Name: embolic middle cerebral artery occlusion (mcao) for ischemic stroke with homologous blood clots in rats
Uploaded: 2014-09-17T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 11 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats at JoVE.com

This work was supported by National Institutes of Health grants HL087990 (G.L.).

윤리 선언문 : (330~380g 무게) 남성 성인 흰쥐이 프로토콜에 사용되었다. 이 프로토콜은 LSU 건강 과학 센터 - 슈 리브 포트에서 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)의 승인 (제 8 판, 국립 과학 아카데미 2011 &#39;실험실 동물의 관리 및 사용을위한 설명서&#39;을 준수하였습니다 ). 수정 된 PE-50 튜브의 1 준비 <ol><li> 점차적으로 튜브를 부드럽게, 손에 의해 가스 불 위의 30cm 긴 PE-50 튜브를 잡습니다. 부드럽게 튜브를 스트레칭. </li><li> 디지털 캘리퍼스 (그림 1)를 사용하여 연신 튜브에 지점을 선택하고, 그것을 표시하고 (외경 : 0.30-0.34 mm) 1cm 길이 끝이 25cm 긴 세그먼트로 수정 된 PE-50 튜브를 잘라. </li></ol> 동종 혈액 응고 2 준비 <ol><li> 70 % N 2 O 30 % O의 이소 플루 란 (유도 5 %, 유지 보수를 위해 2 ~ 3 %)로 쥐를 마취 &lt;채혈하기 전에 얼굴에 마스크에 의해 서브&gt; 2. 발가락 핀치에 의해 마취를 확인합니다. </li><li> 발행 방법 4 기증자 쥐의 대퇴 동맥 삽관을 수행하고 20cm 긴 PE-50 튜브에 직접 대퇴 동맥의 혈액을 전송합니다. 혈전이 혈액을 실온에서 2 시간 동안 튜브를 놓은 다음 4 ℃에서 22 시간 동안 튜브를 유지합니다. 참고 : 삽관 단계 3.1에 ​​설명 된대로 무균 기술을 사용하여 수행됩니다. 기증자 쥐 더욱 샘플링 회수한다. </li><li> 50mm 세그먼트로 PE-50 튜브를 잘라 생리 식염수가 들어있는 멸균 페트리 접시에 관에서 혈전을 세척하십시오. </li><li> 60mm 긴 PE-10 튜브에 50mm에게 긴 혈전을 전송하고 23 G 바늘을 생리 식염수를 포함하는 1 ML의 주사기에 연결된 20cm 긴 PE-50 관에 PE-10 튜브의 각 끝을 연결합니다 (그림 2) . </li><li> 혈액 세포를 제거 할 수있는, 5 분 동안 다른 하나의 주사기로부터의 연속 교호 이동에 의해 응고 시프트응고와 섬유소 코어를 방해하지 않고, 혈관 외 응고 된 혈전의 허약을 최소화 할 수 있습니다. </li><li> 40mm 긴 세그먼트로 혈전을 자르고 무균 조건 하에서 단계 1.2에 설명 된대로 수정 된 PE-50 카테터로 혈전 세그먼트를 전송합니다. 참고 : 모든 PE 튜브가 산화 에틸렌 살균된다. </li></ol> 3 색전 중간 대뇌 동맥 폐색 (그림 3A, B) <ol><li> (최소 121 ° C, 15 분 15 PSI를) 고압 증기 멸균하여 모든 수술 도구를 소독. 70 % 에탄올을 사용하여 수술 테이블과 연관된 수술 장비를 살균. </li><li> 2.1 단계에 설명 된대로 이소 플루 란과 함께 쥐를 마취. 모두 뒤 발에 발가락 핀치를 수행하여 마취의 깊이를 테스트하고 (발을 인출) 모든 관찰 운동은 동물이 수술을 할 충분히 마취가 아님을 나타냅니다. 마취 동안 건조를 방지하기 위해 두 눈에 수의사 연고의 작은 금액을 적용합니다. 복부 목과 머리 재에 털을 면도전기 면도기와 gions은 피부 영역을 노출시킨다. </li><li> 가열 패드에 누운 자세에서 쥐를 놓습니다. 직장 프로브, 컨트롤을 삽입하고 homeothermic 담요 제어 장치를 사용하여 36.5-37.5 ° C 사이의 체온을 유지한다. </li><li> 70 % 에탄올이어서 10 % 포비돈 - 요오드와 면도 피부와 주변 모피 소독. </li><li> 해부 현미경 목에 2 cm 길이의 중간 선 절개를합니다. 수술 부위를 노출하고 오른쪽 경동맥 (CCA), 외부 경동맥 (ECA), 내 경동맥 (ICA) 및 pterygopalatine 동맥 (PPA) 주변 신경 및 근막 (그림 3A)에서 무료 해부 견인기를 사용합니다. 참고 : 길잡이 동물을 준비하는 데 도움이없는 경우 수술 전에 멸균 장갑을 변경합니다. </li><li> (미주 신경에 손상을주지 않고) 주변 신경에서 CCA 무료 해부 및 동맥에서 멸균 5-0 실크 봉합사를 배치합니다. 슬립 매듭 (# 1)을 묶어 작은 HEMOS을 사용하여 봉합을 파악문신과는 몸으로 가르쳐 당깁니다. </li><li> ECA와 그 두 가지, 후두 동맥 (OA) 및 갑상선 동맥 (STA)을 해부하다. 수의학 전기 수술 장치를 사용하여 두 가지를 응고. ECA에서 멸균 6-0 실크 봉합사의 두 조각을 놓습니다. </li><li> 동맥, 머리를 향해 한 조각 (선단) 몸으로 다른 아래에 위치이 실크를 분리합니다. (2 #) 머리에 가장 가까운 측면에 작은 지혈제와 실크를 잡고 머리를 향해 가르쳐 당겨 꽉 합자 타이. 나중에 사용하기 위해 다른 실크 느슨한 매듭 (# 3)를 준비합니다. </li><li> (미주 신경에 손상을주지 않고) 주변 신경에서 ICA와 PPA를 해부하다. 6-0 봉합사 (# 4)와 PPA를 묶어. ICA (# 5) 약 6-0 봉합과 슬립 매듭을합니다. 다르게는, 미세 혈관 클립을 사용하여 ICA 클립. </li><li> Vannas 스타일의 봄 가위로 꽉 (# 2) 느슨한 (# 3) 합자 사이의 ECA에 작은 구멍 (를 통해 2)를 잘라. 수정 된 PE-50 욕조를 삽입CCA의 분기점에 절개를 사전에 혈전이 포함 된 전자. (3 #) 충분한 루멘 주변에 거주하는 튜브의 이동성을 보존 확보하기 위해 느슨한 합자를 조입니다. </li><li> 그루터기를 해제하고 ECA와 ICA의 분기점 아래의 그루터기를 배치하는 작은 구멍의 사이트에서 ECA를 잘라; 이 개질 관 쉽게 ICA로 밀어 허용 할 것이다. ICA를 열고 카테터의 끝이 MCA의 근원에 도달 할 때까지 부드럽게 (~ 분기점에서 17mm를) ICA에 ECA의 루멘에서 튜브를 진행합니다. 참고 : 전에 ECA, 70 % 에탄올로 튜브의 멸균 외부 표면에 튜브의 끝 부분을 삽입 한 다음 멸균 생리 식염수로 씻어. </li><li> 100 μL 해밀턴 주사기 (그림 3B)를 사용하여 10 초 이상 생리 식염수 10 ㎕를 함께 수정 된 PE-50 카테터를 통해 혈전을 주입한다. </li><li> 5 분 후에 ECA에서 카테터를 철회. ECA를 묶어 CCA를 다시 엽니 다. 목에 절개를 봉합. </li></ol> (4) 모니터링 지역 대뇌 혈류 (rCBF) <ol><li> 이전 MCA 폐색으로, 두개골의 뼈를 노출 두피에 1.2 cm 긴 중간 선 절개를합니다. 치과 스크레이퍼 및 멸균면 스왑과 두개골 뼈의 조직을 제거합니다. 참고 : 수술 전에 노출 된 두피 지역 및 주변 모피는 70 % 에탄올 다음 10 % 포비돈 요오드로 소독한다. </li><li> 2mm 후방 및 0.7 mm 구형 스테인레스 버어 (도 4)를 이용하여 5mm 브레 그마 측방에 위치한 직경 1.5 mm 버 홀을 뚫는다. 주 : 그대로 두라을 유지합니다. </li><li> 프로브에게 경질 표면 위의 0.5 mm를 놓습니다. 0 (베이스 라인)에서 rCBF, 5, 15, 30, 60, 90을 모니터링하고 색전술 후 및 120 분에서 계속 5, 15, 30, 45, 및 tPA의 정맥 내 투여 후 60 분. rCBF의 마지막 측정 후, 두피 절개는 봉합에 의해 폐쇄된다. 참고 : 목 절개를하기 전에 우리가 MCA의 occlus 전 기준으로 rCBF을 측정이온. 포스트 MCA 폐색 우리는 목 절개 봉합 폐쇄 후 rCBF을 측정한다. 따라서, 목 절개 무균 유지된다. </li></ol> (5) 수술 후 케어 <ol><li> 탈수를 방지하고 즉시 수술과 통증 완화에 필요한 모든 6 ~ 12 시간 후 Buprenex (0.05 ㎎ / ㎏, SC)를 주입하는 식염수를 피하의 2.5 ml에 주입한다. </li><li> 이소 플루 란 마취를 중지합니다. 37 ° C 수의학 회수 챔버에 쥐를 놓고 (동물을 따뜻하게 유지) 관찰을 유지합니다. 쥐가 마취에서 회복하는 것은 일반적으로 10 분입니다. 그런 다음, 멸균 케이지에 동물을 넣어 장에 페트리 접시에 약간 젖은 음식을 놓고 동물 살균 방에 케이지를 반환합니다. </li><li> 뇌졸중 후 24 시간이 나트륨 펜토 바르 비탈 (100 ㎎ / ㎏ 체중, IP)의 과다로 래트를 안락사. </li></ol> (6) 신경 적자 점수 <ol><li> 전 색전술 후 2 시간에서 Bederson 점수를 수행합니다. 등급의를 사용하여0-3의 케일이 아니라 이전에 5 설명 : 꼬리 쥐를 올리는 공을 바닥에 두 앞발을 확장하고 다른 적자를 나타내지 않는 동물 (정상 동작); 한, 꼬리 쥐를 제기 반대측 앞다리 플렉스; 도 2는 선회하지 않고 횡 푸시 (및 앞다리 굴곡)에 대한 내성을 감소; 3, 돌고와 등급이 동일한 동작. 참고 : 색전술 후 2 시간에서 Bederson 점수 = 0 (적자)을 보여주는 쥐가 더 많은 연구에서 제외됩니다. </li></ol>

<ol>
	<li>Overgaard, K., Sereghy, T., Boysen, G., Pedersen, H., H&#248;yer, S., Diemer, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rat+model+of+reproducible+cerebral+infarction+using+thrombotic+blood+clot+emboli.">A rat model of reproducible cerebral infarction using thrombotic blood clot emboli.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 12 (3), 484-490 (1992).</li><li>Zhang, R. L., Chopp, M., Zhang, Z. G., Jiang, Q., Ewing, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rat+model+of+focal+embolic+cerebral+ischemia.">A rat model of focal embolic cerebral ischemia.</a> Brain Res. 766 (1-2), 83-92 (1997).</li><li>Dinapoli, V. A., Rosen, C. L., Nagamine, T., Crocco, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+MCA+occlusion:+a+precise+embolic+stroke+model.">Selective MCA occlusion: a precise embolic stroke model.</a> J. Neurosci. Methods. 154 (1-2), 233-238 (2006).</li><li>Jespersen, B., Knupp, L., Northcott, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Femoral+arterial+and+venous+catheterization+for+blood+sampling,+drug+administration+and+conscious+blood+pressure+and+heart+rate+measurements.">Femoral arterial and venous catheterization for blood sampling, drug administration and conscious blood pressure and heart rate measurements.</a> J Vis Exp. 59 (3496), (2012).</li><li>Bederson, J. B., Pitts, L. H., Tsuji, M., Nishimura, M. C., Davis, R. L., Bartkowski, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+middle+cerebral+artery+occlusion:+evaluation+of+the+model+and+development+of+a+neurologic+examination.">Rat middle cerebral artery occlusion: evaluation of the model and development of a neurologic examination.</a> Stroke. 17 (3), 472-476 (1986).</li><li>Henninger, N., Bouley, J., Br&#229;tane, B. T., Bastan, B., Shea, M., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+Doppler+flowmetry+predicts+occlusion+but+not+tPA-mediated+reperfusion+success+after+rat+embolic+stroke.">Laser Doppler flowmetry predicts occlusion but not tPA-mediated reperfusion success after rat embolic stroke.</a> Exp Neurol. 215 (2), 290-297 (2009).</li><li>Zhu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Annexin+A2+combined+with+low-dose+tPA+improves+thrombolytic+therapy+in+a+rat+model+of+focal+embolic+stroke.">Annexin A2 combined with low-dose tPA improves thrombolytic therapy in a rat model of focal embolic stroke.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 30 (6), 1137-1146 (2010).</li><li>Cheng, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activated+protein+C+inhibits+tissue+plasminogen+activator-induced+brain+hemorrhage.">Activated protein C inhibits tissue plasminogen activator-induced brain hemorrhage.</a> Nat Med. 2 (11), 1278-1285 (2006).</li><li>Taniguchi, H., Andreasson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hypoxic-ischemic+encephalopathy+model+of+perinatal+ischemia.">The hypoxic-ischemic encephalopathy model of perinatal ischemia.</a> J Vis Exp. 21 (955), (2008).</li><li>Sicard, K. M., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+focal+brain+ischemia.">Animal models of focal brain ischemia.</a> Exp Transl Stroke Med. 1 (7), (2009).</li><li>Florian, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+hypothermia+reduces+infarct+volume+in+aged+rats+after+focal+ischemia.">Long-term hypothermia reduces infarct volume in aged rats after focal ischemia.</a> Neurosci Lett. 438 (2), 180-185 (2008).</li><li>Noor, R., Wang, C. X., Shuaib, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+hyperthermia+on+infarct+volume+in+focal+embolic+model+of+cerebral+ischemia+in+rats.">Effects of hyperthermia on infarct volume in focal embolic model of cerebral ischemia in rats.</a> Neurosci Lett. 349 (2), 130-132 (2003).</li><li>Westendorp, W. F., Nederkoorn, P. J., Vermeij, J. D., Dijkgraaf, M. G., van de Beek, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Post-stroke+infection:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Post-stroke infection: a systematic review and meta-analysis.</a> BMC Neurol. 11 (110), (2011).</li></ol>

We do not have any potential conflicting interests to disclose.

본 연구에서 우리는 MCA의 원점이 풍부한 피브린 응고에 의해 폐색 된 쥐에서 색 전성 뇌졸중 MCAO 모델을 수행하기위한 표준 방법을 설명했다. 이 모델의 주요 장점은 : 피브린 풍부한 혈병과 MCA의 줄기의 폐색은 인간에서 혈전 색 전성 뇌졸중 유사 색 전성 뇌졸중 모델 혈전 용해 요법의 전임상 연구를 수행하기에 적합하고,이 모델을 개발할 수 있음 MCA에 의해 공급 영토 내에서 재현하고 예측 경?...

A correction was made to <a href="/video/51956">Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats</a>. The institution information was updated.
The institution "Louisiana State University Health Science Center" was changed to "Louisiana State University Health Science Center, Shreveport".

A correction was made to <a href="/video/51956">Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats</a>. The institution information was updated.

Erratum: Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

뇌졸중은 미국에서 사망의 세 번째 주요 원인이지만, 급성 뇌졸중의 치료 옵션이 제한 남아있다. 현재, 혈전을 용해하는 재조합 조직 플라스 미노 겐 활성제 (TPA)의 정맥 주입은 급성 허혈성 뇌졸중에 대한 가장 효과적인 치료법이다. 그러나, tPA의 사용은 좁은 치료 창이과 뇌출혈의 위험 증가에 의해 제한됩니다. 따라서 혈전 용해 연구에 적합한 행정의 모델을 긴급하게 필요합니다. 중대 뇌동맥 (MCA)는 가장 자주 인간 스트로크에 가려 동맥이다. 이 동맥에 초점을 맞춘, 허혈성 뇌졸중의 여러 동물 모델이 설정되어있는 것. 현재, MCA를 폐색에 의해 쥐 초점 허혈 모델의 두 가지 주요 유형이 개발되어 있습니다 : 봉합 MCAO 모델과 전성 MCAO 모델. 관내 봉합 MCAO 기법을 통해 모델 널리기구 구동 스트로크 연구에 사용되어 왔지만, 이러한 봉합 모델 몰라인간의 스트로크의 80 %까지로 모방 인간의 스트로크는, 혈전이나 색전에 의해 발생합니다. 그러나, 혈액 응고를 사용하여 색 전성 뇌졸중 모델은 밀접하게 인간의 스트로크를 모방하고 혈전 용해 연구에 적합한 것으로 간주됩니다. 이 전성 모델은 1992 년에 처음 Overgaard 등. 1 쥐에서 개발 및 추가 장 등을 특징으로했다. 1,997 두와 디 나폴리 등에 의해. 2,006 3. 전성 MCAO 증가 주목을 받았다 있지만, 직면 한 기술적 문제가 많은 실험실에 의해. 이 문서에서는, 우리는 MCA 영토 내에서 예측 경색을 개발할 수 있습니다 성인 쥐에서 동종 혈액 응고와 색전 MCAO을 생산하기위한 표준 방법을 보여줍니다. 이 문서에 제시된 기술은 연구자 뇌졸중 연구를위한이 모델을 설정하기위한 기술적 인 문제를 극복하는 데 도움이됩니다.

<table><tbody><tr><td>rh-tPA</td><td>Chemical</td><td>Genentech</td><td></td></tr><tr><td>2,3,5-triphenyltetrazolium chloride</td><td>Chemical</td><td>Sigma</td><td>T8877</td></tr><tr><td>Anesthesia vaporizer</td><td>Equipment</td><td>Soma Technology</td><td>Drager Vapor 19.1&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Rechargeable high speed micro drill</td><td>Equipment</td><td>Fine Science Tools</td><td>18000-17</td></tr><tr><td>Curved scissors</td><td>Equipment</td><td>Fine Science Tools</td><td>14117-14</td></tr><tr><td>Dumont forceps (Medical #7)</td><td>Equipment</td><td>Fine Science Tools</td><td>11270-20</td></tr><tr><td>Dumont forceps (Medical #5)</td><td>Equipment</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-35</td></tr><tr><td>Vannas-style spring scissors</td><td>Equipment</td><td>Fine Science Tools</td><td>15000-03</td></tr><tr><td>Veterinary recovery chamber&amp;nbsp;</td><td>Equipment&amp;nbsp;</td><td>Peco Services&amp;nbsp;</td><td>V1200&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Genie plus syringe pump</td><td>Equipment</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td></td></tr><tr><td>Rat brain matrix</td><td>Equipment</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>RBMA-310C</td></tr><tr><td>Digital caliper&amp;nbsp;</td><td>Equipment</td><td>World Precision Instruments</td><td>501601</td></tr><tr><td>Dissecting microscope</td><td>Equipment</td><td>World Precision Instruments</td><td>PZMTIII-BS-LWD</td></tr><tr><td>Hamilton syringe</td><td>Equipment</td><td>Hamilton</td><td>model 710</td></tr><tr><td>Homeothermic blanket control unit</td><td>Equipment</td><td>Harvard Apparatus</td><td></td></tr><tr><td>Electric clipper</td><td>Equipment</td><td>Braintree Scientific</td><td>CLP-9931</td></tr><tr><td>Veterinary electrosurgical unit</td><td>Equipment</td><td>MACAN Manufacturing Company</td><td>MV-9</td></tr><tr><td>Blood flowmeter</td><td>Equipment</td><td>Adinstruments</td><td></td></tr><tr><td>PowerLab 4/30</td><td>Equipment</td><td>Adinstruments</td><td></td></tr><tr><td>LabChart 7.2</td><td>software</td><td>Adinstruments</td><td></td></tr><tr><td>1 ml syringe</td><td>Consumable</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>309659</td></tr><tr><td>23 G needle</td><td>Consumable</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>305143</td></tr><tr><td>30 G needle</td><td>Consumable</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>305106</td></tr><tr><td>PE-50 tubing</td><td>Consumable</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>427517</td></tr><tr><td>PE-10 tubing</td><td>Consumable</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>427400</td></tr><tr><td>6-0 Silk suture</td><td>Consumable</td><td>Harvard apparatus</td><td>723287</td></tr><tr><td>5-0 Silk suture</td><td>Consumable</td><td>Harvard Apparatus</td><td>517607</td></tr></tbody></table>

embolic middle cerebral artery occlusion (mcao) for ischemic stroke with homologous blood clots in rats

재조합 조직 플라스 미노 겐 활성제 (TPA)의 사용과 임상, 혈전 용해 치료는 급성 허혈성 뇌졸중의 가장 효과적인 치료 남아있다. 그러나, tPA의 사용은 좁은 치료 윈도우 의해 출혈성 변형의 위험 증가에 의해 제한된다. 허혈성 뇌졸중의 치료를위한 새로운 혈전 용해제 및 전략을 연구하기 적합한 뇌졸중 모델을 개발하기위한 시급한 필요성이있다. 관내 봉합 MCAO 및 색전 MCAO : 현재, 허혈성 뇌졸중 모델의 두 가지 주요 유형은 쥐와 생쥐에서 개발되었다. 관내 봉합 MCAO 기법을 통해 모델 널리기구 구동 스트로크 연구에 사용되어 왔지만, 이러한 봉합 모델 임상 상황을 모방하지 혈전 및 연구에 적합하지 않는다. 이러한 모델 중 전성 MCAO 모델은 밀접하게 인간의 허혈성 뇌졸중을 모방하고 혈전 용해 치료의 임상 연구에 적합하다. 이 전성 모델은 첫째 OV에 의해 쥐에서 개발 된1992 년. 등 1 ergaard 또한 장 등이 특징. 1,997 2. 전성 MCAO가 관심을 증가 얻고있다하더라도, 많은 실험실에서 직면 기술적 인 문제가 있습니다. 혈전 용해 연구에 대한 증가하는 요구를 충족하기 위해, 우리는 MCA 영토 내에서 예측 경색 볼륨을 개발할 수 쥐에 전성 MCAO의 높은 재현성 모델을 제시한다. 요컨대, 변성 PE-50 튜브 부드럽게 MCA의 원점에 도달 카테터의 팁까지 내 경동맥 (ICA)의 내강에 외부 경동맥 (ECA)에서 전진된다. 카테터를 통해 하나의 동종 혈액 응고는 MCA의 기원에 배치됩니다. MCA 폐색의 성공을 식별하는 지역 뇌 혈류량을 모니터링하고, 신경 학적 결손 및 경색 부피를 측정 하였다. 이 논문에서 제시 한 기술은 뇌졸중 연구를위한 모델을 구축하기위한 기술적 인 문제를 극복하기 위해 수사관을 도움이 될 것이다. &lt;/ P&gt;

레이저 도플러 flowmetry (LDF)는 뇌허혈 6,7의 유도시 rCBF를 모니터링하는 데 사용 하였다. 우리 연구실을 포함한 많은 실험실이 성공 MCA 폐색 동물을 식별 할 수 rCBF를 사용하고 있지만,베이스 라인의 임계 값은 측정 사이트에 관련된 실험실 사이에서 변화. LDF의 프로브는 2mm의 후방에 배치되고, 이전에 설명한 바와 같이 6 5mm는 브레 그마 측방. rCBF 0에서 모니터 된 5, 15, 30, 60, 90, 및 120...

Watch this Scientific Journal Video about Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats at JoVE.com

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

In this paper, we demonstrate a standard method for producing an embolic middle cerebral artery occlusion with homologous blood clots (fibrin-rich) in adult rat. This model closely mimics human ischemic stroke and is suitable for preclinical study of thrombolytic therapy for ischemic stroke.

흰쥐의 동종 혈액 혈전과 허혈성 뇌졸중에 대한 전성 중간 대뇌 동맥 폐색 (MCAO)

Clinically, thrombolytic therapy with use of recombinant tissue plasminogen activator (tPA) remains the most effective treatment for acute ischemic ...

embolic-middle-cerebral-artery-occlusion-mcao-for-ischemic-stroke

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Medicine

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

26.9K 조회수.  Louisiana State University Health Science Center, Shreveport. In this paper, we demonstrate a standard method for producing an embolic middle cerebral artery occlusion with homologous blood clots (fibrin-rich) in adult rat. This model closely mimics human ischemic stroke and is suitable for preclinical study of thrombolytic therapy for ischemic stroke. 

비디오: Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable clinical state; in the development of animal models of focal ischemia, however, achieving reproducibility of experimentally induced infarct volume is essential. The rat is a widely used animal model for stroke due to its relatively low animal husbandry costs and to the similarity of its cranial circulation to that of humans2,3. In humans, the middle cerebral artery (MCA) is most commonly affected in stroke syndromes and multiple methods of MCA occlusion (MCAO) have been described to mimic this clinical syndrome in animal models. Because recanalization commonly occurs following an acute stroke in the human, reperfusion after a period of occlusion has been included in many of these models. In this video, we demonstrate the transient endovascular suture MCAO model in the spontaneously hypertensive rat (SHR). A filament with a silicon tip coating is placed intraluminally at the MCA origin for 60 minutes, followed by reperfusion. Note that the optimal occlusion period may vary in other rat strains, such as Wistar or Sprague-Dawley. Several behavioral indicators of stroke in the rat are shown. Focal ischemia is confirmed using T2-weighted magnetic resonance images and by staining brain sections with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) 24 hours after MCAO.

Surgical induction of ischemic brain damage in the rat is a widely used model for stroke research. Here we demonstrate the induction of focal cerebral ischemia by occlusion of the middle cerebral artery. Visualization of the resulting infarct by histological staining and magnetic resonance imaging is also shown.

쥐 중간 대뇌 동맥의 폐색의 Endovascular 봉합사에 의해 초점 대뇌 국소 빈혈 모델

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable ...

연구

신경과학

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the brain (ischemic stroke) 2. Since most ischemic strokes (~80%) occur in the territory of middle cerebral artery (MCA) 3, many animal stroke models that have been developed have focused on this artery. The intraluminal monofilament model of middle cerebral artery occlusion (MCAO) involves the insertion of a surgical filament into the external carotid artery and threading it forward into the internal carotid artery (ICA) until the tip occludes the origin of the MCA, resulting in a cessation of blood flow and subsequent brain infarction in the MCA territory 4. The technique can be used to model permanent or transient occlusion 5. If the suture is removed after a certain interval (30 min, 1 h, or 2 h), reperfusion is achieved (transient MCAO); if the filament is left in place (24 h) the procedure is suitable as a model of permanent MCAO. This technique does not require craniectomy, a neurosurgical procedure to remove a portion of skull, which may affect intracranial pressure and temperature 6. It has become the most frequently used method to mimic permanent and transient focal cerebral ischemia in rats and mice 7,8. To evaluate the extent of cerebral infarction, we stain brain slices with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) to identify ischemic brain tissue 9. In this video, we demonstrate the MCAO method and the determination of infarct size by TTC staining.

We demonstrate in the video a method for producing a middle cerebral artery occlusion in adult mice using an intraluminal monofilament. We also show how to evaluate the extent of cerebral infarction by 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) staining.

중간 대뇌 동맥 폐색의 마우스 모델

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

의학

Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, obesity and diabetes. Accordingly, when evaluating therapies for stroke in animals, it is important to select a model with excellent face validity. Ischemic stroke accounts for 80% of all strokes, and the majority of these occur in the territory of the middle cerebral artery (MCA), often inducing infarcts that affect the sensorimotor cortex, causing persistent plegia or paresis on the contralateral side of the body. We demonstrate in this video a method for producing ischemic stroke in elderly rats, which causes sustained sensorimotor disability and substantial cortical infarcts. Specifically, we induce permanent distal middle cerebral artery occlusion (MCAO) in elderly female rats by using diathermy forceps to occlude a short segment of this artery. The carotid artery on the ipsilateral side to the lesion was then permanently occluded and the contralateral carotid artery was transiently occluded for 60 min. We measure the infarct size using structural T2-weighted magnetic resonance imaging (MRI) at 24 hr and 8 weeks after stroke. In this study, the mean infarct volume was 4.5% &#177; 2.0% (standard deviation) of the ipsilateral hemisphere at 24 hr (corrected for brain swelling using Gerriet&#8217;s equation, n = 5). This model is feasible and clinically relevant as it permits the induction of sustained sensorimotor deficits, which is important for the elucidation of pathophysiological mechanisms and novel treatments.

Here we present a protocol to produce permanent distal middle cerebral artery occlusion in elderly female rats with simultaneous occlusion of the carotid arteries to generate large cortical infarcts and sustained deficits. We show confirmation of the lesion size using structural MRI at 24 hr and 8 weeks after stroke.

세 쥐의 경동맥 폐색으로 영구 말초 중간 대뇌을 수행하면 두피 허혈 지속적인 장애를 연구하는

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, ...

Induction of Ischemic Stroke and Ischemia-reperfusion in Mice Using the Middle Artery Occlusion Technique and Visualization of Infarct Area

Cerebrovascular disease is highly prevalent in the global population and encompasses several types of conditions, including stroke. To study the impact of stroke on tissue injury and to evaluate the effectiveness of therapeutic interventions, several experimental models in a variety of species were developed. They include complete global cerebral ischemia, incomplete global ischemia, focal cerebral ischemia, and multifocal cerebral ischemia. The model described in this protocol is based on the middle cerebral artery occlusion (MCAO) and is related to the focal ischemia category. This technique produces consistent focal ischemia in a strictly defined region of the hemisphere and is less invasive than other methods. The procedure described is performed on mice, given the availability of several genetic variants and the high number of tests standardized for mice to aid in the behavioral and neurodeficit evaluation.

We describe a mouse model of stroke induced by the occlusion of the middle cerebral artery using a silicone coated suture. The protocol can be applied to induce permanent occlusion or a temporary ischemia, followed by reperfusion.

경색 지역의 중간 동맥 폐색 기술 및 시각화를 사용하여 마우스의 허혈성 뇌졸중 및 허혈 - 재관류 유도

Cerebrovascular disease is highly prevalent in the global population and encompasses several types of conditions, including stroke. To study the impact of ...

Middle Cerebral Artery Occlusion Allowing Reperfusion via Common Carotid Artery Repair in Mice

The ischemic stroke is a major cause of adult long-term disability and death worldwide. The current treatments available are limited, with only tissue plasminogen activator (tPA) as an approved drug treatment to target ischemic strokes. Current research in the field of ischemic stroke focuses on better understanding the pathophysiology of stroke, to develop and investigate novel pharmaceutical targets. Reliable experimental stroke models are crucial for the progression of potential treatments. The middle cerebral artery occlusion (MCAO) model is clinically relevant and the most frequently used surgical model of ischemic stroke in rodents. However, the outcomes of this model, such as lesion volume, are associated with high levels of variability, particularly in mice. The alternative MCAO model described here allows the reperfusion of the common carotid artery (CCA) and the increased perfusion of the middle cerebral artery (MCA) territory, using a tissue pad with fibrinogen-based sealant to repair the vessel, and the improved welfare of the mice by avoiding external carotid artery (ECA) ligation. This reduces the reliance on the Circle of Willis, which is known to be highly anatomically variable in mice. Representative data show that using this alternative surgical approach decreases the variability in lesion volumes between the traditional MCAO approach and the alternative approach described here.

Intraluminal filament occlusion of the middle cerebral artery is the most frequently used in vivo model of experimental stroke in rodents. An alternative surgical approach to allow common carotid artery repair is performed here, which allows the reperfusion of the common carotid artery and a full reperfusion to the middle cerebral artery territory.

쥐에 있는 일반적인 경 동맥 수리 통해 Reperfusion를 허용 하는 중간 대뇌 동맥 폐색

The ischemic stroke is a major cause of adult long-term disability and death worldwide. The current treatments available are limited, with only tissue ...

경두개 중뇌동맥 폐색 마우스 모델 구축

A Modified Transcranial Middle Cerebral Artery Occlusion Model to Study Stroke Outcomes in Aged Mice

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. The filament MCAO model typically exhibits a massive cerebral infarction in C57Bl/6 mice that sometimes includes brain tissue in the territory supplied by the posterior cerebral artery, which is largely due to a high incidence of posterior communicating artery atresia. This phenomenon is considered a major contributor to the high mortality rate observed in C57Bl/6 mice during long-term stroke recovery after filament MCAO. Thus, many chronic stroke studies exploit distal MCAO models. However, these models usually produce infarction only in the cortex area, and consequently, the assessment of post-stroke neurologic deficits could be a challenge. This study has established a modified transcranial MCAO model in which the MCA at the trunk is partially occluded either permanently or transiently via a small cranial window. Since the occlusion location is relatively proximal to the origin of the MCA, this model generates brain damage in both the cortex and striatum. Extensive characterization of this model has demonstrated an excellent long-term survival rate, even in aged mice, as well as readily detectable neurologic deficits. Therefore, the MCAO mouse model described here represents a valuable tool for experimental stroke research.

저자 스포트라이트: 뇌졸중 연구의 혁신적인 기법과 미래 방향 

This protocol demonstrates a unique mouse stroke model with a medium-sized infarct and an excellent survival rate. This model allows preclinical stroke researchers to extend the ischemia duration, use aged mice, and assess long-term functional outcomes.

늙은 쥐의 뇌졸중 결과를 연구하기 위해 수정된 경두개 중뇌동맥 폐색 모델

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. ...

허혈성 뇌졸중 마우스 모델을 개발하기 위한 원위 중동맥의 폐색

Induction of Acute Ischemic Stroke in Mice Using the Distal Middle Artery Occlusion Technique

Ischemic stroke remains the predominant cause of mortality and functional impairment among the adult populations globally. Only a minority of ischemic stroke patients are eligible to receive intravascular thrombolysis or mechanical thrombectomy therapy within the optimal time window. Among those stroke survivors, around two-thirds suffer neurological dysfunctions over an extended period. Establishing a stable and repeatable experimental ischemic stroke model is extremely significant for further investigating the pathophysiological mechanisms and developing effective therapeutic strategies for ischemic stroke. The middle cerebral artery (MCA) represents the predominant location of ischemic stroke in humans, with the MCA occlusion serving as the frequently employed model of focal cerebral ischemia. In this protocol, we describe the methodology of establishing the distal MCA occlusion (dMCAO) model through transcranial electrocoagulation in C57BL/6 mice. Since the occlusion site is located at the cortical branch of MCA, this model generates a moderate infarcted lesion restricted to the cortex. Neurological behavioral and histopathological characterization have demonstrated visible motor dysfunction, neuron degeneration, and pronounced activation of microglia and astrocytes in this model. Thus, this dMCAO mouse model provides a valuable tool for investigating the ischemiastroke and worth of popularization.

저자 스포트라이트: 뇌졸중 연구를 위해 마우스에서 신뢰할 수 있는 원위 MCA 폐색 모델 확립

Here, we present a protocol to establish a distal middle cerebral artery occlusion (dMCAO) model through transcranial electrocoagulation in C57BL/6J mice and evaluate the subsequent neurological behavior and histopathological features.

원위 중동맥 폐색 기법을 사용한 마우스의 급성 허혈성 뇌졸중 유도

Ischemic stroke remains the predominant cause of mortality and functional impairment among the adult populations globally. Only a minority of ischemic ...

흰쥐의 동종 혈액 혈전과 허혈성 뇌졸중에 대한 전성 중간 대뇌 동맥 폐색 (MCAO)

요약

더 많은 비디오 탐색

이 비디오의 챕터

쥐 중간 대뇌 동맥의 폐색의 Endovascular 봉합사에 의해 초점 대뇌 국소 빈혈 모델

중간 대뇌 동맥 폐색의 마우스 모델

세 쥐의 경동맥 폐색으로 영구 말초 중간 대뇌을 수행하면 두피 허혈 지속적인 장애를 연구하는

경색 지역의 중간 동맥 폐색 기술 및 시각화를 사용하여 마우스의 허혈성 뇌졸중 및 허혈 - 재관류 유도

쥐에 있는 일반적인 경 동맥 수리 통해 Reperfusion를 허용 하는 중간 대뇌 동맥 폐색

늙은 쥐의 뇌졸중 결과를 연구하기 위해 수정된 경두개 중뇌동맥 폐색 모델

늙은 쥐의 뇌졸중 결과를 연구하기 위해 수정된 경두개 중뇌동맥 폐색 모델

늙은 쥐의 뇌졸중 결과를 연구하기 위해 수정된 경두개 중뇌동맥 폐색 모델

원위 중동맥 폐색 기법을 사용한 마우스의 급성 허혈성 뇌졸중 유도

원위 중동맥 폐색 기법을 사용한 마우스의 급성 허혈성 뇌졸중 유도