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11.26 : キャピラリー電気泳動:機器

キャピラリー電気泳動機器は、通常、いくつかの主要なコンポーネントで構成されています。高電圧電源は、キャピラリーの両端にあるバッファーリザーバーにあるアノード(正に帯電した電極)とカソード(負に帯電した電極)に接続することで、分離に必要な電界を生成します。システムには、サンプル バイアル、分離中にサンプル成分が移動する機械的強度を高めるためにポリイミドでコーティングされた溶融シリカキャピラリー、および分離された成分を分析するための検出器が含まれます。

プロセスを開始するには、サンプルをキャピラリーに導入する必要があります。これは、キャピラリーの一端とその電極を関連するバッファーリザーバーから取り外し、サンプルバイアルに配置することで実現します。サンプルの導入は、サンプルバイアルに圧力をかける流体力学的注入、または電界を利用してサンプルをキャピラリーに送り込む電気運動学的注入によって行うことができます。

導電性緩衝液が入ったキャピラリーに電流が流れると、キャピラリーカラムの狭い内径とキャピラリー壁の相対的な厚さにより、ジュール熱が発生します。ジュール熱とは、電流が導電性媒体(この場合はキャピラリー内の緩衝液)を通過するときに発生する熱を指します。これは、熱の形でのエネルギー散逸に直接関係しており、式 Q = I^2Rt で定義されます。ここで、Q は熱エネルギー(ジュール)、I は電流、R は抵抗、t は時間です。キャピラリー電気泳動では、この加熱により緩衝液の粘度が変化し、キャピラリーの中心にある溶質が壁近くの溶質よりも速く移動し、バンドが広がり、分離が低下します。内径が小さいキャピラリーはジュール熱が少なく、外径が大きいキャピラリーは熱を放散する効率が高くなります。

サンプル濃度が低い場合は、スタッキング技術を使用して検出感度を高めることができます。この方法では、緩衝溶液よりもイオン強度が低い溶液にサンプルを注入し、サンプル成分を 2 つの溶液の界面に濃縮します。

サンプルが導入されると、緩衝システム全体に高電圧が印加され、電気浸透流によって荷電種がカソードに向かって移動します。成分の分離は、電界内での電気泳動移動度に基づいて行われます。

キャピラリー電気泳動では、分離された成分を検出および分析するために、吸光、蛍光、伝導率、質量分析などのさまざまな検出器が一般的に使用されています。

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Capillary ElectrophoresisInstrumentationHigh voltage Power SupplyAnodeCathodeBuffer ReservoirsSample VialFused Silica Capillary TubeHydrodynamic InjectionElectrokinetic InjectionJoule HeatingConductive Buffer SolutionSample ConcentrationStacking TechniqueDetection Sensitivity

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