ד ר חאן מאשר תמיכה גרנט K12HD052892 NIH/NICHD, קרן אלפא-1, קרן הילמן, המרכז לחקר הכבד פיטסבורג. ד ר Michalopoulos מאשר גרנט תמיכה של NIH/NIDDK P01DK096990. אנו מעריכים את הסיוע הטכני מצוין ונדיב של אור אן. אנחנו גם אסיר תודה דר דוד א למתן גישה למעבדה למיקרו השתלת/מכרסם.

כל ההליכים התנהלו על פי הנחיות אתית ראש הוועדה אכפת לי חיה מוסדיים שימוש של אוניברסיטת פיטסבורג.
1. יסוד טכניקות והליכים נפוצים
<ol><li>אוטוקלב כל הציוד השתלה לפני השימוש.</li>
	<li>כדי להימנע להרוג את העכבר על ידי הרדמה, בדקו בקפידה את דפוס הנשימה שלו.</li>
	<li>לגעת איברים והמעיים מעט ככל האפשר למנוע פגיעה באיברים וגורם לדימום. לחץ על נקודות דימום עם ספוגיות כותנה רטוב או גזה ספוגים.</li>
	<li>השתמש ספוגיות כותנה רטוב מניפולציה עדינה של איברים. רטוב, ארוגים גזה ספוגים נעשה שימוש בשני גדלים, 3.5 × 3.5 ס"מ ו- 6.0 × 6.0 ס מ. להשתמש אחד קטן יכול לחזור בו כל הכבד. השתמש הגדול מבינהם לעטוף את המעיים קטנים וגדולים.</li>
</ol>2. הכנה presurgical
<ol><li>השתמש עכברים c57/b6 זכר, 8-12 שבועות של גיל (כאשר משקל הגוף היא כ 20-35 גרם) של צינור המרה חלקית מצדו.</li>
	<li>לאפשר העכברים גישה חופשית אוכל ומים עד אינדוקציה של הרדמה.</li>
</ol>3. חלקי צינור המרה מצדו פעולה
<ol><li>עזים ומתנגד העכבר בהצבת החיה תא אינדוקציה עם שילוב של 1.5-2.0% חמצן איזופלוריין ו- 1 ליטר/דקה. נטר את החיה בקפידה על ידי התבוננות את קצב הנשימה. כאשר קצב הנשימה של החיה נשימה אחת לשניה, העכבר הוא anesthetized היטב. מאז רפלקס הנסיגה האיבר קבלה נעלם במהירות רבה יותר, צבוט הגפיים האחוריות הרגל כמו גם לאשר היעדרות מוחלטת של רפלקס הנסיגה. צריך להיות משיכור למר עיניים עם סוכן סיכה אופטלמולוגיות כדי למנוע כיבים הקרנית. הערה את המנה הראשונה של שיכוך כאב יכול להינתן אולטרסאונד כדי למנוע גירוי של קולטני כאב.</li>
	<li>לגלח את דופן הבטן עם קוצץ שיער, מקם את העכבר על השולחן ניתוחים במיקרוסקופ כירורגי. לתקן את כל האיברים לשולחן עם קלטת. השתמש איזופלוריין שאיפה לשמור על העכבר בהרדמה כללית.<ol>
<li>התאם את מאדה איזופלוריין ומשתמשים איזופלוריין 2.0 – 3.0% אינדוקציה.</li>
	</ol>
</li>
	<li>באמצעות מטליות סטרילי, לחטא לקיר הבטן קודם עם 0.3-0.5 מ ל povidone-יוד למריחה על העור, ואחריו 70% אתנול. בעל חיים צריך להיות מכוסה תלוי סטרילי.</li>
	<li>עושים קו האמצע ארוך בטן חתך של מצאתי כדי לחיקו באמצעות מספריים לאדאמסון מלקחיים. לאחר ביצוע החתך בבטן, להפחית את איזופלוריין ל- 0.8-1.0% לצורך תחזוקה.</li>
	<li>חושפים את חלל הבטן בעזרת מפסק-מיקרו. להחזיק מצאתי עם מלקחיים יתושים ומשכו לכיוון הראש של העכבר. לתקן את המלקחיים יתוש במקום באמצעות חימר רך.</li>
	<li>להקנות 1-2 מ ל ומחוממת (37 מעלות צלזיוס) סטיריליים באגירה פוספט תמיסת מלח (PBS) לתוך חלל הבטן כדי למנוע ופצעו אברי הבטן. להחזיק את המעי הדק עם ספוגיות כותנה רטוב, בעדינות. משכי אותם לכיוון הראש של העכבר. חותכים את הרצועות בין המעי הדק את מקבץ להימנע ופצעו את המעי הדק (איור 1 א').</li>
	<li>לעטוף את המעיים קטנים וגדולים עם ספוג גזה רטוב, ארוגים. למקם אותם על הצד סימטרית של חלל הבטן. המעיים עטוף גזה סטרילית ניתן להניח על המגרש הצרה סטרילי כדי למנוע זיהום.</li>
	<li>בעדינות תמשוך את הכבד כל לכיוון מצאתי באמצעות ספוג גזה ארוגים רטוב קטן כדי לחשוף את הכבד hilum רצועה hepato-תריסריון (איור 1B).</li>
	<li>בדוק כדי לוודא את האנטומיה של hilum הכבד. צינור המרה ממוקם בצד הגחוני של וריד שער הכבד. אשר מיקומם של הימין ו שמאל הכבד המרה, אשר נשפכים המפגש בכיס המרה הראשי ב hilum הכבד.</li>
	<li>לזהות את שמאל צינור מרה בכבד אשר מנקז האונה השמאלית ולאחר להקיף אותו ניילון 10-0 בתפר באמצעות הצד הקהה של מחט תפירה (איור 2 א). הימנע ופצעו את וריד שער הכבד, עורק הכבד ואת פני הכבד.</li>
	<li>מאתרים ומפסיקים המרה השמאלי עם ניילון 10-0. (איור 2B).</li>
	<li>מקם את המעיים קטנים וגדולים באותו מיקום כמו לפני הניתוח באמצעות ספוגיות כותנה רטוב.</li>
	<li>לוודא שאין פיתול מעיים בו התוך ופגיעות, ולאחר מכן סגור את השריר ואת העור בשתי שכבות עם 4-0 איחוי. קלועה תפר (איחוי) שימש לסגירה העור, אך monofilament מועדף כדי להפחית את הסבירות של זיהום. הערה: לסגור fascia על-ידי תפירה המשך ממצאתי כדי לערווה וסגור העור על ידי תפרים המשך מהמפשעה כדי מצאתי.</li>
	<li>תפסיק הרדמה לאחר סגירת החתך.</li>
</ol>4. לאחר הניתוח טיפול ומעקב
<ol><li>רק לאחר הניתוח, צובטים את העור הגבי של העכבר, להזריק Buprenex (0.1 מ"ג/ק"ג), צפאזולין (100 מ ג/ק ג). subcutaneously, ואחריו Buprenex זריקה כל 12 שעות עבור 3 ימים ולאחר צפאזולין כל 24 שעות במשך 3 ימים בהתאמה11,12 ,13. הערה את המנה הראשונה של שיכוך כאב יכול להינתן אולטרסאונד כדי למנוע גירוי של קולטני כאב. צפאזולין, ו אנטיביוטיקה אחרים פרי-פעיל נחוצים רק לבעלי-חיים דיכא החיסונית, כגון אלה המשמשות במחקרים השתלת. הערה: אם הניתוח מבוצע בהצלחה, העכבר בדרך כלל משחזרת בתוך 30 דקות פעילות של העכברים יהיה כמעט זהה כתנאי לפני הניתוח.</li>
	<li>בדוק את העכברים מדי יום עבור סימנים של מצוקה.<ol>
<li>להקריב את העכברים מאת נקע בצוואר הרחם בהרדמה כללית להשיג כבדי ודוגמאות רקמה אחרים בנקודות זמן מוגדר (כלומר, 7, 14, 21 ימים) לאחר pBDL.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol>
	<li>Higgins, G. M., Anderson, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+pathology+of+the+liver+-+Restoration+of+the+liver+of+the+white+rat+following+partial+surgical+removal.">Experimental pathology of the liver - Restoration of the liver of the white rat following partial surgical removal.</a> Arch Pathol. 12, 186-202 (1931).</li><li>Cameron, G. R., Oakley, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ligation+of+the+common+bile+duct.">Ligation of the common bile duct.</a> The Journal of Pathology and Bacteriology. 35 (5), 769-798 (1932).</li><li>Kountouras, J., Billing, B. H., Scheuer, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prolonged+bile+duct+obstruction:+a+new+experimental+model+for+cirrhosis+in+the+rat.">Prolonged bile duct obstruction: a new experimental model for cirrhosis in the rat.</a> Br J Exp Pathol. 65 (3), 305-311 (1984).</li><li>Michalopoulos, G. K., Barua, L., Bowen, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transdifferentiation+of+rat+hepatocytes+into+biliary+cells+after+bile+duct+ligation+and+toxic+biliary+injury.">Transdifferentiation of rat hepatocytes into biliary cells after bile duct ligation and toxic biliary injury.</a> Hepatology. 41 (3), 535-544 (2005).</li><li>Dipaola, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+intramural+epithelial+networks+linked+to+peribiliary+glands+that+express+progenitor+cell+markers+and+proliferate+after+injury+in+mice.">Identification of intramural epithelial networks linked to peribiliary glands that express progenitor cell markers and proliferate after injury in mice.</a> Hepatology. 58 (4), 1486-1496 (2013).</li><li>Guyot, C., Combe, C., Desmouliere, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+common+bile+duct+ligation+in+rat:+A+relevant+in+vivo+model+to+study+the+role+of+mechanical+stress+on+cell+and+matrix+behaviour.">The common bile duct ligation in rat: A relevant in vivo model to study the role of mechanical stress on cell and matrix behaviour.</a> Histochem Cell Biol. 126 (4), 517-523 (2006).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+bile+duct+ligation+on+bile+acid+composition+in+mouse+serum+and+liver.">Effect of bile duct ligation on bile acid composition in mouse serum and liver.</a> Liver Int. 32 (1), 58-69 (2012).</li><li>Tag, C. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bile+duct+ligation+in+mice:+induction+of+inflammatory+liver+injury+and+fibrosis+by+obstructive+cholestasis.">Bile duct ligation in mice: induction of inflammatory liver injury and fibrosis by obstructive cholestasis.</a> J Vis Exp. (96), e52438 (2015).</li><li>Osawa, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+mediators+induce+fibrogenic+effects+in+normal+liver+after+partial+bile+duct+ligation.">Systemic mediators induce fibrogenic effects in normal liver after partial bile duct ligation.</a> Liver Int. 26 (9), 1138-1147 (2006).</li><li>Khan, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bile+Duct+Ligation+Induces+ATZ+Globule+Clearance+in+a+Mouse+Model+of+alpha-1+Antitrypsin+Deficiency.">Bile Duct Ligation Induces ATZ Globule Clearance in a Mouse Model of alpha-1 Antitrypsin Deficiency.</a> Gene Expr. 17 (2), 115-127 (2017).</li><li>Birkhead, H. A., Briggs, G. B., Saunders, L. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxicology+of+cefazolin+in+animals.">Toxicology of cefazolin in animals.</a> J Infect Dis. 128, 378 (1973).</li><li>Kunst, M. W., Mattie, H., van Furth, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibacterial+efficacy+of+cefazolin+and+cephradine+in+neutropenic+mice.">Antibacterial efficacy of cefazolin and cephradine in neutropenic mice.</a> Infection. 7 (1), 30-34 (1979).</li><li>Traul, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+studies+of+post-surgical+buprenorphine+therapy+for+mice.">Safety studies of post-surgical buprenorphine therapy for mice.</a> Lab Anim. 49 (2), 100-110 (2015).</li><li>Carlson, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accumulation+of+PiZ+alpha+1-antitrypsin+causes+liver+damage+in+transgenic+mice.">Accumulation of PiZ alpha 1-antitrypsin causes liver damage in transgenic mice.</a> J Clin Invest. 83 (4), 1183-1190 (1989).</li><li>Sifers, R. N., Finegold, M. J., Woo, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alpha-1-antitrypsin+deficiency:+accumulation+or+degradation+of+mutant+variants+within+the+hepatic+endoplasmic+reticulum.">Alpha-1-antitrypsin deficiency: accumulation or degradation of mutant variants within the hepatic endoplasmic reticulum.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 1 (5), 341-345 (1989).</li><li>Rudnick, D. A., Shikapwashya, O., Blomenkamp, K., Teckman, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indomethacin+increases+liver+damage+in+a+murine+model+of+liver+injury+from+alpha-1-antitrypsin+deficiency.">Indomethacin increases liver damage in a murine model of liver injury from alpha-1-antitrypsin deficiency.</a> Hepatology. 44 (4), 976-982 (2006).</li><li>Heinrich, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Partial+bile+duct+ligation+in+mice:+a+novel+model+of+acute+cholestasis.">Partial bile duct ligation in mice: a novel model of acute cholestasis.</a> Surgery. 149 (3), 445-451 (2011).</li><li>Glaser, S. S., Alpini, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+the+cholehepatic+shunt+as+a+potential+therapy+for+primary+sclerosing+cholangitis.">Activation of the cholehepatic shunt as a potential therapy for primary sclerosing cholangitis.</a> Hepatology. 49 (6), 1795-1797 (2009).</li><li>Gurpinar, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+sulindac+derivative+inhibits+lung+adenocarcinoma+cell+growth+through+suppression+of+Akt/mTOR+signaling+and+induction+of+autophagy.">A novel sulindac derivative inhibits lung adenocarcinoma cell growth through suppression of Akt/mTOR signaling and induction of autophagy.</a> Mol Cancer Ther. 12 (5), 663-674 (2013).</li><li>Alpini, G. G., Francis, H., Marzioni, M., Venter, J., Phinizy, J., LeSage, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Madame Curie Bioscience Database. , (2013).</li><li>Kirkland, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+surgical+model+of+biliary+inflammation+and+obstructive+jaundice+in+mice.">Reversible surgical model of biliary inflammation and obstructive jaundice in mice.</a> J Surg Res. 164 (2), 221-227 (2010).</li><li>Delhove, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Longitudinal+in+vivo+bioimaging+of+hepatocyte+transcription+factor+activity+following+cholestatic+liver+injury+in+mice.">Longitudinal in vivo bioimaging of hepatocyte transcription factor activity following cholestatic liver injury in mice.</a> Sci Rep. 7, 41874 (2017).</li><li>Li, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Homing+of+bone+marrow+mesenchymal+stem+cells+mediated+by+sphingosine+1-phosphate+contributes+to+liver+fibrosis.">Homing of bone marrow mesenchymal stem cells mediated by sphingosine 1-phosphate contributes to liver fibrosis.</a> J Hepatol. 50 (6), 1174-1183 (2009).</li><li>Xu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+released+from+cholestatic+rat+livers+possibly+involved+in+inducing+bone+marrow+hepatic+stem+cell+priming.">Factors released from cholestatic rat livers possibly involved in inducing bone marrow hepatic stem cell priming.</a> Stem Cells Dev. 17 (1), 143-155 (2008).</li><li>Sharma, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Propitious+role+of+bone+marrow-derived+mononuclear+cells+in+an+experimental+bile+duct+ligation+model:+potential+clinical+implications+in+obstructive+cholangiopathy.">Propitious role of bone marrow-derived mononuclear cells in an experimental bile duct ligation model: potential clinical implications in obstructive cholangiopathy.</a> Pediatr Surg Int. 29 (6), 623-632 (2013).</li></ol>

המחברים יש אין גילויים.

למרות cBDL היא הטכניקה הנפוצה ביותר ניסיוני עבור חסימתית לחסימת מרה תוך כבדית, היא עשויה להציג אתגרים מרובים בחולדות. בהתאם למספר הימים שלאחר הניתוח הדרוש להשגת נקודת קצה, החיות תוכלו לחוות משמעותי התחלואה והתמותה לאורך זמן. מידת פגיעה ברקמות, נמק בכיס המרה היא מתעצמת בהמשך בעת עבודה עם עכב?...

ניתוח מודלים של פגיעה בכבד חריפה ותיקון, כגון hepatectomy חלקית או צינור המרה המשותף מצדו (cBDL), שימשו במשך עשרות שנים מכרסמים ללמוד התחדשות הכבד ו1,pathobiology2. ב cBDL, צינור המרה (אשר מנקז מרה כל המיוצר בכבד) הוא מאתרים, וכתוצאה מכך לחסימת מרה תוך כבדית חסימתית, דלקת, פיברוזיס בשבועות 2-3 הראשון שלאחר הניתוח, עם התקדמות בסופו של דבר שחמת3. התפשטות צינור המרה transdifferentiation, אינדוקציה של תושב ובתאים הכבד הן גם תכונות של4,cBDL5. למרות cBDL elucidates למנגנונים הספציפיים של cholangiopathy חסימתית, אשר מאופיין היטב עם תוצאות לשחזור בעכברים פראי-סוג, זנים אלה עם נורמלי כבדי-6,-7,-8, ההליך יכול להיות טכנית במודלים העכבר הטרנסגניים מסוימים של מחלות כבד, הדורשות חיות יותר מהצפוי עקב תחלואה גבוהה יותר תמותה של חסימה בכיס המרה לאורך זמן. טכניקה זו היא גם מועילה ללמוד העכברים הטרנסגניים עם שבבסיס בכבד מחלה, אשר אולי לא אחרת סובל מהלחץ של ניסויים כמובן זמן ממושך בעקבות cBDL.
pBDL יכול לספק חלופה הגיונית כדי לסייע להתגבר על כמה מן האתגרים הללו. PBDL הראשונית מחקרים בעכברים פראי-סוג שמטרתם להבדיל מגשרים בפועל מקומית ומערכתית של דלקת9. ב- pBDL, הנהרות בכיס המרה הראשי ימינה ושמאלה הכבד צינורות המרה מעל צינור המרה הוא מדמיין בקפידה ב hilum, רק שמאל הכבד המרה היא מאתרים כדי להפיק את מקומי חסימתית לחסימת מרה תוך כבדית. pBDL מציעה מספר יתרונות cBDL. ב- pBDL, משמש האונה הימנית unligated בקרה פנימית תואמים זהים עבור האונה השמאלית מחוברים, נתון אותם אפקטים מערכתית, כגון מצב תזונתי או במחזור גורמים. למרות מגשרים הפרו דלקתי סיסטמי נכחו, אוסאווה. ואח נצפו פחות פיברוזיס, נמק של האונות unligated, אך מוגבר תאים דלקתיים וביטוי הפיכת גורם גידול-β ב האונה מחוברים9.
לאחרונה, pBDL הוגדרה לחקור השפעות parenchymal כבד מרה יתרת10. באמצעות אותה חיה בקרה פנימית (unligated "דמה") וקבוצות ניסיוני, pBDL חצאים ביעילות את מספר בעלי החיים זקוקים לכל ניסוי, אשר בתורו חסכונית יותר. העכברים לסבול את ההשפעות של pBDL הרבה יותר טוב, כך הזמן האידאלי מהלך הניסוי (≥2 שבועות) ניתן להשיג באונה מחוברים. והכי חשוב, pBDL יכולים להבחין בין השפעות intrahepatic ישירה חסימתית לחסימת מרה תוך כבדית, נשמר מרה רכיבים באונה מחוברים, לעומת האונה שליטה unligated. בסך הכל, pBDL היא שיטה אטרקטיבי ללמוד ספציפי באונה השפעות לשפות אחרות לחסימת מרה תוך כבדית בכבד.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1040px;" width="1039">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:343px;">Microscope-Leica Wild M650, 6&#8211;40&#215; magnification</td>
			<td style="width:336px;">Leica Microsystems</td>
			<td style="width:195px;">n/a</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tec 3 isoflurane funnel fill vaporizer</td>
			<td>General Anesthetic Services</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Stevens Tenotomy Scissors</td>
			<td>Accurate Surgical &#38; Scientific Instruments Corporation</td>
			<td>ASSI.9193</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Adson Forceps</td>
			<td>Fine science tools</td>
			<td>11006-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mosquito classic delicate hemostatic forceps</td>
			<td>Codman</td>
			<td>30-4472</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Micro-retractor</td>
			<td>Murdock; Roboz Surgical Instrument</td>
			<td>RS-6550</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Nonwoven gauze sponges</td>
			<td>Fisherband</td>
			<td>870-PC-DBL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Puritan 6&#8221; Small Cotton Swab w/Wooden Handle</td>
			<td>Puritan Medical Products Company</td>
			<td>868-WCS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dumont SS Forceps - Standard Tips/Straight/Inox/13.5cm</td>
			<td>Fine science tools</td>
			<td>11203-23</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dumont SS Forceps - Standard Tips/Angled 45&#176;/Inox/13.5cm</td>
			<td>Fine science tools</td>
			<td>11203-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Vannas Spring Scissors - 3mm Cutting Edge</td>
			<td>Fine science tools</td>
			<td>15000-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microneedle holder</td>
			<td>Aesculap Surgical Instruments</td>
			<td>FD231R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Micro AROSuture, sterile 10-0 nylon suture, 70 &#181;m, TAP points</td>
			<td>AROSurgical Instruments Corporation</td>
			<td>T4A10N07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">4-0 Vicryl</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>J662H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">5-ml Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Falcon tissue culture dish, 60 &#215; 15 mm</td>
			<td>Corning</td>
			<td>353002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:343px;">Isoflurane, United States Pharmacopeia (USP) liquid for inhalation, 250 ml</td>
			<td>Piramal Healthcare</td>
			<td>NDC 66794-017-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Buprenex injectable (buprenorphine hydrochloride)</td>
			<td>Reckitt Benckiser Pharmaceuticals</td>
			<td>NDC 12496-0757-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cefazolin for injection , USP</td>
			<td>APP Pharmaceuticals</td>
			<td>NDC 63323-238-61</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PVP scrub solution (povidone&#8211;iodine 7.5%)</td>
			<td>Medline</td>
			<td>NDC 12496-0757-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">70% Ethanol</td>
			<td>Decon Labs</td>
			<td>2716</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:343px;">Phosphate Buffered Saline Without Calcium or Magnesium</td>
			<td style="width:336px;">LONZA</td>
			<td style="width:195px;">17-516F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:343px;">Sirius Red</td>
			<td style="width:336px;">Sigma</td>
			<td style="width:195px;">365548</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:343px;">Hematolxylin</td>
			<td style="width:336px;">Fisher (Richard-Allan Scientific)</td>
			<td style="width:195px;">22-050-111 (7211)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:343px;">Eosin</td>
			<td style="width:336px;">Anatech (Fisher)</td>
			<td style="width:195px;">832 (NC9686037)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:343px;">Formalin</td>
			<td style="width:336px;">Fisher</td>
			<td style="width:195px;">SF100-20</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

partial bile duct ligation in the mouse: a controlled model of localized obstructive cholestasis

בחולדות, צינור המרה מלאה מצדו (cBDL) של צינור המרה היא טכניקה כירורגית הוקמה ללמוד התפשטות לחסימת מרה תוך כבדית, צינור המרה חסימתית. עם זאת, ניסויים ארוכי טווח יכול לגרום לזיהום מוגבר. ב זנים העכבר בחר עם מחלת כבד המשמש כבסיס, השוואות משמעותית יכולה להיות מורכבת אפילו עם מצדו של אונת הכבד, אשר יכול להפחית את בעלי חיים הפסדים והוצאות יחיד. כאן, אנו מתארים מצדו צינור המרה חלקית (pBDL) העכבר, שבו מאתרים רק שמאל צינור מרה בכבד, גרימת חסימה בכיס המרה האונה השמאלית, אבל לא האונות הנותרים. בטכניקה המיקרוכירורגית זהיר, ניסויים pBDL יכול להיות חסכונית, מאז האונה unligated משמש פקד פנימי אל האונות מחוברים, כאשר נתון באותם התנאים של אותה חיה. בניגוד cBDL, קבוצת בקרה המופעלים באמצעות העמדת פנים נפרדת אינה הכרחית. pBDL שימושית מאוד ישירות השוואה לשפות אחרות נגד תופעות מערכתיות של לחסימת מרה תוך כבדית ורכיבים אחרים של יתרת מרה. pBDL יכול גם יהיה לשנות את ייעודו בתור שיטה לחקור מנגנונים הקשורים תרופות, נדידת תאים.

עבור ניסוי טיפוסי pBDL בוצעה ב triplicate פיז העכברים הטרנסגניים, אשר מסכם את הדברים מחלת הכבד האנושי נמצאו חוסר אלפא-1 antitrypsin (A1AT). העכבר PiZ overexpresses של transgene המורכב שברי גנומית מספר ה-DNA, המכילים את האזורים קידוד של הגן המוטנטי A1AT אנושי, מקדם, יחד עם אינטרונים, ~ 2 kilobases של ויוצאת איגוף...

Watch this Scientific Journal Video about Partial Bile Duct Ligation in the Mouse: A Controlled Model of Localized Obstructive Cholestasis at JoVE.com

Partial Bile Duct Ligation in the Mouse: A Controlled Model of Localized Obstructive Cholestasis

כאן, אנו מציגים את צינור המרה חלקית מצדו כמודל כירורגי של פגיעה בכבד והתחדשות בחולדות.

צינור המרה חלקית מצדו העכבר: מודל מבוקרת של מקומי חסימתית לחסימת מרה תוך כבדית

In rodents, complete bile duct ligation (cBDL) of the common bile duct is an established surgical technique for studying obstructive cholestasis and bile ...

partial-bile-duct-ligation-mouse-controlled-model-localized

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Biology

15.4K Views.  Jichi Medical University. כאן, אנו מציגים את צינור המרה חלקית מצדו כמודל כירורגי של פגיעה בכבד והתחדשות בחולדות.

Video: Partial Bile Duct Ligation in the Mouse: A Controlled Model of Localized Obstructive Cholestasis

The Microfluidic Probe: Operation and Use for Localized Surface Processing

Microfluidic devices allow assays to be performed using minute amounts of sample and have recently been used to control the microenvironment of cells. Microfluidics is commonly associated with closed microchannels which limit their use to samples that can be introduced, and cultured in the case of cells, within a confined volume. On the other hand, micropipetting system have been used to locally perfuse cells and surfaces, notably using push-pull setups where one pipette acts as source and the other one as sink, but the confinement of the flow is difficult in three dimensions. Furthermore, pipettes are fragile and difficult to position and hence are used in static configuration only. 
The microfluidic probe (MFP) circumvents the constraints imposed by the construction of closed microfluidic channels and instead of enclosing the sample into the microfluidic system, the microfluidic flow can be directly delivered onto the sample, and scanned across the sample, using the MFP. . The injection and aspiration openings are located within a few tens of micrometers of one another so that a microjet injected into the gap is confined by the hydrodynamic forces of the surrounding liquid and entirely aspirated back into the other opening. The microjet can be flushed across the substrate surface and provides a precise tool for localized deposition/delivery of reagents which can be used over large areas by scanning the probe across the surface. 
In this video we present the microfluidic probe1 (MFP). We explain in detail how to assemble the MFP, mount it atop an inverted microscope, and align it relative to the substrate surface, and finally show how to use it to process a substrate surface immersed in a buffer.

In this video we present the microfluidic probe1 (MFP). We explain in detail how to assemble the MFP, mount it atop an inverted microscope, and align it relative to the substrate surface, and finally show how to use it to process a substrate surface immersed in a buffer solution.

בדיקה Microfluidic: מבצע ושימוש לעיבוד Surface לוקליזציה

Microfluidic devices allow assays to be performed using minute amounts of sample and have recently been used to control the microenvironment of cells. ...

LAD-Ligation: A Murine Model of Myocardial Infarction

Research models of infarction and myocardial ischemia are essential to investigate the acute and chronic pathobiological and pathophysiological processes in myocardial ischemia and to develop and optimize future treatment.
Two different methods of creating myocardial ischemia are performed in laboratory rodents. The first method is to create cryo infarction, a fast but inaccurate technique, where a cryo-pen is applied on the surface of the heart (1-3). Using this method the scientist can not guarantee that the cryo-scar leads to ischemia, also a vast myocardial injury is created that shows pathophysiological side effects that are not related to myocardial infarction. The second method is the permanent ligation of the left anterior descending artery (LAD). Here the LAD is ligated with one single stitch, forming an ischemia that can be seen almost immediately. By closing the LAD, no further blood flow is permitted in that area, while the surrounding myocardial tissue is nearly not affected. This surgical procedure imitates the pathobiological and pathophysiological aspects occurring in infarction-related myocardial ischemia.
The method introduced in this video demonstrates the surgical procedure of a mouse infarction model by ligating the LAD. This model is convenient for pathobiological and pathophysiological as well as immunobiological studies on cardiac infarction. The shown technique provides high accuracy and correlates well with histological sections.

This video demonstrates how to use a fast and reliable model to study pathobiological and pathophysiological processes of myocardial ischemia.

LAD-קשירת: מודל Murine של אוטם שריר הלב

Research models of infarction and myocardial ischemia are essential to investigate the acute and chronic pathobiological and pathophysiological processes ...

Surgical Induction of Endolymphatic Hydrops by Obliteration of the Endolymphatic Duct

Surgical induction of endolymphatic hydrops (ELH) in the guinea pig by obliteration and obstruction of the endolymphatic duct is a well-accepted animal model of the condition and an important correlate for human Meniere's disease. In 1965, Robert Kimura and Harold Schuknecht first described an intradural approach for obstruction of the endolymphatic duct (Kimura 1965). Although effective, this technique, which requires penetration of the brain's protective covering, incurred an undesirable level of morbidity and mortality in the animal subjects. Consequently, Andrews and Bohmer developed an extradural approach, which predictably produces fewer of the complications associated with central nervous system (CNS) penetration.(Andrews and Bohmer 1989) 
The extradural approach described here first requires a midline incision in the region of the occiput to expose the underlying muscular layer. We operate only on the right side. After appropriate retraction of the overlying tissue, a horizontal incision is made into the musculature of the right occiput to expose the right temporo-occipital suture line. The bone immediately inferio-lateral the suture line (Fig 1) is then drilled with an otologic drill until the sigmoid sinus becomes visible. Medial retraction of the sigmoid sinus reveals the operculum of the endolymphatic duct, which houses the endolymphatic sac. Drilling medial to the operculum into the area of the endolymphatic sac reveals the endolymphatic duct, which is then packed with bone wax to produce obstruction and ultimately ELH. 
In the following weeks, the animal will demonstrate the progressive, fluctuating hearing loss and histologic evidence of ELH.

This video shows how to surgically obstruct the guinea pig's endolymphatic duct to produce endolymphatic hydrops.

אינדוקציה כירורגי של Hydrops Endolymphatic על ידי מחיקה של צינור Endolymphatic

Surgical induction of endolymphatic hydrops (ELH) in the guinea pig by obliteration and obstruction of the endolymphatic duct is a well-accepted animal ...

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models. This paper describes the development of an orthotopic mouse model of ovarian cancer, treatment of cancer via oral delivery of drugs, and monitoring of tumor cell behavior in response to drug treatment in real time using in vivo imaging system. In this orthotopic model, ovarian tumor cells expressing luciferase are applied topically by injecting them directly into the mouse bursa where each ovary is enclosed. Upon injection of D-luciferin, a substrate of firefly luciferase, luciferase-expressing cells generate bioluminescence signals. This signal is detected by the in vivo imaging system and allows for a non-invasive means of monitoring tumor growth, distribution, and regression in individual animals. Drug administration via oral gavage allows for a maximum dosing volume of 10 mL/kg body weight to be delivered directly to the stomach and closely resembles delivery of drugs in clinical treatments. Therefore, techniques described here, development of an orthotopic mouse model of ovarian cancer, oral delivery of drugs, and in vivo imaging, are useful for better understanding of human ovarian cancer and treatment and will improve targeting this disease.

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

Orthotopic animal models of ovarian cancer replicate better human disease and therefore enhance our understanding of cancer progression and tumor response to therapy. A mouse model receives an intrabursal injection of luciferase-expressing ovarian tumor cells. Treatment is administered via oral gavage. Tumor growth is monitored by in vivo imaging system.

בשנת vivo ההדמיה לטיפולים במודל עכבר orthotopic של סרטן השחלות

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models.  This paper describes the development of an orthotopic mouse model ...

Visualization of Endoplasmic Reticulum Localized mRNAs in Mammalian Cells

In eukaryotes, most of the messenger RNAs (mRNAs) that encode secreted and membrane proteins are localized to the surface of the endoplasmic reticulum (ER). However, the visualization of these mRNAs can be challenging. This is especially true when only a fraction of the mRNA is ER-associated and their distribution to this organelle is obstructed by non-targeted (i.e. "free") transcripts. In order to monitor ER-associated mRNAs, we have developed a method in which cells are treated with a short exposure to a digitonin extraction solution that selectively permeabilizes the plasma membrane, and thus removes the cytoplasmic contents, while simultaneously maintaining the integrity of the ER. When this method is coupled with fluorescent in situ hybridization (FISH), one can clearly visualize ER-bound mRNAs by fluorescent microscopy. Using this protocol the degree of ER-association for either bulk poly(A) transcripts or specific mRNAs can be assessed and even quantified. In the process, one can use this assay to investigate the nature of mRNA-ER interactions.

Here we describe a method to visualize endoplasmic reticulum-associated mRNAs in mammalian tissue culture cells. This technique involves the selective permeabilization of the plasma membrane with digitonin to remove cytoplasmic contents followed by fluorescent in situ hybridization to detect either bulk poly(A) mRNA or specific transcripts.

ויזואליזציה של mRNAs לוקליזציה reticulum endoplasmic בתאי יונקים

In eukaryotes, most of the messenger RNAs (mRNAs) that encode secreted and membrane proteins are localized to the surface of the endoplasmic reticulum ...

Intraductal Injection for Localized Drug Delivery to the Mouse Mammary Gland

Herein we describe a protocol to deliver various reagents to the mouse mammary gland via intraductal injections. Localized drug delivery and knock-down of genes within the mammary epithelium has been difficult to achieve due to the lack of appropriate targeting molecules that are independent of developmental stages such as pregnancy and lactation. Herein, we describe a technique for localized delivery of reagents to the mammary gland at any stage in adulthood via intraductal injection into the nipples of mice. The injections can be performed on live mice, under anesthesia, and allow for a non-invasive and localized drug delivery to the mammary gland. Furthermore, the injections can be repeated over several months without damaging the nipple. Vital dyes such as Evans Blue are very helpful to learn the technique. Upon intraductal injection of the blue dye, the entire ductal tree becomes visible to the eye. Furthermore, fluorescently labeled reagents also allow for visualization and distribution within the mammary gland. This technique is adaptable for a variety of compounds including siRNA, chemotherapeutic agents, and small molecules.

A protocol for the non-invasive intraductal delivery of aqueous reagents to the mouse mammary gland is described. The method takes advantage of localized injection into the nipples of mammary glands targeting mammary ducts specifically. This technique is adaptable for a variety of compounds including siRNA, chemotherapeutic agents and small molecules.

הזרקת intraductal עבור משלוח סמים מקומיים לעכבר החלב בלוטת

Herein we describe a protocol to deliver various reagents to the mouse mammary gland via intraductal injections. Localized drug delivery and knock-down of ...

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

The folding and assembly of proteins is essential for protein function, the long-term health of the cell, and longevity of the organism. Historically, the function and regulation of protein folding was studied in vitro, in isolated tissue culture cells and in unicellular organisms. Recent studies have uncovered links between protein homeostasis (proteostasis), metabolism, development, aging, and temperature-sensing. These findings have led to the development of new tools for monitoring protein folding in the model metazoan organism Caenorhabditis elegans. In our laboratory, we combine behavioral assays, imaging and biochemical approaches using temperature-sensitive or naturally occurring metastable proteins as sensors of the folding environment to monitor protein misfolding. Behavioral assays that are associated with the misfolding of a specific protein provide a simple and powerful readout for protein folding, allowing for the fast screening of genes and conditions that modulate folding. Likewise, such misfolding can be associated with protein mislocalization in the cell. Monitoring protein localization can, therefore, highlight changes in cellular folding capacity occurring in different tissues, at various stages of development and in the face of changing conditions. Finally, using biochemical tools ex vivo, we can directly monitor protein stability and conformation. Thus, by combining behavioral assays, imaging and biochemical techniques, we are able to monitor protein misfolding at the resolution of the organism, the cell, and the protein, respectively.

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

To study the relationship between protein homeostasis, stress and aging, we monitored changes in protein folding by following protein dysfunction, protein localization in the cell and protein stability at the organismal, cellular and protein levels, using the genetically tractable metazoan Caenorhabditis elegans as a model system.

The folding and assembly of proteins is essential for protein function, the long-term health of the cell, and longevity of the organism. Historically, the ...

Validation of a Mouse Model to Disrupt LINC Complexes in a Cell-specific Manner

Nuclear migration and anchorage within developing and adult tissues relies heavily upon large macromolecular protein assemblies called LInkers of the Nucleoskeleton and Cytoskeleton (LINC complexes). These protein scaffolds span the nuclear envelope and connect the interior of the nucleus to components of the surrounding cytoplasmic cytoskeleton. LINC complexes consist of two evolutionary-conserved protein families, Sun proteins and Nesprins that harbor C-terminal molecular signature motifs called the SUN and KASH domains, respectively. Sun proteins are transmembrane proteins of the inner nuclear membrane whose N-terminal nucleoplasmic domain interacts with the nuclear lamina while their C-terminal SUN domains protrudes into the perinuclear space and interacts with the KASH domain of Nesprins. Canonical Nesprin isoforms have a variable sized N-terminus that projects into the cytoplasm and interacts with components of the cytoskeleton. This protocol describes the validation of a dominant-negative transgenic mouse strategy that disrupts endogenous SUN/KASH interactions in a cell-type specific manner. Our approach is based on the Cre/Lox system that bypasses many drawbacks such as perinatal lethality and cell nonautonomous phenotypes that are associated with germline models of LINC complex inactivation. For this reason, this model provides a useful tool to understand the role of LINC complexes during development and homeostasis in a wide array of tissues.

Nuclear envelope proteins play a central role in many basic biological processes and have been implicated in a variety of human diseases. This protocol describes a new Cre/Lox-based mouse model that allows for the spatiotemporal control of LINC complexes disruption.

אימות של מודל עכבר לשבש מכלולי LINC באופן ספציפי בתא

Nuclear migration and anchorage within developing and adult tissues relies heavily upon large macromolecular protein assemblies called LInkers of the ...

A Mouse Model of Intestinal Partial Obstruction

Intestinal obstructions, that impede or block peristaltic movement, can be caused by abdominal adhesions and most gastrointestinal (GI) diseases including tumorous growths. However, the cellular remodeling mechanisms involved in, and caused by, intestinal obstructions are poorly understood. Several animal models of intestinal obstructions have been developed, but the mouse model is the most cost/time effective. The mouse model uses the surgical implantation of an intestinal partial obstruction (PO) that has a high mortality rate if it is not performed correctly. In addition, mice receiving PO surgery fail to develop hypertrophy if an appropriate blockade is not used or not properly placed. Here, we describe a detailed protocol for PO surgery which produces reliable and reproducible intestinal obstructions with a very low mortality rate. This protocol utilizes a surgically placed silicone ring that surrounds the ileum which partially blocks digestive movement in the small intestine. The partial blockage makes the intestine become dilated due to the halt of digestive movement. The dilation of the intestine induces smooth muscle hypertrophy on the oral side of the ring that progressively develops over 2 weeks until it causes death. The surgical PO mouse model offers an in vivo model of hypertrophic intestinal tissue useful for studying pathological changes of intestinal cells including smooth muscle cells (SMC), interstitial cells of Cajal (ICC), PDGFR&#945;+, and neuronal cells during the development of intestinal obstruction.

Intestinal obstructions are a partial or complete blockage of the intestine that can cause severe abdominal pain, nausea, vomiting, and preventing the passage of stool. This procedure for creating intestinal partial obsructions in mice is reliable in studying the mechanisms underlying pathological cell growth and death in the intestine.

דגם העכבר של חסימת מעיים חלקית

Intestinal obstructions, that impede or block peristaltic movement, can be caused by abdominal adhesions and most gastrointestinal (GI) diseases including ...

Isolation and 3D Collagen Sandwich Culture of Primary Mouse Hepatocytes to Study the Role of Cytoskeleton in Bile Canalicular Formation In Vitro

Hepatocytes are the central cells of the liver responsible for its metabolic function. As such, they form a uniquely polarized epithelium, in which two or more hepatocytes contribute apical membranes to form a bile canalicular network through which bile is secreted. Hepatocyte polarization is essential for correct canalicular formation and depends on interactions between the hepatocyte cytoskeleton, cell-cell contacts, and the extracellular matrix. In vitro studies of hepatocyte cytoskeleton involvement in canaliculi formation and its response to pathological situations are handicapped by the lack of cell culture, which would closely resemble the canaliculi network structure in vivo. Described here is a protocol for the isolation of mouse hepatocytes from the adult mouse liver using a modified collagenase perfusion technique. Also described is the production of culture in a 3D collagen sandwich setting, which is used for immunolabeling of cytoskeletal components to study bile canalicular formation and its response to treatments in vitro. It is shown that hepatocyte 3D collagen sandwich cultures respond to treatments with toxins (ethanol) or actin cytoskeleton altering drugs (e.g., blebbistatin) and serve as a valuable tool for in vitro studies of bile canaliculi formation and function.

Presented here is a protocol for the isolation of mouse hepatocytes from adult mouse livers using a modified collagenase perfusion technique. Also described is the long-term culture of hepatocytes in a 3D collagen sandwich setting as well as immunolabeling of the cytoskeletal components to study bile canalicular formation and its response to treatment.

בידוד וכריך קולגן 3D תרבות של העכבר הראשי Hepatocytes כדי ללמוד את התפקיד של שלד ציטוזה היווצרות של המרה בתוך מחוץ לגופית

Hepatocytes are the central cells of the liver responsible for its metabolic function. As such, they form a uniquely polarized epithelium, in which two or ...

צינור המרה חלקית מצדו העכבר: מודל מבוקרת של מקומי חסימתית לחסימת מרה תוך כבדית

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

בדיקה Microfluidic: מבצע ושימוש לעיבוד Surface לוקליזציה

LAD-קשירת: מודל Murine של אוטם שריר הלב

אינדוקציה כירורגי של Hydrops Endolymphatic על ידי מחיקה של צינור Endolymphatic

בשנת vivo ההדמיה לטיפולים במודל עכבר orthotopic של סרטן השחלות

ויזואליזציה של mRNAs לוקליזציה reticulum endoplasmic בתאי יונקים

הזרקת intraductal עבור משלוח סמים מקומיים לעכבר החלב בלוטת

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

אימות של מודל עכבר לשבש מכלולי LINC באופן ספציפי בתא

דגם העכבר של חסימת מעיים חלקית

בידוד וכריך קולגן 3D תרבות של העכבר הראשי Hepatocytes כדי ללמוד את התפקיד של שלד ציטוזה היווצרות של המרה בתוך מחוץ לגופית