We appreciate the assistance of Chris Parker who daily scanned the plants and Curtis Hubbard who maintained the plants in the greenhouse.

1. להקים מושבות TSSM על שעועית פינטו <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שעועית פינטו צמחים, Phaseolus vulgaris L., מגשי פלסטיק (56 x 28 x 5 ס&quot;מ 3) המכיל אדמת השתילה בחממה כפי שמוצג באיור 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סמן את המגשים עם סימון מקלות על פי טיפול ושכפול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גדר ולשמור טמפרטורה בחממה עד 90 ° F ולחות יחסית 70%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגדול שעועית 1-2 trifoliate עלה לבמת 10 כפי שמוצג באיור 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אסוף קרדית עכביש מצמח כותנה שורצת טבעי עם קרדית ידי הסרת עלים נגועים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קרדית שורצת עכביש מקום כותנה משאירה על שעועית פינטו בתדירות שצריך, עד שכל הצמחים במגשים שורצים TSSMs רב. </li></ol><img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/54314/54314fig1.jpg" /> איור 1: נטיעת פינטו שעועית פלסטיקמגשים. זרעי שעועית פינטו ניטעו מגשי פלסטיק (56 x 28 x 5 ס&quot;מ 3) בחממה והיו להשקות מדי יום. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54314/54314fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/54314/54314fig2.jpg" /> איור 2: שעועית פינטו עם עלי trifoliate. העלה האמיתי הראשון נוצר לאחר cotyledons להגיח מן האדמה הוא עלה פשוט או unifoliate. העלים לאחר הם trifoliate משאיר עם טיפים denticulate. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54314/54314fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> 2. ההעברה TSSM לצמחי כותנה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגדול Bt מייננת (לא מהונדסים גנטית) צמחי הכותנה עד 4-5 הבמה עלה נכון מגשי פלסטיק (56 x 28 x 5 ס&quot;מ) בחממה כמפורט צעד 1.3 ו שמוצג באיור 3. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבר מושבות קרדית עכביש מ שעועית מנומרת על צמחי כותנה צעירים 4-5 הבמה עלה אמיתי. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העבר 3 המוני קרדית עכביש עבור צמחים שורצים בקלילות. הערה: ברמות מאוד גבוהות שריצה, קרדית עכביש ליצור המוני או תרמילי 11 ו נמצאת תלויה על טיפים עלו כפי שניתן לראות באיור 4. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים בסיר תחת קצה עלה פינטו שעועית המכילים ההמונים TSSM. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים טיפים עלה שעועית פינטו עם מספריים, המאפשר ההמונים TSSM ליפול לתוך המחבת כפי שמוצג איורים 5 ו 6. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל מחבת הפוכה מעל צמחי כותנת המונים ברז TSSM על צמחי כותנה גדלו ב מגשי פלסטיק כפי שמוצג באיור 7. הערה: כל מגש הכיל ~ 100 צמחי הכותנה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אקראי להפיץ 3 המוני TSSM על צמחי הכותנה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבר 20 מסות בשביליdially שורץ צמחים. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים בסיר תחת קצה עלה פינטו שעועית המכילים ההמונים TSSM. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים טיפים עלה שעועית פינטו עם מספריים, המאפשר להם ליפול לתוך המחבת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אסוף 20 המונים במחבת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל מחבת הפוכה מעל צמח כותנה והקש את המוני TSSM על ~ 100 צמחי כותנה גדלו בחממה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העבר 40 המונים עבור צמחים לנגיעות. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים בסיר תחת קצה עלה פינטו שעועית המכילים ההמונים TSSM. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים טיפים עלה שעועית פינטו עם מספריים, המאפשר להם ליפול לתוך המחבת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אסוף 40 המונים במחבת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל מחבת הפוכה מעל צמחי הכותנה, להקיש את ההמונים TSSM על ~ 100 צמחי הכותנה ולהפיץ אותם באופן אקראי. </li></ol></li></ol></li></ol><img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/54314/54314fig3.jpg" /> איור 3. צמחי כותנה עם 4-5 הבמה עלה אמיתי. thcotyledons הדואר להגיח מן האדמה כמו מבנים דמויי עלי אורינטציה הפוכים לזו על גזע השתיל. Meristem הפסגה עולה דרך cotyledons ויוצרים העלים האמיתיים הראשונים. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54314/54314fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/54314/54314fig4.jpg" /> איור 4. המוני TSSM תלויים על עלה שעועית trifoliate. TSSM גר מושבות וכאשר אוכלוסיות להגיע לצפיפות גבוהה, הם יוצרים ההמונים או מבנים דמויי Boll להתאסף בקצות העלים לפיזור. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54314/54314fig4large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 5" src="/files/ftp_upload/54314/54314fig5.jpg" /> איור 5. חיתוך פינטו שעועית טיפים עלה המכיל מסה TSSM עם מספריים. טיפים עלו שעועית trifoliate המכילים המוני TSSM הוסרו עם מספריים עבור בזיהום צמחי כותנה. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54314/54314fig5large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 6" src="/files/ftp_upload/54314/54314fig6.jpg" /> איור 6. המוני TSSM על טיפים עלו שעועית ממוקמים בתוך המחבת. כאשר מספר מספיק של טיפים עלו שעועית trifoliate עם TSSM נמצא צמחי המבחן, הם הוסרו ממוקמים בתוך המחבת. דגימות אלה שימשו כדי לפשוט קטגוריות טיפול: קל, בינוני וכבד אשר קיבלו 3, 20 ו 40 המוני TSSM, בהתאמה. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54314/54314fig6large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> </a&gt; <img alt="איור 7" src="/files/ftp_upload/54314/54314fig7.jpg" /> איור 7. מפנה מחבת הפוכה. המחבתות המכילות טיפים עלו שעועית trifoliate עם TSSM תתהפכנה על חופת כותנת שורצי צמחי המבחן. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54314/54314fig7large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> 3. צמחי כותנה לשרוץ סריקת TSSM עם החיישן האופטי Multispectral <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אופקי הר החיישן האופטי על מסגרת החממה כ 7 רגל מעל הרצפה כפי שמוצג באיור 8. הגדר את המרחק בין הסורק ואת חופת הצמח ב 36&quot; . השתמש בפלס ניגר כדי להבטיח כי החיישן הוא אופקי רמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחי מגשים uninfested של צמחי כותנה על עגלת דחיפת גלגלים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל את מתג חיישן לאט לדחוף את CART תחת החיישן עד שהמגש לחלוטין עובר בראש החיישן כפי שמוצג באיור 8. בטל מתג. לחזור בו העגלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלב 3.3 שלוש פעמים, עבור סכום כולל של 3 חזרות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על התהליך עבור כל המגשים של כותנה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סריקה חוזרת ביום 1, יום 5, יום 6, יום 7, יום 9, יום 10, יום 12, יום 13 ו יום 14 לאחר הטיפול (DAT). הסריקה ספקה את NDVI (אינדקס צמחיית הבדל מנורמל) ערכי 12. לשדר את ערכי NDVI כדי ולאחסן במחשב כיס אשר לאחר מכן ניתן להוריד למחשב בפורמט טקסט. הערה: NDVI חושב מתוך המשוואה הבאה: NDVI = (NIR - RED) / (NIR + RED), שבו RED ו- NIR הם ערכי ההחזרה הספקטרלית (0-255) באדום קרוב אינפרא אדום בספקטרום ב 660 ו 770 ננומטר, בהתאמה. </li></ol><img alt="הספרה 8" src="/files/ftp_upload/54314/54314fig8.jpg" /> איור 8. muחיישן אופטי ltispectral המשמש למדידת בריאות כמותית של צמחי כותנה שורצים רמות צפיפות שונות של TSSM. עגלת דחיפת הגלגלים עם צמחי המבחן היו נחצית לאט תחת ראש החיישן להשיג ערכי החזרה הספקטרלית. a הוא ראש החיישן; b הוא מחשב כיס; ג הוא תא הסוללות יציאות קלט / פלט; ד הוא RS-232 כבל נתונים סדרתי ודואר הוא נייר מלאכה לספק רקע אחיד. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54314/54314fig8large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> 4. ומנתח נתונים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השג את ערכי NDVI מקסימלית באמצעות הליך אמצעי Proc 13. חשב את אחוז ההפחתה בערכי NDVI עבור כל יום של התבוננות באמצעות יום 0 כערך הפניה. לנתח את הנתונים באמצעות ההליך GLM PROC מדידות חוזרות &lt;sup class = &quot;Xref&quot;&gt; 13. הערה: אמצעי הופרד באמצעות מבחן הטווח המרובה של דאנקן ב- P = 0.05. אמצעי עם האותיות אותה באותיות קטנות לא היה שונה באופן משמעותי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצעו איורים גרפיים של נתונים 14 כפי שמוצג באיור 9. </li></ol><img alt="איור 9" src="/files/ftp_upload/54314/54314fig9.jpg" /> הפחתה או שינוי איור 9. אחוז ביחס NDVI ימים לאחר הטיפול. תוכנת JMP שמשה כדי להמחיש את הקשר הפונקציונלי גרפי בין אחוז השינוי ביחס NDVI ימים של דגימה (DAT). <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54314/54314fig9large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.</a>

<ol>
	<li>Hoy, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Agricultural acarology: Introduction to integrated mite management. 7, (2011).</li><li>Jeppson, L. R., Keifer, H. H., Baker, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mites injurious to economic plants. , (1975).</li><li>Brandenburg, R., Kennedy, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ecological+and+agricultural+considerations+in+the+management+of+twospotted+spider+mite+(Tetranychus+urticae+Koch).">Ecological and agricultural considerations in the management of twospotted spider mite (Tetranychus urticae Koch).</a> Agric. Zool. Rev. 2, 185-236 (1987).</li><li>Saito, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+concept+of+"life+types"+in+Tetranychinae.+An+attempt+to+classify+the+spinning+behaviour+of+Tetranychinae.">The concept of "life types" in Tetranychinae. An attempt to classify the spinning behaviour of Tetranychinae.</a> Acarologia. 24 (4), 377-391 (1983).</li><li>Gore, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+two-spotted+spider+mite+(Acari:+Tetranychidae)+infestation+timing+on+cotton+yields.">Impact of two-spotted spider mite (Acari: Tetranychidae) infestation timing on cotton yields.</a> Journal of Cotton Science. 17, 34-39 (2013).</li><li>Adamczyk, J. J., Lorenz, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Beltwide Cotton Conference. , 981-1000 (2016).</li><li>Williams, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Beltwide Cotton Conference. , 1013-1057 (2016).</li><li>Van Leeuwen, T., Vontas, J., Tsagkarakou, A., Dermauw, W., Tirry, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acaricide+resistance+mechanisms+in+the+two-spotted+spider+mite,+Tetranychus+urticae+and+other+important+Acari:+A+review.">Acaricide resistance mechanisms in the two-spotted spider mite, Tetranychus urticae and other important Acari: A review.</a> Insect Biochem Mol Biol. 40 (8), 563-572 (2010).</li><li>Wilson, L., Morton, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Seasonal+abundance+and+distribution+of+Tetranychus+urticae+(Acari:+Tetranychidae),+the+two+spotted+spider+mite,+on+cotton+in+Australia+and+implications+for+management.">Seasonal abundance and distribution of Tetranychus urticae (Acari: Tetranychidae), the two spotted spider mite, on cotton in Australia and implications for management.</a> Bull Entomol Res. 83 (02), 291-303 (1993).</li><li>Fernandez, F., Gepts, P., Lopez, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stage+of+development+of+the+common+bean+plant.">Stage of development of the common bean plant.</a> Communication Information Support Unit edn. , 32 (1986).</li><li>Clotuche, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+formation+of+collective+silk+balls+in+the+spider+mite+Tetranychus+urticae+Koch.">The formation of collective silk balls in the spider mite Tetranychus urticae Koch.</a> PLoS. ONE. 6 (4), 1804-1807 (2011).</li><li>Rouse, J. W., Haas, R., Schell, J., Deering, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+vegetation+systems+in+the+Great+Plains+with+ERTS.">Monitoring vegetation systems in the Great Plains with ERTS.</a> NASA special publication. 1 (SP-351), 309-317 (1974).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> SAS v.9.4. , (2012).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> JMP v.11. , (2013).</li><li>Asrar, G., Fuchs, M., Kanemasu, E., Hatfield, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimating+absorbed+photosynthetic+radiation+and+leaf+area+index+from+spectral+reflectance+in+wheat.">Estimating absorbed photosynthetic radiation and leaf area index from spectral reflectance in wheat.</a> Agron J. 76 (2), 300-306 (1984).</li><li>Myneni, R. B., Hall, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+interpretation+of+spectral+vegetation+indexes.">The interpretation of spectral vegetation indexes.</a> Geoscience and Remote Sensing, IEEE Transactions on. 33 (2), 481-486 (1995).</li><li>Sellers, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Canopy+reflectance,+photosynthesis+and+transpiration.">Canopy reflectance, photosynthesis and transpiration.</a> Int J Remote Sens. 6 (8), 1335-1372 (1985).</li><li>Tucker, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Higher+northern+latitude+normalized+difference+vegetation+index+and+growing+season+trends+from+1982+to+1999.">Higher northern latitude normalized difference vegetation index and growing season trends from 1982 to 1999.</a> Int. J. Biometeorol. 45 (4), 184-190 (2001).</li><li>Wilson, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Within-plant+distribution+of+spider+mites+(Acari:+Tetranychidae)+on+cotton:+a+developing+implementable+monitoring+program.">Within-plant distribution of spider mites (Acari: Tetranychidae) on cotton: a developing implementable monitoring program.</a> Environ Entomol. 12 (1), 128-134 (1983).</li><li>Fitzgerald, G. J., Maas, S. J., Detar, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spider+mite+detection+and+canopy+component+mapping+in+cotton+using+hyperspectral+imagery+and+spectral+mixture+analysis.">Spider mite detection and canopy component mapping in cotton using hyperspectral imagery and spectral mixture analysis.</a> Precision Agriculture. 5 (3), 275-289 (2004).</li><li>Herrmann, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spectral+monitoring+of+two-spotted+spider+mite+damage+to+pepper+leaves.">Spectral monitoring of two-spotted spider mite damage to pepper leaves.</a> Remote Sensing Letters. 3 (4), 277-283 (2012).</li><li>Reisig, D., Godfrey, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spectral+response+of+cotton+aphid-(Homoptera:+Aphididae)+and+spider+mite-(Acari:+Tetranychidae)+infested+cotton:+Controlled+studies.">Spectral response of cotton aphid-(Homoptera: Aphididae) and spider mite-(Acari: Tetranychidae) infested cotton: Controlled studies.</a> Environ Entomol. 36 (6), 1466-1474 (2007).</li><li>Martin, D. E., Latheef, M. A., L&#243;pez, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+selected+acaricides+against+twospotted+spider+mite+(Acari:+Tetranychidae)+on+greenhouse+cotton+using+multispectral+data.">Evaluation of selected acaricides against twospotted spider mite (Acari: Tetranychidae) on greenhouse cotton using multispectral data.</a> Exp Appl Acarol. 66 (2), 227-245 (2015).</li><li>Boudreaux, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+relative+humidity+on+egg-laying,+hatching,+and+survival+in+various+spider+mites.">The effect of relative humidity on egg-laying, hatching, and survival in various spider mites.</a> J Insect Physiol. 2 (1), 65-72 (1958).</li><li>Bondada, B., Oosterhuis, D., Tugwell, N., Kim, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiological+and+cytological+studies+of+two+spotted+spider+mite,+Tetranychus+urticae+K.,+injury+in+cotton.">Physiological and cytological studies of two spotted spider mite, Tetranychus urticae K., injury in cotton.</a> Southwest Entomol. 20 (2), 171-180 (1995).</li><li>Teramura, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+ultraviolet+B+radiation+on+the+growth+and+yield+of+crop+plants.">Effects of ultraviolet B radiation on the growth and yield of crop plants.</a> Physiol Plant. 58 (3), 415-427 (1983).</li><li>Teramura, A. H., Sullivan, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+UV-B+radiation+on+photosynthesis+and+growth+of+terrestrial+plants.">Effects of UV-B radiation on photosynthesis and growth of terrestrial plants.</a> Photosynthesis Res. 39 (3), 463-473 (1994).</li><li>Ohtsuka, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deleterious+effects+of+UV-B+radiation+on+herbivorous+spider+mites:+they+can+avoid+it+by+remaining+on+lower+leaf+surfaces.">Deleterious effects of UV-B radiation on herbivorous spider mites: they can avoid it by remaining on lower leaf surfaces.</a> Environ Entomol. 38 (3), 920-929 (2009).</li><li>Sakai, Y., Osakabe, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spectrum-specific+damage+and+solar+ultraviolet+radiation+avoidance+in+the+two-spotted+spider+mite.">Spectrum-specific damage and solar ultraviolet radiation avoidance in the two-spotted spider mite.</a> Photochem Photobiol. 86 (4), 925-932 (2010).</li><li>Suzuki, T., Watanabe, M., Takeda, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=UV+tolerance+in+the+two-spotted+spider+mite,+Tetranychus+urticae.">UV tolerance in the two-spotted spider mite, Tetranychus urticae.</a> J Insect Physiol. 55 (7), 649-654 (2009).</li><li>Martin, D. E., L&#243;pez, J. D., Lan, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+evaluation+of+the+GreenSeeker+handheld+optical+sensor+to+variations+in+orientation+and+height+above+canopy.">Laboratory evaluation of the GreenSeeker handheld optical sensor to variations in orientation and height above canopy.</a> International Journal of Agricultural and Biological Engineering. 5 (1), 43-47 (2012).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

כמקובל, בדיקות יעילות ההדברה שנערכו בתחום לכלול מספר טיפולים של כימיים מוטל בשיעורים שונים לעומת בדיקת מטופל. אקוריצידים עם פרופילים רעילות שונות נגד בשלבים instar והבוגר של TSSM מוערכים כדי לקבוע אם הנזק נגרם על ידי אותם יכול להיות מופחת על ידי טיפול כימי. דגימות TSSM נאספות והביאו למעבדה שבה הם נבחנים תחת מיקרוסקופ בשלבים השונים של TSSM נספרים וקליטות. חשוב ביותר לקחת דגימות נאותה של הצמח הפונדקאי כדי לקבוע את הנזק בכל טיפול ולבדל אותם עם דיוק מקובל מבחינה סטטיסטית. מספר דגימות כי נדרשים לבדל הטיפולים זה מזה תלוי פרופיל הפצה של האורגניזם. הפצה בלתי סדירה מאוד של TSSM מובילה סכום ניכר של וריאציה בין האזורים המדגמים, וצמחים רבים חייבים להיות שנדגמו בכדי להבטיח שחזור של אומדני האוכלוסייה. עם זאת, תקציב, כוח אדם, זמן ודיוק סטטיסטי הם גורמים חשובים המשפיעים על טכניקות דגימה. תתכבד חוקר להקצות את המשאבים הזמינים באופן אופטימלי לנהל דגימה עם העלות המעטה אבל עם רוב הדיוק. אנטומולוג במקום בשלבים TSSM לספור חזותית להבקיע את הנזק מבוסס על סולם של שום נזק רמות משתנות של נזק. למשל, טענו חוקרים אחדים דגימה הבינומית, שבו רק אחוז העלים השורצים הובקע ולא מספר קרדית עכביש לכל עלה 9, 19. אחרים העריכו ניזק על ידי TSSM על כותנה מבוססת על סולם מדד עלה אדמומי, אשר נע בין שקשט ואודם כדי אדמומיות נרחבות של חופת צמחיית 19. שיטות אלה הם שרירותיים, אנקדוטליות מוטה על ידי תפיסות הפרט של מידת הנזק.הערכה חזקה יותר וכמותיים של הניזק שנגרם על ידי TSSM נדרשה להעריך להפריד את הטיפולים עם דיוק סטטיסטי. החיישן האופטי multispectral הקרקעי שנראה כלי דגימת שיפור לקבוע את הניזק שנגרם על ידי כמותית TSSM וכדי להפריד את הטיפולים באופן מדויק יותר מאשר מערכת ראיית ניקוד ניזק שאומצה על ידי חוקרים רבים. עם זאת, חוקרים דיווחו כי החישה מרחוק היפר-ספקטרלית אינטנסיבי נתונים שסופקה חתימה ספקטראלית רבה כדי לזהות ולאתר מדגיש יבול ומאפייני חופה לעומת חישה מרחוק multispectral המהווה נתונים פחות אינטנסיבי עם שני גל אורכי 20, 21. באמצעות ספקטרומטר היפר-ספקטרלית, Reisig ו גודפרי מצאו כי ננומטר NIR ההחזרה גל ≈850 כמו ספקטרום אינפורמטיבי להבחין פרוקי הרגליים שורצי מכותנה uninfested 22. במחקר זה, הראינו כי ערכי ההחזרה multispectral (להיות ערך NIR ≈770 ננומטר) עם רק שתי להקות רפאים הצליחו לזהות ולאפיין צמחי הכותנה שורץ בצפיפויות שונות של TSSM. כמו כן, אנו דיווחנו מוקדם יותר כי החיישן האופטי multispectral לא רק להפריד ביעילות צמחי כותנה שורצים קטגוריות צפיפות משתנות נרחב של TSSM, אלא גם הראו כי spiromesifen היה יעיל יותר abamectin בשליטת TSSM ב כותנת עונה מוקדם החממה ב-חצי שיעור שיעור התווית הנמוך ביותר 23. החיישן האופטי multispectral יכול להיות מותקן על פלטפורמת מחקר ניידת ערכי ההחזרה ניתן היו לקבל מן האזורים המטופלים של חופות הצמחייה ללא הסובייקטיביות אנושית. נתוני יעילות Acaricidal כך ניתן להשיג ללא עבודת האדם הרבה. נתוני NDVI ניתן לטעון בקלות למחשב ונותחו באמצעות מסחריים סטטיסטייםתוֹכנָה. מקלט GPS גם יכול להיות מותקן על גבי הפלטפורמה הניידת כדי לאסוף את קואורדינטות GPS כדי ליצור מפת ניזק של השדה. באמצעות חתימות החזרת multispectral מן חופת הצמח, החיישן האופטי multispectral מספק אמצעי מהיר וחסכוני של זיהוי וכימות לחץ צמח. יתר על כן, שטח גדול בהרבה של השדה יכול להיות מכוסה בפחות זמן עם רזולוציה מרחבית גבוהה יותר של חופה צמח לעומת צופיות שדה קונבנציונליות. חשוב לזכור כי רמת הנזק הסף TSSM על כותנה משתנה מאזור לאזור בארצות הברית. לדוגמה, נזק TSSM יהיה גבוה בסביבה צחיחה כמו בקליפורניה לעומת באזור Midsouth שבו גשמים ולחות גבוהה קרובות לנצח 24. לכן, אובדן התשואה בשל נזק TSSM יהיה משתנה וכך גם סף הנזק. עם זאת, דיווחים ממיסיסיפי, ארקנסו וטנסי עולה כי סף רמתעבור TSSM על כותנה שנראה כאשר בין 30 ל -50% מהצמחים שורצים ואוכלוסיות מגבירות 5 פעילות. יתר על כן, צמחים הגדלים בשטח נחשפים מדגיש מרובה כולל מדגיש מים והאכלה של אוכלי עשב פרוקי רגליים ואת האינטראקציות בין פעילויות אלה יכולות להפחית באופן משמעותי את הפרודוקטיביות ואת הצמח צפויים להשפיע סף ניזק. TSSM יכול להפחית במוליכות הפיוניות, פוטוסינתזה וקצב הדיות בכותנה 25. צמחים גדלים בחממה מושפעים קרינת אור UV וזה משמעותי משפיע פונקציה הפיוניות, פוטוסינתזת חופת מורפולוגיה 26, 27 וככל הנראה עלול להיות השפעה נוספת על לחץ צמח. עם זאת, TSSM מסוגל קרינת UV הימנעות ידי בעל גישת גידול המוגן מפני קרינת שמש על פני השטח התחתונים של חופת צמח 28, 29 &lt;/ sup&gt;, 30, שם הוא מתגורר. גובים החיישן האופטי מעל חופת היעד ואת שמיקומו ביחס החיישן אל היעד הם גורמים חשובים שהשפיעו על ערכי ההחזרה משמעותיים שהושגו על ידי החיישן האופטי multispectral 31. למשל, כאשר פלטפורמת המחקר הניידת עוברת דרך שדה מרטש כגון כאשר חופת כותנה פתוחה, החיישן צפוי להניב תוצאות שונות בהתאם האורינטציה של החיישן, או במקביל או בניצב בשורה. כמו כן סביר להניח כי קרקע וחומר רקע אחר עשויות להשפיע על קריאות החיישנים מאוד, במיוחד כאשר חיישן אורינטציה בניצב בשורה. על מנת לקבל תגובה המלאה מהחיישן, ראש החיישן צריך להיות מכוון ב-קו עם וישירות מעל השורות. למרות המכוון את קרן האור בניצב השורות יש יותר סיכוי להרים בחזרההחזרה קרקע בשטח, זה עשויה להיות מקובל, אולם, כאשר חופת כותנה סגורה עם צמחייה עבותה. בנוסף, מפעילים צריכים לעקוב להמלצות יצרן על מגוון גובה הפעלה של 81-122 סנטימטר ואת מכוונים את ראש החיישן ב-קו עם המטרה להשיג תגובת אות מקסימלית. חשוב לטעון את סוללת החיישן לפני השימוש או שזה צריך להיות כל זמן מחובר לחשמל כדי למנוע תקלות. רמת סוללה חלשה עשויה לייצר קריאות שגויות.

שני-מנוקדים קרדית העכביש, urticae Tetranychus (קוך) הוא מזיק polyphagous וקוסמופוליטית של שדה ומפעלים רבים הגננות 1, 2. הוא חי webbings בתוך במושבות על המשטח התחתון של הצמח 3, 4. זה התפתח מלהיות העונה מאוחר נודניק העונה מוקדם באמצע שנות בדרום ארצות הברית בעשור האחרון 5. TSSM היה המזיק המזיק ביותר 5 th של כותנה גרם להפסד מוערך של 57,441 צרורות כותנה ו 0.167% ירידה בתשואה בארצות הברית בשנת 2011 6, 7. מחזור חיים הקצרים שלה, נחישות הפריון הפלואידים-דיפלואידי מין גבוה בשילוב עם היכולת לעכל לטהר xenobiotics החריף את ההתפתחות עמידות לחומרי הדברה 8. נכון להיום, אקוריצידים להישאר כמו oמנגנון בקרה nly מהימן עבור דיכוי urticae ט. לכן, חוקרי חרקים שדה הזמן להעריך כרגע זמין החדש שפותח אקוריצידים עבור יעילות. אמידת הנזק על ידי קרדית העכביש מתבצע לרוב על ידי הבקיע את הנזק בקנה מידה סובייקטיבית בשל הקושי נתקלו בספירת קרדית ידני. חלק שנערך דגימה הבינומית, שבו רק אחוז העלים השורצים הובקע ולא מספר קרדית עכביש לכל עלה 9. סולם מדד עלה אדמומי, אשר נע בין stippling ואודם כדי אדמומיות נרחבות של הצמחייה, שמש כקריטריון להערכת ניזק. דפוס הפריסה המרחבית של ט urticae על כותנה התאים למתכונת הפצת clumped 9. קרדית מופצת על עלוות כותנה מן דלילה כדי מקובצים בכבדות ולהישאר כך בתנאי שדה. cou דפוס הפצה כזוpled עם גודל, ניידות פורה העתק מוקטן שלה עושה ספירה של TSSM קשה. טכניקות חלופיות אמינות יש צורך בהערכה של צפיפות קרדית כדי להעריך את היעילות של אקוריצידים כמותית נגד TSSM. מטרת המחקר הנוכחי הייתה להפריד צמחי הכותנה שנפגעו בצפיפויות שונות של TSSM באמצעות חיישן אופטי multispectral. כוונתנו הייתה לקבוע אם החיישן האופטי הקרקעי יכול לסווג ולהפריד צמחי כותנה בריאים מאלו שנפגעו קרדית העכביש.

<table><tbody><tr><td>GreenSeeker</td><td>Trimble Ag. Division&lt;br /&gt;Westminster, CO</td><td>Model 505</td><td>Red NDVI sensor</td></tr><tr><td>Pinto beans</td><td>Producer&#039;s Co-op., Bryan, TX</td><td>Not applicable</td><td>Free choice item</td></tr><tr><td>Deltapine cotton seeds</td><td>Brazos Bottom Crop Care, Caldwell, TX77836</td><td>Not applicable</td><td>436 RR; NonBt &amp;amp; RoundUp Ready</td></tr><tr><td>Plastic trays</td><td>BWI, Schulenberg, TX</td><td>FG1020NL7</td><td>56 cm x 28 cm</td></tr><tr><td>Label sticks</td><td>Gempler&#039;s, Janesville, WI 53547</td><td>Item # 151276</td><td>Durable spike-style pot markers</td></tr><tr><td>4-wheel Garden push cart</td><td>Farm Tek, Dyersville, IA 52040</td><td>Item # 108676</td><td>61 cm x 122 cm</td></tr></tbody></table>

remote sensing evaluation of two-spotted spider mite damage on greenhouse cotton

The objective of this study was to evaluate a ground-based multispectral optical sensor as a remote sensing tool to assess foliar damage caused by the two-spotted spider mite (TSSM), Tetranychus urticae Koch, on greenhouse grown cotton. TSSM is a polyphagous pest which occurs on a variety of field and horticultural crops. It often becomes an early season pest of cotton in damaging proportions as opposed to being a late season innocuous pest in the mid-southern United States. Evaluation of acaricides is important for maintaining the efficacy of and preventing resistance to the currently available arsenal of chemicals and newly developed control agents. Enumeration of spider mites for efficacy evaluations is laborious and time consuming. Therefore, subjective visual damage rating is commonly used to assess density of spider mites. The NDVI (Normalized Difference Vegetation Index) is the most widely used statistic to describe the spectral reflectance characteristics of vegetation canopy to assess plant stress and health consequent to spider mite infestations. Results demonstrated that a multispectral optical sensor is an effective tool in distinguishing varying levels of infestation caused by T. urticae on early season cotton. This remote sensing technique may be used in lieu of a visual rating to evaluate insecticide treatments.

החיישן פולט אור אדום אינפרא אדום ואור זה בתורו מקבל ביטוי בחזרה מן החופה צמח. האור המוחזר משמש מדידת כמותית של גלוי הלהקות האינפרה-אדום הקרובות של הספקטרום האלקטרומגנטי, והוא נרשם מספרי כמו NDVI (אינדקס צמחיית הבדל מנורמל) קריאה. ערכי NDVI לנוע בין 0 כדי 0.99. ככל NDVI קריאת חופת הצמח הבריאה. צמחייה בריאה סופגת אור הנראה משקפת את האור האינפרה-אדום הקרוב וצמחייה בריאה משקפת אור נראה יותר ופחות אור האינפרה-אדום קרוב. NDVI משמשת פונדקאית לפעילות הפוטוסינתזה ורכוש ספקטרלי זה מתאם גבוה photosynthetically קרינה פעיל 15, 16, 17, 18. ערכים נמוכים מאוד של NDVI (0.1 ומטה) מתאימים לאזורים הצחיחים של רוק אוחול, בעוד ערכים מתונים (0.2 כדי 0.3) מייצגים שיח מרעה וערכים גבוהים (0.6 כדי 0.8) מצביע צמחייה ממוזגת וטרופית. המדידות ההחזרה התקבלו תחת תאורה בשעות היום באזורי אדום קרוב אינפרא אדום של הספקטרום. NDVI חושב מן המשוואה הבאה: NDVI = (NIR - RED) / (NIR + RED), שבו RED ו- NIR הם ערכי ההחזרה הספקטרלית (0-255) בספקטרום האדום קרוב אינפרא אדום ב nm 660 ו 770, בהתאמה. ההחזרה הרשומה חיישן מעריך כל 100 מילישניה. קריאות NDVI מקסימלית ונבחרות מתוך מערך של ערכי NDVI נלקחו בכל פעם על ידי החיישן שמשו בניתוח כדי למזער החזרת רקע ולספק ערכים מספריים דיר בעקביות. הניתוח השונה של הנתונים עולה כי הבדלים משמעותיים להפחתת אחוז NDVI נצפו בין קלות, מ &#39;edially ו בכבדות שורץ צמחי הכותנה לעומת קבוצת הביקורת (F = 436.4; P &lt;0.0001; df = 3, 32). ערכי NDVI אשר תארו מרץ צמח בתקופת מבחן מגוונות משמעותית בין ימים של התבוננות (F = 1398.2; P &lt;0.0001; df = 8, 256). כמו כן, הפחתת אחוז בערכים NDVI הפוך היו מתואמים הטיפולים בתקופת תצפית (DAT), אבל רק לעתים רחוקות נטו לסטות הדפוס הזה ואינטראקציה משמעותית עם DAT (F = 201.5; P &lt;0.0001; df = 24, 256) . הקריטריונים מבחן MANOVA עבור כל השפעה DAT היה משמעותי כמו גם (λ של וילק = 0.00913; F = 339.0; P &lt;0.0001; df = 8, 25). באופן דומה, את האינטראקציה בין DAT וטיפול היה משמעותי (λ של וילק = 0.00101; F = 29.8; P &lt;0.0001; df = 24, 73). איור 9 מציג אחוז שינוי מרץ צמח כפי שהוכח על ידי ערכי NDVI במהלך תקופת המעקב. אמפר לכל חיוביאחוז שינוי בשווי NDVI מציין גידול צמחים בריאים, בעוד ערך שלילי מצביע על כך המרץ של המפעל ירד מאז המדידה הראשונה (כלומר יום 0) נעשתה. צמחי השליטה הלא השורצים והראו גדילת צמיחת צמח לאורך כל תקופת המחקר, בעוד הצמחים הנגועים TSSM הראו שפלה בבריאות לאורך זמן. הפרדה ממוצעת של הטיפולים שניתן לראות בטבלת 1 מגלה כי אין הבדל להגדרת הפחתת אחוז NDVI בין קטגוריות טיפול (קל, בינוני וכבד) והבקרה נצפה עד יום 5 כאשר כיתות שריצה חרגה באופן משמעותי המלא ונשארות גורף כל כך לאחר מכן . נתונים זה מדגים כי החיישן האופטי ניתן להשתמש ביעילות במקום דגימה ידנית ועבודה אינטנסיבית על מנת להעריך את יעילות טיפול כנגד אקוריצידים על כותנה. <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td colspan = &quot;10&quot;&gt; ימים לאחר הטיפול (DAT) </td></tr><tr><td> קטגוריה שריצה </td><td> 1 </td><td> 5 </td><td> 6 </td><td> 7 </td><td> 9 </td><td> 10 </td><td> 12 </td><td> 13 </td><td> 14 </td></tr><tr><td> לִשְׁלוֹט </td><td> 1.18 ± 0.33a </td><td> 2.70 ± 0.40a </td><td> 4.0 ± 0.36a </td><td> 3.94 ± 0.37a </td><td> 3.68 ± 0.53a </td><td> 2.57 ± 0.42a </td><td> 2.96 ± 0.47a </td><td> 3.48 ± 0.38a </td><td> 3.08 ± 0.22a </td></tr><tr><td> אוֹר </td><td> -0.13 ± 0.13b </td><td> -0.71 ± 0.29b </td><td> -0.65 ± 0.28b </td><td> -2.02 ± 0.47b </td><td> -5.68 ± 0.72b </td><td> -11.17 ± 0.94b </td><td> -15.73 ± 1.76b </td><td> -19.54 ± 1.68b </td><td> -24.9 ± 1.90b </td></tr><tr><td> בינוני </td><td> -1.83 ± 0.42c </td><td> -7.06 ± 0.63c </td><td> -9.61 ± 0.53c </td><td> -10.39 ± 0.57c </td><td> -17.06 ± 0.80C </td><td> -26.92 ± 0.72c </td><td> -33.84 ± 0.96c </td><td> -37.05 ± 1.14c </td><td> -41.74 ± 0.73c </td></tr><tr><td> כָּבֵד </td><td> -0.97 ± 0.58bc </td><td> -11.76 ± 0.29d </td><td> -13.83 ± 0.86d </td><td> -15.20 ± 0.63d </td><td> -25.0 ± 1.0d </td><td> -34.63 ± 0.54d </td><td> -39.07 ± 0.94d </td><td> -42.68 ± 0.62d </td><td> -46.71 ± 0.63 </td></tr></tbody></table> טבלה 1: הפחתת אחוז מקס NDVI לאחר צמחי הכותנה היו נגועים משתנה מספר אשכולות או המוני TSSM. צמחי הכותנה גדלה ב מגשי פלסטיק בחממה היו נגועים שלוש קטגוריות של צפיפות קרדית העכביש. קטגורית האור קבל 3 המונים או אשכולות של TSSM לכל מגש, קטגוריה בינונית קבל 20 המונים לכל מגש קטגוריה כבדה קבל 40 המונים לכל מגש. אמצעי הופרד מלא פי דנקן של Multiple טווח הבדיקה (P = 0.05). אמצעים ואחריו את אותו המכתב באותיות קטנות לא היו שונים משמעותית ברמת 5% של הסתברות.

Watch this Scientific Journal Video about Remote Sensing Evaluation of Two-spotted Spider Mite Damage on Greenhouse Cotton at JoVE.com

Remote Sensing Evaluation of Two-spotted Spider Mite Damage on Greenhouse Cotton

כתב היד הזה מתאר חיישן אופטי multispectral כי זיהה פגיעה ביעילות כותנת עונה מוקדם שורץ מלאכותי עם צפיפויות שונות של אוכלוסיות עכביש קרדית שני-מנוקדים.

הערכת חישה מרחוק של נזק עכביש קרדית דו הבחין על כותנה חממה

The objective of this study was to evaluate a ground-based multispectral optical sensor as a remote sensing tool to assess foliar damage caused by the ...

remote-sensing-evaluation-two-spotted-spider-mite-damage-on

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Environment

8.5K Views.  USDA-ARS, SPARC-AATRU.  כתב היד הזה מתאר חיישן אופטי multispectral כי זיהה פגיעה ביעילות כותנת עונה מוקדם שורץ מלאכותי עם צפיפויות שונות של אוכלוסיות עכביש קרדית שני-מנוקדים. 

Video: Remote Sensing Evaluation of Two-spotted Spider Mite Damage on Greenhouse Cotton

Application of Two-spotted Spider Mite Tetranychus urticae for Plant-pest Interaction Studies

The two-spotted spider mite, Tetranychus urticae, is a ubiquitous polyphagous arthropod herbivore that feeds on a remarkably broad array of species, with more than 150 of economic value. It is a major pest of greenhouse crops, especially in Solanaceae and Cucurbitaceae (e.g., tomatoes, eggplants, peppers, cucumbers, zucchini) and greenhouse ornamentals (e.g., roses, chrysanthemum, carnations), annual field crops (such as maize, cotton, soybean, and sugar beet), and in perennial cultures (alfalfa, strawberries, grapes, citruses, and plums)1,2. In addition to the extreme polyphagy that makes it an important agricultural pest, T. urticae has a tendency to develop resistance to a wide array of insecticides and acaricides that are used for its control3-7.
T. urticae is an excellent experimental organism, as it has a rapid life cycle (7 days at 27 &#176;C) and can be easily maintained at high density in the laboratory. Methods to assay gene expression (including in situ hybridization and antibody staining) and to inactivate expression of spider mite endogenous genes using RNA interference have been developed8-10. Recently, the whole genome sequence of T. urticae has been reported, creating an opportunity to develop this pest herbivore as a model organism with equivalent genomic resources that already exist in some of its host plants (Arabidopsis thaliana and the&#160;tomato Solanum lycopersicum)11. Together, these&#160;model organisms could provide insights into molecular bases of plant-pest interactions.
Here, an efficient method for quick and easy collection of a large number of adult female mites, their application on an experimental plant host, and the assessment of the plant damage due to spider mite feeding are described. The presented protocol enables fast and efficient collection of hundreds of individuals at any developmental stage (eggs, larvae, nymphs, adult males, and females) that can be used for subsequent experimental application.

Application of Two-spotted Spider Mite Tetranychus urticae for Plant-pest Interaction Studies

Protocols for efficient preparation of homogenous samples of spider mites, infestation of experimental plants, and assessment of plant damage, as required for studies of plant-pest interaction were developed.

יישום של קרדית העכביש הבחין-Two<em&gt; Tetranychus urticae</em&gt; לאינטראקצית צמח-מזיקים ללימודים

The two-spotted spider mite, Tetranychus urticae, is a ubiquitous polyphagous arthropod herbivore that feeds on a remarkably broad array of species, with ...

Development of Metarhizium anisopliae as a Mycoinsecticide: From Isolation to Field Performance

A major concern when developing commercial mycoinsecticides is the kill speed compared to that of chemical insecticides. Therefore, isolation and screening for the selection of a fast-acting, highly virulent entomopathogenic fungus are important steps. Entomopathogenic fungi, such as Metarhizium, Beauveria, and Nomurea, which act by contact, are better suited than Bacillus thuringiensis or nucleopolyhedrosis virus (NPV), which must be ingested by the insect pest. In the present work, we isolated 68 Metarhizium strains from infected insects using a soil dilution and bait method. The isolates were identified by the amplification and sequencing of the ITS1-5.8S-ITS2 and 26S rDNA region. The most virulent strain of Metarhizium anisopliae was selected based on the median lethal concentration (LC50) and time (LT50) obtained in insect bioassays against III-instar larvae of Helicoverpa armigera. The mass production of spores by the selected strain was carried out with solid-state fermentation (SSF) using rice as a substrate for 14 days. Spores were extracted from the sporulated biomass using 0.1% tween-80, and different formulations of the spores were prepared. Field trials of the formulations for the control of an H. armigera infestation in pigeon peas were carried out by randomized block design. The infestation control levels obtained with oil and aqueous formulations (78.0% and 70.9%, respectively) were better than the 63.4% obtained with chemical pesticide.

Development of Metarhizium anisopliae as a Mycoinsecticide: From Isolation to Field Performance

Here, we report the different stages involved in the knowledge-based development of an effective mycoinsecticide, including the isolation, identification, screening, and selection of the "best-fit" entomopathogenic fungus, Metarhizium anisopliae, for the control of insect pests in agriculture.

פיתוח של<em&gt; מטריציום anisopliae</em&gt; כמקוטלת חיידקים: מהבידוד לביצועי שדה

A major concern when developing commercial mycoinsecticides is the kill speed compared to that of chemical insecticides. Therefore, isolation and ...

Methodology for Developing Life Tables for Sessile Insects in the Field Using the Whitefly, Bemisia tabaci, in Cotton As a Model System

Life tables provide a means of measuring the schedules of birth and death from populations over time. They also can be used to quantify the sources and rates of mortality in populations, which has a variety of applications in ecology, including agricultural ecosystems. Horizontal, or cohort-based, life tables provide for the most direct and accurate method of quantifying vital population rates because they follow a group of individuals in a population from birth to death. Here, protocols are presented for conducting and analyzing cohort-based life tables in the field that takes advantage of the sessile nature of the immature life stages of a global insect pest, Bemisia tabaci. Individual insects are located on the underside of cotton leaves and are marked by drawing a small circle around the insect with a non-toxic pen. This insect can then be observed repeatedly over time with the aid of hand lenses to measure development from one stage to the next and to identify stage-specific causes of death associated with natural and introduced mortality forces. Analyses explain how to correctly measure multiple mortality forces that act contemporaneously within each stage and how to use such data to provide meaningful population dynamic metrics. The method does not directly account for adult survival and reproduction, which limits inference to dynamics of immature stages. An example is presented that focused on measuring the impact of bottom-up (plant quality) and top-down (natural enemies) effects on the mortality dynamics of B. tabaci in the cotton system.

Methodology for Developing Life Tables for Sessile Insects in the Field Using the Whitefly, Bemisia tabaci, in Cotton As a Model System

Life tables allow quantification of the sources and rates of mortality in insect populations and contribute to understanding, predicting and manipulating population dynamics in agroecosystems. Methods for conducting and analyzing cohort-based life tables in the field for an insect with sessile immature life stages are presented.

מתודולוגיית פיתוח טבלאות החיים עבור חרקים Sessile בשימוש השדה כנימת עש הטבק, כנימת עש הטבק, כותנה כמו מערכת מודל

Life tables provide a means of measuring the schedules of birth and death from populations over time. They also can be used to quantify the sources and ...

Screening Cotton Genotypes for Reniform Nematode Resistance

A rapid non-destructive reniform nematode (Rotylenchulus reniformis) screening protocol is needed for the development of resistant cotton (Gossypium hirsutum) varieties to improve nematode management. Most protocols involve extracting vermiform nematodes or eggs from the cotton root system or potting soil to determine population density or reproduction rate. These approaches are generally time-consuming with a small number of genotypes evaluated. An alternative approach is described here in which the root system is visually examined for nematode infection. The protocol involves inoculating cotton seedling 7 days after planting with vermiform nematodes and determining the number of females attached to the root system 28 days after inoculation. Data are expressed as the number of females per gram of fresh root weight to adjust for variation in root growth. The protocol provides an excellent method for evaluating host-plant resistance associated with the ability of the nematode to establish an infection site; however, resistance that hinders nematode reproduction is not assessed. As with other screening protocols, variation is commonly observed in nematode infection among individual genotypes within and between experiments. Data are presented to illustrate the range of variation observed using the protocol. To adjust for this variation, control genotypes are included in experiments. Nonetheless, the protocol provides a simple and rapid method to evaluate host-plant resistance. The protocol has been successfully used to identify resistant accessions from the G. arboreum germplasm collection and evaluate segregating populations of more than 300 individuals to determine the genetics of resistance. A vegetative propagation method for recovering plants for resistance breeding was also developed. After removal of the root system for nematode evaluation, the vegetative shoot is replanted to allow the development of a new root system. More than 95% of the shoots typically develop a new root system with plants reaching maturity.

Here, a protocol is presented for the rapid non-destructive screening of cotton genotypes for reniform nematode resistance. The protocol involves visually examining the roots of nematode-infected cotton seedlings to determine infection response. The vegetative shoot from each plant is then propagated to recover plants for seed production.

הקרנת כותנה גנוטיפים לעמידות בפני ההתנגדות של רנפורם

A rapid non-destructive reniform nematode (Rotylenchulus reniformis) screening protocol is needed for the development of resistant cotton (Gossypium ...

Genetics

Evaluating Dryocosmus Kuriphilus-induced Damage on Castanea Sativa

Dryocosmus kuriphilus Yasumatsu has become a major pest for Castaneasativa since its arrival in Europe. Its galling activity results in the formation of different gall types and prevents the development of normal shoots. Repeated and uncontrolled attacks cause, besides the production of galls and the attendant gall-related reduction in leaf area, progressive corruption of the branch architecture, including the death of branch parts, and an increase in dormant bud activation. Thus far, there have been few attempts to quantify branch architecture damage. Further, the different methods for assessing infestation degree (MAID) that have been developed focus only on the galls' presence and abundance.
Using the leaf area to sapwood area relationship as a green biomass indicator, we developed in a previous study a damage composite index (DCI) that takes into account the most important branch architectural features, allowing for realistic damage assessment during the entire epidemic process. 
The aim of this study is to present this novel method and highlight differences in the damage description with respect to other broadly used indices. Results show how the DCI depicts branch damage better, especially during the epidemic peak, compared to MAID, which tend to underestimate it. We conclude by suggesting how to properly evaluate the overall impact of the pest by means of our composite damage index, the infestation degree using classic methods, and crown transparency evaluations.

Evaluating Dryocosmus Kuriphilus-induced Damage on Castanea Sativa

It is common practice to assess the damage caused by Dryocosmus kuriphilus by considering the abundance of galls alone rather than by also taking related branch corruption into consideration. We propose a composite damage index that takes into account the most important branch features, thus enabling more realistic damage assessment.

הערכת Dryocosmus Kuriphilus-induced נזק על ערמון

Dryocosmus kuriphilus Yasumatsu has become a major pest for Castaneasativa since its arrival in Europe. Its galling activity results in the formation of ...

Methodology to Test Control Agents and Insecticides Against the Coffee Berry Borer Hypothenemus hampei

Prior to recommending insecticides to treat the coffee berry borer (CBB) Hypothenemus hampei, it is valuable to know the mortality and repellency of these insecticides against adult insects or their impact on reproductive output. However, currently available methods assess adult mortality only, limiting the selection of novel insecticides with a different mode of action. In this work, different experimental methods were examined to identify the diverse effects on the CBB under laboratory conditions. For this, green coffee fruits (GFs) were collected and disinfected by immersion in sodium hypochlorite solution followed by UV light irradiation. In parallel, CBB adults from a colony were disinfected by immersion in sodium hypochlorite solution. To assess fruit protection (preinfestation), the fruits were placed in plastic boxes, and the insecticides were applied. Then, the CBB adults were released at a rate of two CBBs per GF. The GFs were left under controlled conditions to evaluate CBB infestation and survival after 1, 7, 15, and 21 days. To evaluate insecticide efficacy after CBB infestation (postinfestation), CBB adults were released to the GFs in a 2:1 ratio for 3 h at 21 &#176;C. Infested fruits showing CBB adults with their abdomens partially exposed were selected and placed in 96-well racks, and the CBBs boring into the fruits were treated directly. After 20 days, the fruits were dissected, and the CBB biological stages inside each fruit were recorded. The GFs served as substrates that mimic natural conditions to evaluate toxic, chemical, and biological insecticides against the CBB.

Methodology to Test Control Agents and Insecticides Against the Coffee Berry Borer Hypothenemus hampei

A method using green coffee fruits (GFs) was developed to test the toxicity of insecticides against the coffee berry borer (CBB). Insecticides or toxic substances were applied to disinfected GFs before or after CBB infestation. Insect mortality, repellency, and reproductive capacity, in addition to other parameters, were evaluated.

מתודולוגיה לבדיקת סוכני בקרה וקוטלי חרקים כנגד היפותנאמוס של ברי ברי הקפה

Prior to recommending insecticides to treat the coffee berry borer (CBB) Hypothenemus hampei, it is valuable to know the mortality and repellency of these ...

Evaluating the Effect of Pesticides on the Larvae of the Solitary Bees

Current ecological risk assessments of pesticides on pollinators have primarily considered only laboratory conditions. For the larvae of solitary bees, ingestion of provisions contaminated with pesticides may increase the mortality rate of the larvae, decrease the collection rate and the population of adult solitary bees in the next year from a demographic perspective. But there are limited studies on the effects of pesticides on the larvae of solitary bees. Therefore, understanding how pesticides influence the larvae of solitary bees should be considered an integral part of pesticide ecological risk assessment. This study presents a method to expose the larvae of solitary bee, Osmia excavata, to lethal or sublethal doses of pesticide, tracking larval weight gain, developmental duration, eclosion ability, and food consumption efficiency conversion of ingested food. To demonstrate the effectiveness of this method, the larvae of O. excavata were fed with provisions containing acute lethal and sublethal doses of chlorpyrifos. Then, the above indexes of the treated larvae were investigated. This technique helps to predict and mitigate the risk of pesticides to pollinators.

The present protocol explains a method to feed pesticide-contaminated provisions to the larvae of the solitary bees, Osmia excavata. The procedure examines the ecotoxicity of the pesticide to the larvae of the solitary bees.

הערכת ההשפעה של חומרי הדברה על הזחלים של הדבורים הבודדות

Current ecological risk assessments of pesticides on pollinators have primarily considered only laboratory conditions. For the larvae of solitary bees, ...

Biochemistry

Bioassays for Monitoring Insecticide Resistance

Pest resistance to pesticides is an increasing problem because pesticides are an integral part of high-yielding production agriculture. When few products are labeled for an individual pest within a particular crop system, chemical control options are limited. Therefore, the same product(s) are used repeatedly and continual selection pressure is placed on the target pest. There are both financial and environmental costs associated with the development of resistant populations. The cost of pesticide resistance has been estimated at approximately $ 1.5 billion annually in the United States. This paper will describe protocols, currently used to monitor arthropod (specifically insects) populations for the development of resistance. The adult vial test is used to measure the toxicity to contact insecticides and a modification of this test is used for plant-systemic insecticides. In these bioassays, insects are exposed to technical grade insecticide and responses (mortality) recorded at a specific post-exposure interval. The mortality data are subjected to Log Dose probit analysis to generate estimates of a lethal concentration that provides mortality to 50% (LC50) of the target populations and a series of confidence limits (CL's) as estimates of data variability. When these data are collected for a range of insecticide-susceptible populations, the LC50 can be used as baseline data for future monitoring purposes. After populations have been exposed to products, the results can be compared to a previously determined LC50 using the same methodology.

This manuscript demonstrates and discusses techniques used to survey pesticide susceptibility and detect resistance to contact and systemic pesticides in arthropod pests.

Bioassays עבור ההתנגדות הדברה ניטור

Pest resistance to pesticides is an increasing problem because pesticides are an integral part of high-yielding production agriculture. When few products ...

Biology

Protocols for Investigating the Host-tissue Distribution, Transmission-mode, and Effect on the Host Fitness of a Densovirus in the Cotton Bollworm

Many novel viruses have been discovered in animal hosts using next-generation sequencing technologies. Previously, we reported a mutualistic virus, Helicoverpa armigera densovirus (HaDV2), in a lepidopteran species, the cotton bollworm, Helicoverpa armigera (Hubner). Here, we describe the protocols that are currently used to study the effect of HaDV2 on its host. First, we establish a HaDV2-free cotton bollworm colony from a single breeding pair. Then, we orally inoculate some neonate larval offspring with HaDV2-containing filtered liquid to produce two colonies with the same genetic background: one HaDV2-infected, the other uninfected. A protocol to compare life table parameters (e.g., larval, pupal, and adult periods and fecundity) between the HaDV2-infected and -uninfected individuals is also presented, as are the protocols for determining the host-tissue distribution and transmission efficiency of HaDV2. These protocols would also be suitable for investigating the effects of other orally transmitted viruses on their insect hosts, lepidopteran hosts in particular.

Here, we present a protocol to investigate the host-tissue distribution, transmission mode, and effect on the host fitness of a densovirus within a lepidopteran species, the cotton bollworm. This protocol can also be used for studying the interaction between other orally-transmitted viruses and their insect hosts.

פרוטוקולים לחקירת הפצת Host-הרקמה, הילוכים-mode, ואת ההשפעה על כושר Host של Densovirus ב bollworm הכותנה

Many novel viruses have been discovered in animal hosts using next-generation sequencing technologies. Previously, we reported a mutualistic virus, ...

Immunology and Infection

Agrobacterium-Mediated Virus-Induced Gene Silencing Assay In Cotton

Cotton (Gossypium hirsutum) is one of the most important crops worldwide. Considerable efforts have been made on molecular breeding of new varieties. The large-scale gene functional analysis in cotton has been lagged behind most of the modern plant species, likely due to its large size of genome, gene duplication and polyploidy, long growth cycle and recalcitrance to genetic transformation1. To facilitate high throughput functional genetic/genomic study in cotton, we attempt to develop rapid and efficient transient assays to assess cotton gene functions.
Virus-Induced Gene Silencing (VIGS) is a powerful technique that was developed based on the host Post-Transcriptional Gene Silencing (PTGS) to repress viral proliferation2,3. Agrobacterium-mediated VIGS has been successfully applied in a wide range of dicots species such as Solanaceae, Arabidopsis and legume species, and monocots species including barley, wheat and maize, for various functional genomic studies3,4. As this rapid and efficient approach avoids plant transformation and overcomes functional redundancy, it is particularly attractive and suitable for functional genomic study in crop species like cotton not amenable for transformation.
In this study, we report the detailed protocol of Agrobacterium-mediated VIGS system in cotton. Among the several viral VIGS vectors, the tobacco rattle virus (TRV) invades a wide range of hosts and is able to spread vigorously throughout the entire plant yet produce mild symptoms on the hosts5. To monitor the silencing efficiency, GrCLA1, a homolog gene of Arabidopsis Cloroplastos alterados 1 gene (AtCLA1) in cotton, has been cloned and inserted into the VIGS binary vector pYL156. CLA1 gene is involved in chloroplast development6, and previous studies have shown that loss-of-function of AtCLA1 resulted in an albino phenotype on true leaves7, providing an excellent visual marker for silencing efficiency. At approximately two weeks post Agrobacterium infiltration, the albino phenotype started to appear on the true leaves, with 100% silencing efficiency in all replicated experiments. The silencing of endogenous gene expression was also confirmed by RT-PCR analysis. Significantly, silencing could potently occur in all the cultivars we tested, including various commercially grown varieties in Texas. This rapid and efficient Agrobacterium-mediated VIGS assay provides a very powerful tool for rapid large-scale analysis of gene functions at genome-wide level in cotton.

We present the detailed protocol for Agrobacterium-mediated virus-induced gene silencing (VIGS) assay in cotton. The tobacco rattle virus (TRV)-derived VIGS vectors were deployed to induce RNA silencing of cotton GrCLA1, Cloroplastos alterados 1 gene. The albino phenotype caused by silencing GrCLA1 was observed at the seedling stage within 2 weeks after inoculation.

Agrobacterium בתיווך Virus-induced ג&#39;ין השתקת Assay כותנה

Cotton (Gossypium hirsutum) is one of the most important crops worldwide. Considerable efforts have been made on molecular breeding of new varieties.  The ...

הערכת חישה מרחוק של נזק עכביש קרדית דו הבחין על כותנה חממה

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

יישום של קרדית העכביש הבחין-Two

פיתוח של