Produzione e ottimizzazione di LTE, un sistema di espressione proteica libera derivato da Leishmania tarantolae per la produzione di proteine ricombinanti

Il nostro sistema di espressione proteica cell-free, che in genere richiede una catena del freddo per il trasporto, ha ora una versione liofilizzata pionieristica. Questa versione rimane stabile a temperatura ambiente, il che lo rende il primo sistema eucariotico disponibile in questo formato. Ciò semplifica il trasporto verso i laboratori e le applicazioni sul campo.

Le attuali sfide sperimentali della produzione di proteine libere da cellule includono l'ottimizzazione delle condizioni di reazione per garantire che le proteine ricombinanti siano correttamente ripiegate e attive. Sebbene il rapporto costo-efficacia delle tecniche cell-free rispetto all'espressione proteica convenzionale in vivo rimanga una sfida significativa, la semplicità di produzione del nostro sistema eucariotico LTE cell-free aiuta ad alleviare questo problema. Il sistema privo di cellule LTE facilita la rapida ricostituzione e analisi delle reti proteiche e delle vie biosintetiche.

La sua integrazione con tecnologie come AlphaLISA e i saggi in vivo consente l'analisi funzionale di sistemi complessi, tra cui la rete di interazione proteica di SARS-CoV-2 e il secretoma di anchilostomi. Il sistema senza cellule LTE consente una produzione rapida ed economica di proteine difficili da esprimere in un formato multiplex. Offre una facile ottimizzazione per la sintesi proteica, eccellendo nella produzione di proteine complesse o tossiche.

Il sistema è scalabile e fornisce una qualità costante da lotto a lotto.