Name: basic methods for the study of reproductive ecology of fish in aquaria
Uploaded: 2017-07-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 25 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Basic Methods for the Study of Reproductive Ecology of Fish in Aquaria at JoVE.com

אנו מודים S. Yokoyama לעזרה עם איסוף דגים. אנו מודים גם ל W. Kawamura על עצות מועילות לגבי שיטות גידול. מחקר זה נתמך על ידי האגודה היפנית לקידום המדע (KAKENHI) באמצעות מענקים (מס &#39;24370006 ו 16K07507) הוענק TS

1. איסוף והובלת דגים חיים הערה: פרוטוקול זה מתאר כיצד לאסוף דגים שיש להם שלפוחית ​​גז, מעומק של 15 מ &#39;עד פני השטח. שינוע מהיר על פני השטח יגרום להרחבת שלפוחית ​​השתן על ידי שינוי בלחץ, אשר יכול לפגוע קשות או להרוג את הדג. זהירות היא מוצדקת, כמו הנזק שנגרם לדגים במהלך הצעד הראשון הזה ישפיע לרעה על הישרדותם ועל התנהגות מאוחר יותר. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני צלילה עם SCUBA, לאסוף את החומרים הבאים: יד ביד מתאים לכידת מינים ממוקד מתחת למים; כפול שקיות פוליאתילן כי הם גדולים מספיק עבור דגים; גומי (80 מ&quot;מ x 6 מ&quot;מ); גליל חמצן לניפוח שקיות האיסוף על פני השטח; את אלבגין, שהוא מיקרוביאלית 10% nifurstyrenate נתרן; תיבת קצף פוליסטירן שבו למקם את שקיות איסוף; פיפטות; ואם יש צורך (ראה צעד 1.4), חבל עם אורךשווה לעומק הצלילה המקסימלי, כמו גם משקל של לפחות 2 ק&quot;ג. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איסוף מינים דגים ממוקד באמצעות יד ביד בעת צלילה; בעוד עדיין מתחת למים, במקום דגים שנתפסו בשקית פוליאתילן ולקשור את הפה של השקית עם גומי. אם יידרשו עוד יום להובלת הדגים לאקווריום, ישמרו גם על המים מהבית הטבעי בשקיות אחרות, וישמשו לחידוש המים הדגים. הערה: עבור בטיחות, משימות מתחת למים חייב להיות עובד על ידי לפחות שני אנשים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משטח מנקודת האיסוף עם שקיות של דגים במהירות של לא יותר מ 1 מ &#39;/ דקה: בעוד בעומק של 10 מ&#39; או יותר, להפסיק לעלות 1 - 5 דקות כל 2 מ &#39;; ו מעומק של 10 מ &#39;לעצור את פני השטח עבור 1 - 5 דקות כל 1 מ&#39;. כאשר דגים בשבי אינם מסוגלים לשמור על הציפה שלהם בשקית ( כלומר , אם הם צפים עם שלפוחית ​​הגז מורחבת תוך עדיין מנסה לשחות לכיוון תחתית), או לשמור על עומק זהה עבור 1 - 5 דקות או דהל 1 - 2 מ &#39;עמוק יותר. פעם הדגים נראה להחלים שלהם ציפה, לחדש את העלייה אל פני השטח. הערה: אם קיימת אפשרות שהאוויר במיכל SCUBA ייגמר תוך כדי העלאה, הידוק חבל לשקית הפוליאתילן וצירוף משקל של 2 ק&quot;ג; לאחר מפעיל מתחת למים יש עלה בבטחה, למשוך את זה עד לפני השטח במהירויות זהה שנקבע לעיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחוף או בסירה, להמיס 10 ppm אלבגין במים של כל שקית פוליאתילן לאחר השטח. הערה: למרות שדגים מסוימים לא יוכלו לשמור על הציפה שלהם רק לאחר הובאו אל פני השטח, רוב ניתן לצפות להתאושש בתוך יום אחד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם צפיפות הדגים בשקית איסוף גבוהה, לחלק את הדגים בין שקיות יותר כדי למנוע מהם מזיקים זה לזה על ידי שפשוף אחד נגד השני במהלך ההובלה. אם הדג הוא מין אגרסיבי, לחלק אותם בנפרד בין שקיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנפח את שקית איסוף עם חמצן ושוב לאטום את הפה של השקית באמצעות rUbberbands. כאשר החדרת החמצן לתוך השקית, להוריד את הזרבובית לתוך השקית של המים כדי להגדיל את התוכן חמצן מומס; את התיק המורחב צריך להיות 1/4 מלא עם מים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור את שקיות איסוף עם דגים בתיבת קצף פוליסטירן, כדי לשמור על טמפרטורת מים יציבה ולהפחית את הלחץ של דגים בתנאים חשוכים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם ייקח יום אחד להובלת הדגים לאקווריום, פעם ביום מחליפים 1/4 עד 1/3 מהמים בכל תיק שמירה על דגים, תוך שימוש במים שנשמרו מהבית גידול שאליו נוספה 10 עמודים לדקה אלבאגין , ו repack כל עם חמצן. בכל יום, להסיר דגים מתים ו excreta על התחתונה ביד נטו או פיפטה. הערה: אם מטוס המטוס מעורב, המתן לפחות יום אחד כדי להתאים את הדגים ללחץ האוויר על פני השטח לפני ההובלה, משום ששינוי שני שלבים בלחץ (מתחת לפני המים, ומשטח לאוויר עליון) בטווח הקצר עלול להשפיע לרעה הישרדות הדגים. </l<html> I </ol> 2. הדגמת הדג לאקווריום <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לצוף את התיק המכיל דגים באקווריום במשך 30 דקות כדי להשוות את טמפרטורת המים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במשך תקופה של 10 דקות, החליפו את מי השקיה במי אקווריום, כדי להימנע מהלם שנגרם כתוצאה מהפרש פתאומי בכימיית המים ( למשל , pH, מליחות). הערה: דג שמזדעזע מהפרש גדול מדי בכימיה של המים עשוי להראות שינוי חריג בצבע הגוף ו / או בהתנהגותו. לפקח על זה בזהירות במהלך הסתגלות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממיסים 10 ppm אלבגין במי האקווריום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר מכן, פעם ביום במשך 3 ימים, לחדש 1/3 של מים אקווריום, לאחר שהוסיף 10 עמודים לדקה אלבקין למים החלופי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבסוף, להתחיל לחסל את אלבגין על ידי החלפת חצי מים אקווריום פעם ביום, עד צבע דוהה. </li></ol> 3. הזרקת גלאי אלסטומר גלוי (VIE) תג לזהות דגים בודדים T &quot;&quot; הערה: בעבודה זו, דגים בודדים מזוהים באמצעות תגי VIE, לדוגמה, ראה פרדריק 10 , אולסן ו Vøllestad 11 , ולבלנק ו Noakes 12. כמו כן, אם מינים המחקר גדול מספיק להחזיק ביד , את השולחן כירורגי בשימוש בשלב 3.2 לא יהיה צורך. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקבוע את מיקום הזרקת צבע תג עבור כל אדם. האפשרות הבטוחה ביותר היא לבחור נקודת זריקה בחלק הגבי השרירי או בחלק הזנב של הגוף, וכדי למנוע הזרקת אותו לתוך הבטן שבה איברים פנימיים עשויים להיות פירסינג. הערה: מערכת מספור מתוארת באיור 1 : אם מינים המחקר גדולים מספיק להזרקת 8 מיקומים אפשריים, מערכת זו תאפשר זיהוי של 154 אנשים באמצעות צבע אחד. עשרה צבעים של תגים VIE זמינים מסחרית. בחר את הצבע להבדיל על בסיס צבע הגוף של דגים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> &lt;חזקה&gt; עבור דגים קטנים יותר מאשר ניתן להחזיק ביד, להכין טבלה כירורגית כדלקמן (עיין גם קינקל ואח &#39;13 ) ( איור 2 ). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים את הספוג רך מדידה 5 ס&quot;מ L x 5 ס&quot;מ W, וזה לפחות 5-10 מ&quot;מ נמוך יותר מגובה של צלחת פטרי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים חריץ ספוג של כ - 10 מ&quot;מ עומק, ולהתאים את רוחב זה של רוחב הגוף המשוער של הדג. חותכים את פוליוויניל כלוריד (PVC) הלוח (עובי 0.3 מ&quot;מ) ל 5 ס&quot;מ L x 5 ס&quot;מ W, ו לכופף אותו לקפל העמק (או M- צורה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את לוח מחורץ PVC על גבי ספוג מחור ולאחר מכן להגדיר את הספוג לתוך צלחת פטרי (ø 160 מ&quot;מ, עומק 30 מ&quot;מ). השתמש במים ממיכל ההחלמה כדי למלא את צלחת פטרי עד הלוח PVC שקוע כראוי. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את תגי VIE על פי מדריך תיוג VIE. מערבבים את חומרי האלסטומר ומוסיפים את התערובת לסרי 3 מ&quot;לNge עם מחט 29-מד, כפי הכלול בערכה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן שני מיכלי מים לשימוש בעת ביצוע זריקות תג: אחד עבור הרדמה ואחד להחלמה; להתאים את הטמפרטורה ואת ריכוז מליחות של אלה כדי להתאים את המים באקווריום גידול. השתמש במשאבת אוויר עם אבן אוויר כדי להפיץ את המים במיכל ההחלמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן נוזל הרדמה על ידי ערבוב 2-methylquinoline עם נפח שווה של 99.5% אתנול; מוסיפים את זה למיכל ההרדמה כדי להשיג ריכוז של 18 עמודים לדקה. הערה: הריכוז האופטימלי של נוזל הרדמה יהיה תלוי במינים וגודל הגוף של הפרטים. לכן, לבחון את הריכוז האופטימלי עבור מינים המחקר מראש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעבירים דגים בודדים לטנק ההרדמה ומאפשרים להם להרדים: כלומר, לחכות עד שהדגים אינם מגיבים לנגיעה או לרטט מים כאשר טנקים חיצוניים. כמו צבע הגוף משתנה כאשר הוא aneshetiZed בדגים רבים, גם לפקח על צבע הגוף בזהירות לשפוט אם דגים הוא הרדים מן השינויים שלה. כי יש אפשרות כי דגים יכולים לקפוץ מתוך טנק הרדמה, לשמור אותו מכוסה באמצעות לוח אקרילי שקוף, לפחות עד הדגים מתחילים לנוע לאט. הערה: כוונן את הזמן הדרוש להרדים ו / או להתאים את הריכוז של נוזל הרדמה, בהתאם למין המחקר וגודלו. אם התנועה אופקולום הוא נעצר אי פעם על ידי ההרדמה, הדג יהיה בסיכון גבוה למוות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כמו דגים יחליש אם הגוף שלהם מחומם, לשמור על האצבעות במים קרים יחסית תוך הרדמה הדגים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרם דג ממיכל ההרדמה ובמהירות למדוד אותו או לרשום את הנתונים הדרושים (אורך כולל, מין, וכו &#39; ). אם נראה שדגים מתאוששים בזמן המדידה, מיד להעביר אותו בחזרה טנק ההרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעבירים את הדגים לשולחן כירורגי. הגדר את הצד הגחון דגים למטה tהוא חריץ PVC. אם גודל הגוף הוא קטן מאוד, להשתמש מיקרוסקופ המשקפת בעת ביצוע ההזרקה. אם מינים המחקר גדול מספיק כדי להחזיק ביד, להזריק את התג VIE בזמן שהוא מוחזק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם את הצד המחודד של המחט כלפי חוץ והצביע על ראש הדג. הכנס את המחט תת עורית, פחות או יותר מקביל לגוף, וכמעט קרוב מתחת לעור ככל האפשר. התאם את עומק הכניסה בהתאם לגודל גוף הדגים ואת קלות לראות את התג. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזריק VIE תג בעת משיכת המחט, ולהפסיק את הזריקה לפני שפוע המחט מגיע לנקודת הכניסה המחט (זה יהיה קל להבחין אם הזרקת תג באזור רחב יחסית). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> על השלמת הזרקת תג, מיד להעביר את הדגים אל מיכל השחזור. אם ההתאוששות נראית איטית מדי, העבירו בעדינות את המים ביד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר ההחלמה, להחזיר את הדגים לאקווריום גידול, ולהמשיך להוסיף 10 עמודים לדקה אלBagin למים במשך 3 ימים. הערה: תחת תנאי נראות נמוכה עבור תגי VIE, אור UV מסונן יאפשר לזהות את התגים. </li></ol> 4. ספירת ביצים דבק דמרוסלי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי ליצור קינון מלאכותי, שהדיג יכול להפקיד בו ביצים דבקות, לחתוך צינור PVC אטום (5 ס&quot;מ, 6 ס&quot;מ) בחצי, בניצב לקוטר. הערה: גודל הצינור הנ&quot;ל מתאים להשרצת גובי קטן יחסית. לכן, להתאים את גודל צינור PVC וצורה כפי המתאים למין המחקר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הדפס רשת 5 מ&quot;מ x 5 מ&quot;מ על גיליון עמיד למים לחתוך אותו כדי להתאים את השטח הפנימי של צינור PVC. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תקן את גיליון עמיד למים לתוך הצינור של PVC באמצעות גומי. הערה: אם זה קשה עבור נשים לצרף ביצים על גיליון עמיד למים, וביצים נופלים מן הסדין, להפוך את הסדין מרקם עם נייר זכוכית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מכסים את קרקעית האקווריום בשכבת חול, 1- 2 ס&quot;מ עובי. הכנס כשליש של צינור PVC בעקיפין לתוך החול, עם הצד גיליון קבוע למטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר ההשרצה מוצלחת על ידי הדג, להסיר את הסדין עם המסה ביצה מן צינור PVC ומניחים אותו בצלחת פטרי עם מים אקווריום. לתקן גיליון חדש בתוך צינור PVC במקום זה בחזרה על החלק התחתון של האקווריום. לבסוף, לספור את הביצים על ידי צילום המסה ביצה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחלופין, אם תצפיות של טיפול ביצים ההורים הם להתבצע לאחר הרבייה, להיזהר לא להביא את הביצים מן המים. במקום זאת, להשתמש בצלחת פטרי כדי לגרוף את הביצים ואת הסדין יחד עם מים האקווריום, לצלם את המסה ביצה במהירות, ולאחר מכן בזהירות את התיקון מחדש את הסדין עם המסה ביצה בחזרה לתוך צינור PVC זהה לפני החזרת הכל למיקום המקורי שלה על תחתית האקווריום. לבסוף, לספור את הביצים באמצעות התמונה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לספור את הביצים באמצעות ImageJ ( איור 3) </stroNg&gt;). אלה אוטומטית ספירה תא שיטות ספירה מוסברים בפירוט הבא: ספירה תא בסיסי (אוניברסיטת שיקגו, משולב אור מיקרוסקופית הליבה מתקן, http://digital.bsd.uchicago.edu/image_j.php); ניתוח החלקיקים (http://imagej.net/Particle_Analysis); מונה נייד (https://imagej.net/Cell_Counter). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחרת, אם ביצים מופקדים בצפיפות, להעריך את מספר הביצים על ידי חישוב יחס צפיפות האזור: לספור ביצים ברשת מודפס 5 x 5 מ&quot;מ 2 לחשב את צפיפות ביצה, למדוד את פני השטח המכוסה ביצים על ידי ImageJ, ולהעריך את המספר הכולל של ביצים מן הצפיפות מעל ליחידה שטח השטח. שיטת המדידה על פני השטח על ידי ImageJ מוסברת להלן: הגדר סולם ... (ענף שירותי מחקר, https://imagej.nih.gov/ij/docs/menus/analyze.html); הוא מסביר כיצד להגדיר את המרחב המרחבי של הדימוי; באמצעות ImageJ למדוד שטח שטח (Keene המדינה המכללה, אקדמיטכנולוגיה, https://dept.keene.edu/at/2011/04/15/by-matthew-ragan/). הערה: אם ביצים שקופות, גיליון המים השחור מתאים יותר לשיטת הספירה האוטומטית מכיוון ש- ImageJ יכול לזהות את קווי הביצים בנפרד. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Helfman, G., Collette, B. B., Facey, D. E., Bowen, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Diversity of Fishes: Biology, Evolution, and Ecology. , (2009).</li><li>Davies, N. B., Krebs, J. R., West, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> An Introduction to Behavioural Ecology. , (2012).</li><li>Fukuda, K., Manabe, H., Sakurai, M., Dewa, S., Shinomiya, A., Sunobe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monogamous+mating+system+and+sexuality+in+the+gobiid+fish,+Trimma+marinae+(Actinopterygii:+Gobiidae).">Monogamous mating system and sexuality in the gobiid fish, Trimma marinae (Actinopterygii: Gobiidae).</a> J Ethol. 35 (1), 121-130 (2017).</li><li>Manabe, H., Matsuoka, M., Goto, K., Dewa, S., Shinomiya, A., Sakurai, M., Sunobe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bi-directional+sex+change+in+the+gobiid+fish+Trimma+sp.:+does+size-advantage+exist?.">Bi-directional sex change in the gobiid fish Trimma sp.: does size-advantage exist?.</a> Behaviour. 145 (1), 99-113 (2008).</li><li>Sakurai, M., Nakakoji, S., Manabe, H., Dewa, S., Shinomiya, A., Sunobe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bi-directional+sex+change+and+gonad+structure+in+the+gobiid+fish+Trimma+yanagitai.">Bi-directional sex change and gonad structure in the gobiid fish Trimma yanagitai.</a> Ichthyol Res. 56 (1), 82-86 (2009).</li><li>Sunobe, T., Nakazono, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+change+in+both+directions+by+alteration+of+social+dominance+in+Trimma+okinawae+(Pisces:+Gobiidae).">Sex change in both directions by alteration of social dominance in Trimma okinawae (Pisces: Gobiidae).</a> Ethology. 94 (4), 339-345 (1993).</li><li>Wong, M. Y., Munday, P. L., Buston, P. M., Jones, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monogamy+when+there+is+potential+for+polygyny:+tests+of+multiple+hypotheses+in+a+group-living+fish.">Monogamy when there is potential for polygyny: tests of multiple hypotheses in a group-living fish.</a> Behav Ecol. 19 (2), 353-361 (2008).</li><li>Kuwamura, T., Suzuki, S., Tanaka, N., Ouchi, E., Karino, K., Nakashima, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+change+of+primary+males+in+a+diandric+labrid+Halichoeres+trimaculatus:+coexistence+of+protandry+and+protogyny+within+a+species.">Sex change of primary males in a diandric labrid Halichoeres trimaculatus: coexistence of protandry and protogyny within a species.</a> J Fish Biol. 70 (6), 1898-1906 (2007).</li><li>Winterbottom, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two+new+species+of+the+Trimma+tevegae+species+group+from+the+Western+Pacific+(Percomorpha:+Gobiidae).">Two new species of the Trimma tevegae species group from the Western Pacific (Percomorpha: Gobiidae).</a> Aqua J Ichthyol Aquat Biol. 10, 29-38 (2005).</li><li>Frederick, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+fluorescent+elastomer+injection+as+a+method+for+marking+small+fish.">Evaluation of fluorescent elastomer injection as a method for marking small fish.</a> Bull Mar Sci. 61 (2), 399-408 (1997).</li><li>Olsen, E. M., V&#248;llestad, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+evaluation+of+visible+implant+elastomer+for+marking+age-0+brown+trout.">An evaluation of visible implant elastomer for marking age-0 brown trout.</a> N Am J Fish Manag. 21 (4), 967-970 (2001).</li><li>Leblanc, C. A., Noakes, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visible+implant+elastomer+(VIE)+tags+for+marking+small+rainbow+trout.">Visible implant elastomer (VIE) tags for marking small rainbow trout.</a> N Am J Fish Manag. 32 (4), 716-719 (2012).</li><li>Kinkel, M. D., Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraperitoneal+injection+into+adult+zebrafish.">Intraperitoneal injection into adult zebrafish.</a> J Vis Exp. (42), e2126 (2010).</li><li>Reavis, R. H., Grober, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+integrative+approach+to+sex+change:+social,+behavioural+and+neurochemical+changes+in+Lythrypnus+dalli+(Pisces).">An integrative approach to sex change: social, behavioural and neurochemical changes in Lythrypnus dalli (Pisces).</a> Acta Ethol. 2 (1), 51-60 (1999).</li><li>Milinski, M., Bakker, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Female+sticklebacks+use+male+coloration+in+mate+choice+and+hence+avoid+parasitized+males.">Female sticklebacks use male coloration in mate choice and hence avoid parasitized males.</a> Nature. 344, 330-333 (1990).</li><li>Basolo, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phylogenetic+evidence+for+the+role+of+a+pre-existing+bias+in+sexual+selection.">Phylogenetic evidence for the role of a pre-existing bias in sexual selection.</a> Proc R Soc Lond B Biol Sci. 259 (1356), 307-311 (1995).</li><li>Milinski, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimal+forging:+the+influence+of+intraspecific+competition+on+diet+selection.">Optimal forging: the influence of intraspecific competition on diet selection.</a> Behav Ecol Sociobiol. 11 (2), 109-115 (1982).</li><li>Manabe, H., Ishimura, M., Shinomiya, A., Sunobe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Field+evidence+for+bidirectional+sex+change+in+the+polygynous+gobiid+fish+Trimma+okinawae.">Field evidence for bidirectional sex change in the polygynous gobiid fish Trimma okinawae.</a> J Fish Biol. 70 (2), 600-609 (2007).</li><li>Stammler, K. L., Corkum, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+fish+size+on+shelter+choice+and+intraspecific+interactions+by+round+gobies+Neogobius+melanostomus.">Assessment of fish size on shelter choice and intraspecific interactions by round gobies Neogobius melanostomus.</a> Environ Biol Fishes. 73 (2), 117-123 (2005).</li><li>Matsumoto, Y., Tawa, A., Takegaki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Female+mate+choice+in+a+paternal+brooding+blenny:+the+process+and+benefits+of+mating+with+males+tending+young+eggs.">Female mate choice in a paternal brooding blenny: the process and benefits of mating with males tending young eggs.</a> Ethology. 117 (3), 227-235 (2011).</li><li>McCormick, M. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behaviorally+induced+maternal+stress+in+a+fish+influences+progeny+quality+by+a+hormonal+mechanism.">Behaviorally induced maternal stress in a fish influences progeny quality by a hormonal mechanism.</a> Ecology. 79 (6), 1873-1883 (1998).</li><li>Knaepkens, G., Bruyndoncx, L., Coeck, J., Eens, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spawning+habitat+enhancement+in+the+European+bullhead+(Cottus+gobio),+an+endangered+freshwater+fish+in+degraded+lowland+rivers.">Spawning habitat enhancement in the European bullhead (Cottus gobio), an endangered freshwater fish in degraded lowland rivers.</a> Biodivers Conserv. 13 (13), 2443-2452 (2004).</li><li>Shiogaki, M., Dotsu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+life+history+of+the+gobiid+fish,+Zonogobius+boreus.">The life history of the gobiid fish, Zonogobius boreus.</a> Bulletin of the Faculty of Fisheries, Nagasaki University. 37, 1-8 (1974).</li><li>Meunier, B., Yavno, S., Ahmed, S., Corkum, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+documentation+of+spawning+and+nest+guarding+in+the+laboratory+by+the+invasive+fish,+the+round+goby+(Neogobius+melanostomus).">First documentation of spawning and nest guarding in the laboratory by the invasive fish, the round goby (Neogobius melanostomus).</a> J Great Lakes Res. 35 (4), 608-612 (2009).</li></ol>

למחברים אין מה לגלות.

אקולוגיה הרבייה של דגים רבים התגלה לעתים קרובות באמצעות גידול ניסיוני. במיוחד, שינוי מין 6 , 8 , 14 , חבר הבחירה 15 , 16 ו intraspecific תחרות 7 , 17 היו נושאים תכופים ש...

האבולוציה הסתגלותית מרהיבה ניכרת במורפולוגיה, האקולוגיה וההתנהגות של דגים 1 . במיוחד, תכונות אקולוגיות הקשורות רבייה הם מגוונים במיוחד, ורוב אלה יכולים להיות מושפעים ישירות על ידי כושר אישי 2 . כדי לקבל תובנה ללחצים סלקטיביים שהביאו להתפתחות של תכונות ייחודיות במינים שונים של דגים, תצפית ישירה של התנהגויות פוריות וחברתיות באמצעות דגים חיים מועילה לעיתים קרובות לבסס השערות תיאורטיות. עם זאת, תצפיות שדה רציף של דגים עשויים לדרוש ציוד תת מימי מיוחד ומתקנים שקשה לשמור. במקרים אלה, תצפיות של דגים שנלכדו בפראות אקווריום יכול להיות מועיל 3 , 4 , 5 . בנוסף, תצפיות יעילות של התנהגויות דגים, כי הם נדירים או אחרתUlt כדי לצפות בתנאים טבעיים יכול להיות אפשרי על ידי מניפולציות ניסויים באקווריום 6 , 7 , 8 . גידול דגים בתנאים טובים על ידי צמצום מתח מלאכותי ופגיעה פיזית הוא קריטי עבור חקירות אקולוגיות מדויקות. הגובי פיגמי טרימה מרינה מגיע 23-25 ​​מ&quot;מ אורך הכולל והוא מופץ במערב האוקיינוס ​​השקט, שם הוא נמצא במפרץ שקט, מוגן, בעומקים של 9-26 מ &#39; 9 . בעבודה זו, T. Marinae משמש כמודל כדי לתאר סדרה של טכניקות בסיסיות לאיסוף דגים באמצעות מנגנון נשימה מתחת למים עצמית (SCUBA), הובלת דגים, והתאקלמות הדגים לאקווריום לצורך תצפית ישירה של התנהגות המינים ואקולוגיה של המחקר.

<table><tbody><tr><td>Hand net</td><td>Nisso</td><td>AQ-17</td><td>Select for the target species size.</td></tr><tr><td>Polyethylene bag</td><td>San-U Fish Farm</td><td>8194</td><td></td></tr><tr><td>Rubber band</td><td>ESCO Co. LTD.</td><td>78-0420-64</td><td>&amp;oslash; 80 mm x 6 mm</td></tr><tr><td>Oxygen cylinder</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Oxgen cylinder for diving equipment suits.</td></tr><tr><td>Elbagin</td><td>Japan Pet Design Co. Ltd.</td><td>75950</td><td>Pafurazine F (provided from same company) is equivalent drug to Elbagin.</td></tr><tr><td>Polystyrene foam box</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Pipette</td><td>AS ONE</td><td>1-8625-04</td><td></td></tr><tr><td>Rope</td><td>Mizukami Kinzoku Co. LTD.</td><td>95301601</td><td></td></tr><tr><td>Weight</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Weight for diving equipment suits.</td></tr><tr><td>Water tank</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Air pump</td><td>KOTOBUKI</td><td>4972814 062115</td><td></td></tr><tr><td>Air stone</td><td>KOTOBUKI</td><td>4972814 232204</td><td></td></tr><tr><td>2-Methylquinoline&amp;nbsp;</td><td>Wako</td><td>170-00376</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol (99.5)</td><td>Wako</td><td>057-00456</td><td></td></tr><tr><td>Visible implant elastomer tag kit</td><td>Northwest Marine Technology</td><td>N/A</td><td>http://www.nmt.us/products/vie/vie.shtml</td></tr><tr><td>Soft sponge</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>PVC board</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>0.3 mm thickness is easy to use.</td></tr><tr><td>Petri dish</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>A large one, such as&amp;nbsp; &amp;oslash; 160 mm and 30 mm depth, is convenient for the injection of the VIE tag.</td></tr><tr><td>Transparent acrylic board</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>UVA filtered light&amp;nbsp;</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>PVC pipe</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>&amp;oslash; 5 cm</td></tr><tr><td>Waterproof sheet</td><td>SOMAR Corp.</td><td>3EKW03</td><td>The film for the plain copier.</td></tr><tr><td>Sand</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Stereo microscope</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Camera</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td></td></tr></tbody></table>

basic methods for the study of reproductive ecology of fish in aquaria

תצפיות לגידול בשבי הן בעלות חשיבות לחשיפת היבטים של התנהגות דגים ואקולוגיה כאשר חקירות שדה רציף אינן אפשריות. הנה, סדרה של טכניקות בסיסיות מתוארים על מנת לאפשר תצפיות של התנהגות הרבייה של דג גובייד פראי נלכד, כמודל, שמרו באקווריום. השיטה מתמקדת בשלושה שלבים: איסוף, הובלה ותצפיות של אקולוגיה פוריות של המצע. היבטים חיוניים של איסוף דגים חיים ותחבורה הם: (1) מניעת פגיעה בדגים, וכן (2) הסתגלות זהירה לאקווריום. מניעת נזק באמצעות פציעות כגון שריטות או שינוי פתאומי של לחץ המים הוא הכרחי בעת איסוף דגים חיים, כמו כל נזק פיזי עשוי להשפיע לרעה על ההישרדות והתנהגות מאוחר יותר של הדג. הסתגלות קפדנית לאקווריום מפחיתה את שכיחות המוות ומקטינה את זעזוע התחבורה. תצפיות במהלך גידול שבוי כוללות: (1) זיהוי של אינדיבידואלים(2) ניטור הוליד ביצים ללא השפעות שליליות על דגים או ביצים, ובכך מאפשר חקירה מפורטת של אקולוגיה הרבייה של מינים המחקר. הזרקה תת-עורית של תגית אלסטומר גלוי (VIE) היא שיטה מדויקת לזיהוי הבא של דגים בודדים, וניתן להשתמש בה עם טווח רחב של דגים, עם השפעה מינימלית על הישרדותם והתנהגותם. אם מינים המחקר הוא ספוגנר המצע המפקיד ביצים דבק, אתר קן מלאכותי שנבנה מתוך צינור פוליוויניל כלור (PVC) עם תוספת של גיליון עמיד למים יהיה להקל על ספירה וניטור הביצים, הפחתת השפעת החוקר על הקן מחזיק ואת הביצה שמירה על התנהגות של דגים. למרות ששיטה בסיסית זו כרוכה בטכניקות שלעתים רחוקות מוזכרות בפירוט במאמרי מחקר, הן בסיסיות לביצוע ניסויים הדורשים גידול שבוי של דג בר.

בעקבות השיטות הנ&quot;ל, 41, 15 ו 96 אנשים של ט marinae נאספו באפריל 2014, 2015 ו 2016, בהתאמה, Offshore של סינמטק אושימה, פריפקטורה של קאגושימה, יפן (לוח 1). בכל מקרה, 25 (61%), 14 (93%) ו -91 (95%) אנשים חיו עד הפקדת ביצים באקווריום. כפי שדווח ב Fukuda et al . 3 ,...

Watch this Scientific Journal Video about Basic Methods for the Study of Reproductive Ecology of Fish in Aquaria at JoVE.com

Basic Methods for the Study of Reproductive Ecology of Fish in Aquaria

סדרה של שיטות בסיסיות כדי לאפשר את המחקר של אקולוגיה הרבייה של דגים שמורים באקווריום מתוארים. אלה הם פרוטוקולים שימושיים לאיסוף דגים באמצעות SCUBA, הובלת דגים חיים, והתבוננות בהתנהגות הרבייה של דגים שנלכדו באקווריום.

שיטות בסיסיות לחקר אקולוגיה פוריות של דגים באקווריום

Captive-rearing observations are valuable for revealing aspects of fish behavior and ecology when continuous field investigations are impossible. Here, a ...

basic-methods-for-the-study-of-reproductive-ecology-of-fish-in-aquaria

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Behavior

11.5K Views.  Tokyo University of Marine Science and Technology.  סדרה של שיטות בסיסיות כדי לאפשר את המחקר של אקולוגיה הרבייה של דגים שמורים באקווריום מתוארים. אלה הם פרוטוקולים שימושיים לאיסוף דגים באמצעות SCUBA, הובלת דגים חיים, והתבוננות בהתנהגות הרבייה של דגים שנלכדו באקווריום. 

Video: Basic Methods for the Study of Reproductive Ecology of Fish in Aquaria

Development of New Methods for Quantifying Fish Density Using Underwater Stereo-video Tools

The use of video camera systems in ecological studies of fish continues to gain traction as a viable, non-extractive method of measuring fish lengths and estimating fish abundance. We developed and implemented a rotating stereo-video camera tool that covers a full 360 degrees of sampling, which maximizes sampling effort compared to stationary camera tools. A variety of studies have detailed the ability of static, stereo-camera systems to obtain highly accurate and precise measurements of fish; the focus here was on the development of methodological approaches to quantify fish density using rotating camera systems. The first approach was to develop a modification of the metric MaxN, which typically is a conservative count of the minimum number of fish observed on a given camera survey. We redefine MaxN to be the maximum number of fish observed in any given rotation of the camera system. When precautions are taken to avoid double counting, this method for MaxN may more accurately reflect true abundance than that obtained from a fixed camera. Secondly, because stereo-video allows fish to be mapped in three-dimensional space, precise estimates of the distance-from-camera can be obtained for each fish. By using the 95% percentile of the observed distance from camera to establish species-specific areas surveyed, we account for differences in detectability among species while avoiding diluting density estimates by using the maximum distance a species was observed. Accounting for this range of detectability is critical to accurately estimate fish abundances. This methodology will facilitate the integration of rotating stereo-video tools in both applied science and management contexts.

We describe a new method for counting fishes, and estimating relative abundance (MaxN) and fish density using rotating stereo-video camera systems. We also demonstrate how to use distance from camera (Z distance) to estimate species-specific detectability.

פיתוח שיטות חדשות לכימות תנועת הדגים בצפיפות בכלים סטריאו-וידאו תת-מימי

The use of video camera systems in ecological studies of fish continues to gain traction as a viable, non-extractive method of measuring fish lengths and ...

Environment

Protocol for Acute and Chronic Ecotoxicity Testing of the Turquoise Killifish Nothobranchius furzeri

The killifish Nothobranchius furzeri is an emerging model organism in the field of ecotoxicology and its applicability in acute and chronic ecotoxicity testing has been demonstrated. Overall, the sensitivity of the species to toxic compounds is in the range with, or higher than, that of other model species.
This work describes protocols for acute, chronic, and multigenerational bioassays of single and combined stressor effects on N. furzeri. Due to its short maturation time and life-cycle, this vertebrate model allows the study of endpoints such as maturation time and fecundity within four months. Transgenerational full life-cycle exposure trials can be performed in as little as 8 months. Since this species produces eggs that are drought-resistant and remain viable for years, the on-site culture of the species is not needed but individuals can be recruited when required. The protocols are designed to measure life-history traits (mortality, growth, fecundity, weight) and critical thermal maximum.

Protocol for Acute and Chronic Ecotoxicity Testing of the Turquoise Killifish Nothobranchius furzeri

In this work, we describe an acute, chronic and multigenerational bioassay to study the effects of single and combined stressors on the Turquoise killifish Nothobranchius furzeri. This protocol is designed to study life-history traits (mortality, growth, fecundity, weight) and critical thermal maximum.

פרוטוקול עבור סימן ובדיקות כרונית Ecotoxicity של דגים גמבוזיים טורקיז Nothobranchius furzeri

The killifish Nothobranchius furzeri is an emerging model organism in the field of ecotoxicology and its applicability in acute and chronic ecotoxicity ...

Raising the Mexican Tetra Astyanax mexicanus for Analysis of Post-larval Phenotypes and Whole-mount Immunohistochemistry

River and cave-adapted populations of Astyanax mexicanus show differences in morphology, physiology, and behavior. Research focused on comparing adult forms has revealed the genetic basis of some of these differences. Less is known about how the populations differ at post-larval stages (at the onset of feeding). Such studies may provide insight into how cavefish survive through adulthood in their natural environment. Methods for comparing post-larval development in the laboratory require standardized aquaculture and feeding regimes. Here we describe how to raise fish on a diet of nutrient-rich rotifers in non-recirculating water for up to two-weeks post fertilization. We demonstrate how to collect post-larval fish from this nursery system and perform whole-mount immunostaining. Immunostaining is an attractive alternative to transgene expression analysis for investigating development and gene function in A. mexicanus. The nursery method can also be used as a standard protocol for establishing density-matched populations for growth into adults.

Raising the Mexican Tetra Astyanax mexicanus for Analysis of Post-larval Phenotypes and Whole-mount Immunohistochemistry

In this protocol, we demonstrate how to breed Astyanax mexicanus adults, raise the larvae, and perform whole-mount immunohistochemistry on post-larval fish to compare the phenotypes of surface and cave morphotypes.

גידול של טטרה מקסיקנית Astyanax mexicanus עבור ניתוח של Post-larval פנוטיפים ואת כולה-הר אימונוהיסטוכימיה

River and cave-adapted populations of Astyanax mexicanus show differences in morphology, physiology, and behavior. Research focused on comparing adult ...

Genetics

Necropsy-based Wild Fish Health Assessment

Anthropogenic influences from increased nutrients and chemical contaminants, to habitat alterations and climate change, can have significant effects on fish populations. Adverse effects monitoring, utilizing biomarkers from the organismal to the molecular level, can be used to assess the cumulative effects on fishes and other organisms. Fish health has been used worldwide as an indicator of aquatic ecosystem health. The necropsy-based fish health assessment provides data on visible abnormalities and lesions, parasites, condition and organosomatic indices. These can be compared by site, season and sex, as well as temporally, to document change over time. Severity ratings can be assigned to various observations to calculate a fish health index for more quantitative assessment. A drawback of the necropsy-based assessment is that it is based on visual observations and condition factors, which are not as sensitive as tissue and subcellular biomarkers for sublethal effects. Additionally, it is rarely possible to identify causes or risk factors associated with observed abnormalities. So, for instance a raised lesion or "tumor" on the fins, lips or body surface may be a neoplasm. However, it could also be a response to a parasite, chronic inflammation or hyperplasia of normal cells in response to an irritant. Conversely, neoplasms, certain parasites, other infectious agents and many tissue changes are not visible and so may be underestimated. However, during the necropsy-based assessment, blood (plasma), tissues for histopathology (microscopic pathology), genomics and other molecular analyses, and otoliths for aging can be collected. These downstream analyses, together with geospatial analyses, habitat assessments, water quality and contaminant analyses can all be important in comprehensive ecosystem evaluations.

The health of wild fishes can be used as an indicator of aquatic ecosystem health. Necropsy-based fish health assessments provide documentation of visible lesions or abnormalities, data used to calculate condition indices as well as the opportunity to collect tissues for microscopic evaluation, gene expression and other more in-depth analyses.

הערכת הבריאות מבוסס necropsy דגים פראי

Anthropogenic influences from increased nutrients and chemical contaminants, to habitat alterations and climate change, can have significant effects on ...

Using the FishSim Animation Toolchain to Investigate Fish Behavior: A Case Study on Mate-Choice Copying In Sailfin Mollies

Over the last decade, employing computer animations for animal behavior research has increased due to its ability to non-invasively manipulate the appearance and behavior of visual stimuli, compared to manipulating live animals. Here, we present the FishSim Animation Toolchain, a software framework developed to provide researchers with an easy-to-use method for implementing 3D computer animations in behavioral experiments with fish. The toolchain offers templates to create virtual 3D stimuli of five different fish species. Stimuli are customizable in both appearance and size, based on photographs taken of live fish. Multiple stimuli can be animated by recording swimming paths in a virtual environment using a video game controller. To increase standardization of the simulated behavior, the prerecorded swimming path may be replayed with different stimuli. Multiple animations can later be organized into playlists and presented on monitors during experiments with live fish.
In a case study with sailfin mollies (Poecilia latipinna), we provide a protocol on how to conduct a mate-choice copying experiment with FishSim. We utilized this method to create and animate virtual males and virtual model females, and then presented these to live focal females in a binary choice experiment. Our results demonstrate that computer animation may be used to simulate virtual fish in a mate-choice copying experiment to investigate the role of female gravid spots as an indication of quality for a model female in mate-choice copying.
Applying this method is not limited to mate-choice copying experiments but can be used in various experimental designs. Still, its usability depends on the visual capabilities of the study species and first needs validation. Overall, computer animations offer a high degree of control and standardization in experiments and bear the potential to &#39;reduce&#39; and &#39;replace&#39; live stimulus animals as well as to &#39;refine&#39; experimental procedures.

Using the FishSim Animation Toolchain to Investigate Fish Behavior: A Case Study on Mate-Choice Copying In Sailfin Mollies

Using the novel FishSim Animation Toolchain, we present a protocol for non-invasive visual manipulation of public information in the context of mate-choice copying in sailfin mollies. FishSim Animation Toolchain provides an easy-to-use framework for the design, animation and presentation of computer-animated fish stimuli for behavioral experiments with live test fish.

באמצעות ערכת הנפשה של FishSim הכלים לחקור התנהגות דגים: חקר מקרה על חבר-הבחירה העתקה של מפרש Mollies

Over the last decade, employing computer animations for animal behavior research has increased due to its ability to non-invasively manipulate the ...

A Standardized Protocol for Preference Testing to Assess Fish Welfare

Animal welfare assessment techniques try to take into consideration the specific needs and wants of the animal in question. Providing enrichment (the addition of physical objects or conspecifics in the housing environment) is often a way to give captive animals the opportunity to choose who or what they interact with and how they spend their time. A fundamental component of the aquatic environment that is often overlooked in captivity, however, is the ability for the animal to choose to engage in physical exercise. For many animals, including fish, exercise is an important aspect of their life history, and is known to have many health benefits, including positive changes in the brain and behavior. Here we present a method for assessing habitat preferences in captive animals. The protocol could easily be adapted to look at a variety of environmental factors (e.g., gravel versus sand as a substrate, plastic plants versus live plants, low flow versus high flow of water) in different aquatic species, or for use with terrestrial species. Statistical assessment of preference is carried out using Jacob&#39;s preference index, which ranks the habitats from -1 (avoidance) to +1 (most preferred). With this information, it can be determined what the animal wants from a welfare perspective, including their preferred location.

A fundamental aspect of assessing the welfare of animals in captivity is to ask whether the animals have what they want. Here, we present a protocol to determine housing preference in the zebrafish (Danio rerio) with respect to the presence/absence of environmental enrichment and access to flowing of water.

פרוטוקול מתוקננת עבור בדיקות העדפה להערכת הרווחה דגים

Animal welfare assessment techniques try to take into consideration the specific needs and wants of the animal in question. Providing enrichment (the ...

A Novel Method of Drug Administration to Multiple Zebrafish (Danio rerio) and the Quantification of Withdrawal

Anxiety testing in zebrafish is often studied in combination with the application of pharmacological substances. In these studies, fish are routinely netted and transported between home aquaria and dosing tanks. In order to enhance the ease of compound administration, a novel method for transferring fish between tanks for drug administration was developed. Inserts that are designed for spawning were used to transfer groups of fish into the drug solution, allowing accurate dosing of all fish in the group. This increases the precision and efficiency of dosing, which becomes very important in long schedules of repeated drug administration. We implemented this procedure for use in a study examining the behavior of zebrafish in the light/dark test after administering ethanol with differing 21 day schedules. In fish exposed to daily-moderate amounts of alcohol there was a significant difference in location preference after 2 days of withdrawal when compared to the control group. However, a significant difference in location preference in a group exposed to weekly-binge administration was not observed. 
This protocol can be generalized for use with all types of compounds that are water-soluble and may be used in any situation when the behavior of fish during or after long schedules of drug administration is being examined. The light/dark test is also a valuable method of assessing withdrawal-induced changes in anxiety.

A Novel Method of Drug Administration to Multiple Zebrafish Danio rerio and the Quantification of Withdrawal

A novel method for reducing variability when exposing fish to drugs is explained. Fish exposed to various patterns of ethanol exposure were found to have altered anxiety levels during withdrawal in a light/dark scototaxic assay.

שיטה חדשה של תרופות אמריקניות לדג הזברה מרובה (<em&gt; Rerio Danio</em&gt;) וכימות של נסיגה

Anxiety testing in zebrafish is often studied in combination with the application of pharmacological substances. In these studies, fish are routinely ...

Neuroscience

Using an Automated 3D-tracking System to Record Individual and Shoals of Adult Zebrafish

Like many aquatic animals, zebrafish (Danio rerio) moves in a 3D space. It is thus preferable to use a 3D recording system to study its behavior. The presented automatic video tracking system accomplishes this by using a mirror system and a calibration procedure that corrects for the considerable error introduced by the transition of light from water to air. With this system it is possible to record both single and groups of adult zebrafish. Before use, the system has to be calibrated. The system consists of three modules: Recording, Path Reconstruction, and Data Processing. The step-by-step protocols for calibration and using the three modules are presented. Depending on the experimental setup, the system can be used for testing neophobia, white aversion, social cohesion, motor impairments, novel object exploration etc. It is especially promising as a first-step tool to study the effects of drugs or mutations on basic behavioral patterns. The system provides information about vertical and horizontal distribution of the zebrafish, about the xyz-components of kinematic parameters (such as locomotion, velocity, acceleration, and turning angle) and it provides the data necessary to calculate parameters for social cohesions when testing shoals.

The use of a 3D automatic video system that can track individual and groups of zebrafish is described. As application example we explore the effects of the NMDA-receptor antagonist MK-801 on shoals of zebrafish.

Like many aquatic animals, zebrafish (Danio rerio) moves in a 3D space. It is thus preferable to use a 3D recording system to study its behavior. The ...

Biology

Gamete Collection and In Vitro Fertilization of Astyanax mexicanus

Astyanax mexicanus is emerging as a model organism for a variety of research fields in biological science. Part of the recent success of this teleost fish species is that it possesses interfertile cave and river-dwelling populations. This enables the genetic mapping of heritable traits that were fixed during adaptation to the different environments of these populations. While this species can be maintained and bred in the lab, it is challenging to both obtain embryos during the daytime and create hybrid embryos between strains. In vitro fertilization (IVF) has been used with a variety of different model organisms to successfully and repeatedly breed animals in the lab. In this protocol, we show how, by acclimatizing A. mexicanus to different light cycles coupled with changes in water temperature, we can shift breeding cycles to a chosen time of the day. Subsequently, we show how to identify suitable parental fish, collect healthy gametes from males and females, and produce viable offspring using IVF. This enables related procedures such as the injection of genetic constructs or developmental analysis to occur during normal working hours. Furthermore, this technique can be used to create hybrids between the cave and surface-dwelling populations, and thereby enable the study of the genetic basis of phenotypic adaptations to different environments.

Gamete Collection and In Vitro Fertilization of Astyanax mexicanus

In vitro fertilization is a commonly used technique with a variety of model organisms to maintain lab populations and produce synchronized embryos for downstream applications. Here, we present a protocol that implements this technique for different populations of the Mexican tetra fish, Astyanax mexicanus.

אוסף המשחק ו הפריה חוץ גופית של Astyanax מקסיאנוס

Astyanax mexicanus is emerging as a model organism for a variety of research fields in biological science. Part of the recent success of this teleost fish ...

Sperm Collection and Computer-Assisted Sperm Analysis in the Teleost Model Japanese Medaka (Oryzias latipes)

Japanese medaka (Oryzias latipes) is a teleost fish and&#160;an emerging vertebrate model for ecotoxicology, developmental, genetics, and physiology research. Medaka is also used extensively to investigate vertebrate reproduction, which is an essential biological function as it allows a species to perpetuate. Sperm quality is an important indicator of male fertility and, thus, reproduction success. Techniques for extracting sperm and sperm analysis are well documented for many species, including teleost fish. Collecting sperm is relatively simple in larger fish but can be more complicated in small model fish as they produce less sperm and are more delicate. This article, therefore, describes two methods of sperm collection in the small model fish, Japanese medaka: testes dissection and abdominal massage. This paper demonstrates that both approaches are feasible for medaka and shows that abdominal massage can be performed a repeated number of times as the fish quickly recover from the procedure. This article also describes a protocol for computer-assisted sperm analysis in medaka to objectively assess several important indicators of medaka sperm quality (motility, progressivity, duration of motility, relative concentration). These procedures, specified for this useful small teleost model, will greatly enhance understanding of the environmental, physiological, and genetic factors influencing fertility in vertebrate males.

Sperm Collection and Computer-Assisted Sperm Analysis in the Teleost Model Japanese Medaka Oryzias latipes

This article describes two quick and efficient methods for collecting sperm from the small model fish medaka (Oryzias latipes), as well as a protocol for reliably assessing sperm quality using computer-assisted sperm analysis (CASA).

איסוף זרע וניתוח זרע בעזרת מחשב במודל הטלוסט מדאקה היפנית (Oryzias latipes)

Japanese medaka (Oryzias latipes) is a teleost fish and&#160;an emerging vertebrate model for ecotoxicology, developmental, genetics, and physiology ...