ハイブリダイゼーション連鎖反応RNAホールマウント蛍光 蚊の嗅覚付属器における化学感覚遺伝子の in situ ハイブリダイゼーション

私たちのグループでは、蚊の化学感覚系に興味を持っています。蚊の味覚と嗅覚を標的にすることで、蚊が私たちを見つけて噛むのを止めることができることを願っています。ハイブリダイゼーション連鎖反応蛍光in situハイブリダイゼーションは最近の開発です。

この技術は、感度が高く、頑健で、複数の遺伝子ターゲットをマルチプレックス化できるため、これらの遺伝子の発現と局在をネイティブ環境内で同時に可視化することができます。特殊トランスクリプトミクスは、空間生物学の分野で用いられている最先端の手法です。この技術は数千の遺伝子を多重化することができ、これらの遺伝子の発現を同時に可視化することができます。

私たちのプロトコルは、アンテナ内のどのニューロンが50ほどの可能なイオン性受容体のいずれかを発現するかを直接視覚化することを可能にします。これは、この古典的な因子受容体がどのように行動を媒介するかについての理解を導くための基本的なロードマップを提供します。触角のような昆虫の嗅覚器官内の嗅覚ニューロンは、通常、保護キチン質の殻の中に埋もれています。

このため、これらのニューロンにおける嗅覚受容体の発現を可視化することは非常に困難です。私たちのプロトコルは、キチナーゼ処理と最先端の蛍光およびシースループロトコルを組み合わせて使用し、これらの課題を克服します。