이 작품은 건강 보조금 R01 CA140257-01의 국립 연구소의 국립 암 연구소에 의해 지원됩니다.

<html> 주 : 동의는 환자로부터 얻은 것입니다. 또한,이 연구는 인간의 복지에 대한 모든, 기관, 국가, 국제 가이드 라인을 준수하여 수행되었습니다. 1. 컴퓨터 준비 <ol><li> 에 노트북을 켜고 DVI2USB 캡처 카드에서 USB를 연결합니다. </li></ol> 2. 모니터를 준비 <ol><li> 내시경 오히려 컴퓨터보다이 화면에서 동영상을 볼 수 있도록 모니터하고 떠있을 위해 DVI 케이블을 연결합니다. </li><li> 서 모니터가 켜져 있고 DVI로 설정되어 있는지 확인합니다. </li><li> 올림푸스 시스템의 뒷면에 떠있을 연결 후 벽에 장착 된 대형 모니터에 이미지를 볼 수있는 올림푸스 시스템의 입력 버튼을 누릅니다. </li></ol> 3. 레이저 다이오드 드라이버 설정 <ol><li> 확인 레이저 다이오드 드라이버가 OFF입니다 확인하십시오. 영상이 수행되기 전에 그것은 단지 몇 분에 전원을 ON으로해야합니다. </li></ol>e_title &quot;&gt; 4. 전원 스트립에게 <ol><li> 전원 스트립에 노트북, 프로세서, 레이저 다이오드 드라이버, DVI 분배기 및 Epiphan의 캡처 카드에 연결합니다. </li></ol> 5. 노트북 바탕 화면에 MDE 와이드 필드를 실행 <ol><li> &#39;현재 폴더&#39;를 기록했다. </li><li> 환자 수와 글자를 눌러 &#39;환자 폴더 만들기&#39;를 입력합니다. </li></ol> 6. 모자를 준비하고 필터 <ol><li> 필터를 취급 할 때는 항상 필터에 기름 찌꺼기의 전송을 최소화하기 위해 장갑과 킴 와이프를 사용합니다. 거즈 나 알코올 면봉은 영상을 방해 할 수있는 섬유를 남겨 둘 수 있습니다. </li><li> 필터 캡을 규정 할 수있는 플랫폼을 만드는 테이블에 몇 킴 와이프를 놓습니다. 이 지역은 소독 절차를 수행하는 동안 위장에 쉽게 액세스 할 수 있어야합니다. </li><li> 필터와 모자를 놓고 절차를 수행하는 동안 사용하기 위해 주변 킴 와이프를 유지합니다. </li></ol> 7. 환자 준비 <ol><li> 사용에 동의 환자엔도 스위트 룸에 도착하기 전에 VFI와 proflavine 염료. </li><li> 위 내시경 검사 절차에 대한 위치 환자. </li><li> 멀티 스펙트럼 디지털 현미경 (MDM) 7을 사용하여 표준 백색광 영상을 진행합니다. </li></ol> 8. Proflavine를 삽입하고 스프레이 <ol><li> 백색광 영상으로 마무리 한 후, 삽입하고 그 조직을 통해 proflavine 염료를 스프레이. 1~5mm는 바렛 조직의 지역에 따라 충분합니다. 이 단계에서 proflavine 염료를 분사하여, (적어도 1 분) 충분한 시간은 VFI 전에 충분한 조직 흡수를 위해 제공됩니다. FDA (IND 102217)에서 조사 가능한 새로운 약 응용 프로그램에 적용됩니다 Proflavine는 곧 신청 후 세포 핵 내에서 집중 형광 조영제이다. 레이저 다이오드의 팬이 조직에 반사 된 빛이 전체 선의 morpholo을 평가하기 위하여 내시경을 가능하게 할 때 VFI 개별 세포 형태를 해결할 수는 없지만GY. </li></ol> 9. 레이저 다이오드를 켜고 <ol><li> 레이저 다이오드의 전원을 켭니다. 영상이 시작되기 전에이 적어도 2 분 작업을 수행합니다. </li></ol> 10. VFI에 내시경을 준비 <ol><li> 완전히 내시경을 철회. </li><li> 이전 내시경 처리에, 조수 장갑 두 쌍을 가지고 있는지 확인합니다. </li><li> 내시경은 위의 설명 된 킴 와이프 ​​플랫폼 옆에있는 조수 앞에 내시경을 보유하고 있습니다. </li><li> 킴 와이프로, 조수 내시경의 끝 부분을 청소합니다. 부드럽게 표면을 청소하고 또한 쉽게 처리하기위한 내시경의 측면을 따라 몇 센티미터를 청소해야합니다. </li><li> 청소 한 후, 장갑의 외부 쌍의 보조 처분이있다. </li><li> 보조 필터를 장착했다. 내시경에서의 보완 구멍에 필터의 짧은 원통형 돌기를 삽입합니다. 프로세스를 돕기 위해 수직 내시경 유지. </li><li> 여과 및 개최어 대신에, 필터 위에 뚜껑을 밀어 넣고 내시경의 팁 위에 아래로 누르십시오. 뚜껑은 안전하고 내시경을 세척 가장자리에 완전히에 밀어 있는지 확인합니다. 캡의 입술이 약간 내시경의 팁을 통해 확장해야합니다. 마지막으로, 반드시 필터 자리에 여전히하고 내시경의 끝으로 세척하십시오. </li></ol> 11. 내시경 식도로 돌아 가기 및 이미지 삽입 12. 식도의 내시경 제거 <ol><li> 킴 와이프를 사용하여주의 깊게 모자를 당기고 내시경을 필터링 할 수 있습니다. 뚜껑을 던져 버리고 다음 경우에 필터를 청소합니다. </li></ol> 13. 필터를 청소 <ol><li> 부드럽게 킴 와이프로 필터를 청소합니다. </li><li> Cydex와 작은 컵을 채우고 12 분 동안 필터 잠수함. 모든 몇 분은 필터를 뒤집으십시오. </li><li> 부드럽게 킴 와이프로 필터를 청소합니다. </li><li> 멸균이 시간을 필터 잠수함. 5 분 후, 분출 B를 사용ottle 가볍게 필터를 통해 멸균 물을 스프레이. </li><li> 몇 킴 와이프에 필터를 배치하고 건조 할 수 있습니다. </li><li> 킴 와이프 ​​사이에있는 저장 용기에 한 번 건조 장소. </li></ol>

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	<li>Modiano, N., Gerson, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Barrett's+Esophagus:+Incidence,+etiology,+pathophysiology,+prevention+and+treatment.">Barrett's Esophagus: Incidence, etiology, pathophysiology, prevention and treatment.</a> Therapeutics and Clinical Risk Management. 3, 1035-1145 (2007).</li><li>Brown, L. M., Devesa, S. S., Chow, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+of+Adenocarcinoma+of+the+esophagus+among+white+Americans+by+sex,+stage,+and+age.">Incidence of Adenocarcinoma of the esophagus among white Americans by sex, stage, and age.</a> Journal of the National Cancer Institute. 100, 1184-1187 (2008).</li><li>Siegel, R., Naishadham, D., Ahmedin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+Statistics,+2012.">Cancer Statistics, 2012.</a> A Cancer Journal for Clinicians. 62, 10-29 (2012).</li><li>Vieth, M., Ell, C., Gossner, L., May, A., Stolte, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histological+analysis+of+endoscopic+resection+specimens+from+326+patients+with+Barrett's+esophagus+and+early+neoplasia.">Histological analysis of endoscopic resection specimens from 326 patients with Barrett's esophagus and early neoplasia.</a> Endoscopy. 36, 776-781 (2004).</li><li>Pohl, H., Rosch, T., Vieth, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Miniprobe+confocal+laser+microscopy+for+the+detection+of+invisible+neoplasia+in+patients+with+Barrett's+oesophagus.">Miniprobe confocal laser microscopy for the detection of invisible neoplasia in patients with Barrett's oesophagus.</a> Gut. 57, 1648-1653 (2008).</li><li>Thekkek, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modular+video+endoscopy+for+in+vivo+cross-polarized+and+vital-dye+fluorescence+imaging+of+Barrett's-associated+neoplasia.">Modular video endoscopy for in vivo cross-polarized and vital-dye fluorescence imaging of Barrett's-associated neoplasia.</a> Journal of Biomedical Optics. 18, 026007 (2013).</li><li>Roblyer, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multispectral+optical+imaging+device+for+in+vivo+detection+of+oral+neoplasia.">Multispectral optical imaging device for in vivo detection of oral neoplasia.</a> Journal of Biomedical Optics. 13, 024019 (2008).</li><li>Egger, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biopsy+surveillance+is+still+necessary+in+patients+with+Barrett's+oesophagus+despite+new+endoscopic+imaging+techniques.">Biopsy surveillance is still necessary in patients with Barrett's oesophagus despite new endoscopic imaging techniques.</a> Gut. 52, 18-23 (2003).</li><li>Thekkek, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vital-dye+enhanced+fluorescence+imaging+of+GI+mucosa:+metaplasia,+neoplasia,+inflammation.">Vital-dye enhanced fluorescence imaging of GI mucosa: metaplasia, neoplasia, inflammation.</a> Gastrointestinal Endoscopy. 75, 877-887 (2012).</li><li>Muldoon, T. J., Anandasabapathy, S., Maru, D., Richards-Kortum, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+imaging+in+Barrett's+esophagus:+a+novel,+low-cost+endoscopic+microscope.">High-resolution imaging in Barrett's esophagus: a novel, low-cost endoscopic microscope.</a> Gastrointestinal Endoscopy. 68, 737-744 (2008).</li></ol>

공개 아무것도 없다.

양성 상피화 생은 고급 발육과 선암에서 구별 할 수 있기 때문에 표준 내시경 감시로, BE에있는 종양은 종종 8 놓친. 나은이 현재 피할 수없는 오류를 해결하기 위해 소화기를 활성화 할 도구로서 중요한 염색 강화 형광 이미징함으로써 조직 유형을 차별화 할 수있는 독특한 기능을 제공하는 조직의 선의 형태를 강조한다. 또한, 2.5 cm까지 시야를 제공하여, VFI는 의심스러운 병변이 더 유명?...

지난 40 년 동안 식도 선암 (EAC)의 빈도는 크게 1,2 증가했다; 아직 만기가 진단, 5 년 생존율은 20 % 미만 3이다. BE의 내시경 감시의 현재 표준은 EAC의 근간을 이루며, 세그먼트의 임의의 네 quandrant 집게 &#39;생검 백색광 내시경이다. 불행하게도,이 기술은 종종 표준 백색광 영상 4 차별화, 평면 미묘하고 어려울 수있는 종양이 골대를 벗어났습니다. 생체 내에서 세포의 기능을 강조하기 위해 공 초점 레이저 현미경을 사용하여 성공이되었지만, 병변은 여전히 인해보기 5의 감소 필드에 누락 될 수 있습니다. 더 촛점 microendoscopic 이미징 영역을 강조 할 수있는 &#39;다리&#39;기술을 갖는 것은 크게 도움이 될 것입니다. 따라서 타지하는 능력을 향상 향상된 레드 플래그 이미징 양상BE에있는 T와 조직 검사 초기 종양은 초기 치료 가능한 단계에서 EAC를 검출하는 수단이 될 것이며 더 효과적인 치료 이후에 개선 된 생존율을 초래할 수 있습니다. VFI는 선의 형태를 선택하고 생체 내 진단 6 개선의 희망에 원위부 식도 종양 (고급 발육 이상 및 암) 윤곽을 그리다, 외인성 국소 형광등 대비, proflavine와 고해상도 상피 영상을 결합하는 새로운 기술입니다. 곧 신청 후 세포 핵 내에서 집중 proflavine의 여기에, 형광 이미지는 내시경이 선의 형태를 시각화 할 수 있도록 공간 50 ~ 100 μM의 해상도와 2.5 cm까지 시야를 제공한다. 그 결과,이 방법은 oblitera이 종양과 BE에서, 연속, 같은 간격의 분비 및 전반적인 균일 한 형태를 가지고 고전 바렛 화생을 구별하는 소화기를 수선의 건축의 기. 여기에서 우리는 다중 분광 내시경이 새로운 기술의 프로토콜을 설명하고, 고급 발육 이상 및 암 양성 상피화 생의 형태 학적 변화를 묘사 한이 장치의 유용성을 입증하는 대표적인 결과를 제공합니다.

<table><tbody><tr><td>Filter*</td><td>Schott North America, Inc., Duryea, Pennsylvania</td><td>Not Applicable</td><td>495-nm long-pass filter</td></tr><tr><td>Halo Cap &amp;ndash; Medium*</td><td>Barrx Medical</td><td>CP-002A</td><td></td></tr><tr><td>Processor*</td><td>Pentax</td><td>EPK-i</td><td></td></tr><tr><td>Multispectral Digital Microscope**</td><td>Not Applicable</td><td>Not Applicable</td><td></td></tr><tr><td>Kimwipes</td><td>Kimberly-Clark</td><td>KimTech Science</td><td>S-8115</td></tr><tr><td>Cidex</td><td>Advanced Sterilization Products&amp;nbsp;</td><td>CIDEX OPA Solution</td><td></td></tr><tr><td>Proflavine hemisulfate (0.01% w/v)</td><td></td><td></td><td>FDA (IND 102,217)</td></tr><tr><td>Laser Diode*</td><td>Nichia Corporation</td><td>Not Applicable</td><td>455-nm</td></tr><tr><td>Image Capture*</td><td>Labview</td><td>Not Applicable</td><td></td></tr><tr><td>Spray Catheter</td><td>Olympus</td><td>Not Applicable</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">*Equipment specifics within Reference 6. **Equipment specifics within Reference 7</td></tr></tbody></table>

diagnosis of neoplasia in barrett&#8217;s esophagus using vital-dye enhanced fluorescence imaging

두 조직 유형이 평평하고 혼자 백색광 영상과 구별 할 수있는 생체 내 종양에서 바렛 식도 (BE)에 양성 상피화 생을 구별 할 수있는 능력은 어려운 남아있다. 그 결과, 선의 구조를 강조 양상은 원위 식도 양성 상피 세포에서 종양을 구별하는 것이 유용 할 것이다. VFI 양성 상피 세포에서 고 등급의 이형성증과 암을 묘사하는 외인성 국소 형광 조영제를 사용하는 새로운 기술입니다. 특히, 형광 이미지는 내시경이 선의 형태를 시각화 할 수 있도록 공간 50 ~ 100 μM의 해상도와 2.5 cm까지 시야를 제공한다. 여기에, 고전 바렛 상피화 생은 연속, 같은 간격의 분비 및 전반적인 균일 한 형태를 나타납니다; 대조적으로, 종양 조직은 선의 프레임 워크의 완전한 말살로 붐비는 나타납니다. 여기에 우리의 개요를 제공계측이 새로운 기술의 프로토콜을 열거합니다. VFI 의심스러운 조직의 선의 구조와 위장을 갖는 반면, 세포 이형성증이 양상으로 확인할 수 없습니다. 따라서, 하나는 형태 학적으로이 영상 기법을 통해 낮은 수준의 발육과 BE에서 바렛 화생을 구별 할 수 없습니다. 뷰의 큰 필드와 해상도의 저하를 트레이드 오프함으로써,이 촬상 시스템은 의심되는 병변을 표적으로하고 생검 빨간색 플래그 촬상 장치로서 적어도 사용될 수있다; 정확도 측정 유망 경우 아직, VFI는 식도 하부에있는 (고급 발육 이상 또는 암로 정의) 신 생물의 진단을위한 표준 영상 기술이 될 수있다.

그림 1B는 정상 편평 상피의 경계에 둘러싸인없이 발육과 고전 바렛 식도를 보여줍니다. 주변으로 있으며 파란색 화살표로 표시됩니다 아첨 편평 상피 조직을 시작으로, 둔한 형광의 균일 한 영역이없는 선의 구조로 존재한다. 녹색 화살표는 편평 상피 조직을 둘러싼 원형의 녹색 선을 나타냅니다. 이 개요는 내시경의 캡으로 인해 발생하는 이슈입니다. 중앙에 위치한 바렛 조직으로 ...

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Diagnosis of Neoplasia in Barrett&#8217;s Esophagus using Vital-dye Enhanced Fluorescence Imaging

생명 염색 강화 형광 이미징 (VFI)은 선의 형태를 선택하고 원위 식도 종양 (고급 발육 이상 및 암)을 묘사하는 외인성 국소 형광 대비 높은 해상도 상피 영상을 결합하여 생체 기술의 소설이다.

생명 염색 강화 형광 이미징을 사용하여 바렛 식도에있는 신 생물의 진단

The ability to differentiate benign metaplasia in Barrett&#8217;s Esophagus (BE) from neoplasia in vivo remains difficult as both tissue types can be flat ...

diagnosis-neoplasia-barretts-esophagus-using-vital-dye-enhanced

Universidad de Cartagena UDEC

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Disorders of the Esophagus

SCIENTISTS IN ACTION

12.0K 조회수.  Icahn School of Medicine at Mount Sinai.  생명 염색 강화 형광 이미징 (VFI)은 선의 형태를 선택하고 원위 식도 종양 (고급 발육 이상 및 암)을 묘사하는 외인성 국소 형광 대비 높은 해상도 상피 영상을 결합하여 생체 기술의 소설이다. 

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Colorectal Cancer Cell Surface Protein Profiling Using an Antibody Microarray and Fluorescence Multiplexing

The current prognosis and classification of CRC relies on staging systems that integrate histopathologic and clinical findings. However, in the majority of CRC cases, cell dysfunction is the result of numerous mutations that modify protein expression and post-translational modification1.
A number of cell surface antigens, including cluster of differentiation (CD) antigens, have been identified as potential prognostic or metastatic biomarkers in CRC. These antigens make ideal biomarkers as their expression often changes with tumour progression or interactions with other cell types, such as tumour-infiltrating lymphocytes (TILs) and tumour-associated macrophages (TAMs).
The use of immunohistochemistry (IHC) for cancer sub-classification and prognostication is well established for some tumour types2,3. However, no single &#x2018;marker&#x2019; has shown prognostic significance greater than clinico-pathological staging or gained wide acceptance for use in routine pathology reporting of all CRC cases. 
A more recent approach to prognostic stratification of disease phenotypes relies on surface protein profiles using multiple 'markers'. While expression profiling of tumours using proteomic techniques such as iTRAQ is a powerful tool for the discovery of biomarkers4, it is not optimal for routine use in diagnostic laboratories and cannot distinguish different cell types in a mixed population. In addition, large amounts of tumour tissue are required for the profiling of purified plasma membrane glycoproteins by these methods. 
In this video we described a simple method for surface proteome profiling of viable cells from disaggregated CRC samples using a DotScan CRC antibody microarray. The 122-antibody microarray consists of a standard 82-antibody region recognizing a range of lineage-specific leukocyte markers, adhesion molecules, receptors and markers of inflammation and immune response5, together with a satellite region for detection of 40 potentially prognostic markers for CRC. Cells are captured only on antibodies for which they express the corresponding antigen. The cell density per dot, determined by optical scanning, reflects the proportion of cells expressing that antigen, the level of expression of the antigen and affinity of the antibody6. 
For CRC tissue or normal intestinal mucosa, optical scans reflect the immunophenotype of mixed populations of cells. Fluorescence multiplexing can then be used to profile selected sub-populations of cells of interest captured on the array. For example, Alexa 647-anti-epithelial cell adhesion molecule (EpCAM; CD326), is a pan-epithelial differentiation antigen that was used to detect CRC cells and also epithelial cells of normal intestinal mucosa, while Phycoerythrin-anti-CD3, was used to detect infiltrating T-cells7. The DotScan CRC microarray should be the prototype for a diagnostic alternative to the anatomically-based CRC staging system.

We described a procedure for the disaggregation of colorectal cancer (CRC) to produce viable single cells, which are then captured on customized antibody microarrays recognizing surface antigens (DotScan CRC microarray). Sub-populations of cells bound to the microarray can be profiled by fluorescence multiplexing using monoclonal antibodies tagged with fluorescent dyes.

항체 Microarray 및 형광 멀티플렉싱을 사용하여 대장암 세포 표면 단백질 프로파일

The current prognosis and classification of CRC relies on staging systems that integrate histopathologic and clinical findings. However, in the majority ...

연구

면역학 및 감염병학

Elastic Staining on Paraffin-embedded Slides of pT3N0M0 Gastric Cancer Tissue

The elastic lamina, which is usually located in the sub-mesothelial layer, adjacent to the peritoneum mesothelial cells, is amphiphilic on hematoxylin and eosin (H&amp;E) staining but can be visualized through elastic staining. One of the important benefits of elastic staining is that it makes it easy to determine whether tumor cells have invaded beyond the elastic lamina. This helps in examining the extent of peritoneal surface invasion, thereby distinguishing the pT3 and pT4 stages in gastrointestinal cancer. In this study, we present a protocol to identify elastic fibers in the formalin-fixed, paraffin-embedded pT3N0M0 gastric cancer tissue sections. We prepare 5-&#181;m paraffin sections fixed on slides, and then all the slides are deparaffinated and rehydrated during the staining procedure. Subsequently, all the sections are oxidized by potassium permanganate, bleached by oxalic acid, stained by elastic staining, and counterstained by Van Gieson's. Finally, we examine the effect of staining; elastic lamina is stained blue-black and collagen fibers are stained red, while the cancer cells are stained in varying shades of yellow. We also describe in detail the methods used for determining the positional relationship between cancer cells and elastic lamina. This method is simple, low-cost, and widely applicable in the identification of peritoneal surface invasion in gastrointestinal cancer because of its outstanding selectivity for elastic fibers and authentic results.

Here, we present a protocol of elastic staining to identify elastic fibers in pT3N0M0 gastric cancer tissues on formalin-fixed, paraffin-embedded sections. Subsequently, we describe a method to determine whether tumor cells invade beyond the elastic lamina.

pT3N0M0 위암 조직의 파라핀 내장 슬라이드에 탄성 염색

The elastic lamina, which is usually located in the sub-mesothelial layer, adjacent to the peritoneum mesothelial cells, is amphiphilic on hematoxylin and ...

암 연구학

In vivo Imaging of Tumor Angiogenesis using Fluorescence Confocal Videomicroscopy

Fibered confocal fluorescence in vivo imaging with a fiber optic bundle uses the same principle as fluorescent confocal microscopy. It can excite fluorescent in situ elements through the optical fibers, and then record some of the emitted photons, via the same optical fibers. The light source is a laser that sends the exciting light through an element within the fiber bundle and as it scans over the sample, recreates an image pixel by pixel. As this scan is very fast, by combining it with dedicated image processing software, images in real time with a frequency of 12 frames/sec can be obtained.
We developed a technique to quantitatively characterize capillary morphology and function, using a confocal fluorescence videomicroscopy device. The first step in our experiment was to record 5 sec movies in the four quadrants of the tumor to visualize the capillary network. All movies were processed using software (ImageCell, Mauna Kea Technology, Paris France) that performs an automated segmentation of vessels around a chosen diameter (10 &mu;m in our case). Thus, we could quantify the 'functional capillary density', which is the ratio between the total vessel area and the total area of the image. This parameter was a surrogate marker for microvascular density, usually measured using pathology tools.
The second step was to record movies of the tumor over 20 min to quantify leakage of the macromolecular contrast agent through the capillary wall into the interstitium. By measuring the ratio of signal intensity in the interstitium over that in the vessels, an 'index leakage' was obtained, acting as a surrogate marker for capillary permeability.

In vivo Imaging of Tumor Angiogenesis using Fluorescence Confocal Videomicroscopy

In this paper, we present a method to analyze tumor microvessels in vivo using dynamic contrast-enhanced fluorescence videomicroscopy. Two quantitative parameters were acquired: functional capillary density reflecting the vascularity of the tumor, and index leakage reflecting the leakiness of the endothelial wall.

형광 공 초점 Videomicroscopy를 사용하여 종양 혈관의 생체 내 이미징

Fibered confocal fluorescence in vivo imaging with a fiber optic bundle uses the same principle as fluorescent confocal microscopy. It can excite ...

의학

종양 미세환경의 다중 면역형광 및 공간 이미지 분석(Multiplex Immunofluorescence and Spatial Image Analysis of the Tumor Microenvironment)

Multiplex Immunofluorescence Combined with Spatial Image Analysis for the Clinical and Biological Assessment of the Tumor Microenvironment

The tumor microenvironment (TME) is composed of a plethora of different cell types, such as cytotoxic immune cells and immunomodulatory cells. Depending on its composition and the interactions between cancer cells and peri-tumoral cells, the TME may affect cancer progression. The characterization of tumors and their complex microenvironment could improve the understanding of cancer diseases and may help scientists and clinicians to discover new biomarkers.
We recently developed several multiplex immunofluorescence (mIF) panels based on tyramide signal amplification (TSA) for the characterization of the TME in colorectal cancer, head and neck squamous cell carcinoma, melanoma, and lung cancer. Once the staining and scanning of the corresponding panels are completed, the samples are analyzed on an image analysis software. The spatial position and the staining of each cell are then exported from this quantification software into R. We developed R scripts that allow us not only to analyze the density of each cell type in several tumor compartments (e.g. the center of the tumor, the margin of the tumor, and the stroma) but also to perform distance-based analyses between different cell types.
This particular workflow adds a spatial dimension to the classical density analysis already routinely performed for several markers. mIF analysis could allow scientists to have a better understanding of the complex interaction between cancer cells and the TME and to discover new predictive biomarkers of response to treatments, such as immune checkpoint inhibitors, and targeted therapies.

저자 스포트라이트: 종양 미세환경의 임상 및 생물학적 평가를 위한 공간 이미지 분석과 결합된 다중 면역형광  

In this article, a protocol for manual tyramide signal amplification (TSA) multiplex immunofluorescence (mIF) combined with image analysis and spatial analysis is described. This protocol can be used with formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) sections for the staining of two to six antigens per slide depending on the slide scanner available in the laboratory.

종양 미세 환경의 임상 및 생물학적 평가를 위한 공간 이미지 분석과 결합된 Multiplex Immunofluorescence

The tumor microenvironment (TME) is composed of a plethora of different cell types, such as cytotoxic immune cells and immunomodulatory cells. Depending ...

Murine Endoscopy for In Vivo Multimodal Imaging of Carcinogenesis and Assessment of Intestinal Wound Healing and Inflammation

Mouse models are widely used to study pathogenesis of human diseases and to evaluate diagnostic procedures as well as therapeutic interventions preclinically. However, valid assessment of pathological alterations often requires histological analysis, and when performed ex vivo, necessitates death of the animal. Therefore in conventional experimental settings, intra-individual follow-up examinations are rarely possible. Thus, development of murine endoscopy in live mice enables investigators for the first time to both directly visualize the gastrointestinal mucosa and also repeat the procedure to monitor for alterations. Numerous applications for in vivo murine endoscopy exist, including studying intestinal inflammation or wound healing, obtaining mucosal biopsies repeatedly, and to locally administer diagnostic or therapeutic agents using miniature injection catheters. Most recently, molecular imaging has extended diagnostic imaging modalities allowing specific detection of distinct target molecules using specific photoprobes. In conclusion, murine endoscopy has emerged as a novel cutting-edge technology for diagnostic experimental in vivo imaging and may significantly impact on preclinical research in various fields.

Murine Endoscopy for In Vivo Multimodal Imaging of Carcinogenesis and Assessment of Intestinal Wound Healing and Inflammation

Small animal imaging techniques allow serial diagnostic examinations and therapeutic interventions in vivo. Recently, the scope of applications has significantly widened and currently includes assessment of colonic tumor development, wound healing and monitoring of inflammation. This protocol illustrates these diverse potential applications of murine endoscopy.

에 대한 쥐의 내시경<em&gt; 생체</em&gt; 발암 및 소장의 평가의 멀티 모달 이미징 상처 치유 및 염증

Mouse models are widely used to study pathogenesis of human diseases and to evaluate diagnostic procedures as well as therapeutic interventions ...

Multimodal Imaging and Spectroscopy Fiber-bundle Microendoscopy Platform for Non-invasive, In Vivo Tissue Analysis

Recent fiber-bundle microendoscopy techniques enable non-invasive analysis of in vivo tissue using either imaging techniques or a combination of spectroscopy techniques. Combining imaging and spectroscopy techniques into a single optical probe may provide a more complete analysis of tissue health. In this article, two dissimilar modalities are combined, high-resolution fluorescence microendoscopy imaging and diffuse reflectance spectroscopy, into a single optical probe. High-resolution fluorescence microendoscopy imaging is a technique used to visualize apical tissue micro-architecture and, although mostly a qualitative technique, has demonstrated effective real-time differentiation between neoplastic and non-neoplastic tissue. Diffuse reflectance spectroscopy is a technique which can extract tissue physiological parameters including local hemoglobin concentration, melanin concentration, and oxygen saturation. This article describes the specifications required to construct the fiber-optic probe, how to build the instrumentation, and then demonstrates the technique on in vivo human skin. This work revealed that tissue micro-architecture, specifically apical skin keratinocytes, can be co-registered with its associated physiological parameters. The instrumentation and fiber-bundle probe presented here can be optimized as either a handheld or endoscopically-compatible device for use in a variety of organ systems. Additional clinical research is needed to test the viability of this technique for different epithelial disease states.

Multimodal Imaging and Spectroscopy Fiber-bundle Microendoscopy Platform for Non-invasive, In Vivo Tissue Analysis

The assembly and use of a multimodal microendoscope is described which can co-register superficial tissue image data with tissue physiological parameters including hemoglobin concentration, melanin concentration, and oxygen saturation. This technique can be useful for evaluating tissue structure and perfusion, and can be optimized for individual needs of the investigator.

멀티 모달 이미징 및 비 침습적에 대한 분광학 섬유 다발 Microendoscopy 플랫폼,<em&gt; 생체</em&gt; 조직 분석

Recent fiber-bundle microendoscopy techniques enable non-invasive analysis of in vivo tissue using either imaging techniques or a combination of ...

생체공학

Gastric Low-Grade Intraepithelial Neoplasia의 위험 예측 모델

Establishment and Evaluation of a Risk Prediction Model for Pathological Escalation of Gastric Low-Grade Intraepithelial Neoplasia

The study aims to explore the risk factors for pathological escalation after endoscopic surgery for gastric low-grade intraepithelial neoplasia (LGIN) and to establish and evaluate a risk prediction model for LGIN. A total of 120 patients diagnosed with gastric LGIN by biopsy and endoscopic submucosal dissection (ESD) between November 2020 and June 2022 were retrospectively analyzed. Gender, age, Helicobacter pylori (HP) infection, lesion size, lesion location, morphology, gastric mucosal congestion, nodules status, surface ulceration and erosion, and ME-observation of all patients were collected and divided into upgraded and non-upgraded groups according to the biopsy and ESD postoperative pathological diagnosis results. Independent risk factors for pathological escalation after ESD surgical treatment were screened by logistic regression analysis, and a risk prediction model was established. Among the 120 patients with gastric LGIN, 49 patients developed postoperative pathological upgrading; the rate of pathological upgrading was 40.83%. Among them, 42 patients were upgraded to high-grade intraepithelial neoplasia (HGIN), 1 case was upgraded to advanced gastric cancer, and 6 cases were upgraded to early gastric carcinoma (EGC). Univariate analysis showed that age, lesion size, gastric mucosal congestion, surface ulcers, and erosion were significantly different between the groups (p &lt; 0.05). Multivariate Logistic regression analysis revealed that age &#8805;60 years, focal length &#8805;2 cm, gastric mucosal congestion, and surface ulceration and erosion were independent risk factors for postoperative pathological escalation in patients with gastric LGIN. Final joint probability forecasting model for P = 1/[1 + e(26.515-0.161 x &#946;1-0.357 x &#946;2+0.039 x &#946;3-0.269 x &#946;4)]. Age, lesion size &#8805;2 cm, gastric mucosal congestion, and lesion surface ulceration and erosion are risk factors for postoperative pathological upgrading in patients with gastric LGIN. The risk prediction model established in this study based on risk factors has predictive value and can provide a scientific reference for the clinical treatment of patients with gastric LGIN.

저자 스포트라이트: 위장관 종양의 조기 발견 및 치료 발전

Here, we performed a systematic evaluation of patients diagnosed with gastric low-grade intraepithelial neoplasia by previous endoscopic biopsy and obtained a pathological diagnosis by complete resection of the lesion by endoscopic submucosal dissection (ESD), analyzing factors that potentially increase the risk of pathological escalation.

위 저등급 상피내 종양의 병리학적 에스컬레이션을 위한 위험 예측 모델 구축 및 평가

The study aims to explore the risk factors for pathological escalation after endoscopic surgery for gastric low-grade intraepithelial neoplasia (LGIN) and ...

생명 염색 강화 형광 이미징을 사용하여 바렛 식도에있는 신 생물의 진단

요약

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