מימון לפרסום מסופק על ידי Cerus קורפ, יצרנית של מערכת הדם ליירט.

<ol>
	<li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components. , (2010).</li><li>Van Rhenen, D. J., Vermeij, J., Mayaudon, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+characteristics+of+S-59+photochemically+treated+platelet+concentrates+derived+from+buffy+coats.">Functional characteristics of S-59 photochemically treated platelet concentrates derived from buffy coats.</a> Vox Sang. 79, 206-214 (2000).</li><li>Wollowitz, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+DNA+and+RNA+in+pathogens:+mode+of+action+of+amotosalen+HCl.">Targeting DNA and RNA in pathogens: mode of action of amotosalen HCl.</a> Transfus. Med. Rev. 31, 11-16 (2004).</li><li>Irsch, J., Lin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogen+Inactivation+of+Platelet+and+Plasma+Blood+Components+for+Transfusion+Using+the+INTERCEPT+Blood+SystemTM.">Pathogen Inactivation of Platelet and Plasma Blood Components for Transfusion Using the INTERCEPT Blood SystemTM.</a> Transfus. Med. Hemother. 38, (2011).</li><li>Lin, L., Dikeman, R., Molini, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photochemical+treatment+of+platelet+concentrates+with+amotosalen+and+long-wavelength+ultraviolet+light+inactivates+a+broad+spectrum+of+pathogenic+bacteria.">Photochemical treatment of platelet concentrates with amotosalen and long-wavelength ultraviolet light inactivates a broad spectrum of pathogenic bacteria.</a> Transfusion. 44, 1496-1504 (2004).</li><li>Lin, L., Hanson, C., Alter, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inactivation+of+viruses+in+platelet+concentrates+by+photochemical+treatment+with+amotosalen+and+long-wavelength+ultraviolet+light.">Inactivation of viruses in platelet concentrates by photochemical treatment with amotosalen and long-wavelength ultraviolet light.</a> Transfusion. 45, 580-590 (2005).</li><li>Allain, J. P., Cianco, C., Blajchman, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protecting+the+blood+supply+from+emerging+pathogens:+the+role+of+pathogen+inactivation.">Protecting the blood supply from emerging pathogens: the role of pathogen inactivation.</a> Transfus. Med. Rev. 19, 110-126 (2005).</li><li>Stramer, S., Hollinger, F., Katz, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emerging+infectious+disease+agents+and+their+potential+threat+to+transfusion+safety.">Emerging infectious disease agents and their potential threat to transfusion safety.</a> Transfusion. 49, 1S-29S (2009).</li><li>Nussbaumer, W., Allesdorfer, D., Grabmer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+transfusion+of+platelet+components+contaminated+with+low+levels+of+bacteria:+a+comparison+of+bacteria+culture+and+pathogen+inactivation+methods.">Prevention of transfusion of platelet components contaminated with low levels of bacteria: a comparison of bacteria culture and pathogen inactivation methods.</a> Transfusion. 47, 1125-1133 (2007).</li><li>Schlenke, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+against+Transfusion-Associated+Graft-versus-Host+Disease+in+Blood+transfusion:+Is+Gamma-Irradiation+the+Only+Answer?+Transfus.">Protection against Transfusion-Associated Graft-versus-Host Disease in Blood transfusion: Is Gamma-Irradiation the Only Answer? Transfus.</a> Med. Hemother. 31, 24-31 (2004).</li><li>Lin, L., Corash, L., Osselear, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+Against+TA-GVHD+Due+to+Platelet+Transfusion+By+Using+Pathogen+Inactivation+with+the+INTERCEPT+Blood+SystemTM+-+Gamma+Irradiation+is+Not+the+Only+Answer.">Protection Against TA-GVHD Due to Platelet Transfusion By Using Pathogen Inactivation with the INTERCEPT Blood SystemTM - Gamma Irradiation is Not the Only Answer.</a> Haematologica. 95 (Extra 1), 230-237 (2010).</li><li>Corash, L., Lin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+processes+for+inactivation+of+leukocytes+to+prevent+transfusion-associated+graft-verus-host+disease.">Novel processes for inactivation of leukocytes to prevent transfusion-associated graft-verus-host disease.</a> Bone Marrow Transplant. 33, 1-7 (2004).</li></ol>

הייצור והגישה חופשיה למאמר זה הוא בחסות Cerus.

טסיות מעייל באפים דורשות מספר שלבי עיבוד שתוצאה בעלויות לאחר איסוף, כולל זמן כוח אדם, חומרים מתכלה, ציוד ופסולת, אשר חייבת להיות בחשבון את העלות הכוללת של הפקת יחידות טסיות הדם. שיפור תפוקת טסיות דם מכל מעייל באפים (באמצעות אופטימיזציה נפח מעייל באפים והמטוקריט) מאפשר ייצור של יחידה כפולה מנת אפי מעייל טסיות מברכה של שבעה מעיילים באפים. כאשר אופטימיזציה זו מתבצעת, מספר אפי המעיילים הנדרשים כדי לייצר מספר קבוע של מנות טסיות עשוי להיות מופחת, ובכך לשפר את הניצול הכולל של אפי מעיילים ומאפשר ייצור של טסיות דם נוספות מתרכז (מחשבים). זמן כוח אדם, כמו גם עלויות מתכלות וציוד כגון מקלטים נקווים, פתרון תוסף טסיות דם, ופלי חיבור סטריליים, ערכות מסננות, ונהלי צנטריפוגה מופחת בשיעור של עד 50%. בנוסף לייעול ייצור טסיות דם והפחתת עלויות נלוות, thiשיטה של ​​האיגום יכול לייצר תרכיז טסיות (PC) שיעמוד בדרישת הקלט לשימוש עם הסט ליירט כפול אחסנת מכולות עיבוד, ומאפשרת לנו לספק הגנה משופרת למקבלי העירוי שלנו גם כן. מערכת הדם ליירט לאיון הפתוגן משתמשת amotosalen וסגול בהירות (UVA) ל-DNA קוולנטית קישור לחצות ו-RNA, מניעת שכפול חומצות גרעין ופתוגנים טיוח שאינם מסוגל לגרום למחלה. 3 זה למעשה מנטרל קשת רחבה של פתוגנים, כולל וירוסים, חיידקים , טפילים, ותאי דם לבנים מזהמים תורם. 4-6 ליירט מספק חלופה לפרדיגמה הנוכחית הבדיקות לפתוגנים מתעוררים, שמבחין הסטורי כרוכה עיכוב משמעותי בזמן בדיקה חדשה שפותחה וסופו של דבר דורשת השקעה כספית משמעותית ליישום בעת מבחן הופך להיות זמין. 7,8 זה גם יכול לספק חלופה לבטיחות measu המיותרמיל כגון גילוי חיידקים 9 וקרינת גמא. 10-12 בנוסף, ליירט מאפשר לנו לטפל ביחידות טסיות מנה כפולות אשר יתרונות יעילות הייצור שלנו ומסייע לנו לדבוק בתקציבים שלנו. ליירט ושיטת הפרווה הכפולה מנת האפים ניתן להתאים למגוון רחב של תהליכי עבודה במרכז בדם. כדוגמאות, אוספי דם מלאים ניתן להגדיל עד 500 מ&quot;ל; אוספים גם יכולים להיות מאוחסנים בלילה 22 מעלות צלזיוס לפני ההפרדה. בנוסף, שיטה חלופית אפי מעייל וריכוז היא אפשרית (למשל שיטת תמנון במקום שיטת רכבת) ו / או מכשיר אוטומטי (למשל TACSI) יכול להיות מנוצל לצנטריפוגה השנייה וההפרדה של השעית טסיות הדם מהתאים האדומים שנותרו . אם תוכן של טסיות דם מוגבר יש צורך, מספר טכניקות זמינות כוללות בחירה מראש של תורמים המבוססת על ספירת הטסיות, דגירת הלילה של הדם המלא, adjustment של הגדרות צנטריפוגה, או ניצול ברכה של 8 מעיילי אפים במקום 7. בשל ההגבלה של איגום קובע זמין כרגע והקיבולת של דליי צנטריפוגות, הנפח הכולל של ברכת המעייל באפים צריך להיות כ 600 מ&quot;ל. תהליך צנטריפוגה וההגדרות המתוארות בפרוטוקול זה המוטב להניב מוצר אשר עונו על הפרמטרים ליירט לברכה של 7 מעיילים באפים. הגדרות צנטריפוגה חייבות להיות שונות אם המספר באפי המעיילים בברכה הוא שונה. במדינות מסוימות, במינון המינימאלי הוא טסיות הדם גבוה ודרישות QC הן קפדניות יותר מאשר בשוודיה. ככזה, התוצאות שלנו לא יכולות להיות אוניברסלי ישימות. במדינות אלו, מחשב המנה הכפולה לפני הטיפול ליירט יצטרך להכיל מספר גדול יותר של טסיות דם על מנת לעמוד בדרישות מקומיות לאחר טיפול ופיצול ליירט. בגלל תוכן הטסיות המרבי וטיפול הנפח for ליירט הם 7x10 11 טסיות ו420 מיליליטר בהתאמה, אחוז היחידות ומעבר לדרישות העיבוד ליירט או תוכן הטסיות מספיק כדי להיות מחולק לשני מינונים טיפוליים, ישתנה בהתאם לגורמים כגון דרישות מקומיות למנת טסיות, קריטריוני QC, תוצאות אפי מעייל לאופטימיזציה ויציבות ייצור. אם מחשב של מנה כפולה עולה על דרישות העיבוד ליירט, זה יכול להיות מותאם באופן ידני כדי לעמוד בדרישות ובהמשך הטיפול. בפעמים המעטות שבו ברכת המעייל 7-האפים מניבה טסיות מספיקות למוצר מנה כפולה לאחר יירוט, אנו בוחרים שלא לבצע את הטיפול ליירט. לחלופין, מרכזי דם אחרים יכולים לבחור לטיפול במחשב עם סט אחד מינון ליירט עיבוד (כלומר סט הנפח הגדול) ולאחסן את המחשב כמינון טיפולי אחד גדול, ובזה עשה איון הפתוגן בכל היחידות. על מנת להבטיח שאנו פוגשיםדרישות QC ולפתוגן לנטרל כמה שיותר היחידות שלנו טסיות ככל האפשר, אנו בוחרים מעיילי אפים המבוססים על ספירת טסיות הדם התורם, שכאשר ראו נקווה, תוביל תוכן הטסיות מינימאלי של 11 5.6x10 טסיות בברכה. הדבר מבטיח תוכן הטסיות מספיק כדי לייצר שני מינונים טיפוליים לאחר טיפול ליירט. האימות שלנו מוכיחה כי 7 יחידות שלמות דם שמקורם באפי מעייל ניתן נקוותה בהצלחה וטופלו בתהליך היירוט לטסיות דם, וכתוצאה מכך 2 מוצרי טסיות מומתים פתוגן שעומדות בקריטריונים לקבלה לייצור (דרישות שבדיות והנחיות אירופיות) ולתמיכה בחולים דורש עירויי טסיות בהתאם להנחיות קליניות ושיטות עירוי טסיות סטנדרטיות בשבדיה.

<table><tbody><tr><td colspan="4">Whole blood donation, primary separation, and platelet production</td></tr><tr><td>Blood collection pack</td><td>Fenwal</td><td>R6485</td><td>Top/Bottom set</td></tr><tr><td>Automated component extractor</td><td>Fenwal</td><td>Optipress-II</td><td></td></tr><tr><td>Blood mixer and balance system</td><td>Baxter</td><td>Easymix V3</td><td></td></tr><tr><td>Platelet leukocyte filtration set</td><td>Fenwal</td><td>K4R7042</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge</td><td>Hettich</td><td>Roto Silenta 63 RS</td><td>Version 5.5</td></tr><tr><td>Platelet additive solution - SSP+</td><td>MacoPharma</td><td>SSP2030U</td><td>300 ml</td></tr><tr><td>Sterile tubing welder</td><td>Terumo</td><td>T-SCD</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">INTERCEPT treatment &amp;amp; storage</td></tr><tr><td>INTERCEPT processing set</td><td><a href="http://www.interceptbloodsystem.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png" /> Cerus</a></td><td>INT2503</td><td>Dual Storage (DS) set</td></tr><tr><td>INTERCEPT Illuminator</td><td><a href="http://www.interceptbloodsystem.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png" /> Cerus</a></td><td>INT100</td><td></td></tr><tr><td>PC sample pack</td><td>Fenwal</td><td>FTX 1122</td><td></td></tr><tr><td>Incubator</td><td>Helmer</td><td>PC2200/PC3200</td><td></td></tr><tr><td>Agitator</td><td>Helmer</td><td>PF48H/PF96H</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Evaluation of &lt;em&gt;in vitro&lt;/em&gt; Platelet Function</td></tr><tr><td>Blood gas analyzer</td><td>Radiometer</td><td>ABL 735</td><td>Used for pH, blood gases, and lactate measurement</td></tr><tr><td>Chemistry system</td><td>Ortho Clinical Diagnostic</td><td>Vitros 5.1</td><td>Used for glucose measurement</td></tr><tr><td>Hematology analyzer</td><td>Boule Medical AB</td><td>Medonic CA620-Cellguard</td><td>Used for platelet count measurement</td></tr><tr><td>Flow cytometer</td><td>BD</td><td>FACSCanto</td><td>Used for white blood cell measurement</td></tr></tbody></table>

preparation and pathogen inactivation of double dose buffy coat platelet products using the intercept blood system

מרכזי דם מתמודדים עם אתגרים רבים, כולל תשואה למקסם הפקה מתרומות הדם שהם מקבלים המוצר כמו גם להבטיח רמת הבטיחות הגבוהה עבור חולי עירוי, כולל הגנה מפני מחלות המועברות במגע עירוי. זה חייבת להתבצע באופן אחראי מבחינה כספי אשר ממזער את ההוצאות תפעוליות, כולל חומרים מתכלה, ציוד, פסולת, ועלויות כוח אדם, בין שאר. מספר שיטות זמינות כדי לייצר טסיות דם מתרכזת בעירוי. האחד הנפוץ ביותר הוא שיטת המעייל באפים שביחידת טסיות טיפולית יחידה (2.0 ≥ 11 טסיות X10 ליחידה או לתקנות מקומיות) הוא הוכן על ידי איגום שכבת המעייל באפים עד שש מתרומות דם שלמות. הליך להפקה &quot;מנה כפולות&quot; טסיות דם כל נגזרים רק לאחרונה פותח. מוצגת כאן היא שיטה חדשנית להכנהכל טסיות דם מנה כפולות נגזרות מתרכזות מברכות של 7 מעיילי באפי ולאחר מכן טיפול ביחידות המנה הכפולות עם מערכת הדם ליירט לאיון הפתוגן. ליירט פותח כדי לנטרל וירוסים, חיידקים, טפילים ותאים לבנים תורמים מזהמים שעלולה להיות נוכח בדם שנתרם. שיוך ליירט בשיטת הפרווה הכפולה מנת האפים על ידי ניצול העיבוד ליירט גדר עם מכל אחסון כפול (&quot;סט DS&quot;), מאפשר למרכזי דם לטיפול בכל אחת מיחידות המנה הכפולות שלהם בסט עיבוד בודד פתוגן איון, ובכך למקסם את בטיחות מטופל תוך מזעור עלויות. שיטת הפרווה הכפולה מנת האפים דורשת מעיילי אפים פחות ומפחיתה את השימוש בחומרים מתכלה על ידי עד 50% (סטים כגון איגום, מערכות סינון, פתרון תוסף טסיות דם, וופלי חיבור סטריליים) בהשוואה להכנה וטיפול ביחידות בודדות במינון אפי מעייל טסיות . חיסכון בעלויות אחר כולל פחות פסולת, פחות הציוד maintenance, דרישות הספק נמוכות, הקטין זמן אנשים, ועלות גבייה נמוכה בהשוואה לטכניקת אפרזיס.

Watch this Scientific Journal Video about Preparation and Pathogen Inactivation of Double Dose Buffy Coat Platelet Products using the INTERCEPT Blood System at JoVE.com

Preparation and Pathogen Inactivation of Double Dose Buffy Coat Platelet Products using the INTERCEPT Blood System

מאמר זה מתאר את התהליך שבו בית החולים של אוניברסיטת Örebro לייצר טסיות כפולות מנת אפי מעייל מתרכז הוכנו מתרומות דם שלמות וטופלו במערכת הדם ליירט לאיון הפתוגן.<em&gt; במבחנה</em&gt; איכות של יחידות טסיות הסופיות מוערכת על פני 7 ימים של אחסון.

הכנה ואיון פעולה של הפתוגן מוצרי Double מנת באפי Coat טסיות דם באמצעות מערכת הדם ליירט

Blood centers are faced with many challenges including maximizing production yield from the blood product donations they receive as well as ensuring the ...

preparation-pathogen-inactivation-double-dose-buffy-coat-platelet

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Medicine

28.6K Views.  Örebro University Hospital. מאמר זה מתאר את התהליך שבו בית החולים של אוניברסיטת Örebro לייצר טסיות כפולות מנת אפי מעייל מתרכז הוכנו מתרומות דם שלמות וטופלו במערכת הדם ליירט לאיון הפתוגן. במבחנה איכות של יחידות טסיות הסופיות מוערכת על פני 7 ימים של אחסון.

Video: Preparation and Pathogen Inactivation of Double Dose Buffy Coat Platelet Products using the INTERCEPT Blood System

Microfluidic Flow Chambers Using Reconstituted Blood to Model Hemostasis and Platelet Transfusion In Vitro

Blood platelets prepared for transfusion gradually lose hemostatic function during storage. Platelet function can be investigated using a variety of (indirect) in vitro experiments, but none of these is as comprehensive as microfluidic flow chambers. In this protocol, the reconstitution of thrombocytopenic fresh blood with stored blood bank platelets is used to simulate platelet transfusion. Next, the reconstituted sample is perfused in microfluidic flow chambers which mimic hemostasis on exposed subendothelial matrix proteins. Effects of blood donation, transport, component separation, storage and pathogen inactivation can be measured in paired experimental designs. This allows reliable comparison of the impact every manipulation in blood component preparation has on hemostasis. Our results demonstrate the impact of temperature cycling, shear rates, platelet concentration and storage duration on platelet function. In conclusion, this protocol analyzes the function of blood bank platelets and this ultimately aids in optimization of the processing chain including phlebotomy, transport, component preparation, storage and transfusion.

Microfluidic Flow Chambers Using Reconstituted Blood to Model Hemostasis and Platelet Transfusion In Vitro

Platelet transfusion and hemostasis was modeled using blood reconstitution and microfluidic flow chambers to investigate the function of blood banking platelets. The data demonstrate the consequences of platelet storage lesion on hemostasis, in vitro.

Microfluidic זרימה צ&#39;יימברס שימוש מחדש דם למודל המוסטאסיס ואת טסיות עירוי<em&gt; במבחנה</em

Blood platelets prepared for transfusion gradually lose hemostatic function during storage. Platelet function can be investigated using a variety of ...

Bioengineering

Treatment of Platelet Products with Riboflavin and UV Light: Effectiveness Against High Titer Bacterial Contamination

Contamination of platelet units by bacteria has long been acknowledged as a significant transfusion risk due to their post-donation storage conditions. Products are routinely stored at 22 &#176;C on an agitating shaker, a condition that can promote bacterial growth. Although the total number of bacteria believed to be introduced into a platelet product is extremely low, these bacteria can multiply to a very high titer prior to transfusion, potentially resulting in serious adverse events. The aim of this study was to evaluate a riboflavin based pathogen reduction process against a panel of bacteria that have been identified as common contaminants of platelet products. This panel included the following organisms: S. epidermidis, S. aureus, S. mitis, S. pyogenes, S. marcescens, Y. enterocolitica, B. neotomae, B. cereus, E. coli, P. aeruginosa and K. pneumoniae. Each platelet unit was inoculated with a high bacterial load and samples were removed both before and after treatment. A colony forming assay, using an end point dilution scheme, was used to determine the pre-treatment and post-treatment bacterial titers. Log reduction was calculated by subtracting the post-treatment titer from the pre-treatment titer. The following log reductions were observed: S. epidermidis 4.7 log (99.998%), S. aureus 4.8 log (99.998%), S. mitis 3.7 log (99.98%), S. pyogenes 2.6 log (99.7%), S. marcescens 4.0 log (99.99%), Y. enterocolitica 3.3 log (99.95%), B. neotomae 5.4 log (99.9996%), B. cereus 2.6 log (99.7%), E. coli &#8805;5.4 log (99.9996%), P. aeruginosa 4.7 log (99.998%) and K. pneumoniae 2.8 log (99.8%). The results from this study suggest the process could help to lower the risk of severe adverse transfusion events associated with bacterial contamination.

The storage conditions of platelet products create an ideal environment for bacterial contaminants to multiply to dangerous levels. The goal of this study was to use a colony forming assay to evaluate a riboflavin based pathogen reduction process against high titer bacterial contamination in human platelet products.

טיפול במוצרי טסיות דם עם ריבופלבין ואור UV: יעילות גבוהה נגד כייל קטריאלי זיהום

Contamination of platelet units by bacteria has long been acknowledged as a significant transfusion risk due to their post-donation storage conditions. ...

Immunology and Infection

Rapid Fractionation and Isolation of Whole Blood Components in Samples Obtained from a Community-based Setting

Collection and processing of whole blood samples in a non-clinical setting offers a unique opportunity to evaluate community-dwelling individuals both with and without preexisting conditions. Rapid processing of these samples is essential to avoid degradation of key cellular components. Included here are methods for simultaneous peripheral blood mononuclear cell (PBMC), DNA, RNA and serum isolation from a single blood draw performed in the homes of consenting participants across a metropolitan area, with processing initiated within 2 hr of collection. We have used these techniques to process over 1,600 blood specimens yielding consistent, high quality material, which has subsequently been used in successful DNA methylation, genotyping, gene expression and flow cytometry analyses. Some of the methods employed are standard; however, when combined in the described manner, they enable efficient processing of samples from participants of population- and/or community-based studies who would not normally be evaluated in a clinical setting. Therefore, this protocol has the potential to obtain samples (and subsequently data) that are more representative of the general population.

We outline a methodology for the processing of whole blood to obtain a variety of components for further analysis. We have optimized a streamlined protocol that enables rapid, high-throughput simultaneous processing of whole blood samples in a non-clinical setting.

פלזמה מהירה ובידוד של מרכיבי דם שלמים בדגימות שהתקבלה מהגדרה מבוססת-קהילה

Collection and processing of whole blood samples in a non-clinical setting offers a unique opportunity to evaluate community-dwelling individuals both ...

Investigating von Willebrand Factor Pathophysiology Using a Flow Chamber Model of von Willebrand Factor-platelet String Formation

Von Willebrand factor (VWF) is a multimeric glycoprotein coagulation factor that mediates platelet adhesion and aggregation at sites of endothelial damage and that carries factor VIII in the circulation. VWF is synthesized by endothelial cells and is either released constitutively into the plasma or is stored in specialized organelles, called Weibel-Palade bodies (WPBs), for on-demand release in response to hemostatic challenge. Procoagulant and proinflammatory stimuli can rapidly induce WPB exocytosis and VWF release. The majority of VWF released by endothelial cells circulates in the plasma; however, a proportion of VWF is anchored to the endothelial cell surface. Under conditions of physiological shear, endothelial-anchored VWF can bind to platelets, forming a VWF-platelet string that may represent the nidus of thrombus formation. A flow chamber system can be used to visually observe the release of VWF from endothelial cells and the subsequent platelet capture in a manner that is reproducible and relevant to the pathophysiology of VWF-mediated thrombus formation. Using this methodology, endothelial cells are cultured in a flow chamber and are subsequently stimulated with secretagogues to induce WPB exocytosis. Washed platelets are then perfused over the activated endothelium. The platelets are activated and subsequently bind to elongated VWF strings in the direction of fluid flow. Using extracellular histones as a procoagulant and proinflammatory stimulus, we observed increased VWF-platelet string formation on histone-treated endothelial cells compared to untreated endothelial cells. This protocol describes a quantitative, visual, and real-time assessment of the activation of VWF-platelet interactions in models of thrombosis and hemostasis.

In this paper, we describe a method to assess endothelial von Willebrand factor release and the subsequent platelet capture under fluid shear stress in response to inflammatory stimuli using an in vitro flow chamber system.

חוקרים פון Willebrand גורם פתופסיולוגיה באמצעות מודל קאמרית זרימה של פון Willebrand פקטור-טסיות מחרוזת היווצרות

Von Willebrand factor (VWF) is a multimeric glycoprotein coagulation factor that mediates platelet adhesion and aggregation at sites of endothelial damage ...

Routine Screening Method for Microparticles in Platelet Transfusions

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood banks. Cells fragment off microparticles (MP) when they are stressed. Blood and blood components may contain cellular fragments from a variety of cells, most notably from activated platelets. When performing their roles as innate immune cells and major players in coagulation and hemostasis, platelets change shape and generate microparticles. With dynamic light scattering (DLS)-based microparticle detection, it is possible to differentiate activated (high microparticle) from non-activated (low microparticle) platelets in transfusions, and optimize the use of this scarce blood product. Previous research suggests that providing non-activated platelets for prophylactic use in hematology-oncology patients could reduce their risk of becoming refractory and improve patient care. The goal of this screening method is to routinely differentiate activated from non-activated platelets. The method described here outlines the steps to be performed for routine platelet inventory management in a hospital blood bank: obtaining a sample from a platelet transfusion, loading the sample into the capillary for DLS measurement, performing the DLS test to identify microparticles, and using the reported microparticle content to identify activated platelets.

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative in hospital blood banks. The goal is to differentiate activated from non-activated platelets to optimize the use of platelets. Providing non-activated platelets to hematology-oncology patients might reduce their high risk to become refractory.

השגרה הקרנת שיטה עבור Microparticles ב עירויי טסיות

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood ...

<meta charset="utf8"></head><body>פלטפורמה להערכת תפקוד טסיות בטראומה ובעירוי

Microfluidics in Assessing Platelet Function

Microfluidics incorporate physiologically relevant substrates and flows that mimic the vasculature and are, therefore, a valuable tool for studying aspects of thrombosis and hemostasis. At high-shear environments simulating arterial flow, a microfluidic assay facilitates the study of platelet function, as platelet-rich thrombi form in a localized stenotic region of a flow channel. Utilizing devices that allow for small sample volume can additionally aid in evaluating platelet function under flow from volume-limited patient samples or animal models. Studying trauma patient samples or samples following platelet product transfusion may aid in directing therapeutic strategies for patient populations in which platelet function is critical. Effects of platelet inhibition via pharmacological agents can also be studied in this model. The objective of this protocol is to establish a microfluidic platform that incorporates physiologic flow, biological surfaces, and relevant hemostatic mechanisms to assess platelet function with implications for the study of trauma induced coagulopathy and transfusion medicine.

<meta charset="utf8"></head><body>מיקרופלואידיקה בהערכת תפקוד טסיות הדם

Platelet function under flow can be assessed and simulated hemostatic resuscitation can be modeled using a microfluidic device, which has applications in trauma and transfusion medicine.

מיקרופלואידיקה בהערכת תפקוד טסיות הדם

Microfluidics incorporate physiologically relevant substrates and flows that mimic the vasculature and are, therefore, a valuable tool for studying ...

בידוד PBMC בתפוקה גבוהה באמצעות חרוזים אימונומגנטיים

Isolating Human Peripheral Blood Mononuclear Cells from Buffy Coats via High Throughput Immunomagnetic Bead Separation

Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) are a heterogeneous population of monocytes and lymphocytes. Cryopreserved PBMCs have stable viability in long-term storage, making them an ideal cell type for many downstream research purposes, including flow cytometry, immunoassays, and genome sequencing. Typically, PBMCs are isolated via&#160;density gradient centrifugation, however, it is a low-throughput workflow that is difficult and costly to scale. This article presents a high-throughput workflow using a magnetic bead-based PBMC isolation method that is quick to implement. Total cell concentration, viability, and population distribution with PBMCs obtained using density gradient isolation were compared, and cell viability and proportion of cell types were comparable for both techniques. Isolated PBMCs demonstrated over 70% viability up to 9 days after blood collection, although yield decreased by half after 5 days compared to PBMCs processed within 24 h of collection. In summary, this article describes a PBMC protocol that utilizes a bead-based approach to adapt to a high throughput workflow and demonstrates that both manual and automated bead-based methods can increase processing capacity and provide flexibility for various budgets.

מחבר זרקור: התקדמות בבידוד PBMC - שיפור התפוקה והעקביות במחקר

This protocol details a high-throughput automation-compatible method to isolate human peripheral blood mononuclear cells for biobanking and other purposes.

בידוד תאי דם חד-גרעיניים היקפיים אנושיים ממעילי באפי באמצעות הפרדת חרוזים אימונומגנטית בתפוקה גבוהה

Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) are a heterogeneous population of monocytes and lymphocytes. Cryopreserved PBMCs have stable viability in ...

הכנה ואיון פעולה של הפתוגן מוצרי Double מנת באפי Coat טסיות דם באמצעות מערכת הדם ליירט

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

Microfluidic זרימה צ'יימברס שימוש מחדש דם למודל המוסטאסיס ואת טסיות עירוי

טיפול במוצרי טסיות דם עם ריבופלבין ואור UV: יעילות גבוהה נגד כייל קטריאלי זיהום

פלזמה מהירה ובידוד של מרכיבי דם שלמים בדגימות שהתקבלה מהגדרה מבוססת-קהילה

חוקרים פון Willebrand גורם פתופסיולוגיה באמצעות מודל קאמרית זרימה של פון Willebrand פקטור-טסיות מחרוזת היווצרות

השגרה הקרנת שיטה עבור Microparticles ב עירויי טסיות

מיקרופלואידיקה בהערכת תפקוד טסיות הדם

מיקרופלואידיקה בהערכת תפקוד טסיות הדם

מיקרופלואידיקה בהערכת תפקוד טסיות הדם

בידוד תאי דם חד-גרעיניים היקפיים אנושיים ממעילי באפי באמצעות הפרדת חרוזים אימונומגנטית בתפוקה גבוהה

בידוד תאי דם חד-גרעיניים היקפיים אנושיים ממעילי באפי באמצעות הפרדת חרוזים אימונומגנטית בתפוקה גבוהה