Retina divisa come preparazione flatmount migliorata per lo studio dei neuroni dello strato nucleare interno nella retina dei vertebrati

Il nostro gruppo è interessato ai circuiti neuronali e ai meccanismi sinaptici alla base dell'elaborazione visiva nella retina. Il Morgans Lab sta studiando i meccanismi molecolari di adattamento alla luce nelle cellule bipolari e il Sivyer Lab è interessato a come i neuroni retinici interni contribuiscono alla funzione delle cellule ganglionari. L'accesso ai neuroni dello strato internucleare nell'intera retina è una sfida sia per gli studi anatomici che per quelli fisiologici.

I neuroni dello strato internucleare sono accessibili in sezioni verticali, ma sono pochissimi i neuroni nel campo visivo. Inoltre, l'affettatura recide i processi laterali e le connessioni che possono avere un impatto sugli studi fisiologici. La rimozione dei fotorecettori nella tecnica della retina divisa migliora notevolmente la diffusione degli anticorpi nella retina interna, il che rende l'immunomarcatura dei bersagli retinici interni oltre 20 volte più veloce rispetto alla tradizionale retina a montaggio intero.

La retina divisa migliora notevolmente anche l'accesso ai neuroni dello strato internucleare durante l'elettrofisiologia del patch clamp. La tecnica della retina divisa aprirà le porte a nuovi approcci e accelererà il ritmo dei nostri esperimenti. Ad esempio, abbiamo in programma di utilizzare questa tecnica per studiare gli input delle cellule bipolari alle cellule gangliari della melanopsina esprimendo la canalrodopsina nelle cellule bipolari.