Questo protocollo consente esperimenti di microalghe replicati con poco input da parte dell'utente. È progettato per i ricercatori che desiderano passare da boccette monitorate manualmente a boccette da banco senza acquistare bioreattori fotografici commerciali tecnici e costosi. Questo bioreattore fotografico consente il rapporto di luce e la flessibilità, il monitoraggio continuo della crescita e la replicazione triplice.
Per iniziare, apri il software di acquisizione dati. Compilare la pagina di configurazione e assegnare i file di calibrazione ai rispettivi sensori. Sotto il nome del file di directory, selezionare la cartella corrispondente del numero di porta del modulo di input digitale.
Fare clic sulla cartella corrente e ripetere l'operazione per tutte le porte. Quindi fare clic su OK per passare alla pagina di registrazione. Quindi, riempire le bottiglie di vetro al volume desiderato con il terreno di coltura e centrifugare la coltura stock in tre tubi bilanciati da 50 millilitri per ottenere tre pellet.
Aggiungere un pellet a ciascun flacone utilizzando una pipetta sierologica e un terreno fresco. Quindi rilasciare un agitatore magnetico da 25 per otto millimetri in ciascuna bottiglia prima di sigillare l'apertura della bottiglia con un tappo di gomma e un tappo a vite filettato ad apertura. Se sono installate porte di campionamento opzionali, chiudere le valvole.
Dopo aver individuato l'estremità di ciascuna linea del gas all'interno del tubo in PVC, collegare un ago alla porta di richiamo della posta della valvola. Collegare ogni bombola al suo sensore di gas perforando ogni tappo di gomma con l'ago corrispondente. Quindi, avvia ciascun sensore di gas singolarmente selezionando la casella di controllo sul lato sinistro dello schermo, facendo clic su Start e inserendo un nome file.
Fare clic su OK e ripetere l'operazione per tutti i sensori. Quindi, accendere il fotoreattore bio e assicurarsi che il controller di illuminazione multiplex digitale sia collegato a un alimentatore. Utilizzando il pulsante sul controller multiplex digitale, passare dalla scena di supporto alla scena di luce personalizzata per garantire che il dispositivo funzioni correttamente.
Per il campionamento delle bottiglie, preparare altri 500 millilitri di terreno fresco prima di iniziare l'esperimento. Per raccogliere il campione, chiudere la valvola sulla linea del gas e collegare una siringa da 10 millilitri alla valvola della porta di campionamento. Dopo aver collegato la siringa, aprire la valvola della porta di campionamento e prelevare otto millilitri di coltura.
Quindi chiudere la valvola della porta di campionamento e scollegare la siringa. Quindi, collegare una siringa contenente otto millilitri di mezzo fresco alla valvola della porta di campionamento. Quindi aprire la valvola e iniettare il mezzo fresco.
Infine, chiudere la valvola della porta di campionamento e scollegare la siringa. Per esportare i dati, selezionare file e dati offline. Dopo aver selezionato tutti i file di registro pertinenti, esportare i dati nel software del foglio di calcolo e salvarli.
Un esperimento di successo è caratterizzato da un modello diurno strettamente replicato di produzione di ossigeno. La portata dell'ossigeno funge da proxy per il tasso di crescita di una coltura. Durante le ore illuminate, la produzione di gas aumenta costantemente e durante le ore non illuminate, la produzione di gas si ferma.
Il volume totale di ossigeno prodotto in quattro giorni variava da 316 millilitri nel trattamento A a 902 millilitri nel trattamento C.In il regime di luce di 300 micro mole per metro quadrato al secondo, la temperatura aumentava di un massimo di 1,4 gradi Celsius durante il giorno. Le temperature di coltura sono tornate al basale durante la notte. Nonostante le diverse concentrazioni iniziali di biomassa, i trattamenti B e C hanno generato la stessa quantità di biomassa totale causando identici spostamenti nel pH medio.
I dati online sulla portata di ossigeno hanno rivelato che ogni trattamento aveva tassi di crescita giornalieri variabili, che si riflettevano anche nelle misurazioni del pH due volte al giorno. Il primo giorno, il tasso di crescita del trattamento B era inferiore a quello del trattamento C.Mentre al terzo giorno, i tassi di crescita del trattamento B hanno superato quelli del trattamento C.I dati sulla velocità di flusso dell'ossigeno hanno indicato che la crescita più elevata si è verificata il terzo giorno nel trattamento B.Le stime di crescita basate sull'ossigeno totale misurato dovrebbero sottostimare leggermente la crescita della biomassa, che era valida per cinque esempi su sette. Due esempi hanno sovrastimato la crescita.
Questo potrebbe essere stato influenzato dagli esperimenti determinati alla fine della notte. La respirazione notturna sostanziale aumenta il consumo di ossigeno, genera un vuoto spaziale della testa della bottiglia, aspirando la confezione con il liquido dai sensori di gas. Se la respirazione può essere alta, apriamo lo spazio della testa durante la notte.
