זיהוי של התקדמות הגידול ריאה בעכברים על ידי הדמיה אולטרסאונד

המשמעות של פרוטוקול זה טמונה בגילוי בזמן אמת של גידולי הריאות שהתפתחו באופן ספונטני במודל העכבר הזה, החל מייזום הגידולים והתקדמות הגידול. היתרון של טכניקה זו הוא כי הוא לא פולשני, הוא דורש רק מיומנות בסיסית ולאפשר לנו לפקח ישירות על ההשפעה של התרופה וטיפול עניין. התקדמות גידול ריאות ניתן להעריך גם בנוכחות או היעדר גן של עניין.

באמצעות ניתוח זה, אסטרטגיות טיפול חדשניות ניתן להאריך פוטנציאלית למרפאה. שבעה ו -18 שבועות לאחר צנרור lentiviral, להפעיל את משאבת החימום עבור ג'ל אולטרסאונד צג הטמפרטורה ולהגדיר חממה 33 מעלות צלזיוס. מניחים את המנוע 3D על מערכת הרכבת המשולבת ולאשר כי המנוע ואת מערכת הרכבה מתמר מאובטחים במקום.

לחבר מתמר תדר 40 הרץ למנוע 3D ולפתוח מחקר חדש בתוכנת אולטרסאונד. בחלון הלימוד החדש, הזן את שם המחקר. בחלון שם הסדרה, הזן שם סידרה וכל מידע רלוונטי אחר.

לאחר לחיצה על בוצע, בחר את סוג מתמר. התוכנית תשתנה למצב B. מניחים מנורת חימום בתנוחה נוחה מעל פלטפורמת החיה ומאשרים חוסר תגובה לרפלקס הדוושה בעכבר הניסיוני הרדמה.

מניחים את העכבר על פלטפורמת החיה לתוך הגחון של האם ולהחיל משחה על העיניים של החיה. אבטחו את הגפיים בחוזקה לפלטפורמה עם סרט הדבקה והחלו שכבה דקה של ג'ל האולטרסאונד החם על החזה של החיה. השתמש בכפתור בקרת הגובה כדי להוריד את גשוש הרכישה עד שהוא נוגע במשטח של חזה העכבר ולמקם את החללית כך של לב העכבר מרוכז בקירוב.

לאחר מכן השתמשו במיקרו ידיות כדי לרכוש תמונות של החזה כולו משני גפיים בכיוון הרוחבי. באופן אידיאלי איסוף 500 מסגרות לכל עכבר. לאחר שכל התמונות נלכדו, נקו את הג'ל מחזה העכבר והכנסו את החיה לחממה המתחממת.

לניתוח דו-מימדי של תמונות האולטרסאונד, פתחו את המסגרות הנרכשות בתוכנת האולטרסאונד וסרקו ידנית את המסגרות לגידולים. עבור גידולים ייזום קטן, לספור את מספר beelines מעת לעת כל 10 מסגרות לכל אורך של 500 מסגרות שנרכשו. עבור מדידות דו-ממדיות של גידולים גדולים השתמש בכלי ליניארי כדי למדוד את הרוחב והאורך של הגידול הנוכחי, ולאחר מכן לחשב את נפח הגידולים באמצעות הנוסחה.

שבעה שבועות לאחר זיהום תוך-קנה הנשימה, הדמיית אולטרסאונד מבוצעת כדי לדמיין את הסוגים השונים של נגעים מבשר המתרחשים במודל העכבר הניסיוני לאחר ההזרקה. נגעים אלה beeline מזוהה מבשר ניתן לספור על ידי העין המייצגים גידולים קטנים על פני השטח של הריאות. התוויית פיזור של נתונים אלה מאפשרת לכמת את הגידולים בתוך העכברים הניסיוניים כדי לאפשר הערכה של מספר הגידול היחסי לכל בעל חיים.

ב 18 שבועות לאחר זיהום, גידולים גדולים מופיעים כמו שסועים עמוקים להפריע משטח הרבים שניתן למדוד בתוך תוכנת אולטרסאונד. לאחר מכן ניתן לכמת את נפח הגידול היחסי לצורך ניתוח סטטיסטי. המטוקסילין וכתמי אאוסין על חלקי ריאות שנקטפו ב 20 שבועות לאחר זיהום מאשר היווצרות של גידולים גדולים, כמו גם היווצרות של אדנומה אדנוקרצינומה.

חשוב לא לבלבל את גידולי הריאות, שהם דינמיים, עם תוצאות חיוביות שגויות, שהם סטטיים. מאז ההסמכה של מספר הגידול של הנפח הוא יחסי בשיטה זו, אנו ממליצים להשתמש בשיטות נוספות, כגון כתם פטרי. מודל זה מאפשר הערכה ישירה של ההשפעות של סטייות גנטיות או אסטרטגיות טיפול על התפתחות סרטן ריאות בעכברים.