이 작품은 혁신에 대한 캐나다 재단에 의해 부분적으로 재정 지원을하고 있습니다.

1. 시스템 준비 <ol><li> 카메라로 관찰 할 수있는 반사 재료의 캡처 볼륨을 삭제합니다. 이 운동 테스트 동안 고정 배경 마커와 혼동되는 실제 피부에 기반 마커의 가능성을 감소하고 세션의 전반적인 정확도를 향상시킵니다. </li><li> 실험실 내에서 고정 된 위치에 고정 마커의 모든 카메라를 목표로하여 카메라를 보정합니다. 알려진 거리에 위치 이동 마커를 사용하여 동적 움직임에 정적 보정을 확장합니다. 보정을 최적화하기 위해 가능한 한 캡처 볼륨의 많은을 포함해야합니다. </li><li> 환자 준비에 사용되는 모든 자료 (반사 마커, 측정 장치, 등) 구성 할 수 있습니다. 이 테스트 기간 동안 효율성을 개선하고 환자의 부담을 줄일 수 있습니다. </li></ol> 2. 환자 준비 <ol><li> 측정하기위한 관절과 몸 세그먼트 통해 가능한 한 많은 피부로 쉽게받을 수 있습니다. amoun을 최소화느슨한 피팅 의류 t과 반사 마커를 시각화 할 수있는 카메라의 기능을 방해 할 수 있습니다 의류의 모든 조각이 제한되어 있는지 확인합니다. 이것은 테이프 나 클립을 사용하여 수행 할 수 있습니다. 가능하면 마커가 피부에 직접 부착되어 있는지 확인합니다. </li><li> 마커 고정을위한 피부를 준비합니다. 면도 나 지역을 마모은 머리가 존재하거나 피부 표면이 과도하게 땀이 나 기름입니다 경우에 필요할 수 있습니다. 가닥이 알코올 또는 이와 유사한 액체를 사용하여 명확한 영역을 닦고 것이 유용 할 수 있습니다. 마커와 피부 사이의 준수를 극대화하고, 떨어지에서 마커를 방지하기 위해이 단계는 중요합니다. </li><li> 사용하도록 설정 마커를 기반으로 주요 해부학 적 랜드 마크에 대한 만져보다. 실제 랜드 마크에서 피부를 표시하면 아이콘 게재 위치에 대한 정확도를 개선하고 평가하는 동안 떨어지 마커의 경우에 필요한 정보를 제공합니다. </li><li> 에 따라 해부학 적 랜드 마크 위에 부착 반사 마커마커 세트의 규격. 대부분의 마커 세트는 낮은 다리와 상체의 다양한 해부학 적 랜드 마크를 통해 양자 배치 12-15 마커의 최소 포함됩니다. 그것은 실제 골격 운동을 다시 만들 수있는 능력이 피부를 기반 마커의 위치에 따라 달라집니다 점에 유의하는 것이 중요합니다. 사용되는 biomechanical 모델을 결정할 때 따라서 신중한 검토가 이루어져야합니다. </li><li> 필요한 경우, 중요한 anthropometric 데이터 측정을보세요. biomechanical 모델에 따라 이러한 데이터는 세그먼트 길이, 회전의 공동 센터의 위치, 그리고 biomechanics 데이터의 오프라인 프로세싱 동안 이동 구간 및 사지의 전체 관성 속성을 계산하기 위해 필요할 수 있습니다. </li></ol> 3. 모션 분석​​ 및 실시간 피드백의 인도 <ol><li> 약 3 초 지속 초기 정적 평가판을 캡처 볼륨의 중앙에있는 제목 스탠드를 갖추고 있습니다. 이 재판은 보장하기 위해 필요합니다 모든 rele원하시오 마커가 표시되어 있으며 세그먼트 방향을 계산합니다. </li><li> 데이터 수집 소프트웨어, 라벨 적절한 모든 마커와 개인의 anthropometric 특성에 맞는 템플릿을 만들을 사용합니다. 각 몸의 크기로 아이콘 위치를 일치하면 실시간 추적 및 데이터 분석을 향상시킬 수 있습니다. 이 마커 위치의 중복을 통합 할 수 있습니다 운동의 모델을 만드는 것이 중요합니다. 아이콘 가림 또는 드롭 오프가 발생 경우에 추가 마커 위치에 적절한 동적 특성을 생산하고 데이터에 중단없이 실시간으로 디스플레이를 유지하기 위해 적절한 활용 할 수있는 능력. </li><li> 초 10-30에서 지속 초기 모션 분석​​ 평가를 수행합니다. 이것은 기본 데이터를 얻기 위해 필요하며 또한 환자 결과의 피드백을 제공하는 첫 번째 메커니즘으로 사용할 수 있습니다. 관련 연구 결과에 대한 환자와의 상담 모터 리어을 지원하는 것이 중요합니다새로운 운동 패턴을 제작하면 닝이 필요합니다. </li><li> 상담자가 의도 된 운동 수정의 목적을 설명합니다. 이 biomechanical 및 임상 변형에 대한 rationales이 어떻게 주어진 병리에 고유 모두를 포함해야합니다. 치료에 의해 이동 수정의 데모는 환자로 배우는 모터를 강화합니다. 이동 수정은 일반적으로 치료 기간 동안 환자의 biomechanical 및 임상 프리젠 테이션 또는 연구 목적으로하는 경우에만 검사 할 연구 질문에 따라 결정됩니다. </li><li> 움직임 재교육 세션을 시작합니다. 러닝 머신을 사용하는 경우, 피사체가 자신의 선호하는 속도를 선택하고 정상 상태에 도달하는 데 몇 분 정도를 제공 할 수 있습니다. 이 또한 환자가 친숙하고 설정 실험, 장비를 갖춘 편안한, 그리고 프로토콜이 될 수 있습니다. </li><li> 움직임의 성능 동안 환자에게 피드백을 제공합니다. 이것은 많은 DIF의 형태를 취할 수ferent 접근 및 이들의 조합이 초기 훈련 기간 동안 유용합니다. 이러한 언어 적 피드백과 실시간 바이오 피드백으로 진행 아니라 적은 기술 방법으로 시작합니다. 실시간 바이오 피드백의 활용은 항상 한 번에 하나의 결과 변수의 최대의 명확한 표시가 포함되어야합니다. </li><li> 새로운 운동을 실천하기 위해 환자에 대한 충분한 시간을 제공합니다. 효과적인 모터 학습은 즉시 달성되지 않습니다. 대신, 새로운 운동 특성을 지속적으로 연습하면 운동을 담당하는 모터 프로그램을 재 수립을 확보에 도움이 될 것입니다. 전형적인 재교육 개입 8-10 초점을 맞춘 교육 세션, 30 및 60 분 사이에 지속적인 각이 필요할 수 있습니다. </li></ol> 4. 환자 드 - 브리핑과 후속 교육 세션 <ol><li> 환자와 세션의 중요한 발견과 결과에 대해 설명합니다. 에 초점을 중요한 요소는 성능 변화를 포함하는 소정의 움직임 modif을 준수해야합니다ication 및 수정의 근거와 중요성의 추가 설명입니다. </li><li> 환자에서 세션에 대한 의견을 구합니다. 각 환자의 환경 설정 가능성이 다른 것을 감안할 때, 그것은 특정 개인에 대한 개입의 배달을 수정해야 할 수도 있습니다. 이러한 효과를 최적화 할 조기 식별해야합니다. </li><li> 필요한 경우, 이후의 교육 세션에 대한 계획을 결정합니다. 멀티 세션 개입이 선택되어 있으면, 이후의 교육 세션은 모터 학습을 향상시키기 위해 어두운 피드백 방식을 사용해야합니다. 시간 피드백 블록 및 미래 세션에서 더 의견 사이의 낮은 전반적인 의견 및 대체를 제공합니다. </li></ol>

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	<li>Ivanenko, Y. P., Poppele, R. E., Lacquaniti, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+control+programs+and+walking.">Motor control programs and walking.</a> Neuroscientist. 12, 339-348 (2006).</li><li>Woodford, H., Price, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EMG+biofeedback+to+improve+lower+extremity+function+after+stroke.">EMG biofeedback to improve lower extremity function after stroke.</a> Cochrane Database Syst. Rev. 2007, CD004585 (2007).</li><li>Moreland, J. D., Thomson, M. A., Fuoco, A. 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L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+electromyographic+biofeedback+as+an+adjunct+to+therapeutic+exercise+in+treating+the+lower+extremities+of+hemiplegic+patients.">Evaluation of electromyographic biofeedback as an adjunct to therapeutic exercise in treating the lower extremities of hemiplegic patients.</a> Phys. Ther. 61, 886-893 (1981).</li><li>Tate, J. C., Milner, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+kinematic,+temporospatial,+and+kinetic+biofeedback+during+gait+retraining+in+patients:+a+systematic+review.">Real-time kinematic, temporospatial, and kinetic biofeedback during gait retraining in patients: a systematic review.</a> Phys. 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S., Bennell, K. L., Wrigley, T. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Feasibility+of+a+gait+retraining+strategy+for+reducing+knee+joint+loading:+Increased+trunk+lean+guided+by+real-time+biofeedback.">Feasibility of a gait retraining strategy for reducing knee joint loading: Increased trunk lean guided by real-time biofeedback.</a> J. Biomech. , (2010).</li><li>Mundermann, A., Asay, J., Mundermann, L., Andriacchi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implications+of+increased+medio-lateral+trunk+sway+for+ambulatory+mechanics.">Implications of increased medio-lateral trunk sway for ambulatory mechanics.</a> J. Biomech. 41, 165-170 (2008).</li></ol>

관심 없음 충돌이 선언 없습니다.

등 도보로 이동하는 동안 성능의 실시간 피드백을 표준 모션 분석​​ 방법에 대한 가치 부가 될 수 있습니다. 그 상대 초기에 구체적이고 개별 이동 수정에 대한 연구는 확실히 정확도와 실시간으로 원하는 수정을 생산 할 수있는 능력의 혜택을받을하지만. 환자가 이동 수정의 특정 금액을 요구하는 경우 예를 들어,이 금액은 측정 할 수 있으며, 실제 이동하는 동안 제공됩니다. 여기에 제시된 ?...

낮은 사지의 신경 근육 또는 musculoskeletal 구조에 중요한 변화 가능성이 움직임과 관련 신체 기능의 특성에 영향을 미칠 것입니다. 따라서, 물리적 기능의 향상은 재활 개입의 중요한 결과이다. 등 도보로 일반 반복적 인 움직임은 일반적으로 올바른 강도와 타이밍 1 근육을 활성화하는 데 필요한 필요한 제어 정보를 포함하는 모터 프로그램의 적용을받습니다. 이러한 모터 프로그램은 따라서 운동에 투신 한 컨트롤의 양을 줄이고 관심을 다른 높은 수준의 작업에 지불해야 허용, 운동의 automaticity을 개선 할 필요가 있습니다. 그러나, 운동의 모터 프로그램의 역할과 이러한 프로그램은 부상 또는 질병이 어려운 벤처 후 운동 성능을 변경 년에 걸쳐 정제되는 사실을 주어진. 전통적으로, 운동은 intervent 재교육이온은 새로운 정보가 새로운 진화 모터 프로그램에 통합 될 수 있도록 운동 성능의 충분한 피드백을 제공에 predicated되었습니다. , 아직 효과적인 간단한 방법은 글로벌 지침 (예, &quot;더 구부리&quot; &quot;무릎을 직선 유지&quot;)뿐만 아니라 거울이나 비디오 녹화 장치의 사용으로 시각적 인 피드백을 제공하는 메커니즘과 구두 의견이 포함되어 있습니다. 이러한 간접적 인 전략이 유용하지만, 특히 한정된 자원과 임상 설정에서, 그들은 운동 변수의 이산과 수량화 조치를 제공하는 자신의 어려움에 의해 제한됩니다. 그 결과, 의견의 추가 더 직접적인 방법으로 이러한 기술을 보완하면 가능성이 원하는 모터 재 학습을 강화합니다. 운동 특성의 분리, 객관적 결과의 피드백을 제공하는 것은 운동 retraini 동안 성능을 향상시킬 수있는 연구와 임상 사회에 많은 동의가<html> NG 개입했습니다. 예를 들어, electromyographic 바이오 피드백 장치를 사용 근육 활성화 강도의 순간 시각 또는 청각의 의견은 특히 뇌졸중 2-3, 뇌성 마비 4 또는 만성 hemiplegia 5 명에 운동의 재활에 의지가되는 것되고있다. 반면, 이동 운동학의 피드백 (공동와 세그먼트 각도)가 적은 신속하고 정확하게 이러한 결과를 평가 및 측정의 어려움으로 인해 활용 것으로 증명되었습니다. 사실, 모션 biomechanics 연구에서 눈에 띄게 기능과 임상 설정에 통합 할 시작의 양적, 실험실 기반의 분석을하지만, 모션 분석​​ 사용의 대부분은 테스트 후 오프라인 분석을 위해 예약되어 있습니다. 그러나, 6 재교육 운동의 효과를 개선하는 수단으로 보행 조치의 피드백을 제공 할 수있는 새로운 기술을 사용하는 문학 연구의 증가가 있습니다. ve_content &quot;&gt; 현재 표준 모션 분석​​ 시스템과 통합 실시간 바이오 피드백 기능의 사용에 대한 조사를 벌이고 있습니다 병리 하나는 무릎 골관절염 (OA)입니다. 최근 연구 통과 부하를 줄이기 위해 특별히 설계된 보행의 운동학의 실시간 피드백을 활용 한 외부 무릎 예증의 순간 사용 정량화 무릎 관절, -. OA의 진행 7 인정 위험 요소는 예를 들어, 연구 허벅지 각 8 트렁크 각도 9-10의 크기를 실시간으로 바이오 피드백을 활용 한 사냥 외 11를 제공했습니다. 실시간 시련을 걸어 동안 참가자의 앞 트렁크 각도의 디스플레이와는 무릎 예증의 순간 magnitudes의 동반 감소로 단일 교육 세션에서 편안한 전시 트렁크를 증가 할 수있는 능력을 보여 주었다. 반면, 바리오스 외 8 8 세션을 실시 걸음 걸이 재교육 개입은 동적 정면 비행기 무릎을 수정에 초점을한 달 개입이 기준에 비해 이후 입장시 및 각도는 무릎 예증의 순간 값에 상당한 감소를 보여 주었다. 이러한 연구와 유사한 연구, 측정, 분석 및 지속적으로 기준으로 환자의 관심 변수를 표시 할 수있는 능력에 의존하고 있습니다. 연구의이 급성장 지역 pathologies 다양한 영향을 미치는 운동의 특성과 환자의 임상 의미가 있습니다. 무릎의 골관절염 (OA)에 관련된 동적 변경의 예제를 사용하여,이 문서의 목적은 성능을 걷는 실시간 바이오 피드백을 사용하여 이동 재교육 개입을 수행하는 데 필요한 방법을 설명하는 것입니다.

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 코멘트 (선택 사항) </td></tr><tr><td> 반사 마커 </td><td> 3x3 디자인 </td><td></td><td> 12mm 직경 </td></tr><tr><td> 마커 테이프 디스크 </td><td> 할인 Disposables </td><td> TD-22 전극 목걸이, 8mm </td><td> 설계 사용은 전극 칼라로입니다 </td></tr><tr><td> 모션 분석​​ 카메라 </td><td> 모션 분석​​ 주식회사 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Biofeedtrak </td><td> 모션 분석​​ 주식회사 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> MATLAB </td><td> Mathworks </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

movement retraining using real-time feedback of performance

운동의 수정 - 몇 년 동안 연마 한 특히 운동 패턴 - 운동 성능에 관한 책임을 신경 근육 패턴의 재 조직이 필요합니다. 이 모터 학습은 모두 연구와 임상 설정에 활용 방법의 번호를 통해 개선 할 수 있습니다. 실시간 또는 이동에 따라 결과의 지식 성능 일반적으로, 구두 의견에 일반적으로 모터 학습을 instilling의 예비 수단으로 임상 적으로 사용됩니다. 상담자의 구두 지시 사항을 보완하는 데 사용, 환자의 선호도 및 학습 스타일, 시각적 인 피드백 (예 : 거울 또는 비디오의 다양한 종류의 사용을 통해) 또는 치료사 터치를 활용 고유 감각의 안내에 있습니다 따라. 사실, 의견의 이러한 형태의 조합 모터 학습과 최적화 결과를 촉진 할 수있는 임상 설정에서 다반사​​. 연구소 기반의 양적 운동분석은 건강하고 부상당한 인구의 움직임의 다양한 정확하고 객관적인 분석을 제공하기 위해 연구 설정에서 의지가되는 것이었습니다. 움직임을 캡처의 실제 메커니즘은 다를 수 있지만, 현재의 모든 모션 분석​​ 시스템은 몸 세그먼트와 관절의 움직임을 추적 할 수 및 주요 이동 패턴을 정량화하기 위해 운동의 오래된 방정식을 사용하는 능력에 의존하고 있습니다. 수집 및 처리 속도, 분석 및 움직임에 대한 설명의 제한으로 인해 전통적으로 주어진 테스트 세션의 종료 후 오프라인 발생했습니다. 본 논문은 이동 패턴 및 운동 분석 세션 동안 환자에 맞는 운동 특성의 디스플레이의 근처 순간 평가 및 정량화에 의존 표준 모션 분석 기법에 새로운 보충을 강조합니다. 결과적으로,이 소설 기법은 장점은 ove가 피드백을 전달하는 새로운 방법을 제공 할 수 있습니다연구는 현재 피드백 방법을 사용했습니다.

무릎 OA와 환자의 증가 측면 트렁크 편안한 각도에 초점을 하나의 움직임 재교육 세션에서 예는 그림 2에 표시됩니다. 성능의 구두와 거울 기반 피드백의 조합을 사용하는 훈련을 약 15 분 후, 환자는 실시간 데이터 측면 트렁크 굴곡의 양에 관한이 제공되었습니다. 이 방법으로 교육 추가 10 분 동안 계속했다. 일반 (수정되지 않은) 시험 기간 동안, 환자는 약 2 °의 편안한 측면 트렁크?...

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Movement Retraining using Real-time Feedback of Performance

부상 또는 질병에 따라 재교육 이상 운동 패턴은 물리적 재활의 핵심 구성 요소입니다. 기술의 최근 발전 결과의 근처 순간 정량화와 함께 다양한 작업 동안 운동의 정확한 평가를 허용하고 있습니다. 이 실시간으로 결함이 운동 패턴의 변형에 대한 새로운 기회를 제공합니다.

운동은 성능의 실시간 피드백을 사용하여 재교육

Any modification of movement - especially movement patterns that have been honed over a number of years - requires re-organization of the neuromuscular ...

movement-retraining-using-real-time-feedback-of-performance

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Medicine

13.2K 조회수.  University of British Columbia. 부상 또는 질병에 따라 재교육 이상 운동 패턴은 물리적 재활의 핵심 구성 요소입니다. 기술의 최근 발전 결과의 근처 순간 정량화와 함께 다양한 작업 동안 운동의 정확한 평가를 허용하고 있습니다. 이 실시간으로 결함이 운동 패턴의 변형에 대한 새로운 기회를 제공합니다.

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Evaluation of Nanoparticle Uptake in Tumors in Real Time Using Intravital Imaging

Current technologies for tumor imaging, such as ultrasound, MRI, PET and CT, are unable to yield high-resolution images for the assessment of nanoparticle uptake in tumors at the microscopic level1,2,3, highlighting the utility of a suitable xenograft model in which to perform detailed uptake analyses. Here, we use high-resolution intravital imaging to evaluate nanoparticle uptake in human tumor xenografts in a modified, shell-less chicken embryo model. The chicken embryo model is particularly well-suited for these in vivo analyses because it supports the growth of human tumors, is relatively inexpensive and does not require anesthetization or surgery 4,5. Tumor cells form fully vascularized xenografts within 7 days when implanted into the chorioallantoic membrane (CAM) 6. The resulting tumors are visualized by non-invasive real-time, high-resolution imaging that can be maintained for up to 72 hours with little impact on either the host or tumor systems. Nanoparticles with a wide range of sizes and formulations administered distal to the tumor can be visualized and quantified as they flow through the bloodstream, extravasate from leaky tumor vasculature, and accumulate at the tumor site. We describe here the analysis of nanoparticles derived from Cowpea mosaic virus (CPMV) decorated with near-infrared fluorescent dyes and/or polyethylene glycol polymers (PEG) 7, 8, 9,10,11. Upon intravenous administration, these viral nanoparticles are rapidly internalized by endothelial cells, resulting in global labeling of the vasculature both outside and within the tumor7,12. PEGylation of the viral nanoparticles increases their plasma half-life, extends their time in the circulation, and ultimately enhances their accumulation in tumors via the enhanced permeability and retention (EPR) effect 7, 10,11. The rate and extent of accumulation of nanoparticles in a tumor is measured over time using image analysis software. This technique provides a method to both visualize and quantify nanoparticle dynamics in human tumors.

We present a novel approach to quantify nanoparticle localization in the vasculature of human xenografted tumors using dynamic, real-time intravital imaging in an avian embryo model.

Intravital 이미징을 사용하여 실시간으로 종양의 Nanoparticle의 이해 평가

Current technologies for tumor imaging, such as ultrasound, MRI, PET and CT, are unable to yield high-resolution images for the assessment of nanoparticle ...

연구

의학

Real-time fMRI Biofeedback Targeting the Orbitofrontal Cortex for Contamination Anxiety

We present a method for training subjects to control activity in a region of their orbitofrontal cortex associated with contamination anxiety using biofeedback of real-time functional magnetic resonance imaging (rt-fMRI) data. Increased activity of this region is seen in relationship with contamination anxiety both in control subjects1 and in individuals with obsessive-compulsive disorder (OCD),2 a relatively common and often debilitating psychiatric disorder involving contamination anxiety. Although many brain regions have been implicated in OCD, abnormality in the orbitofrontal cortex (OFC) is one of the most consistent findings.3, 4 Furthermore, hyperactivity in the OFC has been found to correlate with OCD symptom severity5 and decreases in hyperactivity in this region have been reported to correlate with decreased symptom severity.6 Therefore, the ability to control this brain area may translate into clinical improvements in obsessive-compulsive symptoms including contamination anxiety. Biofeedback of rt-fMRI data is a new technique in which the temporal pattern of activity in a specific region (or associated with a specific distributed pattern of brain activity) in a subject's brain is provided as a feedback signal to the subject. Recent reports indicate that people are able to develop control over the activity of specific brain areas when provided with rt-fMRI biofeedback.7-12 In particular, several studies using this technique to target brain areas involved in emotion processing have reported success in training subjects to control these regions.13-18 In several cases, rt-fMRI biofeedback training has been reported to induce cognitive, emotional, or clinical changes in subjects.8, 9, 13, 19 Here we illustrate this technique as applied to the treatment of contamination anxiety in healthy subjects. This biofeedback intervention will be a valuable basic research tool: it allows researchers to perturb brain function, measure the resulting changes in brain dynamics and relate those to changes in contamination anxiety or other behavioral measures. In addition, the establishment of this method serves as a first step towards the investigation of fMRI-based biofeedback as a therapeutic intervention for OCD. Given that approximately a quarter of patients with OCD receive little benefit from the currently available forms of treatment,20-22 and that those who do benefit rarely recover completely, new approaches for treating this population are urgently needed.

Here we present a method for training people to control a brain area involved in contamination anxiety and for probing the relationship between contamination anxiety and brain connectivity patterns.

오염 불안에 대한 Orbitofrontal 접속을 타겟팅 실시간 fMRI의 생체 자기 제어 중이죠

We present a method for training subjects to control activity in a region of their orbitofrontal cortex associated with contamination anxiety using ...

MicroRNA Detection in Prostate Tumors by Quantitative Real-time PCR (qPCR)

MicroRNAs (miRNAs) are single-stranded, 18&#x2013;24 nucleotide long, non-coding RNA molecules. They are involved in virtually every cellular process including development1, apoptosis2, and cell cycle regulation3. MiRNAs are estimated to regulate the expression of 30% to 90% of human genes4 by binding to their target messenger RNAs (mRNAs)5. Widespread dysregulation of miRNAs has been reported in various diseases and cancer subtypes6. Due to their prevalence and unique structure, these small molecules are likely to be the next generation of biomarkers, therapeutic agents and/or targets.
Methods used to investigate miRNA expression include SYBR green I dye- based as well as Taqman-probe based qPCR. If miRNAs are to be effectively used in the clinical setting, it is imperative that their detection in fresh and/or archived clinical samples be accurate, reproducible, and specific. qPCR has been widely used for validating expression of miRNAs in whole genome analyses such as microarray studies7. The samples used in this protocol were from patients who underwent radical prostatectomy for clinically localized prostate cancer; however other tissues and cell lines can be substituted in. Prostate specimens were snap-frozen in liquid nitrogen after resection. Clinical variables and follow-up information for each patient were collected for subsequent analysis8.
Quantification of miRNA levels in prostate tumor samples. The main steps in qPCR analysis of tumors are: Total RNA extraction, cDNA synthesis, and detection of qPCR products using miRNA-specific primers. Total RNA, which includes mRNA, miRNA, and other small RNAs were extracted from specimens using TRIzol reagent. Qiagen's miScript System was used to synthesize cDNA and perform qPCR (Figure 1). Endogenous miRNAs are not polyadenylated, therefore during the reverse transcription process, a poly(A) polymerase polyadenylates the miRNA. The miRNA is used as a template to synthesize cDNA using oligo-dT and Reverse Transcriptase. A universal tag sequence on the 5' end of oligo-dT primers facilitates the amplification of cDNA in the PCR step. PCR product amplification is detected by the level of fluorescence emitted by SYBR Green, a dye which intercalates into double stranded DNA. Specific miRNA primers, along with a Universal Primer that binds to the universal tag sequence will amplify specific miRNA sequences. 
The miScript Primer Assays are available for over a thousand human-specific miRNAs, and hundreds of murine-specific miRNAs. Relative quantification method was used here to quantify the expression of miRNAs. To correct for variability amongst different samples, expression levels of a target miRNA is normalized to the expression levels of a reference gene. The choice of a gene on which to normalize the expression of targets is critical in relative quantification method of analysis. Examples of reference genes typically used in this capacity are the small RNAs RNU6B, RNU44, and RNU48 as they are considered to be stably expressed across most samples. In this protocol, RNU6B is used as the reference gene.

MicroRNA Detection in Prostate Tumors by Quantitative Real-time PCR qPCR

Quantitative Real Time polymerase chain reaction (qPCR) is a rapid and sensitive method to investigate the expression levels of various microRNA (miRNA) molecules in tumor samples. Using this method expression of hundreds of different miRNA molecules can be amplified, quantified, and analyzed from the same cDNA template.

정량 실시간 PCR (qPCR)에 의한 전립선 종양에 MicroRNA 감지

MicroRNAs (miRNAs) are single-stranded, 18&#x2013;24 nucleotide long, non-coding RNA molecules. They are involved in virtually every cellular process ...

Cerebrospinal Fluid MicroRNA Profiling Using Quantitative Real Time PCR

MicroRNAs (miRNAs) constitute a potent layer of gene regulation by guiding RISC to target sites located on mRNAs and, consequently, by modulating their translational repression. Changes in miRNA expression have been shown to be involved in the development of all major complex diseases. Furthermore, recent findings showed that miRNAs can be secreted to the extracellular environment and enter the bloodstream and other body fluids where they can circulate with high stability. The function of such circulating miRNAs remains largely elusive, but systematic high throughput approaches, such as miRNA profiling arrays, have lead to the identification of miRNA signatures in several pathological conditions, including neurodegenerative disorders and several types of cancers. In this context, the identification of miRNA expression profile in the cerebrospinal fluid, as reported in our recent study, makes miRNAs attractive candidates for biomarker analysis.
There are several tools available for profiling microRNAs, such as microarrays, quantitative real-time PCR (qPCR), and deep sequencing. Here, we describe a sensitive method to profile microRNAs in cerebrospinal fluids by quantitative real-time PCR. We used the Exiqon microRNA ready-to-use PCR human panels I and II V2.R, which allows detection of 742 unique human microRNAs. We performed the arrays in triplicate runs and we processed and analyzed data using the GenEx Professional 5 software.
Using this protocol, we have successfully profiled microRNAs in various types of cell lines and primary cells, CSF, plasma, and formalin-fixed paraffin-embedded tissues.

We describe a protocol of real time PCR to profile microRNAs in the cerebrospinal fluid (CSF). With the exception of RNA extraction protocols, the procedure can be extended to RNA extracted from other body fluids, cultured cells, or tissue specimens.

정량 실시간 PCR을 사용하여 뇌척수액의 마이크로 RNA 프로파일

MicroRNAs (miRNAs) constitute a potent layer of gene regulation by guiding RISC to target sites located on mRNAs and, consequently, by modulating their ...

Assessment of Ovarian Cancer Spheroid Attachment and Invasion of Mesothelial Cells in Real Time

Ovarian cancers metastasize by shedding into the peritoneal fluid and dispersing to distal sites within the peritoneum. Monolayer cultures do not accurately model the behaviors of cancer cells within a nonadherent environment, as cancer cells inherently aggregate into multicellular structures which contribute to the metastatic process by attaching to and invading the peritoneal lining to form secondary tumors. To model this important stage of ovarian cancer metastasis, multicellular aggregates, or spheroids, can be generated from established ovarian cancer cell lines maintained under nonadherent conditions. To mimic the peritoneal microenvironment encountered by tumor cells in vivo, a spheroid-mesothelial co-culture model was established in which preformed spheroids are plated on top of a human mesothelial cell monolayer, formed over an extracellular matrix barrier. Methods were then developed using a real-time cell analyzer to conduct quantitative real time measurements of the invasive capacity of different ovarian cancer cell lines grown as spheroids. This approach allows for the continuous measurement of invasion over long periods of time, which has several advantages over traditional endpoint assays and more laborious real time microscopy image analyses. In short, this method enables a rapid, determination of factors which regulate the interactions between ovarian cancer spheroid cells invading through mesothelial and matrix barriers over time.

Ovarian cancer cell invasion into the mesothelial lining of the peritoneum is a dynamic process over time. Utilizing a real time analyzer, the invasive capacity of ovarian cancer cells in a spheroid-mesothelial cell co-culture model can be quantified over prolonged time periods, providing insights into factors regulating the metastatic process.

실시간으로 중피 세포의 난소 암 회전 타원체의 부착과 침략의 평가

Ovarian cancers metastasize by shedding into the peritoneal fluid and dispersing to distal sites within the peritoneum. Monolayer cultures do not ...

Real-time Cytotoxicity Assays in Human Whole Blood

A live cell-based whole blood cytotoxicity assay (WCA) that allows access to temporal information of the overall cell cytotoxicity is developed with high-throughput cell positioning technology. The targeted tumor cell populations are first preprogrammed to immobilization into an array format, and labeled with green fluorescent cytosolic dyes. Following the cell array formation, antibody drugs are added in combination with human whole blood. Propidium iodide (PI) is then added to assess cell death. The cell array is analyzed with an automatic imaging system. While cytosolic dye labels the targeted tumor cell populations, PI labels the dead tumor cell populations. Thus, the percentage of target cancer cell killing can be quantified by calculating the number of surviving targeted cells to the number of dead targeted cells. With this method, researchers are able to access time-dependent and dose-dependent cell cytotoxicity information. Remarkably, no hazardous radiochemicals are used. The WCA presented here has been tested with lymphoma, leukemia, and solid tumor cell lines. Therefore, WCA allows researchers to assess drug efficacy in a highly relevant ex&#160;vivo condition.

The whole blood cytotoxicity assay (WCA) is a cytotoxicity assay developed by incorporating high-throughput cell positioning technology with fluorescence microscopy and automated image processing. Here, we describe how lymphoma cells treated with an anti-CD20 antibody can be analyzed real-time in human whole blood to provide quantitative cellular cytotoxicity analysis.

인간 전혈에서 실시간 세포 독성 분석 실험

A live cell-based whole blood cytotoxicity assay (WCA) that allows access to temporal information of the overall cell cytotoxicity is developed with ...

Video Movement Analysis Using Smartphones (ViMAS): A Pilot Study

The use of smartphones in clinical practice is steadily increasing with the availability of low cost/freely available &#34;apps&#34; that could be used to assess human gait. The primary aim of this manuscript is to test the concurrent validity of kinematic measures recorded by a smartphone application in comparison to a 3D motion capture system in the sagittal plane. The secondary aim was to develop a protocol for clinicians on the set up of the smartphone camera for video movement analysis.
The sagittal plane knee angle was measured during heel strike and toe off events using the smart phone app and a 3D motion-capture system in 32 healthy subjects. Three trials were performed at near (2-m) and far (4-m) smartphone camera distances. The order of the distances was randomized. Regression analysis was performed to estimate the height of the camera based on either the subject&#39;s height or leg length.
Absolute measurement errors were least during toe off (3.12 &#177; 5.44 degrees) compared to heel strike (5.81 &#177; 5.26 degrees). There were significant (p &#60; 0.05) but moderate agreements between the application and 3D motion capture measures of knee angles. There were also no significant (p &#62; 0.05) differences between the absolute measurement errors between the two camera positions. The measurement errors averaged between 3 - 5 degrees during toe off and heel strike events of the gait cycle.
The use of smartphone apps can be a useful tool in the clinic for performing gait or human movement analysis. Further studies are needed to establish the accuracy in measuring movements of the upper extremity and trunk.

Video Movement Analysis Using Smartphones ViMAS: A Pilot Study

This manuscript describes the method to test the concurrent validity of kinematic measures recorded by the smartphone application in comparison to a 3D motion capture system in the sagittal plane. This protocol will enable clinicians to set up smartphones for video capture of human movement.

비디오 운동 분석을 사용하여 스마트 폰 (ViMAS) : 파일럿 연구

The use of smartphones in clinical practice is steadily increasing with the availability of low cost/freely available &#34;apps&#34; that could be used to ...

3D Ultrasound Imaging: Fast and Cost-effective Morphometry of Musculoskeletal Tissue

The developmental goal of 3D ultrasound imaging (3DUS) is to engineer a modality to perform 3D morphological ultrasound analysis of human muscles. 3DUS images are constructed from calibrated freehand 2D B-mode ultrasound images, which are positioned into a voxel array. Ultrasound (US) imaging allows quantification of muscle size, fascicle length, and angle of pennation. These morphological variables are important determinants of muscle force and length range of force exertion. The presented protocol describes an approach to determine volume and fascicle length of m.&#160;vastus lateralis and m.&#160;gastrocnemius medialis. 3DUS facilitates standardization using 3D anatomical references. This approach provides a fast and cost-effective approach for quantifying 3D morphology in skeletal muscles. In healthcare and sports, information on the morphometry of muscles is very valuable in diagnostics and/or follow-up evaluations after treatment or training.

3D ultrasound imaging (3DUS) allows fast and cost-effective morphometry of musculoskeletal tissues. We present a protocol to measure muscle volume and fascicle length using 3DUS.

3 차원 초음파 영상: 골격 조직의 신속 하 고 비용 효율적인 Morphometry

The developmental goal of 3D ultrasound imaging (3DUS) is to engineer a modality to perform 3D morphological ultrasound analysis of human muscles. 3DUS ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any potential therapeutic approach directed against acute left ventricular (LV) dysfunction. Current imaging modalities (e.g., echocardiography and magnetic resonance imaging) have several limitations since data on LV pressure cannot directly be measured. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion could serve as a novel method for a real-time evaluation of LV function.
At the beginning of the procedure, mice were anesthetized followed by endotracheal intubation. For LV catheterization, the right carotid artery was exposed via middle-neck incision. The catheter was introduced and placed into the LV cavity. Left thoracotomy was conducted and the left main coronary artery (LCA) was ligated. To induce reperfusion, the suture was released after 45 min. Pressure-volume data was recorded at all times.
Ligation of the LCA caused a decrease in LV systolic function as evidenced by a 30% reduction in stroke volume, LV ejection fraction (EF), and cardiac output. Maximum dP/dt as a parameter for LV contractility was also significantly reduced and diastolic function was severely impaired (minimum dP/dt -40%). Reperfusion over a period of 20 min did not lead to a complete recovery of LV function.
Real-time pressure-volume analysis served as a valid procedure for monitoring cardiac function during acute myocardial infarction in mice. Maintaining stable anesthesia and a standardized surgical approach was crucial to ensure valid results. As the early phase of acute myocardial infarction is critical for morbidity and mortality, the delineated method could be beneficial for preclinical evaluation of new strategies for cardioprotection.

Acute myocardial infarction in mice induces acute but incompletely characterized changes in left ventricular (LV) function. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion serves as a novel method for a real-time evaluation of LV function.

쥐의 급성 심근 경색의 실시간 압력-볼륨 분석

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...

Bio-energetics Investigation of Candida albicans Using Real-time Extracellular Flux Analysis

Mitochondria are essential organelles for the cellular metabolism and survival. A variety of key events take place in mitochondria, such as cellular respiration, oxidative metabolism, signal transduction, and apoptosis. Consequently, mitochondrial dysfunction is reported to play an important role in the antifungal drug tolerance and virulence of pathogenic fungi. Recent data have also led to the recognition of the importance of the mitochondria as an important contributor to fungal pathogenesis. Despite the importance of the mitochondria in fungal biology, standardized methods to understand its function are poorly developed. Here, we present a procedure to study the basal oxygen consumption rate (OCR), a measure of mitochondrial respiration, and extracellular acidification rates (ECAR), a measure of glycolytic function in C. albicans strains. The method described herein can be applied to any Candidaspp. strains without the need to purify mitochondria from the intact fungal cells. Furthermore, this protocol can also be customized to screen for inhibitors of mitochondrial function in C. albicans strains.