この作業は、研究 (B) (20291958) N.U.; に補助金によって支えられました。若手にニュージーランド (、) (25713024)

動物のケアと実験動物のケアのための浜松大学学校の医学動物ケア委員会中心にガイドラインに従って行われた。
 1。 モデルを作成するため手術 注: 10 のビードの殺菌剤に手術器具を配置 s 術。術中滅菌手袋を使用します。
<ol><li>使用ラット 300-400 g. の重量を量るラットに食糧へのアクセスを許可および水の 自由</li>。
	<li>は、イソフルラン吸入 (2.0 3.0 mL/L) とラットを麻酔します。つま先のピンチによって適切な anesthetization を確認します</li>。
	<li>電気カミソリ、腹部の毛を剃るし、アルコールとポビドン ヨード液と腹部をスクラブします</li>。
	<li>は、仰臥位操作テーブルの上にネズミを配置します。ラット獣医軟膏を使用 &#39; 麻酔中の乾燥を防ぐため s 目</li>。
	<li>は、はさみを使用して腹側正中腹部切開で開腹したを実行します。明確な手術野を確保するため腹部の内容を腹腔内傷リトラクターを使用して滅菌ガーゼでパックします</li>。
	血管周囲組織から大動脈を切断する <li>が優しくをピックアップし、ピンセットで大動脈の壁を公開してから分岐する左腎静脈のレベルから後腹膜腔の上行大動脈の剥離する後腹膜を引き裂く、血管周囲組織 ( 図 1 a).</li>
	<li>ブロック血液 5-0 絹弦と腹部大動脈から分岐血管を大動脈の内腔を狭くしない大動脈から時点で供給 Ligate</li>。
	大動脈の血流をブロックする <li>血管クリップすぐ下腎動脈と大動脈の分岐のすぐ上に配置します 。
	注: クリップのサイズは、血流を完全にブロックする大動脈の直径よりも大きくなければなりません。一時的な 5-0 絹弦の合字もクリップではなく血流をブロックするため十分だ</li>。
	<li>ポリウレタン製カテーテルを挿入する遠位大動脈腎動脈の枝に隣接するクリップからマイクロはさみ 5 mm を使用して前の大動脈壁をカット、大動脈の壁の表面にドット出血を作成すると似ています</li>。
	<li>ポリウレタン製カテーテルを挿入 (0.55 mm、内径外径 0.37 mm) 水で大動脈の血を洗い流すため切開浅く針留置 24 ゲージを使用します。ポリウレタン製カテーテルに水で満たされた 1 mL の注射器の管理し、水で大動脈の血の残りを洗い流します。洗浄した後に、大動脈からカテーテルを削除します</li>。
	<li>ポリウレタン製カテーテルを挿入する前に (1.20 mm、内径外径 0.94 mm) 長さ 10 mm ( 図 1 b) をポリウレタン製のカテーテルをカット、18 g の留置針を使用しています。
	<ol><li>挿入カット ステップ 1.9 の切開から大動脈の内腔にポリウレタン製のカテーテルの作品。完全に大動脈の内腔に 10 mm のカテーテルを挿入し、切開の位置に合わせてカテーテルの中点の位置を変更 (すなわち カテーテルで切開をカバー).</li>
	</ol></li> <li>切開を縫合 8-0 モノフィラメント文字列 ( 図 1) を使用して修復します</li>。
	<li>結紮 5-0 絹弦とポリウレタン製のカテーテル ( 図 1) の組み合わせを用いた腹部大動脈 。
	注: 留置カテーテルによる大動脈の内腔を維持できます。カテーテルの位置を始まるようにしっかりと大動脈を縛る。外科医 &#39; 形成二重止め結びの結び目の最初のスローをつなぐとき、それは余分なねじれを追加します、追加ターンがより多くの摩擦を提供し、緩みを減らすことができますので、s の結び目をお勧めします</li>。
	<li>結紮後、大動脈分岐部の血管クリップを取り外し、順行血流を回復する腎動脈以下の血管クリップを取り外します。総大動脈の拍動を確認します</li>。
	<li>は、2 つの層、腹膜および 4-0 ポリプロピレン縫合糸で、他のレイヤーで腹部切開を閉じる。しっかりと突出した器官を防ぐために切開部を縫合します</li>。
	<li>は、腹部の切開に局所リドカインを適用します。意識が戻るまで、加熱パッドのラットを配置します。放置しないでください、ラットまでそれは胸骨の横臥を維持するために十分な意識を取り戻しました。それは完全に回復するまで他のラットの会社に操作を経たラットを返しません</li>。
	<li>は、操作後ラットを密接に監視します。ラットが苦痛や体の重量損失の兆候を示している場合、滅菌生理食塩水 (1.0 2.0 mL) のボーラスを皮下注入します</li>。
	<li>は術後、超音波エコーで拡大した大動脈の経時的発展を観察します。説明 5 として腹部大動脈の外側のエッジにエッジの内側から最大径測定</li>。
</ol> 2。収穫、修正、および弾性線維 (EVG) 染色 <ol><li>28 日術後管理ペントバルビ タール ナトリウム &#8805; 100 mg/kg 腹腔内にラットを安楽死させる</li>。
	<li>カット ラット &#39; s 腹部キャビティ腹。メスを使用して初期の切開を行います。はさみを使用して動脈瘤を収穫し、24-48 h. のための中立的バッファー 10% ホルマリンで収穫された大動脈を配置 
	注: 外科医は、大動脈やその他の臓器に損傷を防ぐため、動脈瘤を公開するときに注意しなければなりません。AAA の形成を示す、高架の腹部臓器を観察すべき。生体内の イメージと 前のヴィヴォ イメージ 図 2 を示していますAAAs のこの代表的なサンプルが破裂しない</li>。
	<li>EVG 染色 9 <ol><li><ol><li>準備その行動 に調製した溶液 の &#39; 特定の順序で、次を混合することによって s ヘマトキシリン: アルコール ヘマトキシリン 20 mL、10% 塩化第二鉄 8.0 mLルゴール &#39; s ヨウ素 8 mL。各添加の間ソリューションをミックスします。このソリューションは必要に応じて新鮮な準備することができます</li>。
			<li>準備バン維 &#39; 1% 酸フクシンを混合することによって s ソリューション 1 mL 及び飽和ピクリン酸 45 mL。一晩立つし、よく混ぜるようにします。このソリューションは、2 週間安定</li>。
			<li>10% した FeCl 3 40 mL に 10 mL を混合することによって差別化ソリューション (2% 塩化第二鉄) の準備蒸留水します。このソリューションは必要に応じて新鮮な準備があります</li>。
			<li>準備 5% ハイポ チオ硫酸ナトリウム 5.0 g 100 ml の蒸留水に溶解します。この解決策は、1 年間安定した</li>。
		</ol></li> <li>染色手順 注: 詳細に 9 を参照を参照してください。
		<ol><li>10 分が、その行動、大動脈の蒸留水で収穫された大動脈固定パラフィン切片を簡単に、メタンハイド レート &#39; s ヘマトキシリン 25 分洗浄水と 10-30 倍 (2% した FeCl 3) ソリューションの差別化でひと泳ぎ。水ですすいでください。5% ハイポ 1 分水で洗浄のために配置します。ヴァン維の場所 &#39; s 向け 5 分</li>
			<li>Dehydrate 以下のアルコールで順序: 30 の 75%、90%、95%、100%、100% のアルコールそれぞれ秒。その後、2 回、5 分間のキシレンのオフにします。樹脂製取付中 coverslip の場所 。
			注: 弾性線維は黒に青黒表示します。核: bla にブルーck。コラーゲン: 赤;およびその他の組織の要素: 黄色</li>。
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol>
	<li>Wolinsky, H., Glagov, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+abdominal+and+thoracic+aortic+medial+structure+in+mammals.+Deviation+of+man+from+the+usual+pattern.">Comparison of abdominal and thoracic aortic medial structure in mammals. Deviation of man from the usual pattern.</a> Circ Res. 25 (6), 677-686 (1969).</li><li>Sano, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymphangiogenesis+and+angiogenesis+in+abdominal+aortic+aneurysm.">Lymphangiogenesis and angiogenesis in abdominal aortic aneurysm.</a> PLoS One. 9 (3), e89830 (2014).</li><li>Vorp, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+of+intraluminal+thrombus+in+abdominal+aortic+aneurysm+with+local+hypoxia+and+wall+weakening.">Association of intraluminal thrombus in abdominal aortic aneurysm with local hypoxia and wall weakening.</a> J Vasc Surg. 34 (2), 291-299 (2001).</li><li>Tanaka, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adventitial+vasa+vasorum+arteriosclerosis+in+abdominal+aortic+aneurysm.">Adventitial vasa vasorum arteriosclerosis in abdominal aortic aneurysm.</a> PLoS One. 8 (2), e57398 (2013).</li><li>Tanaka, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoperfusion+of+the+Adventitial+Vasa+Vasorum+Develops+an+Abdominal+Aortic+Aneurysm.">Hypoperfusion of the Adventitial Vasa Vasorum Develops an Abdominal Aortic Aneurysm.</a> PLoS One. 10 (8), e0134386 (2015).</li><li>Tanaka, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+Mass+Spectrometry+Reveals+a+Unique+Distribution+of+Triglycerides+in+the+Abdominal+Aortic+Aneurysmal+Wall.">Imaging Mass Spectrometry Reveals a Unique Distribution of Triglycerides in the Abdominal Aortic Aneurysmal Wall.</a> J Vasc Res. 52 (2), 127-135 (2015).</li><li>Kugo, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+preventive+effect+of+fish+oil+on+abdominal+aortic+aneurysm+development.">The preventive effect of fish oil on abdominal aortic aneurysm development.</a> Biosci Biotechnol Biochem. 80 (6), 1186-1191 (2016).</li><li>Kugo, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipocyte+in+vascular+wall+can+induce+the+rupture+of+abdominal+aortic+aneurysm.">Adipocyte in vascular wall can induce the rupture of abdominal aortic aneurysm.</a> Sci Rep. 6, 31268 (2016).</li><li>Lichtenberg, A., Cebotari, S., Tudorache, I., Hilfiker, A., Haverich, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+scaffolds+for+heart+valve+tissue+engineering.">Biological scaffolds for heart valve tissue engineering.</a> Methods Mol Med. 140, 309-317 (2007).</li><li>Heistad, D. D., Marcus, M. L., Larsen, G. E., Armstrong, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+vasa+vasorum+in+nourishment+of+the+aortic+wall.">Role of vasa vasorum in nourishment of the aortic wall.</a> Am J Physiol. 240 (5), H781-H787 (1981).</li><li>Yoshimura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regression+of+abdominal+aortic+aneurysm+by+inhibition+of+c-Jun+N-terminal+kinase.">Regression of abdominal aortic aneurysm by inhibition of c-Jun N-terminal kinase.</a> Nat Med. 11 (12), 1330-1338 (2005).</li><li>Azuma, J., Asagami, T., Dalman, R., Tsao, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creation+of+murine+experimental+abdominal+aortic+aneurysms+with+elastase.">Creation of murine experimental abdominal aortic aneurysms with elastase.</a> J Vis Exp. (29), (2009).</li><li>Lu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subcutaneous+Angiotensin+II+Infusion+using+Osmotic+Pumps+Induces+Aortic+Aneurysms+in+Mice.">Subcutaneous Angiotensin II Infusion using Osmotic Pumps Induces Aortic Aneurysms in Mice.</a> J Vis Exp. (103), (2015).</li><li>United Kingdom, E. T. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+versus+open+repair+of+abdominal+aortic+aneurysm.">Endovascular versus open repair of abdominal aortic aneurysm.</a> N Engl J Med. 362 (20), 1863-1871 (2010).</li></ol>

著者が明らかに何もありません。

生理学的な条件の下で外側と中間層によって養われています VV、外膜から内側 VV1に浸透するのに対し、大動脈壁の内層が腔血流からの拡散によって栄養します。腹部の大動脈の壁に VV 血流が次の 3 つの方向/領域に属します: (1) 近位大動脈、大動脈壁と (3) 血管周囲組織10(2) 遠位方向方向。以前は、有意な狭窄や閉塞腹部大動脈の壁に VV 血流が低下4をすることができますを示唆している AAA の壁に VV の人間のティッシュの組織学的分析が識別されます。AAA、高齢者がポリウレタン製カテーテル挿入と高齢者の腹部大動脈の縫合結紮の組み合わせによって引き起こされたこのプロトコルでは非常に重要なポイントです。慎重に組織の層を剥離するには、外科医はスムーズにポリウレタン製カテーテルを大動脈に挿入する必要があり、外 VV と動脈瘤形成の血流の低下による慢性的な低酸素症を引き起こす大動脈をしっかりと縛る。これらのテクニックを使用して、大動脈壁内の血流が減少しその結果、ローカル低酸素環境が誘発されます。血流低下と低酸素状態における動脈瘤形成は、腹部の大動脈の壁に VV 血流が AAA 形成の病因の役割を果たしていることを示します。
具体的には、大動脈瘤モデルは次の条件を満たす必要があります: ベースライン、チュニカ メディアの変性、大動脈壁の炎症と比較して血管径の 1.5 倍の増加。最も人気のある動物モデルは、CaCl211、エラスターゼ12、アンジオテンシン II13などの物質を使用して炎症反応を誘導することによって構築されています。これらのモデルは再現性の高い、明らかに病理学的変化を引き起こすことができ、調査研究でよく使用されます。私たちのモデルの手順を手順 (図 3) 後 28 日目まで行った前に超音波検査から 7 日ごと大動脈径を検討しました。その結果、大動脈の径がやや増加する 28 日間この直径の変更が以前の齧歯動物モデルと同様であることを示します。血管のフォームの肉眼観察では、滑らかな紡錘形 (図 2) が示されます。28 日に我々 はラットを犠牲にし、回収された大動脈組織の病理組織学的分析を行った。涙と判ったと外膜の弾性およびコラーゲン線維の消失 (図 4) を認めた.さらに、マクロファージなどの炎症細胞外膜からチュニカ メディアに存在していた。
現在、AAAs の利用可能な治療法の選択肢は、手術と血管内ステント術、AAA 破裂14患者の 30-50% の死亡率とに限定されます。しかし、AAAs の治療に医療用医薬品が認められています。人間と AAA の研究で使用される確立された動物モデルの病理学的所見に矛盾があること議論があります。人間の AAA と AAA モデル動物の病態の類似性は、薬理学的治療法の開発に不可欠です。齧歯動物モデルの有効性に関する我々 のラットのモデルは腔内血栓5と脂肪細胞形成8面で人間に類似した形態。さらに、本研究ではラットの約 20% は AAA 破裂をいたし、術後後 28 日以内に死亡しました。腹部大動脈瘤破裂はこの病気の最も重要なイベントが、破裂は、確立された実験の AAA モデルと共通、メカニズムは解明されていません。したがって、このモデルは大動脈径の拡張や動脈瘤の破裂のメカニズムを理解するために役立ちます。
このモデルの作成は、いくつかの手術に必要です。したがって、研究者は、このモデルの制限は、このモデルの作成を練習しなければなりません。将来的に、我々 できる血流が低下徐々 に VV 壁を厚くことにより自発的な大動脈瘤の齧歯動物モデルを作成したいと思います。

腹部大動脈は次の 3 つの層から成る: 血管の内壁 (内膜)、内側層 (メディア)、および外側の血管壁 (膜) と、これらの外膜がユニークな血液供給システム (VV) 栄養血管、として知られています。大動脈組織は外 VV 灌流と大動脈血流1から簡単な酸素の拡散によって酸素が供給されます。ただし、地理的に、腹部大動脈、大動脈の他の部分に比べると VVs の少なくとも分布です。2
人間の腹部大動脈瘤の組織の低酸素 (AAA) 壁厚管腔内血栓 (ILT)3の以前の研究報告。また、動脈瘤の壁の外の VV は AAA 壁4組織低酸素症に関連付けられて大幅に高い率で動脈硬化性変化と閉塞が示されています。これらの調査結果に基づいて、AAA の小説齧歯動物モデルは外 VV 低灌流5を誘導することによって作成されました。このモデルでは、VV 低灌流は組織低酸素症と形態学的および病理学的特性人間の AAA6のそれらに類似していた上、AAA の開発を引き起こした。首相の例では、クラスルーム ・の存在過脂肪細胞6、および破裂7、8を引き起こす可能性の蓄積をご利用され。これらの調査結果は、ほとんど以前の齧歯動物モデルで観察されています。したがって、このモデルが AAA 開発と破壊のメカニズムのより深い理解に大きく貢献します。紹介を通じて外 VV 低灌流、AAAs を誘導するために使用する標準プロトコルを記述し、手術手技を用いた大動脈壁に低酸素血症を誘発する方法を説明します。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="826">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:292px;">rat</td>
			<td style="width:115px;">Japan SLC.Inc</td>
			<td style="width:185px;">Slc:SD rat</td>
			<td style="width:235px;">Sprague&#8211;Dawley ratTM</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:292px;">povidone-iodine solution</td>
			<td style="width:115px;">Libatape Pharmaceutical Co., Ltd.</td>
			<td style="width:185px;">4987335 111457</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:292px;">5-0 silk string</td>
			<td style="width:115px;">Akiyama Medical MFG. CO.,LTD</td>
			<td style="width:185px;">JIS No.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">vascular clips</td>
			<td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td>
			<td>C-42-S-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:292px;">polyurethane catheter (24-gauge indwelling needle)</td>
			<td style="width:115px;">MEDIKIT</td>
			<td style="width:185px;">24G</td>
			<td>Supercath Z4VTM, 24-gauge indwelling needle</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:292px;">polyurethane catheter (18-gauge indwelling needle)</td>
			<td style="width:115px;">MEDIKIT</td>
			<td style="width:185px;">18G</td>
			<td>Supercath Z3VTM, 18-gauge indwelling needle</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:292px;">8-0 monofilament string</td>
			<td style="width:115px;">Ethicon Suture</td>
			<td style="width:185px;">c-42-S-2</td>
			<td>PROLENE Polypropylene Suture, Repair the incision with the suture</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

creation of a rodent model of abdominal aortic aneurysm by blocking adventitial vasa vasorum perfusion

ヴァーサ号外管の脈管 (VV) は、酸素、大動脈壁の栄養を提供します。大動脈壁における低酸素には、拡大された腹部大動脈瘤 (AAAs) 可能性があります。この記事で紹介し、大動脈内腔と上腹部大動脈の縫合結紮にポリウレタン製カテーテル挿入の組み合わせで作成された外 VV 低灌流を AAAs を誘導するために使用される標準プロトコルです。
プロトコルは、食糧および水の自由が提供される 300 から 400 グラムの重量を量る雄ラットの使用を含みます。腹側正中腹部切開で開腹、大動脈の剥離が実行されますと、血管周囲組織からの血流をブロックします。大動脈腎動脈の枝に隣接して小さな切開を含むを実行し、18 g 留置針を用いたポリウレタン製カテーテルが挿入されます。切開部を修復した後、カテーテルを大動脈のタイトな結紮は大動脈の血流を乱すことがなく大動脈壁から近位方向から VV 血流をブロックします。この手法は、進行性の大動脈拡張と AAA を引き起こすことができます。
このモデルの最大の利点は、VV 低灌流が組織低酸素症および形態学的および病理学的特性を人間の AAA のものに似ている上、AAA の開発を引き起こすことです。

記載された手術方法は、ラットのポリウレタン製カテーテル挿入と高齢者の腹部大動脈の縫合結紮の組み合わせを使用して、慢性的な低酸素状態における動脈瘤の新たな動物モデルを作成します。プロトコルのセクションで説明したラットは、プロシージャの後の 28 日の安楽死だった。大動脈は、収穫され、動脈瘤形成を可視化するイメージングします。図 2は、紡錘状の AAA の開発を示しています。前のヴィヴォの大動脈の上下の端は、拡張なし通常直径を持っています。大動脈の直径は、経腹超音波検査 (図 3) を使用して測定しました。直径一般にプロシージャの後約 14 日で最大サイズに達したその後、そのまま残るか、またはわずかに増加します。図 4は、EVG 染色後、最大直径で動脈瘤の病理組織学的イメージを示します。28 日目の組織像 (動脈瘤) 0 日目と比較して弾性線維の顕著な低下を示した。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55763/55763fig1.jpg"> 
図 1: 腹部大動脈瘤 (AAA) を誘導する手術。 (A) 上大動脈周囲の組織から剥離されます。(10 mm 長いカット B) ポリウレタン製カテーテルが大動脈の小さな切開を通して挿入されます。(C) 切開が 8-0 モノフィラメント縫合糸で修復され、血流が復活しました。(D) 大動脈は、挿入されたカテーテルの上 5-0 シルク縫合糸で結紮は。スケール バー = 5 mm.<a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55763/55763fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55763/55763fig2.jpg"> 
図 2: 代表的な予後。 紡錘状の腹部大動脈瘤の術後 28 日目表示開発に関する肉眼。後腹膜の高マージンは、(破線; 左) 動脈瘤の外側のエッジに対応します。前のヴィヴォの大動脈の上部と下部の端 (右) 正常です。スケール バー = 3 mm.<a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55763/55763fig2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55763/55763fig3.jpg"> 
図 3: 最大大動脈径経腹超音波断層法を用いて測定します。 大動脈径は、このラットのモデルで着実に増加しました。大動脈の直径は平均 ± 標準偏差として表示されます (n = 12)。<a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55763/55763fig3large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55763/55763fig4.jpg"> 
図 4: エラスティカ ・ ヴァン ・維染色と動脈瘤の組織の代表的なイメージ。 EVG 染色を示す変性弾性板腔内血栓の形成とメディアのプロシージャの後の 28 日 (右) の組織学的評価。大動脈の弾性繊維の断片化と大動脈外膜スパース コラーゲン線維は、28 日に観察されます。0 日目 (左) 施術前に、です。スケール バー = 500 μ m.<a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55763/55763fig4large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。

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Creation of a Rodent Model of Abdominal Aortic Aneurysm by Blocking Adventitial Vasa Vasorum Perfusion

大動脈内腔と大動脈の縫合結紮にポリウレタン製カテーテル挿入、外栄養血管の血流の低下による慢性的な低酸素症を誘発します。この記事では、人間の AAA のものと同様の特性を持つ腹部大動脈瘤 (AAA) の新たな動物モデルについて説明します。

外ヴァーサ栄養血管の血流をブロックすることにより腹部の大動脈瘤の齧歯動物モデルの作成

The adventitial vasa vasorum (VV) provides oxygen and nourishment to the aortic wall. Hypoxia in the aortic wall can cause enlarged abdominal aortic ...

creation-rodent-model-abdominal-aortic-aneurysm-blocking-adventitial

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Medicine

9.0K ビュー.  Hamamatsu University School of Medicine. 大動脈内腔と大動脈の縫合結紮にポリウレタン製カテーテル挿入、外栄養血管の血流の低下による慢性的な低酸素症を誘発します。この記事では、人間の AAA のものと同様の特性を持つ腹部大動脈瘤 (AAA) の新たな動物モデルについて説明します。

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Creation of Reversible Cholestatic Rat Model

Cholestasis is a clinical condition commonly encountered by both surgeons and gastroenterologists. Cholestasis can cause various physiological changes and affect the nutritional status and surgical outcomes. Study of the pathophysiological changes occurring in the liver and other organs is of importance. Various studies have been done in cholestatic rat models.
We used a reversible cholestatic rat model in our recent study looking at the role of methylprednisolone in the ischemia reperfusion injury. Various techniques for creation of a reversible cholestatic model have been described. Creation of a reversible cholestatic rat model can be challenging in view of the smaller size and unique hepatopancreatobiliary anatomy in rats. This video article demonstrates the creation of a reversible cholestatic model.
This model can be used in various studies, such as looking at the changes in nutritional, physiological, pathological, histological and immunological changes in the gastrointestinal tract. This model can also be used to see the effects of cholestasis and various therapeutic interventions on major hepatic surgeries.

Cholestasis is a clinical condition commonly encountered by both surgeons and gastroenterologists. Creation of a reversible cholestatic rat model can be challenging in view of the smaller size and unique hepatopancreatobiliary anatomy in rats. This video article demonstrates the creation of a reversible cholestatic model.

リバーシブル胆汁うっ滞ラットモデルの作成

Cholestasis is a clinical condition commonly encountered by both surgeons and gastroenterologists. Cholestasis can cause various physiological changes and ...

医学

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of Abdominal aortic aneurysm (AAA) pathophysiology. There is no abdominal aortic aneurysm endograft exclusion model cheap and reproducible, which would allow deep investigations of AAA before and after treatment. We hereby describe how to induce, and then to exclude with a covered coronary stentgraft an abdominal aortic aneurysm in a rat. The well known elastase induced AAA model was first reported in 19901 in a rat, then described in mice2. Elastin degradation leads to dilation of the aorta with inflammatory infiltration of the abdominal wall and intra luminal thrombus, matching with human AAA. Endovascular exclusion with small covered stentgraft is then performed, excluding any interactions between circulating blood and the aneurysm thrombus. Appropriate exclusion and stentgraft patency is confirmed before euthanasia by an angiography thought the left carotid artery. Partial control of elastase diffusion makes aneurysm shape different for each animal. It is difficult to create an aneurysm, which will allow an appropriate length of aorta below the aneurysm for an easy stentgraft introduction, and with adequate proximal and distal neck to prevent endoleaks. Lots of failure can result to stentgraft introduction which sometimes lead to aorta tear with pain and troubles to stitch it, and endothelial damage with post op aorta thrombosis. Giving aspirin to rats before stentgraft implantation decreases failure rate without major hemorrhage. Clamping time activates neutrophils, endothelium and platelets, and may interfere with biological analysis.

Histological and biochemical modifications after aneurysm endograft exclusion are still unclear. We describe a new model of endograft implantation on a murine aneurysm. Through thrombus analysis with and without persistant circulating blood stream interface, and new endovascular biomaterials evaluation, this model will help to better understand endovascular aneurysm exclusion pathobiology.

血管内大動脈瘤の修復の新しいマウスモデル

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Background 
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered advancements to decrease the occurrence this injury.&#160;The current model demonstrates reproducible lower&#160;extremity paralysis following thoracic aortic occlusion.
Methods 
Adult male C57BL6 mice were anesthetized with isoflurane. Through a cervicosternal incision the aorta was exposed. The descending thoracic aorta and left subclavian arteries were identified without entrance into pleural space. Skeletonization of these arteries was followed by immediate closure (Sham) or occlusion for 4 min (moderate ischemia) or 8 min (prolonged ischemia). The sternotomy and skin were closed and the mouse was transferred to warming bed for recovery.&#160; Following recovery, functional analysis was obtained at 12 hr intervals until 48 hr.
Results 
Mice that underwent sham surgery showed no observable hind&#160;limb deficit. Mice subjected to moderate ischemia for 4 min had minimal functional deficit at 12 hr followed by progression to complete paralysis at 48 hr. Mice subjected to prolonged ischemia had an immediate paralysis with no observable hind-limb movement at any point in the postoperative period. There was no observed intraoperative or post&#160;operative mortality.
Conclusion 
Reproducible lower extremity paralysis whether immediate or delayed can be achieved in a murine model. Additionally, by using a median sternotomy and careful dissection, high survival rates, and reproducibility can be achieved.

The lack of mechanistic understanding of spinal cord ischemia-reperfusion injury has hindered further adjuncts to prevent paraplegia following high risk aortic operations. Thus, the development of animal models is imperative. This manuscript demonstrates reproducible lower extremity paralysis following thoracic aortic occlusion in a murine model.

脊髄虚血再灌流のマウスモデルにおいて胸部大動脈閉塞によって再現可能対麻痺

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

Ascending Aortic Constriction in Rats for Creation of Pressure Overload Cardiac Hypertrophy Model

Ascending aortic constriction is the most common and successful surgical model for creating pressure overload induced cardiac hypertrophy and heart failure. Here, we describe a detailed surgical procedure for creating pressure overload and cardiac hypertrophy in rats by constriction of the ascending aorta using a small metallic clip. After anesthesia, the trachea is intubated by inserting a cannula through a half way incision made between two cartilage rings of trachea. Then a skin incision is made at the level of the second intercostal space on the left chest wall and muscle layers are cleared to locate the ascending portion of aorta. The ascending aorta is constricted to 50&#8211;60% of its original diameter by application of a small sized titanium clip. Following aortic constriction, the second and third ribs are approximated with prolene sutures. The tracheal cannula is removed once spontaneous breathing was re-established. The animal is allowed to recover on the heating pad by gradually lowering anesthesia. The intensity of pressure overload created by constriction of the ascending aorta is determined by recording the pressure gradient using trans-thoracic two dimensional Doppler-echocardiography. Overall this protocol is useful to study the remodeling events and contractile properties of the heart during the gradual onset and progression from compensated cardiac hypertrophy to heart failure stage.

We describe a stepwise procedure for creating pressure overload and left ventricular hypertrophy in Wistar rats by constriction of the ascending aorta using a small metallic clip. This model is extensively used for studying remodeling changes during cardiac hypertrophy and for identifying and evaluating strategies for regression of such changes.

圧負荷心肥大モデルの作成のためのラットの大動脈狭窄昇順

Ascending aortic constriction is the most common and successful surgical model for creating pressure overload induced cardiac hypertrophy and heart ...

Creation of Abdominal Adhesions in Mice

Abdominal adhesions consist of fibrotic tissue that forms in the peritoneal space in response to an inflammatory insult, typically surgery or intraabdominal infection. The precise mechanisms underlying adhesion formation are poorly understood. Many compounds and physical barriers have been tested for their ability to prevent adhesions after surgery with varying levels of success. The mouse and rat are important models for the study of abdominal adhesions. Several different techniques for the creation of adhesions in the mouse and rat exist in the literature. Here we describe a protocol utilizing abrasion of the cecum with sandpaper and sutures placed in the right abdominal sidewall. The mouse is anesthetized and the abdomen is prepped. A midline laparotomy is created and the cecum is identified. Sandpaper is used to gently abrade the surface of the cecum. Next, several figure-of-eight sutures are placed into the peritoneum of the right abdominal sidewall. The abdominal cavity is irrigated, a small amount of starch is applied, and the incision is closed. We have found that this technique produces the most consistent adhesions with the lowest mortality rate.

Abdominal adhesions that form after surgery are a major cause of pain, infertility, and hospitalization and reoperation for small bowel obstruction. Our surgical procedure for creating abdominal adhesions in mice is a reliable tool to study the mechanisms underlying the formation of adhesions.

マウスの腹部癒着の作成

Abdominal adhesions consist of fibrotic tissue that forms in the peritoneal space in response to an inflammatory insult, typically surgery or ...

Reproducible Arterial Denudation Injury by Infrarenal Abdominal Aortic Clamping in a Murine Model

Percutaneous vascular interventions uniformly result in arterial denudation injuries that subsequently lead to thrombosis and restenosis. These complications can be attributed to impairments in re-endothelialization within the wound margins. Yet, the cellular and molecular mechanisms of re-endothelialization remain to be defined. While several animal models to study re-endothelialization after arterial denudation are available, few are performed in the mouse because of surgical limitations. This undermines the opportunity to exploit transgenic mouse lines and investigate the contribution of specific genes to the process of re-endothelialization. Here, we present a step-by-step protocol for creating a highly reproducible murine model of arterial denudation injury in the infrarenal abdominal aorta using external vascular clamping. Immunocytochemical staining of injured aortas for fibrinogen and &#946;-catenin demonstrate the exposure of a pro-thrombotic surface and the border of intact endothelium, respectively. The method presented here has the advantages of speed, excellent overall survival rate, and relative technical ease, creating a uniquely practical tool for imposing arterial denudation injury in transgenic mouse models. Using this method, investigators may elucidate the mechanisms of re-endothelialization under normal or pathological conditions.

Understanding the cellular and molecular mechanisms of re-endothelialization following arterial denudation injury is of paramount importance in preventing thrombosis and restenosis of arteries. Here we describe a protocol for reproducible arterial denudation injury of the infrarenal abdominal aorta. The procedure was developed to investigate the underlying mechanisms that regulate endothelial regeneration using mouse models.

マウスモデルにおける下腹部大動脈クランプすることにより、再現性動脈侵食に起因けが

Percutaneous vascular interventions uniformly result in arterial denudation injuries that subsequently lead to thrombosis and restenosis. These ...

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of &#946;-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Aortic aneurysm and dissection is associated with significant morbidity and mortality in the population and can be highly lethal. While animal models of aortic disease exist, in vivo imaging of the vasculature has been limited. In recent years, micro-computerized tomography (micro-CT) has emerged as a preferred modality for imaging both large and small vessels both in vivo and ex vivo. In conjunction with a method of vascular casting, we have successfully used micro-CT to characterize the frequency and distribution of aortic pathology in &#946;-aminopropionitrile-treated C57/Bl6 mice. Technical limitations of this method include variations in the quality of the perfusion introduced by poor animal preparation, the application of proper methodologies for vessel size quantification, and the non-survivability of this procedure. This article details a methodology for the intravascular perfusion of a lead-based radiopaque silicone rubber for the quantitative characterization of aortopathy in a mouse model of aneurysm and dissection. In addition to visualizing aortic pathology, this method may be used for examining other vascular beds in vivo or vascular beds removed post-mortem.

This article describes a detailed methodology of using a radiopaque lead-based silicone rubber to perfuse the murine vasculature for aortic diameter quantification in a mouse model of aortic aneurysm and dissection.

Aortopathy β-アミノプロピオニ トリルによる大動脈瘤と解離のマウスモデルでのマイクロ CT 定量分析

Aortic aneurysm and dissection is associated with significant morbidity and mortality in the population and can be highly lethal. While animal models of ...

Ultrasound Imaging of the Thoracic and Abdominal Aorta in Mice to Determine Aneurysm Dimensions

Contemporary high-resolution ultrasound instruments have sufficient resolution to facilitate the measurement of mouse aortas. These instruments have been widely used to measure aortic dimensions in mouse models of aortic aneurysms. Aortic aneurysms are defined as permanent dilations of the aorta, which occur most frequently in the ascending and abdominal regions. Sequential measurements of aortic dimensions by ultrasound are the principal approach for assessing the development and progression of aortic aneurysms in vivo. Although many reported studies used ultrasound imaging to measure aortic diameters as a primary endpoint, there are confounding factors, such as probe position and cardiac cycle, that may impact the accuracy of data acquisition, analysis, and interpretation. The purpose of this protocol is to provide a practical guide on the use of ultrasound to measure the aortic diameter in a reliable and reproducible manner. This protocol introduces the preparation of mice and instruments, the acquisition of appropriate ultrasound images, and data analysis.

Ultrasound imaging has become a common modality to determine the luminal dimensions of thoracic and abdominal aortic aneurysms in mice. This protocol describes the procedure to acquire reliable and reproducible two-dimensional ultrasound images of the ascending and abdominal aorta in mice.

マウス脳動脈瘤のサイズを調べるために胸部、腹部の大動脈の超音波断層像

Contemporary high-resolution ultrasound instruments have sufficient resolution to facilitate the measurement of mouse aortas. These instruments have been ...

Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. An aneurysm forms as a result of progressive weakening and eventual dilation of the aorta, which can rupture or tear once it reaches a critical diameter. Aneurysms of the descending aorta in the chest, called descending thoracic aortic aneurysms (dTAA), make up a large proportion of aneurysm cases in the United States. Uncontained dTAA rupture is almost universally lethal, and elective repair has a high rate of morbidity and mortality. The purpose of our model is to study dTAA specifically, to elucidate the pathophysiology of dTAA and to search for molecular targets to halt the growth or reduce the size of dTAA. By having a murine model to study thoracic pathology precisely, targeted therapies can be developed to specifically test dTAA. The method is based on the placement of porcine pancreatic elastase (PPE) directly on the outer murine aortic wall after surgical exposure. This creates a destructive and inflammatory reaction, which weakens the aortic wall and allows for aneurysm formation over weeks to months. Though murine models possess limitations, our dTAA model produces robust aneurysms of predictable size. Furthermore, this model can be used to test genetic and pharmaceutical targets which may arrest dTAA growth or prevent rupture. In human patients, interventions such as these could help avoid aneurysm rupture, and difficult surgical intervention.

We describe a surgical protocol to consistently induce robust descending thoracic aortic aneurysms in mice. The procedure involves left thoracotomy, thoracic aorta exposure, and placement of a sponge soaked in porcine pancreatic elastase on the aortic wall.

局所エラスターゼ誘発下下胸部大動脈瘤のマウス外科モデル

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. ...

Porcine Model of Infrarenal Abdominal Aortic Aneurysm

Large animal models to study abdominal aortic aneurysms are sparse. The purpose of this model is to create reproducible, clinically significant infrarenal abdominal aortic aneurysms (AAA) in swine. To achieve this, we use a combination of balloon angioplasty, elastase and collagenase, and a lysyl oxidase inhibitor, called &#946;-aminopropionitrile (BAPN), to create clinically significant infrarenal aortic aneurysms, analogous to human disease.
Noncastrated male swine are fed BAPN for 7 days prior to surgery to achieve a steady state in the blood. A midline laparotomy is performed and the infrarenal aorta is circumferentially dissected. An initial measurement is recorded prior to aneurysm induction with a combination of balloon angioplasty, elastase (500 units)/collagenase (8000 units) perfusion, and topical elastase application. Swine are fed BAPN daily until terminal procedure on either postoperative day 7, 14, or 28, at which time the aneurysm is measured, and tissue procured. BAPN + surgery pigs are compared to pigs that underwent surgery alone.
Swine treated with BAPN and surgery had a mean aortic dilation of 89.9% &#177; 47.4% at day 7, 105.4% &#177; 58.1% at day 14, and 113.5% &#177; 30.2% at day 28. Pigs treated with surgery alone had significantly smaller aneurysms compared to BAPN + surgery animals at day 28 (p &#60; 0.0003). The BAPN + surgery group had macroscopic and immunohistochemical evidence of end stage aneurysmal disease.
Clinically significant infrarenal AAA can be induced using balloon angioplasty, elastase/collagenase perfusion and topical application, supplemented with oral BAPN. This model creates large, clinically significant AAA with hallmarks of human disease. This has important implications for the elucidation of AAA pathogenesis and testing of novel therapies and devices for the treatment of AAA. Limitations of the model include variation in BAPN ingested by swine, quality of elastase perfusion, and cost of BAPN.&#160;

This novel model creates robust infrarenal abdominal aortic aneurysms in swine using a combination of balloon angioplasty, elastase/collagenase perfusion, topical elastase application, and oral compound &#946;-aminopropionitrile administration, which interferes with collagen cross-linking.

尿毛腹部大動脈瘤の豚モデル

Large animal models to study abdominal aortic aneurysms are sparse. The purpose of this model is to create reproducible, clinically significant infrarenal ...

外ヴァーサ栄養血管の血流をブロックすることにより腹部の大動脈瘤の齧歯動物モデルの作成

要約

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Aortopathy β-アミノプロピオニトリルによる大動脈瘤と解離のマウスモデルでのマイクロ CT 定量分析

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