol> 3. 되며 고 오신 얼룩 <ol><li>증류수에 그들의 단면도 가진 슬라이드 린스.</li>
	<li>8 분에 대 한 되며 솔루션 핵 얼룩</li>
	<li>실행 하는 10 분에 대 한 수돗물에 씻어</li>
	<li>2 분에 오신 솔루션 얼룩</li>
	<li>Dehydrate 100% 에탄올 (EtOH)에 2 분 동안 세 번. 크 실 렌 또는 크 실 렌 대신에 2 분 동안 세 번을 선택을 취소 합니다. 크 실 렌 기반 설치 매체에 마운트.</li>
	<li>는 슬라이드 사진 하 고 interventricular 심장의 경도 섹션에서 핵의 수준에서 cardiomyocyte 직경을 측정 한다. 심장 당 세 섹션 및 섹션 당 적어도 100 셀 측정.</li>
</ol> 4. WGA 얼룩 <ol><li>tetramethylrhodamine (또는 다른 형광 성 염료) 2.7 단계에서 가져온 슬라이드를 품 어-습 한 챔버에 실 온에서 60 분에 대 한 WGA (PBS에 1: 100)를 활용.</li>
	<li>PBS를 가진 5 분 세 번 세척.</li>
	<li>마운트 형광 DAPI 포함 된 미디어를 탑재와 함께입니다. 분석 하기 전에 어둠 속에서 4 ° C에서 저장소. 
	주의: 눈 보호와 호환 화학 내성 장갑 착용.</li>
	<li>슬라이드 사진.
	<ol><li>사용 현미경 epi 조명 형광 및 필터 DAPI와 tetramethylrhodamine (테이블의 자료를 참조)를 설정 합니다. 최대 밝기를 자동 노출 조리개 설정.</li>
		<li>취득 파란색과 빨간색 채널에 대 한 400 x 배율에서 이미지를 구분합니다. ImageJ에서 이미지를 엽니다. 밝기를 조정 하 고 필요한 경우를 대비 (이미지 &#62; 조정 &#62; 밝기/대비).</li>
		<li>8 비트 각 이미지 설정 (이미지 &#62; 유형 &#62; 8-비트). DAPI WGA 이미지 오버레이. DAPI를 빨강 채널 파랑 채널을 사용 하 여 WGA;에 대 한 없음으로 녹색과 회색 채널 설정 (이미지 &#62; 색상 &#62; 채널 병합) 31.</li>
	</ol></li> <li>Cardiomyocyte 직경 interventricular 심장의 횡 근 섹션에서 핵의 수준에서 결정.
	<ol><li>정의 ImageJ에 이미지의 규모. 이 목적을 위해 (예를 들어, 심장 섹션으로 같은 확대 hemocytometer 챔버; 단계 4.4) 알려진된 크기의 사진.</li>
		<li>처음부터 끝까지 선을 그리는 직선 도구를 사용 하 여 알려진 구조 (분석 &#62; 규모 설정). 
		참고: 픽셀에서 거리 표시 됩니다 자동으로; 알려진된 거리와 길이 단위 입력 해야 합니다. 핵의 수준에서 cardiomyocyte 측정 진행.</li>
		<li>WGA-긍정적인 세포 막의 반대 사이트에 DAPI 긍정적인 핵 통해 WGA 긍정적인 막에서 직선을 그릴 (분석 &#62; 측정). 결과 창에서 길이 값 소수 자릿수의 의미 있는 수 있는지 확인 (분석 &#62; 측정을 설정 &#62; 소수 자릿수).</li>
		<li>심장 당 세 섹션 및 섹션 당 적어도 100 셀을 측정합니다. 결과 Excel로 내보내기 (결과 클릭 &#62; 파일 &#62;로 저장 &#62;.csv) 6 , 31.</li>
	</ol></li></ol> 5. Pecam-1 Immunostaining <ol><li>항 unmasking 수행.
	<li>나트륨 시트르산의 추가 1, 600 mL <ol>버퍼 (10 m m 나트륨 구 연산 염, 0.05% 트윈 20, pH 6.0) 압력 밥 솥입니다. 열판에 압력 밥 솥을 놓고 전체 전력에 그것을 설정 합니다. 이 시점에서; 압력 밥 솥의 뚜껑을 확보 하지 마십시오 단순히 위에 휴식. 
		주의: 핫!</li>
		<li>나트륨 구 연산 염 버퍼 끓는 일단 단계 2.5에서에서 압력 밥 솥 슬라이드를 전송. 압력 밥 솥 뚜껑을 보호 합니다. 밥 솥 전체 압력에는, 7 분을 기다립니다. 7 분 경과 열판을 해제 하 고 빈 싱크대에 압력 밥 솥을 배치. 압력 방출 벨 브를 활성화 하 고 밥 솥을 통해 냉 수를 실행. 그것은 드 가압, 일단 뚜껑 열고 냉 수 5 분 장소에 대 한 솥에 슬라이드에서에서 실행 200 mL PBS의. 
		참고: 또는, 마이크로웨이브 항 unmasking 사용할 수, 과열 위험 증가.</li>
	</ol></li> <li>사용 0.3%의 5 분에 대 한 블록 내 인 성 과산화 효소 활동에 메탄올에 과산화 수소 3 시간 2 분에 대 한 PBS의 각에서 200 mL에 대 한 슬라이드를 린스. 
	주의: 가연성 및 독성!</li>
	<li>희석된 정상적인 차단 혈 청 (PBS에 5% 정상 염소 혈 청) 또한 avidin 블록 (4 방울 1 ml에서)을 포함 하는 15 분에 대 한 슬라이드를 품 어.</li>
	<li>신중 하 게 섹션에서 액체 누르고 토끼에서 Pecam-1 항 체, mL 당 biotin 블록의 2.5% 정상 염소 혈 청 및 4를 포함 하는 PBS에 희석된 1시 50분으로 그들을 품 어. 4 습 한 챔버에 하룻밤 슬라이드를 품 어 ° c.</li>
	<li>는 PBS의 200 mL에 5 분에 대 한 세 번 슬라이드를 씻어. Biotinylated 염소-토끼 IgG 항 체 희석 1: 200 실 온에서 1 h 2.5% 정상 염소 혈 청을 포함 하는 PBS에로 섹션을 품 어. PBS의 200 mL에 5 분에 대 한 세 번 슬라이드를 씻어.</li>
	<li>품 어 t그는 20 분 (시 약 A와 결합 된 30 분 이전 해야 시 B 사용)에 대 한 과산화 효소 avidin/biotin 기반 시스템 섹션입니다. PBS의 200 mL에 5 분에 대 한 세 번 슬라이드를 씻어.</li>
	<li>분해 1 3, 3 &#39;-diaminobenzidine (한 덩어리)와 과산화 수소 1 요소 두 번 증 류 물 5 mL에 태블릿. 약 3 분, 컬러 개발을 신중 하 게 모니터링 DAB 솔루션 섹션을 품 어. 부드럽게 200 ml PBS의 슬라이드를 세척 하 여 발 색 반응을 중지. 
	주의: 발암 성; 화학 방지 장갑 착용!</li>
	<li>는 Hematoxylin와 6 분에 대 한 핵 counterstain. 100% 알코올 200ml에 2 분을 위한 3 시간 2 분 Dehydrate의 수돗물을 실행에 린스. 크 실 렌 또는 크 실 렌 대신에 각 200ml 3 시간 2 분 대 한 선택을 취소 합니다. 크 실 렌 기반 설치 매체에 마운트.</li>
	<li>(적어도 10 필드 각 심장의 interventricular 심장에서 40 x 확대) 슬라이드 사진 하 고 자유롭게 사용할 수 ImageJ 소프트웨어 31를 사용 하 여 Pecam-1 영역 밀도 측정 한다. DAB 및 되며 색상 deconvolution 32 플러그인을 사용 하 고 같은 수준으로 이미지 대비를 조정. 
	참고: 갈색과 보라색/파란색 색상 색상 deconvolution 어려움이 발생할 수 있습니다, 중요 한 스펙트럼 중복 경우에 하나를 명확 하 고, 밝은 파란색 핵 얼룩 되며 솔루션의 다른 브랜드를 시도할 수 있습니다. 면역 형광 검사 또는 모 세관의 수동 계산을 수행할 수 또는.</li>
</ol>

<ol>
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A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendations+for+quantification+of+Doppler+echocardiography:+a+report+from+the+Doppler+Quantification+Task+Force+of+the+Nomenclature+and+Standards+Committee+of+the+American+Society+of+Echocardiography.">Recommendations for quantification of Doppler echocardiography: a report from the Doppler Quantification Task Force of the Nomenclature and Standards Committee of the American Society of Echocardiography.</a> J Am Soc Echocardiogr. 15 (2), 167-184 (2002).</li><li>van Laake, L. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+of+cell+therapy+and+assessment+of+cardiac+function+using+magnetic+resonance+imaging+in+a+mouse+model+of+myocardial+infarction.">Monitoring of cell therapy and assessment of cardiac function using magnetic resonance imaging in a mouse model of myocardial infarction.</a> Nat Protoc. 2 (10), 2551-2567 (2007).</li><li>Wagner, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Wilms'+tumor+suppressor+Wt1+is+expressed+in+the+coronary+vasculature+after+myocardial+infarction.">The Wilms' tumor suppressor Wt1 is expressed in the coronary vasculature after myocardial infarction.</a> FASEB J. 16 (9), 1117-1119 (2002).</li><li>Wagner, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+induction+and+inheritance+of+epigenetic+cardiac+hypertrophy+in+the+mouse.">RNA induction and inheritance of epigenetic cardiac hypertrophy in the mouse.</a> Dev Cell. 14 (6), 962-969 (2008).</li><li>Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIH+Image+to+ImageJ:+25+years+of+image+analysis.">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nat Methods. 9 (7), 671-675 (2012).</li><li>Ruifrok, A. C., Johnston, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+histochemical+staining+by+color+deconvolution.">Quantification of histochemical staining by color deconvolution.</a> Anal Quant Cytol Histol. 23 (4), 291-299 (2001).</li><li>Lazzeroni, D., Rimoldi, O., Camici, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+Left+Ventricular+Hypertrophy+to+Dysfunction+and+Failure.">From Left Ventricular Hypertrophy to Dysfunction and Failure.</a> Circ J. 80 (3), 555-564 (2016).</li><li>Ismail, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistologic+labeling+of+murine+endothelium.">Immunohistologic labeling of murine endothelium.</a> Cardiovasc Pathol. 12 (2), 82-90 (2003).</li><li>Benton, R. L., Maddie, M. A., Minnillo, D. R., Hagg, T., Whittemore, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Griffonia+simplicifolia+isolectin+B4+identifies+a+specific+subpopulation+of+angiogenic+blood+vessels+following+contusive+spinal+cord+injury+in+the+adult+mouse.">Griffonia simplicifolia isolectin B4 identifies a specific subpopulation of angiogenic blood vessels following contusive spinal cord injury in the adult mouse.</a> J Comp Neurol. 507 (1), 1031-1052 (2008).</li><li>Ayoub, A. E., Salm, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+morphological+diversity+of+microglia+in+the+activated+hypothalamic+supraoptic+nucleus.">Increased morphological diversity of microglia in the activated hypothalamic supraoptic nucleus.</a> J Neurosci. 23 (21), 7759-7766 (2003).</li><li>Maddox, D. E., Shibata, S., Goldstein, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stimulated+macrophages+express+a+new+glycoprotein+receptor+reactive+with+Griffonia+simplicifolia+I-B4+isolectin.">Stimulated macrophages express a new glycoprotein receptor reactive with Griffonia simplicifolia I-B4 isolectin.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 79 (1), 166-170 (1982).</li><li>dela Paz, N. G., D'Amore, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arterial+versus+venous+endothelial+cells.">Arterial versus venous endothelial cells.</a> Cell Tissue Res. 335 (1), 5-16 (2009).</li></ol>

저자는 공개 없다.

다른 방법은 심장 구조와 쥐, 심장 초음파, 등 대비 강화 된 MRI, 마이크로 CT, PET 스캔 기능을 평가 하기 위해 개발 되었습니다. 비용 효율성과 단순함, 심장 초음파는 마우스11기능 분석에 대 한 가장 널리 사용 되 기술입니다. 마음과 쥐에서 심장 박동, 주파수 변환기의 높은 주파수의 작은 크기 때문에 일반적으로, &#62; 10 MHz 해야 사용할 수 있지만 성공적인 측정 8 또는 9 MHz 변환?...

유전자 변형된 마우스 모델의 큰 다양 한 사용할 수 있습니다, 하 고 약리 연구에서 쥐의 수는 높은1,2. 심장 초음파 및 MRI은 심장 기능과 형태학이 마우스 모델3의 phenotypic 특성 일반적으로 사용 되 접근법입니다. 제시 프로토콜의 목적은 심장 기능과 성인 쥐에 형태 분석입니다. 그것은 echocardiographic, 조직학, 결합 및 immunohistochemical 측정. Echocardiographic 시험 쥐4,5,6,7,,89,10,11에서 널리 이용 된다 12. Pachon 외. 11 식별 205 연구 2012과 2015 사이의 순환, 순환 연구, 미국의 저널의 생리-심 혼과 순환 상 생리학, 및 심장 혈관 연구 에 게시 동물에 echocardiographic 검사를 사용합니다.
심장 초음파는 심장 고기 유전자 변형된 쥐5,6,13,,1415,16, 를 식별 하는 데 17 , 18 , 19 , 20 , 21 , 22, 또한 만성 과부하 유발 비 대, 심근 허 혈, 및 쥐 (12에서 검토) 심장 근육 병 증 모델에서 심장 기능 분석으로. 향상 된 심장 초음파 장비에 대 한 수는 왼쪽 심 실 (LV) 수축 기 및 diastolic 차원, 조직 도플러 영상, 심근 대비 진단법, 그리고 라스베가스 지역 기능과 관상 예비 의 평가의 표준 측정 12. 이상적으로, echocardiographic 시험 수축 기능, 자율 반사 제어에 마 취의 부정적인 영향을 피하기 위해 의식 쥐에서 수행 해야 하 고 심장 속도11. 그럼에도 불구 하 고,이 방법은 동물; 훈련 요구에 의해 제한 됩니다. 안정적인; 체온 유지에 어려움 운동 유물; 스트레스; 매우 높은 심장 주파수; 그리고 동물의 많은 수는 조사 하는 경우에 특히 실험을 수행 하기 위해 두 개 이상의 조사에 대 한 요구 사항. 흥미롭게도, 최근 연구 보고 훈련 하 고 훈련 되지 않는 동물19에 echocardiographic 매개 변수에서 차이가. 우리는 마 취 쥐에 echocardiographic 측정을 수행합니다. 다른 마 취 프로토콜 아래에 설명 될 것 이다.
비록 표준 해상도 심장 초음파 (&#62; 10 MHz)은 측정 LV 수축 기 및 diastolic 크기와 성인 쥐에 심장 기능에 충분 한, 메서드를 기본 구조 현상의 설명에 제한 됩니다. 따라서, 우리가 결합 조직학을 vivo에서 측정 및 측정, 예를 들어 cardiomyocyte 직경 및 배 밀도를 immunohistological 분석. 동일한 유형의 다른 조직학 및 immunohistological 조사, 확산의 결정, apoptosis, 경색 크기 측정, 섬유 증, 및 특정 마커 식의 검사를 수행할 수 있습니다. 조직 처리 하지만이 프로토콜의 대상이 되지 않습니다. 조직학 분석 비보에 echocardiographic 시험의 기본 구조 변경에 대 한 추가적인 통찰력을 제공합니다. 추가 단계에서 우리는 분자와 울트라 구조 조사와이 측정을 완료할 수 있습니다. 조직학 분석 echocardiographic 시험 완료 뿐만 아니라 또한 불가결 될 때 심장 초음파의 해상도 충분 하지 않습니다. 이것은 유전자 변형된 생쥐 배아 치명적인23,24의 모델의 경우 특히.

<table><tbody><tr><td>Wheat germ agglutinin (WGA) conjugated tetramethylrhodamine</td><td>Life Technologies, Molecular Probes</td><td>W849</td><td></td></tr><tr><td>Biotinylated Goat Anti-Rabbit IgG Antibody</td><td>Vectorlabs</td><td>BA-1000</td><td></td></tr><tr><td>Avidin/Biotin Blocking Kit</td><td>Vectorlabs</td><td>SP-2001</td><td></td></tr><tr><td>VECTASTAIN Elite ABC HRP Kit (Peroxidase, Standard)</td><td>Vectorlabs</td><td>PK-6100</td><td></td></tr><tr><td>VECTASHIELD Antifade Mounting Medium with DAPI</td><td>Vectorlabs</td><td>H-1200</td><td></td></tr><tr><td>SIGMAFAST 3,3&#039;-Diaminobenzidine tablets</td><td>Sigma</td><td>D4168</td><td></td></tr><tr><td>Hydrogen peroxide solution</td><td>Sigma</td><td>H1009</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Pecam-1 (CD31) antibody</td><td>Abcam</td><td>ab28364</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasound transmission gel, Gel Aquasonic 100</td><td>Parker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Linear ultrasound probe, L15-7io</td><td>Philips Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Echocardiograph, IE33 xMATRIX</td><td>Philips Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microscope, Leica DMi8</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fluorescence Filterset DAPI</td><td>Leica</td><td>11525304</td><td></td></tr><tr><td>Filterset TxR</td><td>Leica</td><td>11525310</td><td></td></tr><tr><td>Digital Camera, SPOT RT3 Color Slider</td><td>Spot Imaging</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Imaging Software, SPOT 5.2 Advanced and Basic Software</td><td>Spot Imaging</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Imaging Computer</td><td>Dell</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fine Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>14028-10</td><td></td></tr><tr><td>Large Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>14501-14</td><td></td></tr><tr><td>Scalpel blades</td><td>Fine Science Tools</td><td>10023-00</td><td></td></tr><tr><td>Graefe Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11650-10</td><td></td></tr><tr><td>Rodent shaver</td><td>Harvard Apparatus</td><td>34-0243</td><td></td></tr><tr><td>cassettes for paraffin embedding</td><td>Sakura</td><td>4155F</td><td></td></tr><tr><td>neutral buffered Formalin</td><td>Sakura</td><td>8727</td><td></td></tr><tr><td>Xylene</td><td>Sakura</td><td>8733</td><td></td></tr><tr><td>Paraffine TEK III</td><td>Sakura</td><td>4511</td><td></td></tr><tr><td>automated embedding apparatus, Tissue-Tek VIP</td><td>Sakura</td><td>6032</td><td></td></tr><tr><td>paraffin-embedding station Tissue-Tek TEC 5</td><td>Sakura</td><td>5229</td><td></td></tr><tr><td>microtome blades,Accu-Edge S35</td><td>Sakura</td><td>4685</td><td></td></tr><tr><td>microscopy slides, Tissue-Tek</td><td>Sakura</td><td>9533</td><td></td></tr><tr><td>cover slips, Tissue-Tek</td><td>Sakura</td><td>9582</td><td></td></tr><tr><td>Mounting medium Tissue-Tek</td><td>Sakura</td><td>1408</td><td></td></tr><tr><td>slide boxes</td><td>Sakura</td><td>3958</td><td></td></tr><tr><td>eosine solution</td><td>Sakura</td><td>8703</td><td></td></tr><tr><td>hematoxyline solution</td><td>Sakura</td><td>8711</td><td></td></tr><tr><td>microtome, RM2125RT</td><td>Leica</td><td>720-1880 (VWR)</td><td></td></tr><tr><td>water bath, Leica HI1210</td><td>Leica</td><td>720-0113(VWR)</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>VWR</td><td>ACRO444220050</td><td></td></tr><tr><td>15 ml tubes</td><td>VWR</td><td>734-0451</td><td></td></tr><tr><td>staining glass dish</td><td>VWR</td><td>MARI4220004</td><td></td></tr><tr><td>staining jars</td><td>VWR</td><td>MARI4200005</td><td></td></tr><tr><td>Incubator</td><td>Binder</td><td>9010-0012</td><td></td></tr><tr><td>DAB and urea hydrogen peroxide tablets, SIGMAFAST 3,3&amp;prime;-Diaminobenzidine tablets</td><td>Sigma</td><td>D4293</td><td></td></tr><tr><td>PBS (10X)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>70011044</td><td></td></tr></tbody></table>

echocardiographic and histological examination of cardiac morphology in the mouse

유전자 변형된 마우스 모델의 증가 최근 몇 년 동안에서 가능한 되고있다. 또한, 약리 연구에서 쥐의 수는 높다. 이 마우스 모델의 phenotypic 특성에는 심장 기능과 형태학의 검사를 필요합니다. 심장 초음파 및 자기 공명 영상 (MRI)은 심장 기능과 마우스 형태학 특성을 일반적으로 사용 되 접근법입니다. Echocardiographic 및 MRI 장비 전문 사용 작은 설치류에 비싼 하 고 전용된 공간이 필요 합니다. 이 프로토콜 15 MHz 인간의 혈관 프로브 임상 echocardiographic 시스템을 사용 하 여 마우스에 심장 측정을 설명 합니다. 측정은 마 취 성인 쥐에 수행 됩니다. 적어도 3 개의 이미지 시퀀스는 기록 하 고 parasternal 짧은 축 보기에서 M 모드에서 각 동물에 대 한 분석. 나중에, 심장 조직학 검사 수행 및 cardiomyocyte 직경 hematoxylin에 결정 됩니다-오신-또는 밀 세균 agglutinin (WGA)-파라핀 섹션 스테인드. 배 밀도 Pecam-1 immunostaining 후 결정된 morphometrically입니다. 프로토콜 약리 연구에 성공적으로 적용 하 고 다른 유전 동물 모델의 왼쪽된 앞쪽 내림차순 관상 동맥 (영구 결 찰 하 여 실험적인 심근 경색 후에 뿐만 아니라 초기 조건 되었습니다. 젊은이)입니다. 우리의 경험에서는, echocardiographic 조사 마 취 동물에 제한 되 고 적어도 무게 성인 쥐에 가능 25 g.

그림 1, 대표 echocardiographic 녹음 유전자 변형 쥐에서 심장 고기를 식별 하기 위해 심장 초음파의 유용성을 보여 줍니다. 정상적인 심장 기능 (그림 1A)와 마우스 및 넓혀 진된 좌 심 실 및 감소 된 LV 기능 (그림 1B)와 동물의 차이 쉽게 확인 될 수 있다. 그림 2 에서는 cardiomyocyte 비교 직경...

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Echocardiographic and Histological Examination of Cardiac Morphology in the Mouse

Echocardiographic 시험 쥐에서 자주 사용 됩니다. 비싼 고해상도 초음파 장치가이 목적을 위해 개발 되었습니다. 이 프로토콜에서는 심장 형태를 결정 하는 조직학 형태학 분석 함께 저렴 한 echocardiographic 절차를 설명 합니다.

마우스의 심장 형태학의 echocardiographic 및 조직학 검사

An increasing number of genetically modified mouse models has become available in recent years. Moreover, the number of pharmacological studies performed ...

echocardiographic-histological-examination-cardiac-morphology

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Medicine

21.4K 조회수.  CNRS, INSERM, iBV. Echocardiographic 시험 쥐에서 자주 사용 됩니다. 비싼 고해상도 초음파 장치가이 목적을 위해 개발 되었습니다. 이 프로토콜에서는 심장 형태를 결정 하는 조직학 형태학 분석 함께 저렴 한 echocardiographic 절차를 설명 합니다.

비디오: Echocardiographic and Histological Examination of Cardiac Morphology in the Mouse

Transthoracic Echocardiography in Mice

In recent years, murine models have become the primary avenue for studying the molecular mechanisms of cardiac dysfunction resulting from changes in gene expression. Transgenic and gene targeting methods can be used to generate mice with altered cardiac size and function,1-3 and as a result, in vivo techniques are needed to evaluate their cardiac phenotype. Transthoracic echocardiography, pulse wave Doppler (PWD), and tissue Doppler imaging (TDI) can be used to provide dimensional measurements of the mouse heart and to quantify the degree of cardiac systolic and diastolic performance. Two-dimensional imaging is used to detect abnormal anatomy or movements of the left ventricle, whereas M-mode echo is used for quantification of cardiac dimensions and contractility.4,5 In addition, PWD is used to quantify localized velocity of turbulent flow,6 whereas TDI is used to measure the velocity of myocardial motion.7 Thus, transthoracic echocardiography offers a comprehensive method for the noninvasive evaluation of cardiac function in mice.

Transthoracic echocardiography offers a noninvasive method for the evaluation of cardiac function in mice. A combination of ultrasound and Doppler imaging modalities can be used to obtain dimensional measurements of the heart and intracardiac blood flow, which together provide an assessment of cardiac systolic and diastolic performance.

마우스에 Transthoracic Echocardiography

In recent years, murine models have become the primary avenue for studying the molecular mechanisms of cardiac dysfunction resulting from changes in gene ...

연구

의학

Murine Echocardiography and Ultrasound Imaging

Rodent models of cardiac pathophysiology represent a valuable research tool to investigate mechanism of disease as well as test new therapeutics.1 Echocardiography provides a powerful, non-invasive tool to serially assess cardiac morphometry and function in a living animal.2 However, using this technique on mice poses unique challenges owing to the small size and rapid heart rate of these animals.3 Until recently, few ultrasound systems were capable of performing quality echocardiography on mice, and those generally lacked the image resolution and frame rate necessary to obtain truly quantitative measurements. Newly released systems such as the VisualSonics Vevo2100 provide new tools for researchers to carefully and non-invasively investigate cardiac function in mice. This system generates high resolution images and provides analysis capabilities similar to those used with human patients. Although color Doppler has been available for over 30 years in humans, this valuable technology has only recently been possible in rodent ultrasound.4,5 Color Doppler has broad applications for echocardiography, including the ability to quickly assess flow directionality in vessels and through valves, and to rapidly identify valve regurgitation. Strain analysis is a critical advance that is utilized to quantitatively measure regional myocardial function.6 This technique has the potential to detect changes in pathology, or resolution of pathology, earlier than conventional techniques. Coupled with the addition of three-dimensional image reconstruction, volumetric assessment of whole-organs is possible, including visualization and assessment of cardiac and vascular structures. Murine-compatible contrast imaging can also allow for volumetric measurements and tissue perfusion assessment.

This video demonstrates use of a rail-mounted high-frequency ultrasound probe to perform echocardiography on an anesthetized mouse. The methods describe both conventional two-dimensional and M-mode measurements of cardiac function in addition to newer, more powerful tools such as color Doppler, strain analysis, as well as general and targeted contrast imaging.

Murine Echocardiography 및 초음파 이미징

Rodent models of cardiac pathophysiology represent a valuable research tool to investigate mechanism of disease as well as test new therapeutics.1  ...

Echocardiographic Assessment of the Right Heart in Mice

Transgenic and toxic models of pulmonary arterial hypertension (PAH) are widely used to study the pathophysiology of PAH and to investigate potential therapies. Given the expense and time involved in creating animal models of disease, it is critical that researchers have tools to accurately assess phenotypic expression of disease. Right ventricular dysfunction is the major manifestation of pulmonary hypertension. Echocardiography is the mainstay of the noninvasive assessment of right ventricular function in rodent models and has the advantage of clear translation to humans in whom the same tool is used. Published echocardiography protocols in murine models of PAH are lacking.
In this article, we describe a protocol for assessing RV and pulmonary vascular function in a mouse model of PAH with a dominant negative BMPRII mutation; however, this protocol is applicable to any diseases affecting the pulmonary vasculature or right heart. We provide a detailed description of animal preparation, image acquisition and hemodynamic calculation of stroke volume, cardiac output and an estimate of pulmonary artery pressure.

This article provides a protocol for the echocardiographic assessment of right ventricular size and pulmonary hypertension in mice. Applications include phenotype determination and serial assessment in transgenic and toxin-induced mouse models of cardiomyopathy and pulmonary vascular disease.

마우스의 오른쪽 심장의 심 초음파 평가

Transgenic and toxic models of pulmonary arterial hypertension (PAH) are widely used to study the pathophysiology of PAH and to investigate potential ...

Analysis of Congenital Heart Defects in Mouse Embryos Using Qualitative and Quantitative Histological Methods

Congenital heart defects (CHD) are the most common type of birth defect in humans, affecting up to 1% of all live births. However, the underlying causes for CHD are still poorly understood. The developing mouse constitutes a valuable model for the study of CHD, because cardiac developmental programs between mice and humans are highly conserved. The protocol describes in detail how to produce mouse embryos of the desired gestational stage, methods to isolate and preserve the heart for downstream processing, quantitative methods to identify common types of CHD by histology (e.g., ventricular septal defects, atrial septal defects, patent ductus arteriosus), and quantitative histomorphometry methods to measure common muscular compaction phenotypes. These methods articulate all the steps involved in sample preparation, collection, and analysis, allowing scientists to correctly and reproducibly measure CHD.

In this protocol, we describe procedures to qualitatively and quantitatively analyze developmental phenotypes in mice associated with congenital heart defects.

정성적 및 정량적 조직학적 방법을 사용하여 마우스 배아의 선천성 심장 결함 분석

Congenital heart defects (CHD) are the most common type of birth defect in humans, affecting up to 1% of all live births. However, the underlying causes ...

발생학

A Pipeline to Characterize Structural Heart Defects in the Fetal Mouse

Congenital heart diseases (CHDs) are major causes of infant death in the United States. In the 1980s and earlier, most patients with moderate or severe CHD died before adulthood, with the maximum mortality during the first week of life. Remarkable advances in surgical techniques, diagnostic approaches, and medical management have led to marked improvements in outcomes. To address the critical research needs of understanding congenital heart defects, murine models have provided an ideal research platform, as they have very similar heart anatomy to humans and short gestation rates. The combination of genetic engineering with high-throughput phenotyping tools has allowed for the replication and diagnosis of structural heart defects to further elucidate the molecular pathways behind CHDs. The use of noninvasive fetal echocardiography to screen the cardiac phenotypes in mouse models coupled with the high fidelity of Episcopic fluorescence image capture (EFIC) using Episcopic confocal microscopy (ECM) histopathology with three-dimensional (3D) reconstructions enables a detailed view into the anatomy of various congenital heart defects. This protocol outlines a complete workflow of these methods to obtain an accurate diagnosis of murine congenital heart defects. Applying this phenotyping protocol to model organisms will allow for accurate CHD diagnosis, yielding insights into the mechanisms of CHD. Identifying the underlying mechanisms of CHD provide opportunities for potential therapies and interventions.

This article details murine congenital heart disease (CHD) diagnostic methods using fetal echocardiography, necropsy, and Episcopic fluorescence image capture (EFIC) using Episcopic confocal microscopy (ECM) followed by three-dimensional (3D) reconstruction.

태아 마우스의 구조적 심장 결함을 특성화하는 파이프라인

Congenital heart diseases (CHDs) are major causes of infant death in the United States. In the 1980s and earlier, most patients with moderate or severe ...

Assessment of Cardiac Morphological and Functional Changes in Mouse Model of Transverse Aortic Constriction by Echocardiographic Imaging

Transverse aortic constriction (TAC) in mice has been used as a valuable model to study mechanisms of cardiac hypertrophy and heart failure1. A reliable noninvasive method is essential to assess real-time cardiac morphological and functional changes in animal models of heart disease. Transthoracic echocardiography represents an important tool for noninvasive assessment of cardiac structure and function2. Here we used a high-resolution ultrasound imaging system to monitor myocardial remodeling and heart failure progression over time in a mouse model of TAC. B-mode, M-mode, and Doppler imaging were used to precisely assess cardiac hypertrophy, ventricular dilatation, and functional deterioration in mice following TAC. Color and pulse wave (PW) Doppler imaging was used to noninvasively measure pressure gradient across the aortic constriction created by TAC and to assess transmitral blood flow in mice. Thus transthoracic echocardiographic imaging provides comprehensive noninvasive measurements of cardiac dimensions and function in mouse models of heart disease.

The goal of this protocol is to noninvasively assess cardiac structural and functional changes in a mouse model of heart disease created by transverse aortic constriction, using B- and M-mode echocardiography and color/pulse wave Doppler imaging.

심 초음파 이미징에 의해 가로 대동맥 수축의 마우스 모델에서 심장 형태 학적 평가 및 기능 변경

Transverse aortic constriction (TAC) in mice has been used as a valuable model to study mechanisms of cardiac hypertrophy and heart failure1. A reliable ...

Echocardiographic Approaches and Protocols for Comprehensive Phenotypic Characterization of Valvular Heart Disease in Mice

The aim of this manuscript and accompanying video is to provide an overview of the methods and approaches used for imaging heart valve function in rodents, with detailed descriptions of the appropriate methods for anesthesia, the echocardiographic windows used, the imaging planes and probe orientations for image acquisition, the methods for data analysis, and the limitations of emerging technologies for the evaluation of cardiac and valvular function. Importantly, we also highlight several future areas of research in cardiac and heart valve imaging that may be leveraged to gain insights into the pathogenesis of valve disease in preclinical animal models. We propose that using a systematic approach to evaluating cardiac and heart valve function in mice can result in more robust and reproducible data, as well as facilitate the discovery of previously underappreciated phenotypes in genetically-altered and/or physiologically-stressed mice.

This protocol provides a detailed description of the echocardiographic approach for comprehensive phenotyping of heart and heart valve function in mice.

마우스의 심장 판막 질환의 종합 표현형 특성에 대한 심 초음파 접근 및 프로토콜

The aim of this manuscript and accompanying video is to provide an overview of the methods and approaches used for imaging heart valve function in ...

Murine Echocardiography of Left Atrium, Aorta, and Pulmonary Artery

The present methodology teaches the investigator how to measure and use the LAV as a surrogate of chronic elevations in Left Ventricular diastolic pressure through echocardiography, as well as to obtain measurements of the Aorta and PA diameter in mice.
Mice older than 10 d of age can be analyzed using the present technique. The technique is composed of 3 main steps: set-up, image acquisition, and image analysis. The set-up step consists of getting the mouse anesthetized with 1% isoflurane, shaving it, and taping it in a supine position to a heated EKG board where the image acquisition will take place. The image acquisition step consists of learning to identify the cardiac structures and obtaining all the required images with its correspondent probe and axis in order to be able to calculate volumes and diameters. The image analysis step consists of measuring the previously acquired images with the aid of computer software.
Advantages of the proposed technique include a fast (15 min) procedure that would allow the researcher to evaluate interventions in a non-invasive, non-terminal approach and therefore follow the same mouse over time; each mouse can be used as its own control. This fact plus having the same operator perform all the acquisition and analysis for the entire experiment minimizes the limitation of operator-dependency. The present methodology is useful for mouse researchers in cardiovascular and pulmonary medicine.

The following protocol describes the methodology for the acquisition and analysis of echocardiographic images used to obtain the Left Atrial Volume (LAV), Aorta (Ao) diameter, and Pulmonary Artery (PA) diameter in mice. This technique is a non-invasive, non-terminal procedure that allows assessment of the cardiopulmonary function.

왼쪽 아트리움, 대동맥과 폐동맥의 쥐 심 초음파

The present methodology teaches the investigator how to measure and use the LAV as a surrogate of chronic elevations in Left Ventricular diastolic ...

Echocardiographic Measurement of Right Ventricular Diastolic Parameters in Mouse

Diastolic dysfunction is a prominent feature of right ventricular (RV) remodeling associated with conditions of pressure overload. However, the RV diastolic function is rarely quantified in experimental studies. This might be due to technical difficulties in the visualization of the RV in the apical four-chamber view in rodents. Here we describe two positions facilitating the visualization of the apical four-chamber view in mice to assess the RV diastolic function.
The apical four-chamber view is enabled by tilting the mouse fixation platform to the left and caudally (LeCa) or to the right and cranially (RiCr). Both positions provide images of comparable quality. The results of the RV diastolic function obtained from two positions are not significantly different. Both positions are comparably easy to perform. This protocol can be incorporated into published protocols and enables detailed investigations of the RV function.

Here we describe and compare two positions for obtaining the apical four-chamber view in mice. These positions enable the quantification of the right ventricular function, provide comparable results, and can be used interchangeably.

마우스의 우심실 확장기 매개변수의 심초음파 측정

Diastolic dysfunction is a prominent feature of right ventricular (RV) remodeling associated with conditions of pressure overload. However, the RV ...

Echocardiographic Characterization of Left Ventricular Structure, Function, and Coronary Flow in Neonate Mice

Echocardiography is a non-invasive procedure that enables the evaluation of structural and functional parameters in animal models of cardiovascular disease and is used to assess the impact of potential treatments in preclinical studies. Echocardiographic studies are usually conducted in young adult mice (i.e., 4-6 weeks of age). The evaluation of early neonatal cardiovascular function is not usually performed because of the small size of the mouse pups and the associated technical difficulties. One of the most important challenges is that the short length of the pups&#39; limbs prevents them from reaching the electrodes in the echocardiography platform. Body temperature is the other challenge, as pups are very susceptible to changes in temperature. Therefore, it is important to establish a practical guide for performing echocardiographic studies in small mouse pups to help researchers detect early pathological changes and study the progression of cardiovascular disease over time. The current work describes a protocol for performing echocardiography in mouse pups at the early age of 7 days old. The echocardiographic characterization of cardiac morphology, function, and coronary flow in neonatal mice is also described.

The present protocol describes the echocardiographic assessment of left ventricular morphology, function, and coronary blood flow in 7-day old neonate mice.

신생아 마우스의 좌심실 구조, 기능 및 관상 동맥 흐름의 심 초음파 특성

Echocardiography is a non-invasive procedure that enables the evaluation of structural and functional parameters in animal models of cardiovascular ...