Name: arterial pouch microsurgical bifurcation aneurysm model in the rabbit
Uploaded: 2020-05-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 11 s
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著者らは、周術期における優れた支援と技術支援についてOlgica BeslacとKay Nettelbeck氏に、長期の動物衛生の献身的な監督に対してAlessandra Bergadano(DVM、PhD)に感謝している。

すべての獣医ケアは、施設のガイドラインに従って実施され(すべての実験はスイスのベルン州動物ケアのための地方委員会(BE 108/16)によって承認されました)、理事会認定の獣医師麻酔科医の監督下で実施されました。ARRIVEガイドラインと3Rの原則は厳密に守られた17,18。
注:すべての動物を摂氏22°C(°C)の室温で飼育し、12時間(h)の明暗サイクルを維持します。毎回、水、ペレット、自由摂取干し草の食事への無料アクセスを提供します。統計解析は、ノンパラメトリックWilcoxon-Mann-Whitney-U検定を用いて実施した。確率値(p)が≤0.05であった場合、有意であると考えられた。
1. 手術前段階
<ol><li>23〜3°Cの温度を維持する静かで無菌の手術室のすぐ隣で手術を計画しているすべてのウサギの詳細な術前臨床検査±行う。<ol>
<li>各動物の体重を記録し、粘膜、毛細血管補充時間および脈拍品質を巨視的に評価する。</li>
		<li>さらに聴診器と腹部触診で心臓聴診を行う。</li>
		<li>臨床所見に基づいて、米国麻酔学会(ASA)の分類を各ウサギに帰する19。ASA Iスコアを有する動物のみを試験に含める。</li>
		<li>電気シェーバーで両方の外耳を剃り、耳介動脈と静脈の両方にプリロカイン - リドカインクリームを塗布します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>20ミリグラム(mg)/キログラム(kg)のケタミン、100mg/kgのデクスメデトミジン、0.3mg/kgのメタドンを組み合わせてシリンジを介して皮下注射(SC)してウサギを鎮静させる。</li>
	<li>各動物を少なくとも15分間邪魔しないでおきます。</li>
	<li>その後、緩いフェイスマスクを通して3リットル(l)/分(分)の補助酸素化下、パルスオキシメーターを通して安定したモニタリングを行い、左耳介中心動脈に22Gカニューレを、対側耳の耳介静脈に別の22Gカニューレを置く。</li>
	<li>手術野(頸部)を剃り、0.75%切開前後ロピバカインを皮内に注射する。次に額を剃り、小児脳波(EEG)センサーを配置する準備をします。</li>
	<li>プロポフォール1-2mg/kgを静脈内投与(IV)して全身麻酔を誘導する。その後、直ちにすべてのウサギの気管をシリコーンチューブ(内径3ミリメートル(mm))でカプノグラフィック制御下で挿管する。その後、すべてのウサギを手術室に運び、背側リカンブルに置き、チューブを小児サークルシステムに接続します。</li>
	<li>酸素中のイソフルランを介して麻酔の深化と維持を達成し、最大終末潮汐イソフルラン濃度1.3%を目標とする。</li>
	<li>気管抜管まで、臨床的および器械的モニタリング(パルス酸素濃度測定、ドップラーおよび侵襲的血圧、3誘導心電図、EEG、直腸温度モニタリング、吸入および呼気ガス)を確実に行う。</li>
	<li>水分補給を維持するには、リンゲル乳酸塩を静脈アクセスを介して5ml/kg/hの連続速度注入(CRI)で提供します。つま先のピンチを使用して、常に10分間隔で適切な麻酔を確認してください。</li>
	<li>マヌブリウム胸骨から両顎の角度にポビドンヨウ素を使用して手術野を消毒する。次に、手術野の滅菌ドレープを行う。</li>
	<li>手術中は、リドカインをCRI50マイクログラム(μg)/kg/minで、フェンタニルを3μg/kg/hで鎮痛剤に投与する。自発的または補助的な換気と許容性高カルシウム血症を適用します。手術中に少なくとも1回は動脈血ガス分析を行う。</li>
	<li>関連する低血圧(平均動脈圧<60mmHg)をノルアドレナリンで治療する。加熱パッドまたは加熱強制加温システムを使用して低体温(直腸温度≤38°C)を予防します。</li>
</ol>2. 外科的段階 – ステップI
<ol><li>マヌブリウム・スターニから顎の角度/喉頭のレベルまでの中央の皮膚切開で手術を開始します。メス、外科用はさみ、鉗子で皮膚と軟部組織を鋭く解剖します。鈍い解剖によって下皮と脂肪パッドを内側に分離する。</li>
	<li>鈍解剖により左側に胸鎖乳突筋の前上隆起部を内側に進入し、微小鉗子と外科用ハサミを用いる。</li>
	<li>巨視的に、鈍い調製を行い、左CCAを遠位迷走神経から慎重に分離し、さらにマイクロ鉗子および外科用ハサミを使用して喉頭麻痺を回避する(図2)。左CCAの分岐部が術中ランドマークとして機能することに留意されたい(図3 および 図4A)。以下のすべてのステップでは、軟部組織スプレッダーを使用して外科的視覚化を改善します。</li>
	<li>迷走神経からの左遠位CCAの調製および解放が成功した後、パパベリン(40mg / ml、0.9%等張性塩化ナトリウム溶液で1:1希釈)を局所的に投与する。マイクロスワブですべての血管セグメントを継続的に保護し、続いてさらにパパベリンを外部に投与します。パパベリンを浸した左CCAを自家筋肉組織の下に置き、手術顕微鏡の光の下で血管を乾燥から保護する。</li>
	<li>手術中の外科医の快適さを最大限に引き出しながら、側面を切り替えます。右側で同じ外科的処置を繰り返す。CCAを、予め定義されたランドマーク(顎の角度/喉頭および内頸静脈のレベルでの頸動脈分岐; 図4A,B)。スプレッダーを再挿入し、前述のようにマイクロスワブとパパベリンを投与します。</li>
	<li>右近位CCAの結紮前に、静脈耳カテーテルを介してヘパリン(500国際単位(IU)/ kg)を全身に注射する。</li>
	<li>これからは手術用顕微鏡を使ってください。まず、動脈血管の張力を避けるために、巨視的に見える近位ランドマークの端部に直接4-0の非吸収性縫合糸で右近位CCAを結紮する。<ol>
<li>第二に、最初の4-0合字から遠位に切断した後、得られる動脈パウチがすべての動物において約3〜124mmの標準化された長さになることを考慮して、測定用の容器クリップを使用して、遠位に正確に4〜4〜0の非吸収性合字を適用する(図5A、C)。</li>
	</ol>
</li>
	<li>6-0合字を締め付けた後、内皮損傷を避け、血栓形成を防ぐために灌漑用の長い血管セグメントを作成するために、一時的な血管クリップ(脳動脈瘤手術で通常使用されるように)で右CCAをできるだけ遠位にクランプします(図5B)。</li>
	<li>次に、4-0の非吸収性合字に遠位にカットを実行します。動脈パウチを採取するために(図5C)、6−0非吸収性結紮まで遠位に第2の切断を行う。</li>
	<li>動脈パウチをすべての軟部組織から細心の注意を払って清掃し、血管クリップでその長さ、幅、深さを測定します(図5C)。それ以上の修正が必要ない場合は、自家動脈移植片をヘパリン化溶液(0.9%等張塩化ナトリウム中500IU / 100ml)に室温で保持し、さらに使用するまで保管してください。</li>
</ol>3. 動脈パウチの劣化
<ol><li>動脈パウチの分解が必要な場合は、軟部組織を細心の注意を払って清掃し、実験当日に室温で5mlのトリス緩衝液に溶解した100IUのブタエラスターゼで20分間プレインキュベートする。ブラシテクニックは使用しないでください。シェーカーを使用して動脈嚢内および外腔内にインキュベートする。</li>
	<li>パウチを0.9%等張塩化ナトリウムのヘパリン化溶液に入れる前に、0.9%等張塩化ナトリウム溶液中の解剖学的鉗子で3分間穏やかに3回スワイプし、残りのブタエラスターゼを洗い流す。</li>
	<li>必要に応じて、動脈ポーチの内腔をシリコーン製のマイクロチューブで開いたままにしておきます。濡れたマイクロパディングで外科的処置全体を通して左右のCCAを細心の注意を払って保護します。</li>
</ol>4. 外科的段階 – ステップII
<ol><li>CCAをさらに調製するために、その真下に2つの丸いマイクロ綿棒を置いて、動脈をより表面的に動かす。次に、動脈の視覚化を改善するために、遠位3分の1の左CCAの下に紫色のパディングが付いたマイクロスワブを1つ入れます。</li>
	<li>100mlの0.9%等張性塩化ナトリウムに溶解した500IUのヘパリンと組み合わせた0.9%等張性塩化ナトリウムの溶液で右近位CCAを洗い流す。緊張のない吻合を作成するには、右CCAを脂肪パッド/気管周囲筋組織の下に置き、外科用はさみを使用して左側にトンネルします。動脈の軟部組織を除去する。<ol>
<li>次に、マイクロハサミと鉗子を使用して、右CCAの近位側で2mmの魚の口切開を行います。</li>
	</ol></li>
	<li>手術台の側面を変更します。左遠位CCAを別の一時血管クリップでクリップし、続いて近位左CCAを2つの一時血管クリップでクリップします。濡れたマイクロ綿棒を使用して、すべての露出した血管セグメントを外科用光の下で乾燥から保護します。</li>
	<li>左CCAの遠位3分の1を軟部組織から完全に解放し、関節切除術を行う。外科用マイクロ鉗子を使用し、柔らかくいくつかの軟部組織をつかむ。次に、動脈を上昇させ、外科用マイクロハサミで左遠位CCAをゆっくりと切開する。容器セグメントをヘパリン(100mlの0.9%等張塩化ナトリウム溶液に溶解した500IU)で洗い流す。</li>
	<li>湾曲したマイクロ鉗子及びマイクロハサミで動脈切除術を行った後、左CCAの遠位3分の1に位置する動脈切除術を遠位に拡大し、右頸動脈の直鎖の直径の約2倍及び自家移植片を測定する。これにより、動脈嚢への十分な血流が可能になる。</li>
	<li>ヘパリン処理した生理食塩水から動脈パウチを取り出す。分岐が計画されている外科用フィールドにポーチを置きます。非吸収性の9-0縫合糸で尾側に位置する右頸動脈鈍い後部を縫合し始め、続いて魚の口の切開のレベルで頭蓋に位置する後部側に縫合糸を縫合する。背面を遠位から近位までシングルステッチで縫製仕上げます。</li>
	<li>縫合中は、すべてのエラスターゼプレインキュベートされたパウチを連続灌漑で湿らせたままにしてください。パウチの血管壁を縫合しながら、湾曲した外科用マイクロ鉗子を使用して、その先端で内腔を静かに開きます。左または近位右CCAの部分を縫合するときはいつでも、まっすぐな外科用マイクロ鉗子を使用してください。その後、水平裏面を縫合する。</li>
	<li>次に、動脈瘤のドームから始めて、その基部に移動する水平前側を縫合する。その後、前面の遠位に単一のステッチが尾状に移動することから始めます。<ol>
<li>吻合を縫合しながらすべてのステップ4.5\u20124.8では、医原性狭窄を避けるために動脈切除術に近い血管の部分をつかむだけに注意してください。また、ヘパリン化塩化ナトリウム溶液(100mlの0.9%等張塩化ナトリウムに溶解された500IU)で満たされたシリンジで、外科的処置全体を通してすべての血管セグメントを外側に連続的に湿らせ、湿ったマイクロ綿棒で保護する。</li>
		<li>吻合を終える前に、管腔内のヘパリン処理された0.9%等張性塩化ナトリウム溶液(100mlの0.9%等張性塩化ナトリウムに溶解した500IU)で複合体全体を灌漑する。エラスターゼ修飾動脈パウチは、乾燥して血栓する傾向が強いため、できるだけ早く縫い付けなければならないことに注意してください。円周血管の消化に関するパウチ内の残留エラスターゼ濃度の攻撃的な挙動のために、血管複合体を迅速に再灌流する手術を迅速に進める。</li>
	</ol></li>
	<li>すべての一時的な血管クランプを段階的に取り外します。<ol>
<li>左側のCCAから遠位クランプを取り外します。軽度の出血を受け入れ、吻合部にマイクロ綿棒を優しく刻印してそれを固くする。その後、右CCAのクランプを外し、血栓形成を避けるためにマイクロ綿棒と鉗子で優しく押します。</li>
		<li>必要に応じて、十分な凝固を提供するために一時的な血管クリップを交換してください。その後、両方の容器クリップを左側から近くから取り外します。いずれかのステップで必要に応じて、クリップを交換して凝固を許可したり、再ステッチングを実行したりします。</li>
	</ol></li>
	<li>この段階で血管複合体の蛍光血管造影を行う(図6 及び 図7)。 注:蛍光血管造影は、2つのバンドパスフィルター、ビデオカメラ付きスマートフォン、および自転車のスポットライトを使用して、1mlのフルオレセインIVを投与することによって行われる。この手順は、既に他の箇所で説明されている20、21、22。</li>
	<li>最後に、手術室を閉じます。吻合を保護するために、単一の節を有する3-0再吸収可能な縫合糸で脂肪パッドを再適応させ、穏やかに縫合する。同じ方法で下皮と皮膚を閉じます。</li>
</ol>5. 術後段階
<ol><li>手術終了時にイソフルランおよび全身鎮痛剤の投与を中止し、嚥下反射が戻ったらすぐに気管抜管を行う。</li>
	<li>0.5mg / kgのメロキシカムIV、10mg / kgのアスピリン(ASS)IV、100μgのビタミンB12 SCおよび20mg / kgのクラモキシルIVを投与する。</li>
	<li>ウサギが自発的に胸骨臥位を取り戻すまで、補助的な酸素補給と活発な温暖化を提供します。</li>
	<li>げっ歯類およびウサギの疼痛の評価および管理のためのガイドラインに従って、術後フォローアップおよび動物ケアを最初の3日間1日4回行う23,24。</li>
	<li>疼痛評価用スコアシートに従って、外耳にフェンタニルパッチ(12μg/h)、メロキシカムを1日1回SCで3日間、メタドンをレスキューセラピーSCとして術後鎮痛剤を投与する。250IU/kgの低分子ヘパリン(LMH)をすべてのウサギの皮下に3日間投与する。</li>
</ol>

この研究は、スイスのアーラウ州カントンスピタル・アーラウ研究評議会とスイス国立科学財団SNF(310030_182450)の研究資金によって支援されました。著者らは、提示された研究の設計と実施について単独で責任を負い、競合する利益を宣言しません。

私たちの研究は、ウサギの異なる壁条件を持つ真の分岐動脈瘤モデルを作成することの実現可能性を示しています。全体として、平均体重3.7±0.09kg、平均年齢112±3日を有する14匹の雌ニュージーランド白ウサギが研究に含まれた。全動脈瘤の85.72%が28日間の追跡期間中、特許のままであった。2匹の動物が早死にした(死亡率12.5%)。
以前の研究は、血管内動脈瘤治療の管理を...

頭蓋内動脈瘤(IA)破裂から生じるくも膜下出血は、血管内または顕微外科的閉塞技術のいずれかによって効果的に制御することができる1、2、3、4。コイリング後のIA再発の主な限界を克服するために、異なる血管内療法が過去数十年にわたって重要性を増し、血管内デバイスを試験する必要性が高まっている。これらの新規治療アプローチを試験するために、レオロジー特性、血行動態および動脈瘤壁状態を尊重する適切な動物モデルが強く保証される5、6、7。この文脈において、臨床的および前臨床試験は、特に壁細胞の喪失に焦点を当てて、閉塞後の動脈瘤破裂および再発に関する動脈瘤壁状態の重要な役割をすでに明らかにしている7,8,9。
これまでのところ、ウサギの実験的動脈瘤は、エラスターゼインキュベートされた総頸動脈(CCA)切り株または人工CCA分岐部に縫合された静脈小袋のいずれかによって最も頻繁に作成されてきた。図10、11、12、13、14、15、16このように、真の動脈嚢分岐モデルは記載されていない。
この研究の目的は、ウサギモデルで異なる壁条件を有する分岐動脈瘤の顕微手術的作成のための安全で高速で標準化された技術を設計することでした(図1)。これは、非修飾および修飾された動脈パウチを、両方のCCAの人工的に作成された分岐部に縫合することによって達成された。

<table><tbody><tr><td>3-0 resorbable suture</td><td>Ethicon Inc., USA</td><td>VCP428G</td><td></td></tr><tr><td>4-0 non-absorbable suture</td><td>B. Braun, Germany</td><td>G0762563</td><td></td></tr><tr><td>6-0 non-absorbable suture</td><td>B. Braun, Germany</td><td>C0766070</td><td></td></tr><tr><td>9-0 non-absorbable suture</td><td>B. Braun, Germany</td><td>G1111140</td><td></td></tr><tr><td>Adrenaline</td><td>Amino AG</td><td>1445419</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Amiodarone</td><td>Helvepharm AG</td><td>5078567</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Anesthesia machine</td><td>Dr&amp;auml;ger</td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Aspirin</td><td>Sanofi-Aventis (Suisse) SA</td><td>622693</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Atropine</td><td>Labatec Pharma SA</td><td>6577083</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Bandpass filter blue</td><td>Thorlabs</td><td>FD1B</td><td>any other</td></tr><tr><td>Bandpass filter green</td><td>Thorlabs</td><td>FGV9</td><td>any other</td></tr><tr><td>Bipolar forceps</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Bicycle spotlight</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Biemer vessel clip (2 x)</td><td>B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland</td><td>FD560R</td><td>temporary</td></tr><tr><td>Bispectral index (neonatal)</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Blood pressure cuff (neonatal)</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Clamoxyl</td><td>GlaxoSmithKline AG</td><td>758808</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Dexmedetomidine</td><td>Ever Pharma</td><td>136740-1</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Electrocardiogram electrodes</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Elastase</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45125</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Ephedrine</td><td>Amino AG</td><td>1435734</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Esmolol</td><td>OrPha Swiss GmbH</td><td>3284044</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Fentanyl (intravenous use)</td><td>Janssen-Cilag AG</td><td>98683</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Fentanyl (transdermal)</td><td>Mepha Pharma AG</td><td>4008286</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Fluoresceine</td><td>Curatis AG</td><td>5030376</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Fragmin</td><td>Pfizer PFE Switzerland GmbH</td><td>1906725</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Glyco</td><td></td><td></td><td>any generic</td></tr><tr><td>Heating pad</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Isotonic sodium chloride solution (0.9%)</td><td>Fresenius KABI</td><td>336769</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Ketamine</td><td>Pfizer</td><td>342261</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Laboratory shaker</td><td>Stuart</td><td>SRT6</td><td>any other</td></tr><tr><td>Lidocaine</td><td>Streuli Pharma AG</td><td>747466</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Longuettes</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Metacam</td><td>Boehringer Ingelheim</td><td>P7626406</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Methadone</td><td>Streuli Pharma AG</td><td>1084546</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Microtubes</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Micro needle holder</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Midazolam</td><td>Accord Healthcare AG</td><td>7752484</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Needle holder</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>O2-Face mask</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Operation microscope</td><td>Wild Heerbrugg</td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Papaverine</td><td>Bichsel</td><td></td><td>any generic</td></tr><tr><td>Prilocaine-lidocaine creme</td><td>Emla</td><td></td><td>any generic</td></tr><tr><td>Propofol</td><td>B. Braun Medical AG, Switzerland</td><td></td><td>any generic</td></tr><tr><td>Pulse oxymeter</td><td></td><td></td><td>any generic</td></tr><tr><td>Rectal temperature probe (neonatal)</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Ropivacaine</td><td>Aspen Pharma Schweiz GmbH</td><td>1882249</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Scalpell</td><td>Swann-Morton</td><td>210</td><td>any other</td></tr><tr><td>Small animal shaver</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Smartphone</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Soft tissue forceps</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Soft tissue spreader</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Stainless steel sponge bowls</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Sterile micro swabs</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Stethoscope</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Straight and curved micro-forceps</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Straight and curved micro-scissors</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Straight and curved forceps</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Surgery drape</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Surgical scissors</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Syringes 1 ml, 2ml and 5 ml</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Tris-Buffer</td><td>Sigma Aldrich</td><td>93302</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Vascular clip applicator</td><td>B. Braun, Germany</td><td>FT495T</td><td></td></tr><tr><td>Vein and arterial catheter 22 G</td><td></td><td></td><td>any generic</td></tr><tr><td>Vitarubin</td><td>Streuli Pharma AG</td><td>6847559</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Yasargil titan standard clip (2 x)</td><td>B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland</td><td>FT242T</td><td>temporary</td></tr></tbody></table>

arterial pouch microsurgical bifurcation aneurysm model in the rabbit

頭蓋内動脈瘤の血管内治療は過去数十年にわたって重要性を増し、その結果、血管内デバイスを検査する必要性が高まっています。レオロジー、血行力学的および動脈瘤壁状態を尊重する動物モデルは、非常に正当化される。したがって、本研究の目的は、ウサギにおいて非修飾および修飾壁状態を有する自家動脈嚢分岐動脈瘤を創作するための新規な標準化された再現性のある外科的技術を設計することであった。
分岐動脈瘤は、左総頸動脈上の右側の端から側への吻合によって作成され、いずれも動脈嚢の親動脈として機能し、これは微小外科的に縫合された。移植片を近位右総頚動脈から採取し、対照(n=7、即時自家再移植)または改変(n=7、自家再移植前に100国際単位エラスターゼと共に20分間インキュベートする)群のいずれかの。パウチおよび親動脈開存性は、作成直後に蛍光血管造影により制御した。フォローアップ(28日)で、すべてのウサギはコントラスト増強磁気共鳴血管造影および蛍光血管造影を受け、続いて動脈瘤採取、巨視的および組織学的評価を受けた。
合計16匹の雌のニュージーランド白ウサギが手術されました。2匹の動物が早死にしました。追跡調査では、全動脈瘤の85.72%が特許のままであった。両群とも、時間の経過とともに動脈瘤サイズの増加を明らかにした。これは、対照群(6.48 ± 1.81 mm 3 vs 19.85 ±追跡時6.40 mm 3、p = 0.037)で、改変群(作成時8.03 ± 1.08 mm 3 vs 20.29 ±追跡時6.16 mm 3、p = 0.054)でより顕著であった。
我々の発見は、顕微手術的アプローチにおいて異なる壁条件を有する分岐動脈瘤の作成を可能にするこの新しいウサギモデルの妥当性を実証する。優れた長期的開存性と経時的な動脈瘤成長の性質を考えると、このモデルは、新規血管内療法の前臨床評価のための重要なツールとして役立つ可能性がある。

7匹の動物のパイロットシリーズに続いて、合計16匹の動物が実験プロトコールに含まれました。2匹の動物が早死にしたため、最終分析から除外された(死亡率12.5%)。14匹の動物について計算したところ、蛍光血管造影時の即時動脈瘤開存率は、対照群および改変群の両方で71.43%であった。4つの動脈瘤を連続した血栓排出で再開しなければならず、蛍光血管造影を繰り返した後、すべての症例(1...

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Arterial Pouch Microsurgical Bifurcation Aneurysm Model in the Rabbit

頭蓋内動脈瘤治療のための血管内装置の開発と試験は依然として非常に重要です。今日使用されているほとんどの動脈瘤モデルは、動脈変性壁の重要な特性または真の分岐の血行動態のいずれかを見逃している。そこで、ウサギにおける新規な動脈パウチ分岐模型の設計を目指した。

ウサギの動脈ポーチ微小外科分岐動脈瘤モデル

Endovascular treatment for intracranial aneurysms gained importance over the past decades, consequently there is an increased need of testing endovascular ...

arterial-pouch-microsurgical-bifurcation-aneurysm-model-in-the-rabbit

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Neuroscience

2.3K ビュー.  Kantonsspital Aarau. 頭蓋内動脈瘤治療のための血管内装置の開発と試験は依然として非常に重要です。今日使用されているほとんどの動脈瘤モデルは、動脈変性壁の重要な特性または真の分岐の血行動態のいずれかを見逃している。そこで、ウサギにおける新規な動脈パウチ分岐模型の設計を目指した。

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Microsurgical Venous Pouch Arterial-Bifurcation Aneurysms in the Rabbit Model: Technical Aspects

For ruptured human cerebral aneurysms endovascular embolization has become an equivalent alternative to aneurysm clipping.1 However, large clinical trials have shown disappointing long-term results with unacceptable high rates of aneurysm recanalization and delayed aneurysm rupture.2 To overcome these problems, animal experimental studies are crucial for the development of better endovascular devices.3-5
Several animal models in rats, rabbits, canines and swine are available.6-8 Comparisons of the different animal models showed the superiority of the rabbit model with regard to hemodynamics and comparability of the coagulation system and cost-effectiveness.9-11 
The venous pouch arterial bifurcation model in rabbits is formed by a venous pouch sutured into an artificially created true bifurcation of both common carotid arteries (CCA). The main advantage of this model are true bifurcational hemodynamics.12 The major drawbacks are the sofar high microsurgical technical demands and high morbidity and mortality rates of up to 50%.13 These limitations have resulted in less frequent use of this aneurysm model in the recent years. These shortcomings could be overcome with improved surgical procedures and modified peri- and postoperative analgetic management and anticoagulation.14-16 Our techniques reported in this paper demonstrate this optimized technique for microsurgical creation of arterial bifurcation aneurysms.

An optimized technique for the microsurgical creation of arterial bifurcation aneurysms mimicking bifurcation human cerebral aneurysms is described. A venous pouch is sutured into an artificially created true bifurcation of both common carotid arteries. Facilitated microsurgical techniques and aggressive postoperative anticoagulation and analgesia lead to minimized morbidity rates and high aneurysm patency rates.

ウサギモデルにおける顕微静脈ポーチ動脈 - 分岐瘤：技術的側面

For ruptured human cerebral aneurysms endovascular embolization has become an equivalent alternative to aneurysm clipping.1 However, large clinical trials ...

医学

Detection of Neuritic Plaques in Alzheimer's Disease Mouse Model

Alzheimer's disease (AD) is the most common neurodegenerative disorder leading to dementia. Neuritic plaque formation is one of the pathological hallmarks of Alzheimer's disease. The central component of neuritic plaques is a small filamentous protein called amyloid &beta; protein (A&beta;)1, which is derived from sequential proteolytic cleavage of the beta-amyloid precursor protein (APP) by &beta;-secretase and &gamma;-secretase. The amyloid hypothesis entails that A&gamma;-containing plaques as the underlying toxic mechanism in AD pathology2. The postmortem analysis of the presence of neuritic plaque confirms the diagnosis of AD. To further our understanding of A&gamma; neurobiology in AD pathogenesis, various mouse strains expressing AD-related mutations in the human APP genes were generated. Depending on the severity of the disease, these mice will develop neuritic plaques at different ages. These mice serve as invaluable tools for studying the pathogenesis and drug development that could affect the APP processing pathway and neuritic plaque formation. In this protocol, we employ an immunohistochemical method for specific detection of neuritic plaques in AD model mice. We will specifically discuss the preparation from extracting the half brain, paraformaldehyde fixation, cryosectioning, and two methods to detect neurotic plaques in AD transgenic mice: immunohistochemical detection using the ABC and DAB method and fluorescent detection using thiofalvin S staining method.

One of the pathological characteristics of AD is the formation of Amyloid &#x03B2; protein positive neuritic plaques. In this protocol we describe two methods to detect neuritic plaques in transgenic AD model mice: immunohistochemical detection using the ABC and DAB method and fluorescent detection using thioflavin S staining method.

アルツハイマー病のマウスモデルにおける神経突起斑の検出

Alzheimer's disease (AD) is the most common neurodegenerative disorder leading to dementia. Neuritic plaque formation is one of the pathological hallmarks ...

神経科学

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

Proprioception is the ability to sense the motion, or position, of body parts by responding to stimuli arising within the body. In fruitflies and other insects proprioception is provided by specialized sensory organs termed chordotonal organs (ChOs) 2. Like many other organs in Drosophila, ChOs develop twice during the life cycle of the fly. First, the larval ChOs develop during embryogenesis. Then, the adult ChOs start to develop in the larval imaginal discs and continue to differentiate during metamorphosis.
The development of larval ChOs during embryogenesis has been studied extensively 10,11,13,15,16. The centerpiece of each ChO is a sensory unit composed of a neuron and a scolopale cell. The sensory unit is stretched between two types of accessory cells that attach to the cuticle via specialized epidermal attachment cells 1,9,14. When a fly larva moves, the relative displacement of the epidermal attachment cells leads to stretching of the sensory unit and consequent opening of specific transient receptor potential vanilloid (TRPV) channels at the outer segment of the dendrite 8,12. The elicited signal is then transferred to the locomotor central pattern generator circuit in the central nervous system.
Multiple ChOs have been described in the adult fly 7. These are located near the joints of the adult fly appendages (legs, wings and halters) and in the thorax and abdomen. In addition, several hundreds of ChOs collectively form the Johnston's organ in the adult antenna that transduce acoustic to mechanical energy 3,5,17,4.
In contrast to the extensive knowledge about the development of ChOs in embryonic stages, very little is known about the morphology of these organs during larval stages. Moreover, with the exception of femoral ChOs 18 and Johnston's organ, our knowledge about the development and structure of ChOs in the adult fly is very fragmentary.
Here we describe a method for staining and visualizing ChOs in third instar larvae and pupae. This method can be applied together with genetic tools to better characterize the morphology and understand the development of the various ChOs in the fly.

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

A method to immunostain and visualize chordotonal organs in larvae and pupae of Drosophila melanogaster is described.

でProprioceptorsの可視化<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt;幼虫および蛹

Proprioception is the ability to sense the motion, or position, of body parts by responding to stimuli arising within the body. In fruitflies and other ...

The Helsinki Rat Microsurgical Sidewall Aneurysm Model

Experimental saccular aneurysm models are necessary for testing novel surgical and endovascular treatment options and devices before they are introduced into clinical practice. Furthermore, experimental models are needed to elucidate the complex aneurysm biology leading to rupture of saccular aneurysms.
Several different kinds of experimental models for saccular aneurysms have been established in different species. Many of them, however, require special skills, expensive equipment, or special environments, which limits their widespread use. A simple, robust, and inexpensive experimental model is needed as a standardized tool that can be used in a standardized manner in various institutions.
The microsurgical rat abdominal aortic sidewall aneurysm model combines the possibility to study both novel endovascular treatment strategies and the molecular basis of aneurysm biology in a standardized and inexpensive manner. Standardized grafts by means of shape, size, and geometry are harvested from a donor rat&#39;s descending thoracic aorta and then transplanted to a syngenic recipient rat. The aneurysms are sutured end-to-side with continuous or interrupted 9-0 nylon sutures to the infrarenal abdominal aorta.
We present step-by-step procedural instructions, information on necessary equipment, and discuss important anatomical and surgical details for successful microsurgical creation of an abdominal aortic sidewall aneurysm in the rat.

Microsurgical sidewall aneurysms in rats are created by end-to-side anastomosis of an aortic graft to the abdominal aorta. We present step-by-step instructions and discuss anatomical and surgical details for successful experimental saccular aneurysm creation.

ヘルシンキラット顕微側壁動脈瘤モデル

Experimental saccular aneurysm models are necessary for testing novel surgical and endovascular treatment options and devices before they are introduced ...

A Rabbit Venous Interposition Model Mimicking Revascularization Surgery using Vein Grafts to Assess Intimal Hyperplasia under Arterial Blood Pressure

Although vein grafts have been commonly used as autologous grafts in revascularization surgeries for ischemic diseases, the long-term patency remains poor because of the acceleration of intimal hyperplasia due to the exposure to arterial blood pressure. The present protocol is designed for the establishment of experimental venous intimal hyperplasia by interposing rabbit jugular veins to the ipsilateral carotid arteries. The protocol does not require surgical procedures deep in the body trunk and the extent of the incision is limited, which is less invasive for the animals, allowing long-term observation after implantation. This simple procedure enables researchers to investigate strategies to attenuate the progression of intimal hyperplasia of the implanted vein grafts. Using this protocol, we reported the effects transduction of microRNA-145 (miR-145), which is known to control the phenotype of vascular smooth muscle cells (VSMCs) from the proliferative to the contractile state, into harvested vein grafts. We confirmed the attenuation of intimal hyperplasia of vein grafts by transducing miR-145 before implantation surgery through the phenotype change of the VSMCs. Here we report a less invasive experimental platform to investigate the strategies that can be used to attenuate intimal hyperplasia of vein grafts in revascularization surgeries.

The present protocol aims to experimentally create venous intimal hyperplasia by subjecting veins to arterial blood pressure for developing strategies to attenuate venous intimal hyperplasia following revascularization surgery using vein grafts.

静脈移植を用いた血管形成術を模したウサギ静脈間位置モデルによる動脈血圧下の内膜過形成の評価

Although vein grafts have been commonly used as autologous grafts in revascularization surgeries for ischemic diseases, the long-term patency remains poor ...

Creation of Two Saccular Elastase-Digested Aneurysms with Different Hemodynamics in One Rabbit

Preclinical animal models with hemodynamic, morphologic, and histologic characteristics close to human intracranial aneurysms play a key role in the understanding of the pathophysiological processes and the development and testing of new therapeutic strategies. This study aims to describe a new rabbit aneurysm model that allows the creation of two elastase-digested saccular aneurysms with different hemodynamic conditions within the same animal.
Five female New Zealand white rabbits with a mean weight of 4.0 (&#177; 0.3) kg and mean age of 25 (&#177;5) weeks underwent microsurgical stump and bifurcation aneurysm creation. One aneurysm (stump) was created by right common carotid artery (CCA) exposure at its origin at the brachiocephalic trunk. A temporary clip was applied at the CCA origin and another, 2 cm above. This segment was treated with a local injection of 100 U of elastase for 20 min. A second aneurysm (bifurcation) was created by suturing an elastase-treated arterial pouch into the end-to-side anastomosis of the right CCA to left CCA. Patency was controlled by fluorescence angiography immediately after creation.
The average duration of surgery was 221 min. The creation of two aneurysms in the same animal was successful in all rabbits without complication. All aneurysms were patent immediately after surgery except for one bifurcation aneurysm, which showed an extreme tissue reaction due to elastase incubation and an immediate intraluminal thrombosis. No mortality was observed during surgery and up to one-month follow-up. Morbidity was limited to a transient vestibular syndrome (one rabbit), which recovered spontaneously within one day.
Demonstrated here for the first time is the feasibility of creating a two-aneurysm rabbit model with stump and bifurcation hemodynamic characteristics and highly degenerated wall conditions. This model allows the study of the natural course and potential treatment strategies on the basis of aneurysm biology under different flow conditions.

This protocol describes the steps for the creation of a rabbit model with two elastase-digested aneurysms with different hemodynamics (stump and bifurcation constellation). This allows the testing of novel endovascular devices in aneurysms with different angioarchitecture and hemodynamic conditions within a single animal.

1匹のウサギにおける血行動態の異なる嚢状エラスターゼ消化動脈瘤の作製

Preclinical animal models with hemodynamic, morphologic, and histologic characteristics close to human intracranial aneurysms play a key role in the ...

Microsurgical Creation of Giant Bifurcation Aneurysms in Rabbits for the Evaluation of Endovascular Devices

Giant aneurysms are dangerous lesions requiring endovascular treatment, with high rates of aneurysm recanalization and re-rupture. Reliable in vivo models are rare but are required for testing new endovascular devices.&#160;We demonstrate the technical aspects of the creation of giant bifurcation aneurysms in New Zealand white rabbits (2.5-5.5 kg). A 25-30 mm long venous pouch is taken from the external jugular vein, and a bifurcation between both carotid arteries is created microsurgically. The pouch is sutured in the bifurcation to mimic a giant aneurysm. This protocol summarizes our previously published standard technique for venous pouch true arterial bifurcation aneurysms and highlights its essential modification steps for giant aneurysms. Using this modified technique, we were able to create an animal model for giant aneurysms with high comparability to humans regarding the hemodynamics and coagulation systems. Furthermore, low morbidity and high aneurysm patency rates were achieved. The proposed giant aneurysm model offers an excellent possibility for testing new endovascular devices.

Here, we describe the technique for the microsurgical creation of giant bifurcation aneurysms in rabbits for the evaluation of endovascular devices.

血管内デバイスの評価のためのウサギにおける巨大分岐動脈瘤の顕微手術的作成

Giant aneurysms are dangerous lesions requiring endovascular treatment, with high rates of aneurysm recanalization and re-rupture. Reliable in vivo models ...

Swine Models of Aneurysmal Diseases for Training and Research

Large animal models, specifically swine, are widely used to research cardiovascular diseases and therapies, as well as for training purposes. This paper describes two different aneurysmal swine models that may help researchers to study new therapies for aneurysmal diseases. These aneurysmal models are created by surgically adding a pouch of tissue to carotid arteries in swine. When the model is used for research, the pouch must be autologous; for training purposes, a synthetic pouch suffices.
First, the right external jugular vein (EJV) and right common carotid artery (CCA) must be surgically exposed. The EJV is ligated and a vein pouch fashioned from a short segment. This pouch is then sutured to an elliptical arteriotomy performed in the CCA. Animals must be kept heparinized during model creation, and local vasodilators may be used to decrease vasospasms. Once the suture is completed, correct blood flow should be inspected, checking for bleeding from the suture line and vessel patency. Finally, the surgical incision is closed by layers and an angiography performed to image the aneurysmal model.
A simplification of this aneurysmal carotid model that decreases invasiveness and surgical time is the use of a synthetic, rather than venous, pouch. For this purpose, a pouch is tailored in advance with a segment of a polytetrafluoroethylene (PTFE) prosthesis, one end of which is sutured close using polypropylene vascular suture and sterilized prior to surgery. This "sac" is then attached to an arteriotomy performed in the CCA as described. 
Although these models do not reproduce many of the physiopathological events related to aneurysm formation, they are hemodynamically similar to the situation found in the clinical setting. Therefore, they can be used for research or training purposes, allowing physicians to learn and practice different endovascular techniques in animal models that are close to the human system.

Description of two different aneurysmal swine models for neuroradiology training courses and research studies. This study provides evidence of the feasibility of these aneurysm porcine model creations and the reproducible methods that are close to the clinical setting.

Large animal models, specifically swine, are widely used to research cardiovascular diseases and therapies, as well as for training purposes. This paper ...

A Modified Technique for Arteriovenous Fistula Construction in Rabbits

Juxta-anastomotic stenosis is a challenging problem that often causes non-maturation and decreases the patency of an arteriovenous fistula (AVF). Injury to the veins and arteries during the operation and hemodynamic changes can lead to intimal hyperplasia, leading to juxta-anastomotic stenosis. To reduce injury to the veins and arteries during the operation, this study proposes a new modified no-touch technique (MNTT) for AVF construction that can decrease the rate of juxta-anastomotic stenosis and improve the AVF patency. To unravel the hemodynamic changes and mechanisms of the MNTT, this study presented an AVF procedure using this technique. Although this procedure is technically challenging, 94.4% procedural success was achieved after adequate training. Ultimately, 13 out of 34 rabbits had a functional AVF 4 weeks after the surgery, leading to a 38.2% AVF patency rate. However, at 4 weeks, the survival rate was 86.1%. Ultrasonography showed active blood flow through AVF anastomosis. Furthermore, the spiral laminar flow was observed in the vein and artery near the anastomosis, suggesting that this technique may improve the hemodynamics of the AVF. On histological observation, significant venous intimal hyperplasia was observed at the AVF anastomosis, whereas no significant intimal hyperplasia was observed at the proximal external jugular vein (EJV) of the anastomosis. This technique will improve the understanding of the mechanisms underlying the use of MNTT for AVF construction and provide technical support for the further optimization of the surgical approach in AVF construction.

The present protocol proposes the creation of an arteriovenous fistula in rabbits using a modified no-touch technique. The technique involves the side-to-side anastomosis of the common carotid artery and external jugular vein without the dissection of the perivenous tissues or cutting off the artery.

ウサギの動静脈瘻構築のための改良技術

Juxta-anastomotic stenosis is a challenging problem that often causes non-maturation and decreases the patency of an arteriovenous fistula (AVF). Injury ...

Developing an Experimental Aneurysm Model in a Rabbit Using an Elastase-Treated Vessel Pouch

<a href='https://appjove.unicartagenaproxy.elogim.com/v/61157/arterial-pouch-microsurgical-bifurcation-aneurysm-model-in-the-rabbit'>Source: Wanderer, S., et al. Arterial Pouch Microsurgical Bifurcation Aneurysm Model in the Rabbit. J. Vis. Exp. (2020)</a>This video demonstrates the creation of an experimental aneurysm model in a rabbit using an elastase-treated vessel pouch. After excising a segment of the right CCA, the pouch is treated with elastase, then sutured to the left CCA to restore blood flow. The resulting stress on the weakened pouch walls induces aneurysm formation.