פרוטוקול זה שימושי לבדיקת רגישות מכנית בגב. הוא מעניין במיוחד עבור עיצובי אורך במודלים של חולדות של כאבי גב כרוניים, שמטרתם לבחון יעילות של התערבות להפחתת רגישות הגב לגירויים מזיקים. השיטה פשוטה, נגישה ומניבה תוצאות ניתנות לשחזור אצל נסיינים מיומנים.
הוא מבוסס במידה רבה על מבחן פון פריי, המשמש בדרך כלל להערכת רגישות מכנית בכפה האחורית. כמו בכל מבחן התנהגותי אחר, על הנסיינים לתרגל סטנדרטיזציה של יישום החוטים, ועד שניתן להבחין בקלות בין התנהגויות המיוצרות על ידי גירויים מכניים לבין התנהגויות אחרות. הבדיקה פשוטה, אחרת, ולא אמור להיות קושי גדול להשתמש בה.
מי שידגים את ההליך יהיה נאסים אסקנדרי, דוקטורנט מהמעבדה שלי. כדי לגרום לכאבי גב כרוניים בחולדה, בצעו הזרקה תוך שרירית של האדג'ובנט של Complete Freund, או CFA, לשרירי הגב. באמצעות מחט 27 מד, להזריק 150 מיקרוליטר של תחליב מים בשמן מוכן לשימוש של CFA לתוך השרירים paraspinal באופן חד צדדי או דו צדדי.
שמור את המחט במקום לפחות שלוש דקות. לאחר מכן, ייצרו את כלוב הבדיקה עבור שני בעלי חיים, הכולל תא אחד לכל חיה על ידי הרכבת שני התאים הרציפים על ארבע רגלי פרספקס באורך 33 סנטימטרים. השתמשו בפרספקס שקוף לדפנות החדרים, ובפרספקס שחור כדי להפריד בין תאים כדי למנוע מבעלי חיים לראות זה את זה.
לאחר מכן הפוך את הרצפה והתקרה של כלוב הבדיקה באמצעות רשת נירוסטה עשויה חוט אחד מילימטר עם מרחק חוט שמונה מ"מ. הכירו את כלוב הבדיקה של החולדה במשך 30 דקות ביום במשך חמישה עד שבעה ימים רצופים לפני הבדיקה הראשונה. במצב נוטה תחת הרדמה איזופלורנית, יש לגלח את שיער הגב באזור העניין מעל כ-10 רמות חוליות באמצעות גוזם שיער של בעלי חיים.
לפעולות חוזרות ונשנות, יש לגלח את השיער האחורי כל שלושה ימים ללא הערכה התנהגותית כדי להבטיח שהגירויים תמיד מיושמים ישירות על העור. צייר סימן על העור עם סמן קבוע כדי להבטיח כי חוטים מוחלים תמיד על אותו אזור בעת חזרה על הבדיקה בימים שונים. ביום הבדיקה, הכניסו את החולדה לכלוב הבדיקה למשך 15 עד 30 דקות לפני הבדיקה עד שהחולדה רגועה.
לאחר מכן יש למרוח חוטי פון פריי בניצב לגב, תמיד החל מחוט הלהט במשקל שני גרם ובשיטת מעלה/מטה. החל את חוט הלהט במשך שתי שניות באופן דו צדדי על האזור המעניין 10 מ"מ מעמוד השדרה מעובד כל 15 עד 30 שניות כאשר החולדה ערה, עומדת על ארבע כפותיה, ולא זזה. אם לא נצפתה תגובה עם יישום של חוט להט, להחיל את חוט הלהט הבא עם כוח גבוה יותר בסדרה.
אם נצפתה תגובה חיובית כגון הקשתת הגב, ליקוק, עוויתות שרירים, התרחקות מחוט הלהט או סיבוב, השתמש בחוט הלהט הבא עם כוח נמוך יותר בסדרה. המשך את ההליך עד ארבע קריאות מתקבלות לאחר השינוי ההתנהגותי הראשון. במחקר זה נבדקה רגישות מכנית של הגב בין CFA לבין חולדות ביקורת.
בנקודת ההתחלה, הרגישות המכנית הייתה דומה בין הקבוצות. הזרקה תוך שרירית של CFA בשרירי המותניים גרמה לעלייה ניכרת ברגישות המכנית משבעה ל -28 ימים. לעומת זאת, חולדות הביקורת לא הראו שינוי משמעותי.
יתר על כן, בדיקה היסטולוגית אישרה את נוכחותם של שינויים דלקתיים כרוניים בשרירים שהוזרקו עם CFA עם חדירת לויקוציטים ברורה. שרירי גב בריאים מחולדה מבוקרת לאחר הזרקה תוך שרירית של מי מלח מוצגים כהפניה. רגישות היתר המכנית נצפתה בכפה האחורית במבחן פון פריי סטנדרטי, בנוסף לשרירי הגב.
חשוב מאוד לוודא כי חוט הלהט מוחל תמיד באותו אופן בניצב לגב, וכי החיה אינה זזה בעת החלתו. הנסיין צריך גם להרגיש ביטחון בהבחנה בין תגובות התנהגותיות לתנועות מודרניות.
