מוות המוח אינדוקציה עכברים באמצעות לחץ דם פנים עורקים ניטור ואוורור באמצעות קנה מאוזן

למרות שתרומה לאחר מוות מוחי של תורם היא המקור העיקרי להשתלת איברים מוצקים, האובדן הבלתי הפיך של תפקוד המוח גורם לשינויים פתופיזיולוגיים שמובילים לתגובה דלקתית מערכתית. מודל מורין זה של אינדוקציה של מוות מוחי מאפשר שימוש במגוון רחב של כלים אנליטיים ומודלים נוקאאוט כדי לחקור את המסלולים של ויסות מוות מוחי. לצנתור עורקי לאחר אישור חוסר תגובה רפלקס הדוושה והסרת שיער הבטן העליונה, לחטא את העור החשוף עם 70% אתנול ולהשתמש מספריים ניתוח לעשות חתך קו האמצע בעור.

באמצעות מטלפים, בוטה לנתח את בלוטות submandibular ואת רקמת שריר הצוואר ולהפריד את הרקמות כדי לחשוף את העורק הראשי נפוץ. מקום שלוש 8-0 ליגטורות משי מתחת לעורק הראשי המשותף הנכון ומ מניחים מלחציים על הקשירה הפרוקסימלית. הביאו מתח בזרם כך שהזרימה תושעה וסגרו את הקשירה הדיסטלית ביותר.

הכנס קטטר עורקי 26-מד דרך חור עור מעוצב מראש קטן על ההיבט הגולגולתי של החתך. לסחוט את הקטטר עם מדפים אם לומן הוא גדול מדי כדי להפחית את הזרימה האחורית ולאבטח את קטטר עם כל שלושת התפרים, ולאחר מכן להשתמש יחיד 5-0 monofilament nonabsorbable כדי לתקן את הקטטר לעור ליד חור העור preformed. כדי לבצע tracheostomy, להשתמש במטסים כדי לנתח קהה את השרירים הקדם-צבאיים ולמקום שני 8-0 קשירה משי מתחת קנה הנשימה.

הכנס את צינור האוורור בין שני סחוסים קנה הנשימה כדי למנוע אוורור חד צדדי ולאבטח את הצינור עם שתי הקשירות מוכנות, ולאחר מכן לסגור את העור עם 6-0 monofilament תפר ריצה nonabsorbable ולאוורר את העכבר עם תדר של 150 לדקה ונפח גאות ושפל של 200 microliters. כדי לגרום למוות מוחי בבעל החיים הניסיוני, סדר את העכבר לתדר הנוטה, והחזקת העור במטסים, השתמש במספריים כירורגיים כדי להסיר את העור מהגולגולת. לקדוח חור קליפר מילימטר אחד perimedially מעל קליפת המוח הקודקודית השמאלית ולהשתמש מדחפים קהה לחדור גשר הרקמה הסופי של הגולגולת.

לאחר הסרת כל הקצוות החדים, להכניס קטטר בלון ממולא מראש עם מלוחים עם כל האוויר פונה. כאשר הקטטר נמצא כולו בתוך חלל הגולגולת, השתמש במשאבת מזרק כדי להתחיל לנפח את הקטטר בכ -0.1 מילימטרים לדקה על פני תקופה של 10 עד 15 דקות. כאשר מוות מוחי מתרחש, לעצור את האינפלציה של קטטר בלון ולהמקם שמיכת חימום על העכבר, כדי למנוע היפותרמיה.

לאחר מוות מוחי אושר, לפקח ולתעד את לחץ הדם באופן קבוע, מחדיר 100 microliters של מלוחים כל 30 דקות כדי לייצב את לחץ הדם של החיה. לאחר ארבע שעות של מוות מוחי, להוציא את כל בעלי החיים מבלי להכות לבבות לקצור את איברי העכבר ורקמות עניין על פי פרוטוקולים סטנדרטיים. לאחר אינדוקציה מוחית-מוות, לחץ הדם מציג שיא יתר לחץ דם ראשוני ואחריו שלב תת לחץ דם ממושך.

תצפית מבוססת נוספת היא כי אינדוקציה מוות מוחי מובילה להפעלה של המערכת החיסונית. ואכן, לאחר ארבע שעות של מוות מוחי במודל זה, רגולציה ספציפית לאיבר של סמנים חיסוניים נצפית ברמת mRNA. לאחר תקופה מוגדרת מראש של מוות מוחי, האיברים עשויים להיות שנקטפו לניתוח הישיר שלהם או להשתלת איברים לאחר מכן.

מודל זה יאפשר מחקרי עומק על השפעת הפציעה הנגרמת כתוצאה ממוח וכבר חשף תובנות חדשות לגבי הפעלה משלימה והגירה לויקוציט.