עבודה זו נתמכה על ידי מענק מטעם NHLBI כדי RW.

1. מגדל כוח התקנה מבצע <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מגדל כוח ממוקם על פיסת דיקט, כי הוא הידק לטבלה. 4.5 סל&quot;ד המנוע בהילוך מ Grainger מונח על גבי ארבעה 2 &quot;X6&quot; לוחות 1 ¾ אינץ&#39; לוח דיקט. המנוע, בקרת AC / DC מהירות, הפתיל, מתג הפעלה / כיבוי מחווטים יחד לתוך תיבת צומת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לקרר את המנוע, חור בקוטר 3 אינץ&#39; הוא חתך לתוך חתיכת אנכי ½ ס&quot;מ של דיקט. מצד אחד, מאוורר 3 אינץ&#39; מצורף דיקט, ומצד שני, 3 אינץ&#39; מתכת גליל בקוטר מצורף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרוע מחוייט מסתובבת עם רולר רכוב על סוף מחובר למנוע. המנוע והזרוע המצורפת לסובב בכיוון השעון, דוחף כלפי מטה צד אחד של המניות כפופה ¾ אינץ&#39; מרובע צינור המחובר דיקט עם ציר הדלת. גלגל מחובר בצד העליון של המניה צינור מתחת הפלטפורמה כדי לאפשר לו להתגלגל על ​​הבמה, כי הוא דירectly מעליו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרוע דוחף את בקצה אחד של מניות צינור ומרים סוף ההפוך, העלאת פלטפורמה שתי רמות (1D איור). כאשר הרים את היד מנקה את המניות צינור זה מאפשר הזרוע לחזור למצב ההתחלתי, שומטת את הפלטפורמה למטה (איור 1F). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פלטפורמות אלה כוללים מתלים אשר ממוקמות על גבי דיקט ומאובטחת על ידי חבלי בנג&#39;י, כי הם מחוברים אל העיניים בורג. הרציפים להחליק למעלה ולמטה לאורך המחוונים מגירה המצורפים דיקט עם סוגריים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צלוחיות ממוקמות אל המדפים ומאובטחת על ידי מסך רשת רבוע המתקיים במקום עם חבלי בנג&#39;י. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כרית קלקר ממוקם מתחת פלטפורמת לשכך את ההלם של ירידה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכוח של המנוע מותאם כך זמן הסיבוב המלא הוא 15 שניות ארוכות. </li></ol> 2. תרגיל פרוטוקול <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זבובים הם שוכנו 25 מעלות צלזיוס עם לחות בחממה 50% ו 12 שעות אור / דהRK מחזור. גם פעילות גופנית אימון והערכה של היכולת הגופנית נערכים בחדר 25 ° C בטמפרטורה מבוקרת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זבובים נאספים גיל בהתאמה, בתוך 1-2 ימים זה מזה. מינימום של 240 זבובים נדרש ניטור האורך של geotaxis סיבולת ושליליות (טיפוס) היכולת, שני אינדיקטורים פיזיולוגיים המשקפים את ההשפעות של אימון התעמלות. ניטור האורך מאפשר בידוד השינוי המושרה ביחס ערכי המוצא עבור כל קבוצה, ללא תופעות של בלבול בין קבוצות שונות. זבובים על ניסויים נוספים יש לאסוף לפי הצורך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר איסוף, זבובים מחולקים 120 זבובים הניסוי, אשר יהיה נתון למשטר פעילות גופנית, 120 זבובים הביקורת, אשר לא ניתנות למימוש. הזבובים מאוחסנים בקבוקונים של 20 טס כל אחד. את צלוחיות של זבובים הניסוי מחוברים עם תאית המשרד Flugs אצטט ואת צלוחיות השליטה (אינם יודעים תנועה) זבובים מחוברים עם spo רכהnge פקקים, אשר יכול להידחף למטה כדי לשתק את הזבובים בעת מגדל כוח. הספוג משמש immobilization בגלל הגודל שלה אדפטיבית מאפשר מיקום קל בחלק התחתון של בקבוקון. החומר ספוג רך גם מפחית פציעות שנגרמו על ידי Flugs מוצקים יותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זבובים על מגדל כוח מאוחסנים שבוצעו בקבוקונים המכילים 5 מ&quot;ל של מזון, אשר מספק להם נחיתה רכה יותר זבובים, כי הם שבוצעו ב בקבוקונים ריקים. המזון מורכב בדרך כלל סוכרוז של 10%, שמרים 10%, ו 2% אגר במים, למרות שאנחנו לא שומרים זבובים לאכול לעיתים קרובות במהלך אימון. אם בקבוקונים ריקים משמשים במהלך האימון, אחוז של זבובים הסובלים מפציעות הוא גדל באופן דרמטי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מגדל כוח מופעל בחדר בטמפרטורה מבוקרת שמתוחזק על 25 ° C. זבובים ניסיוני ממוקמות על מגדל כוח ועשה לטפס. זבובים בקרה ממוקמות גם על מגדל כוח, אבל הפקק ספוג הוא pusheD לתוך בקבוקון כ 3 מ&quot;מ מעל זבובים על מנת להגביל את התנועה. קבוצה זו מהווה שליטה על תופעות של מגדל כוח שאינן קשורות לממש. אמנם עדיין קיים באיזה חדר לזבובים אלה לתמרן, ראינו שוב ושוב כי זבובים בתנאים אלה להפעיל מעט מאוד ולא להפגין התגובה הפיזיולוגית לממש. זה יכול להיות גם רצוי לכלול קבוצת ביקורת נוספת לא מושם על מגדל כוח בכלל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זבובים ימומשו חמישה ימים רצופים בכל שבוע, תוך ניצול לוח הזמנים ramped (איור 2). במהלך שבוע אחד הזבובים ימומשו במשך 2 שעות בכל הפעלה, שבועיים של 2.5 שעות בכל הפעלה, ובשבוע 3 במשך 3 שעות בכל הפעלה. למרות משטרי אחרות נבדקו, פרוטוקול זה מייצר תוצאות עקביות ברחבי גנוטיפים ובתנאים שונות. פרוטוקול זה הוא, לעומת זאת, בכפוף מגוון רחב של וריאציות אפשריות שעשויות להתאים הניסוי בפרט. </li></ol><pclass = &quot;jove_title&quot;&gt; 3. תרגיל ועייפות של תנועה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגיע הזמן עייפות במהלך פעילות אירובית היא אינדיקטור פיזיולוגי שימושי כדי לאשר ו / או לכמת את היכולת הגופנית של קבוצה נתונה. מבחני עייפות ניתן לבצע longitudinally על קבוצות אשר ישמשו בניסויים אימונים. מבחני יכול להתבצע גם לפני אימון, אחרי סיום פרוטוקול אימון, או שניהם. אחרים נקודות זמן ביניים ניתן להוסיף אם תרשימים התקדמות הדרגתית במהלך האימון הרצוי. Assay עייפות יכולה לשמש גם כדי למדוד את סיבולת גופנית כתגובה לטיפולים אחרים מאשר פרוטוקול אימון, כמו שינוי בתזונה (איור 3 ב). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מבחני עייפות צריכה להתנהל ביום שבו האימון לא מתקיים. זבובים הן ניסיוניות ובקרה מונחות על מגדל הכוח בקבוקונים של 20 גרם כל אחד לטפס עד עייף. עייפות מוכרת כישלון להגיב לגירוי geotaxis שלילית עם הטיפוס להיותהודעה פרטית אל AkaMoL. התנהגות עייפות הוא הבקיע ידי תצפית ויזואלית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בקבוקון של זבובים נחשב &quot;עייף&quot;, כאשר 5 או פחות זבובים מצליחים לטפס גבוה יותר מ -2 אינץ&#39; ארבע טיפות רצופים. צלוחיות עייף יוסרו מגדל כוח בזמן שהוא עדיין פועל, ואת השעה של הסרת נרשם. הזמנים של הסרת ניתן להתוות כמו היסטוגרמה מקוננת, או מזימה &quot;זמן היציאה כישלון&quot;. דוגמה הנתונים להתוות כמו &quot;זמן היציאה כישלון&quot; העלילה מוצגת באיור 3 ב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צלוחיות מנוטרים ב 10 דקות intervals לתקופה מקסימלית של 10 שעות (איור 3 ב). </li></ol> 4. פעילות גופנית, גיל, יכולת של תנועה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מאז זה פרוטוקול אימון מסתמך על התנהגות מפעיל המושרה, assay העיקרי quantitating ההשפעות של אימון היא longitudinally למדוד שינוי הממוצע לרוץ במהירות במהלך אימון. במהלך האימון, 120-fly קבוצות של זבובים אינם יודעים תנועה שבוצעו ו נבדקים מדי יום על תגובתם geotaxis שלילית שלtimulus. הטכניקה טבעת המתואר Gargano et al. (2005) משמש כדי למדוד יכולת טיפוס של 12 זבובים. בקצרה, טכניקה זו מודדת גובה הממוצע עלה ב בקבוקון של זבובים בתקופה מוגדרת לאחר גיוס של geotaxis שליליות. גובה טיפס במהלך הזמן המוגדר שווה לטפס במהירות. המדידות מבוצעות לפני הצבת זבובים במחשב לאימונים מדי יום, כדי למנוע סיבוכים מעייפות אחרי ריצה של יום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בפרוטוקול הסטנדרטי שלנו, זבובים ימומשו עבור סכום כולל של שלושה שבועות ויכולת טיפוס נבחן עבור סכום כולל של חמישה שבועות: שלושה שבועות במהלך אימון כושר, שבועיים לאחר הפסקת פעילות גופנית (איור 2). זה מאפשר הניסוי להתוות אם ההשפעות של פעילות גופנית על ניידות נמשכות לאחר הפסקת התוכנית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ארבע תמונות של ביצועים טבעת היומי של כל קבוצה משמשים לניתוח טיפוס היכולת. שש צלוחיות כלולים כל צילום. גרם שליליeotaxis מושרה, ושימוש במצלמה מתוזמן, צילום נלקח לאחר מספר מוגדר של שניות. אנו משתמשים בדרך כלל שתי שניות, אם כי זה יכול להיות מגוונים בהתאם לתנאי הניסוי. עבור כל תמונה, כל בקבוקון מחולק לארבעה רבעים של גובה שווים, תוכנת עיבוד התמונה משמש להקצות לכל זבוב ציון על סמך ברבע הגיע בתוך פרק הזמן המוקצב. זבובים לטפס ברבע העליון שקיבל ציון של 4, עף ברבע הגבוה ביותר הבא לקבל 3, עפה ברבע השני הגבוה ביותר לקבל 2, וזבובים ברבע הנמוך ביותר לקבל 1. זבובים לא לטפס מעל לתחתית כלל מקבלים ציון של 0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור כל בקבוקון בצילום נתון, &quot;המדד לטפס&quot; נוצר על ידי חישוב ממוצע הציונים של כל הזבובים בבקבוקון זה. המדדים של כל הצנצנת מתוך ארבעת התצלומים הם ממוצעים ואז לתת מדד טיפוס הסופית לאותו היום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כל הניסויים נערכים geotaxis שליליות longitudinally. התוצאות מנורמל כדי ציון הראשוני &quot;לפני פעילות גופנית&quot; על מנת לצמצם את ההשפעה של השינוי קבוצה בטיפוס היכולת לסמן את שינוי האורך היחסי ביכולת טיפוס של המחזור כתוצאה של אימון התעמלות. ציון הראשוני נקבע על ידי הממוצע של מדדי המטפסים הראשונים שלושה ימים מקבל ערך של 1. בניסויים הבאים באים לידי ביטוי אז כאחוז המדד הראשוני. </li></ol> 5. נציג תוצאות Wild-type זבובים להגיב פרוטוקול סיבולת עם ירידה הקשורה לגיל פחתה בטיפוס היכולת כי נמשכת לאחר סיום האימון, כפי שהיא משתקפת מבחני טבעת האורך על פני חמישה שבועות בגיל (איור 3 א). ירידה זו מאוחרת ב geotaxis שליליות היא תגובה פנוטיפי הרגיל יכול לשמש בקרה חיובית על מנת להבטיח כי wild-type בתגובה התרגיל מתרחש בדרך כלל. סט נתונים זה מוצג כדוגמה כיצדאינדוקציה של פעילות גופנית על ידי תוכנית מגדל כוח יכול לשמש כקלט התנהגותי. היכולת של גורמים גנטיים או סביבתיים שונים על מנת לווסת את האפקט הזה אז יכול להיות מוערך. לעומת זאת, מגדל חשמל יכול לשמש גם פלט בעיצובים ניסיוניים שונים. כך, למשל, גנוטיפ דיאטה, או תנאים אחרים יכולים להיות מגוונים. אם כן, ההשפעה של אלה וריאציות על פעילות גופנית ופיזיולוגיה ניתן לבדוק באמצעות מגדל כוח. כאן, אנו מציגים דוגמה של גישה זו. כאשר טס עם אחוז שונה של סוכרוז בדיאטה שלהם נבדקו בפעם לתוכן, עייפות מוגברת סוכרוז בקורלציה עם כושר סיבולת גבוה (איור 3 ב). <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/3786/3786fig1.jpg" /> באיור 1. מבצע של מגדל כוח. (AC) הזרוע כפוף ממונע עם רולר המצורפת מסתובב עם כיוון השעון עד שהוא בא במגע עם צינור מכופף מרובע. (D, E)הזרוע דוחף על צינור מרובע כפוף, גורם פלטפורמה עמוס צלוחיות של זבובים להרים. (F) כזרוע מנקה את הצינור פלטפורמת מותר לרדת למטה, מה שאילץ הזבובים לחזור לתחתית בקבוקון. <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/3786/3786fig2.jpg" /> איור 2. הציע פרוטוקול פעילות גופנית. עף נתון פרוטוקול אימון עשויים לממש במשך חמישה ימים בכל שבוע תחת משטר של שלושה שבועות ramped ארוך מגדיל בהדרגה את משך הזמן של פעילות גופנית מ 2 שעות הראשונות של 30 דקות מדי שבוע. ניתוחים רגילים כוללים מבחני עייפות לפני ואחרי תוכנית האימון מבחני הטבעת שבוע 1 עד שבוע 5. מבחני כל מבוצעות בשני עותקים על מספר שווה של זבובים אינם יודעים תנועה כביקורת שלילית. אחרים בדיקות פיזיולוגיות או ביוכימי שונים ניתן לבצע כפי שנקבע על ידי החוקר. <img aLT = &quot;איור 3&quot; src = &quot;/ files/ftp_upload/3786/3786fig3.jpg&quot; /&gt; איור 3. פעילות אירובית משנה היבטים רבים של ניידות. (א) ביצעו מבחני טבעת longitudinally פני הדורות בזוג אחד של גברים-Y 1 וואט 67C23 הקבוצות. גיל בהתאמה, זהים מבחינה גנטית למימוש וזבובים שליטה אינם יודעים תנועה נמדדו מדי יום עבור מהירות טיפוס ממוצעת. התוצאות באות לידי ביטוי במונחים של המדד לטפס, כי הוא תקין לגובה הטיפוס הממוצע על פני שלושת הימים הראשונים של המדידה. תרגיל מאומנים זבובים להציג ירידה מצומצמת הקשורות לגיל ביכולת geotaxis שלילית בהשוואה לגיל בהתאמה אחים אינם יודעים תנועה ברחבי הגילאים (2-way ANOVA, p &lt;0.005). (ב) מבחני עייפות שנערך במשך 8 שעות גיל בהתאמה זבובים נקבה S השוויצרים מראים השפעה משמעותית של תוכן סוכרוז תזונתיים בזמן עייפות (Log-דרגה, p &lt;0.0001). לפני הניסוי, זבובים הואכלו בדיאטה שמרים / סוכרוז / אגר, עם משקל של 10% / נפח yeaריכוז רחוב, ואחוז משתנה של סוכרוז תזונתיים. חמישה בקבוקונים של 20 זבובים כל אחד נבדקו עבור כל דיאטה. הגרף מציג כמה צלוחיות רבות עדיין יש חמישה או יותר זבובים פועל בנקודת זמן נתונה. תוצאות אלו ניתן לטפל סטטיסטית וגם מבחינה גרפית כמו הישרדות (או זמן אי) עקום, עם &quot;אי&quot; של הבקבוקון להיות מוגדר כנקודה בזמן שבה פחות מחמש זבובים להמשיך להגיב לגירוי geotaxis שלילית. שים לב, הרבה עיצובים אחרים המחקר האפשריים וטיפולים סטטיסטיים אפשריים, ונתונים טיפול ומדידה צריך להיות מותאם כך שיתאים לצרכים האישיים.

<ol>
	<li>Wild, S., Roglic, G., Green, A., Sicree, R., King, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+Prevalence+of+Diabetes:+Estimates+for+the+year+2000+and+projections+for+2030.">Global Prevalence of Diabetes: Estimates for the year 2000 and projections for 2030.</a> Diabetes Care. 25, 1047-1053 (2004).</li><li>Flegal, K. M., Carroll, M. D., Ogden, L. C., Johnson, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+and+Trends+in+Obesity+Among+US+Adults.">Prevalence and Trends in Obesity Among US Adults.</a> JAMA. 288, 1723-1727 (1999).</li><li>Hubert, H. B., Feinleib, M., McNamar, P. M., Castelli, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obesity+as+an+Independent+Risk+Factor+for+Cardiovascular+Disease:+A+26-year+Follow-up+of+Participants+in+the+Framingham+Heart+Study.">Obesity as an Independent Risk Factor for Cardiovascular Disease: A 26-year Follow-up of Participants in the Framingham Heart Study.</a> Circulation. 67, 698-977 (1983).</li><li>Ross, R., Dagnone, D., Jones, P. J. H., Smith, H., Paddags, A., Hudson, R., Janssen, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduction+in+obesity+and+related+comorbid+conditions+after+diet-induced+weight+loss+or+exercise-induced+weight+loss+in+med+â&#x20AC;&#x201C;+A+randomized,+controlled+trial.">Reduction in obesity and related comorbid conditions after diet-induced weight loss or exercise-induced weight loss in med â&#x20AC;&#x201C; A randomized, controlled trial.</a> Annals of Internal Medicine. 133, 92-103 (2000).</li><li>Goodyea, L. J., Kahn, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exercise+Glucose+Transport,+and+Insulin+Sensitivity.">Exercise Glucose Transport, and Insulin Sensitivity.</a> Annual Review of Medicine. 49, 235-261 (1998).</li><li>Linke, A., Adams, V., Schulze, P. D., Erbs, S., Gielen, S., Fiehn, E., Mobius-Winkler, S., Schubert, A., Schuler, G., Hambrecht, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antioxidative+Effects+of+Exercise+Training+in+Patients+With+Chronic+Heart+Failure.">Antioxidative Effects of Exercise Training in Patients With Chronic Heart Failure.</a> Circulation. 111, 1763-1763 (2005).</li><li>Kemi, O. J., Ellingsen, O., Smith, G. L., Wisloff, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exercise-induced+changes+in+calcium+handling+in+left+ventricular+cardiomyocytes.">Exercise-induced changes in calcium handling in left ventricular cardiomyocytes.</a> Frontiers in Bioscience. 13, 356-368 (2008).</li><li>Wang, H., Hiatt, W. R., Barstow, T. J., Brass, E. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationships+between+muscle+mitochondrial+enzyme+activity+and+oxidative+capacity+in+man:+alterations+with+disease.">Relationships between muscle mitochondrial enzyme activity and oxidative capacity in man: alterations with disease.</a> Eur. J. Appl. Physiol. 80, 22-27 (1999).</li><li>Wu, Z., Puigserver, P., Andersson, U., Zhang, C., Adelmant, G., Mootha, V., Troy, A., Cinti, S., Lowell, B., Scarpulla, R. C., Spiegelman, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+Controlling+Mitochondrial+Biogenesis+and+Respiration+through+the+Thermogenic+Coactivator+PGC-1.">Mechanisms Controlling Mitochondrial Biogenesis and Respiration through the Thermogenic Coactivator PGC-1.</a> Cell. 98, 115-124 (1999).</li><li>Goto, M., Terada, S., Kato, M., Katoh, M., Yokozeki, T., Tabata, I., Shimokawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=cDNA+Cloning+and+mRNA+Analysis+of+PGC-1+in+Epirtrochlearis+Muscle+in+Swimming-Exercised+Rats.">cDNA Cloning and mRNA Analysis of PGC-1 in Epirtrochlearis Muscle in Swimming-Exercised Rats.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. , 274-350 (2000).</li><li>Piazza, N., Gosangi, B., Devilla, S., Arking, R., Wessells, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exercise-Training+in+Young+Drosophila+melanogaster+Reduces+Age-Related+Decline+in+Mobility+and+Cardiac+Performance.">Exercise-Training in Young Drosophila melanogaster Reduces Age-Related Decline in Mobility and Cardiac Performance.</a> PLoS ONE. 4, e5886-e5886 (2009).</li><li>Gargano, J. W., Martin, I., Bhandari, P., Grotewiel, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+iterative+negative+geotaxis+(RING):+a+new+method+for+assessing+age-related+locomotor+decline+in+Drosophila.">Rapid iterative negative geotaxis (RING): a new method for assessing age-related locomotor decline in Drosophila.</a> Exp Gerontol. 40, 386-395 (2005).</li></ol>

אין לי מה לחשוף.

פרוטוקול הכללי שהוצג הצליחה לתעד השפעות פיזיולוגיות לאחר אימון. עם זאת, בכמה תחומים בפרוטוקול זה, כפופים לשינוי כדי שיתאים לצרכים ניסיוניים מסוימים. לדוגמה, אורך האימון ומספר התקפי עלול להיות מגוונים כדי להפוך את התוכנית פחות או יותר מאתגר, לפי הצורך. גובה של מיכל שבו היכולת geotaxis שלילית נמדדת אפשר לשנות כדי להגדיל את השטח המיועד לשיפור להיות מתועד. שיטות שונות של אוטומציה quantitation של טיפוס מהיר יכול להיות גם ישים. בעיקרון, כל תוכנית תוכנה המסוגלת להבחין זבוב מרקע ניתן להשתמש כדי להאיץ את תהליך איסוף הנתונים. היבטים מסוימים של הפרוטוקול צריך להיות שונה רק בזהירות רבה, עם זאת. כך, למשל, ניסויים ראשוניים מצביעים על כך בתוקף לפחות יום אחד של מנוחה בשבוע נוטה להקל הופעות גדול יותרovement יותר פעילות גופנית מדי יום בלתי נלאה. בנוסף, קצב היממה וטמפרטורה ידועים משפיעים על תנועת בעלי חיים בעלי דם קר. זמן של יום האימונים יתקיים יכולים להיות מגוונים, אבל תמיד צריך להיות עקבי בתוך קבוצות מסוימות תחת השוואה, על מנת למנוע את האפשרות של תופעות בלבול של מקצבים היממה. בקרת טמפרטורה היא גם חיונית, ומומלץ חדר ייעודי בטמפרטורה קבועה לציוד תרגיל הבית. לבסוף, זכרים ונקבות יש גודלו נמדד בנפרד, כדי למנוע את הפוטנציאל של תופעות של בלבול ההבדלים פריון ומין של היכולת הגופנית. יישומים אפשריים של מתודולוגיה זו מוגבלת רק על ידי הדמיון של החוקר. בעבודה ראשונית, יש לנו שימוש במתודולוגיה זו בשלושה יישומים רחב: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי למדוד את ההשפעה של פעילות אירובית על היבטים שונים של הביולוגיה סוג פרועה ברחבי הגילאים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Tהו למדוד את ההשפעה של פעילות אירובית על פנוטיפים מוטנטים ספציפיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למסך עבור גורמים גנטיים הדרושים לבצע את היתרונות של פעילות גופנית </li></ol> כל היישומים הללו מקיף מגוון רחב של אפשרויות מסוימות. בהתבסס על הניסיון הראשוני שלנו, פנוטיפים מוטנטים נוטים להשתנות עם רמת פעילות גופנית כמה שהם משתנים עם דיאטה. השימוש בדגמים חסרי חוליות כדי להבין טוב יותר את הקשר בין פעילות גופנית דיאטה, ופיזיולוגיה ההזדקנות הוא אולי היישום הכללי החשוב ביותר של פרוטוקול זה.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם מגיב </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגי </td><td> תגובות </td></tr><tr><td> דייטון Gearmotor </td><td> Grainger </td><td> 1LRA6A </td><td></td></tr><tr><td> Raco חשמל Box </td><td> Grainger </td><td> 5A052 </td><td></td></tr><tr><td> Raco כיסוי </td><td> Grainger </td><td> 5A053 </td><td></td></tr><tr><td> קופר Bussmann Fuse </td><td> Grainger </td><td> 6F043 </td><td></td></tr><tr><td> קופר Bussmann מחזיק נתיך </td><td> Grainger </td><td> 1DD33 </td><td></td></tr><tr><td> הליגה טכנולוגיות החלף </td><td> Grainger </td><td> 2X464 </td><td></td></tr><tr><td> דייטון הבקרה, AC / DC מהירות </td><td> Grainger </td><td> 4X796 </td><td&gt; </td></tr><tr><td> Flugs עבור בקבוקוני פלסטיק פלסטיק צרים </td><td> Genesee מדעי </td><td> 49-102 </td><td></td></tr></tbody></table>

endurance training protocol and longitudinal performance assays for drosophila melanogaster

אחת הבעיות הדחופות ביותר העומדות בפני חוקרים רפואיים מודרניים הוא רמות הגואה של השמנת יתר, עם גידול עקב בהפרעות נלוות כגון סוכרת ומחלות לב וכלי דם 1-3. הנושא החשוב של מחקר אלה בעיות בריאות הקשורות כרוך התפקיד של פעילות אירובית כמו התערבות מועילה. אימון פעילות גופנית היא זולה, לא פולשנית התערבות עם תוצאות חיוביות, ביניהן ירידה בגוף עודף שומן 4, עלתה הרגישות לאינסולין בשריר השלד 5, עלתה תגובות אנטי דלקתיות antioxidative 6, ויכולת משופרת כויץ cardiomyocytes 7. פעילות גופנית בעצימות נמוכה ידוע להגביר את הפעילות biogenesis המיטוכונדריה ו 8 בבני אדם ועכברים, עם coactivator תעתיק PGC1-α כמו ביניים חשוב 9,10. Despiטה את החשיבות של פעילות גופנית ככלי למאבק כמה חשובים מחלות הקשורות לגיל, נרחבים מחקרים גנטיים האורך כבר הקשתה על ידי היעדר פרוטוקול אימון סיבולת כמה קצרי חיים מינים מודל גנטיות. מגוון של כלים גנטיים הזמינים לשימוש עם תסיסנית, תוך שמירה תוחלת החיים קצרה וזולה שלו, להפוך אותו מושך מודל למחקר נוסף של אלה מנגנונים גנטיים. לאור זאת פיתחנו מנגנון רומן, המכונה מגדל כוח, בקנה מידה גדול עבור פעילות גופנית, אימון תסיסנית melanogaster 11. מגדל כוח מנצל geotaxis התנהגות שלילית האינסטינקטיבית של זבובים שוב ושוב כדי לגרום טיפוס מהיר. בכל פעם מרים את המכשיר, ולאחר מכן יורד, הפלטפורמה של הזבובים, הזבובים הם המושרה לטפס. זבובים להמשיך להגיב, כל עוד המכשיר הוא במבצע או עד שהם הופכים עייף מכדי להגיב. לכן, החוקר יכול להשתמש במכונה כדי לספק שלאימון imultaneous למספר גדול של זבובים לגיל בהתאמה ו זהים מבחינה גנטית. בנוסף, אנו מתארים מבחני שימושיות הקשורים לעקוב אחר ההתקדמות האורך של הקבוצות לטוס במהלך אימון.

Watch this Scientific Journal Video about Endurance Training Protocol and Longitudinal Performance Assays for Drosophila melanogaster at JoVE.com

Endurance Training Protocol and Longitudinal Performance Assays for Drosophila melanogaster

אנו מתארים את פרוטוקול 1 אימון סיבולת של זן חשובים מודל גנטי,<em&gt; תסיסנית melanogaster</em&gt;, וכן להתוות מבחני כמה להתוות שיפור ההכשרה הבאה ניידות.

אימון סיבולת פרוטוקול מבחני ביצועים ארוכי טווח עבור תסיסנית melanogaster

One of the most pressing problems facing modern medical researchers is the surging levels of obesity, with the consequent increase in associated disorders ...

endurance-training-protocol-longitudinal-performance-assays-for

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Biology

Endurance Training Protocol and Longitudinal Performance Assays for Drosophila melanogaster

15.5K Views.  University of Michigan Medical School. אנו מתארים את פרוטוקול 1 אימון סיבולת של זן חשובים מודל גנטי, תסיסנית melanogaster, וכן להתוות מבחני כמה להתוות שיפור ההכשרה הבאה ניידות.

Video: Endurance Training Protocol and Longitudinal Performance Assays for Drosophila melanogaster

Measuring Exercise Levels in Drosophila melanogaster Using the Rotating Exercise Quantification System (REQS)

Drosophila melanogaster is a new model organism for studies in exercise biology. To date, two main exercise systems, the Power Tower and the Treadwheel have been described. However, a method to measure the amount of additional animal activity induced through the exercise treatment has been lacking. The Rotating Exercise Quantification System (REQS) fills this need, providing a measure of animal activity for animals experiencing rotational exercise. This protocol details how to use the REQS to assess animal activity during rotational exercise and illustrates the type of data that can be generated. Here, we demonstrate how the REQS is used to measure sex- and strain-specific differences in exercise induced activity. The REQS can also be used to evaluate the impact of various other experimental parameters such as age, diet, or population size on exercise induced activity. In addition, it can be used to compare the efficacy of different exercise training protocols. Importantly, it provides an opportunity to standardize exercise treatments between strains, allowing the researcher to achieve equal amounts of activity between groups if needed. Thus, the REQS is a notable new resource for exercise biologists working with the Drosophila model system and complements existing exercise systems.

Measuring Exercise Levels in Drosophila melanogaster Using the Rotating Exercise Quantification System REQS

The Rotating Exercise Quantification System (REQS) can induce exercise in Drosophila melanogaster through rotation while simultaneously measuring the amount of activity performed by the animals. Here, we present a point-by-point protocol detailing how to measure activity levels of animals experiencing rotational exercise treatments using the REQS.

מדידת רמות פעילות גופנית ב- דרוזופילה melanogaster באמצעות מערכת כימות בתרגיל סיבוב (REQS)

Drosophila melanogaster is a new model organism for studies in exercise biology. To date, two main exercise systems, the Power Tower and the Treadwheel ...

Genetics

The TreadWheel: Interval Training Protocol for Gently Induced Exercise in Drosophila melanogaster

The incidence of complex metabolic diseases has increased as a result of a widespread transition towards lifestyles of increased caloric intake and lowered activity levels. These multifactorial diseases arise from a combination of genetic, environmental, and behavioral factors. One such complex disease is Metabolic Syndrome (MetS), which is a cluster of metabolic disorders, including hypertension, hyperglycemia, and abdominal obesity. Exercise and dietary intervention are the primary treatments recommended by doctors to mitigate obesity and its subsequent metabolic diseases. Exercise intervention, in particular aerobic interval training, stimulates favorable changes in the common risk factors for Type 2 Diabetes Mellitus (T2DM), Cardiovascular Disease (CVD), and other conditions. With the influx of evidence describing the therapeutic effect exercise has on metabolic health, establishing a system that models exercise in a controlled setting provides a valuable tool for assessing the effects of exercise in an experimental context. Drosophila melanogaster is a great tool for investigating the physiological and molecular changes that result from exercise intervention. The flies have short lifespans and similar mechanisms of metabolizing nutrients when compared to humans. To induce exercise in Drosophila, we developed a machine called the TreadWheel, which utilizes the fly&#39;s innate, negative geotaxis tendency to gently induce climbing. This enables researchers to perform experiments on large cohorts of genetically diverse flies to better understand the genotype-by-environment interactions underlying the effects of exercise on metabolic health.

The TreadWheel: Interval Training Protocol for Gently Induced Exercise in Drosophila melanogaster

The TreadWheel uses rotational motion to gently induce exercise in adult Drosophila melanogaster by exploiting flies&#39; innate, negative geotaxis. It allows for analysis of the interactions between exercise and factors, such as genotype, sex, and diet, and their effect on physiological and molecular assays to assess metabolic health.

TreadWheel: מרווח אימון פרוטוקול בעדינות המושרה תרגיל דרוזופילה melanogaster

The incidence of complex metabolic diseases has increased as a result of a widespread transition towards lifestyles of increased caloric intake and ...

High-Resolution Video Tracking of Locomotion in Adult Drosophila Melanogaster

Flies provide an important model for studying complex behavior due to the plethora of genetic tools available to researchers in this field. Studying locomotor behavior in Drosophila melanogaster relies on the ability to be able to quantify changes in motion during or in response to a given task. For this reason, a high-resolution video tracking system, such as the one we describe in this paper, is a valuable tool for measuring locomotion in real-time. Our protocol involves the use of an initial air pulse to break the flies momentum, followed by a thirty second filming period in a square chamber. A tracking program is then used to calculate the instantaneous speed of each fly within the chamber in 10 msec increments. Analysis software then compiles this data, and outputs a variety of parameters such as average speed, max speed, time spent in motion, acceleration, etc. This protocol will discuss proper feeding and management of flies for behavioral tasks, handling flies without anesthetization or immobilization, setting up a controlled environment, and running the assay from start to finish.

The study of complex locomotor behavior in Drosophila melanogaster is dependent upon the ability to quantify changes in a given fly's movement. This article demonstrates how to do this using a high-resolution tracking system.

וידאו ברזולוציה גבוהה של מעקב אחר תנועה של מבוגרים תסיסנית melanogaster

Flies provide an important model for studying complex behavior due to the plethora of genetic tools available to researchers in this field.  Studying ...

An Affordable and Efficient "Homemade" Platform for Drosophila Behavioral Studies, and an Accompanying Protocol for Larval Mitochondrial Respirometry

The usefulness of Drosophila as a model organism for the study of human diseases, behaviors and basic biology is unquestionable. Although practical, Drosophila research lacks popularity in developing countries, possibly due to the misinformed idea that establishing a lab and performing relevant experiments with such tiny insects is difficult and requires expensive, specialized apparatuses. Here, we describe how to build an affordable flylab to quantitatively analyze a myriad of behavioral parameters in D. melanogaster, by 3D-printing many of the necessary pieces of equipment. We provide protocols to build in-house vial racks, courtship arenas, apparatuses for locomotor assays, etc., to be used for general fly maintenance and to perform behavioral experiments using adult flies and larvae. We also provide protocols on how to use more sophisticated systems, such as a high resolution oxygraph, to measure mitochondrial oxygen consumption in larval samples, and show its association with behavioral changes in the larvae upon the xenotopic expression of the mitochondrial alternative oxidase (AOX). AOX increases larval activity and mitochondrial leak respiration, and accelerates development at low temperatures, which is consistent with a thermogenic role for the enzyme. We hope these protocols will inspire researchers, especially from developing countries, to use Drosophila to easily combine behavior and mitochondrial metabolism data, which may lead to information on genes and/or environmental conditions that may also regulate human physiology and disease states.

An Affordable and Efficient "Homemade" Platform for Drosophila Behavioral Studies, and an Accompanying Protocol for Larval Mitochondrial Respirometry

We provide protocols for anyone with a "maker culture" mind to start building a flylab for quantitative analysis of a myriad of behavioral parameters in Drosophila melanogaster, by 3D-printing many of the necessary pieces of equipment. We also describe a high resolution respirometry protocol using larvae to combine behavioral and mitochondrial metabolism data.

The usefulness of Drosophila as a model organism for the study of human diseases, behaviors and basic biology is unquestionable. Although practical, ...

Behavior

Foraging Path-length Protocol for Drosophila melanogaster Larvae

The Drosophila melanogaster larval path-length phenotype is an established measure used to study the genetic and environmental contributions to behavioral variation. The larval path-length assay was developed to measure individual differences in foraging behavior that were later linked to the foraging gene. Larval path-length is an easily scored trait that facilitates the collection of large sample sizes, at minimal cost, for genetic screens. Here we provide a detailed description of the current protocol for the larval path-length assay first used by Sokolowski. The protocol details how to reproducibly handle test animals, perform the behavioral assay and analyze the data. An example of how the assay can be used to measure behavioral plasticity in response to environmental change, by manipulating feeding environment prior to performing the assay, is also provided. Finally, appropriate test design as well as environmental factors that can modify larval path-length such as food quality, developmental age and day effects are discussed.

Foraging Path-length Protocol for Drosophila melanogaster Larvae

We provide a detailed protocol for a Drosophila melanogaster foraging path-length assay. We discuss the preparation and handling of test animals, how to perform the assay and analyze the data.

פרוטוקול נתיב באורך שארגן לעצמו<em&gt; תסיסנית</em&gt; זחלים

The Drosophila melanogaster larval path-length phenotype is an established measure used to study the genetic and environmental contributions to behavioral ...

Neuroscience

Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster

Aging is a phenomenon that results in steady physiological deterioration in nearly all organisms in which it has been examined, leading to reduced physical performance and increased risk of disease. Individual aging is manifest at the population level as an increase in age-dependent mortality, which is often measured in the laboratory by observing lifespan in large cohorts of age-matched individuals. Experiments that seek to quantify the extent to which genetic or environmental manipulations impact lifespan in simple model organisms have been remarkably successful for understanding the aspects of aging that are conserved across taxa and for inspiring new strategies for extending lifespan and preventing age-associated disease in mammals.
The vinegar fly, Drosophila melanogaster, is an attractive model organism for studying the mechanisms of aging due to its relatively short lifespan, convenient husbandry, and facile genetics. However, demographic measures of aging, including age-specific survival and mortality, are extraordinarily susceptible to even minor variations in experimental design and environment, and the maintenance of strict laboratory practices for the duration of aging experiments is required. These considerations, together with the need to practice careful control of genetic background, are essential for generating robust measurements. Indeed, there are many notable controversies surrounding inference from longevity experiments in yeast, worms, flies and mice that have been traced to environmental or genetic artifacts1-4. In this protocol, we describe a set of procedures that have been optimized over many years of measuring longevity in Drosophila using laboratory vials. We also describe the use of the dLife software, which was developed by our laboratory and is available for download (<a href="http://sitemaker.umich.edu/pletcherlab/software">http://sitemaker.umich.edu/pletcherlab/software</a>). dLife accelerates throughput and promotes good practices by incorporating optimal experimental design, simplifying fly handling and data collection, and standardizing data analysis. We will also discuss the many potential pitfalls in the design, collection, and interpretation of lifespan data, and we provide steps to avoid these dangers.

Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster is a powerful model organism for exploring the molecular basis of longevity regulation. This protocol will discuss the steps involved in generating a reproducible, population-based measurement of longevity as well as potential pitfalls and how to avoid them.

מדידה של תוחלת חיים ב<em&gt; דרוזופילה melanogaster</em

Aging is a phenomenon that results in steady physiological deterioration in nearly all organisms in which it has been examined, leading to reduced ...

An Improved Method for Accurate and Rapid Measurement of Flight Performance in Drosophila

Drosophila has proven to be a useful model system for analysis of behavior, including flight. The initial flight tester involved dropping flies into an oil-coated graduated cylinder; landing height provided a measure of flight performance by assessing how far flies will fall before producing enough thrust to make contact with the wall of the cylinder. Here we describe an updated version of the flight tester with four major improvements. First, we added a &#34;drop tube&#34; to ensure that all flies enter the flight cylinder at a similar velocity between trials, eliminating variability between users. Second, we replaced the oil coating with removable plastic sheets coated in Tangle-Trap, an adhesive designed to capture live insects. Third, we use a longer cylinder to enable more accurate discrimination of flight ability. Fourth we use a digital camera and imaging software to automate the scoring of flight performance. These improvements allow for the rapid, quantitative assessment of flight behavior, useful for large datasets and large-scale genetic screens.

An Improved Method for Accurate and Rapid Measurement of Flight Performance in Drosophila

Here we describe a method for rapid and accurate measurement of flight performance in Drosophila, enabling high-throughput screening.

שיטה משופרת למדידה מדויקת והמהירה של טיסה בביצועים<em&gt; דרוזופילה</em

Drosophila has proven to be a useful model system for analysis of behavior, including flight. The initial flight tester involved dropping flies into an ...

Experimental Protocol for Using Drosophila As an Invertebrate Model System for Toxicity Testing in the Laboratory

Emergent properties and external factors (population-level and ecosystem-level interactions, in particular) play important roles in mediating ecologically-important endpoints, though they are rarely considered in toxicological studies. D. melanogaster is emerging as a toxicology model for the behavioral, neurological, and genetic impacts of toxicants, to name a few. More importantly, species in the genus Drosophila can be utilized as a model system for an integrative framework approach to incorporate emergent properties and answer ecologically-relevant questions in&#160;toxicology research. The aim of this paper is to provide a protocol for exposing species in the genus Drosophila to pollutants to be used as a model system for a range of phenotypic outputs and ecologically-relevant questions. More specifically, this protocol can be used to 1) link multiple biological levels of organization and understand the impact of toxicants on both individual- and population-level fitness; 2) test the impact of toxicants at different stages of developmental exposure; 3) test multigenerational and evolutionary implications of pollutants; and 4) test multiple contaminants and stressors simultaneously.

Experimental Protocol for Using Drosophila As an Invertebrate Model System for Toxicity Testing in the Laboratory

In this paper, we provide a detailed protocol for exposing species in the genus Drosophila to pollutants with the goal of studying the impact of exposure on a range of phenotypic outputs at different developmental stages and for more than one generation.

נסיוני באמצעות דרוזופילה כמערכת מודל הגעה לבדיקת רעילות במעבדה

Emergent properties and external factors (population-level and ecosystem-level interactions, in particular) play important roles in mediating ...

Drosophila Maintenance

Drosophila melanogaster, commonly known as fruit flies, are a frequently used model organism for life science research. Although starting a collection of these critters may seem as easy as leaving a banana on your kitchen counter for too long, a productive fly colony in the lab requires careful husbandry and maintenance.
This video demonstrates the necessary steps for maintaining a healthy fly stock. The overview begins with the preparation and storage of the yeast and sugar-containing media on which flies feed. Next, the vessels most commonly used for housing Drosophila are shown, as well as how and when to move flies between these containers. Finally, the presentation also includes examples of the ways in which housing and feeding conditions are manipulated for biological experiments.

Maintenance and Husbandry of Drosophila melanogaster

דרוסופילים אחזקה

Drosophila melanogaster, commonly known as fruit flies, are a frequently used model organism for life science research. Although starting a collection of ...

Education

JoVE Science Education

Basic Biology

Biology I: yeast, Drosophila and C. elegans

Fly Climbing Assay: A Method to Test General Locomotion in Drosophila melanogaster

Source: Gevedon, O., et al. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/video/59720/in-vivo-forward-genetic-screen-to-identify-novel-neuroprotective">In Vivo Forward Genetic Screen to Identify Novel Neuroprotective Genes in Drosophila melanogaster</a>. J. Vis. Exp. (2019).
This video describes a simple method to quantify fly locomotion and shows the climbing assay performed.&#160; The fly climbing assay is a general test of motor function which relies on a negative geotaxis response.

בדיקת טיפוס זבובים: שיטה לבדיקת תנועה כללית בדרוזופילה מלנוגסטר

Source: Gevedon, O., et al. In Vivo Forward Genetic Screen to Identify Novel Neuroprotective Genes in Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2019).
This ...

אימון סיבולת פרוטוקול מבחני ביצועים ארוכי טווח עבור תסיסנית melanogaster

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

מדידת רמות פעילות גופנית ב- דרוזופילה melanogaster באמצעות מערכת כימות בתרגיל סיבוב (REQS)

TreadWheel: מרווח אימון פרוטוקול בעדינות המושרה תרגיל דרוזופילה melanogaster

וידאו ברזולוציה גבוהה של מעקב אחר תנועה של מבוגרים תסיסנית melanogaster

An Affordable and Efficient "Homemade" Platform for Drosophila Behavioral Studies, and an Accompanying Protocol for Larval Mitochondrial Respirometry

פרוטוקול נתיב באורך שארגן לעצמו

מדידה של תוחלת חיים ב

שיטה משופרת למדידה מדויקת והמהירה של טיסה בביצועים

נסיוני באמצעות דרוזופילה כמערכת מודל הגעה לבדיקת רעילות במעבדה

דרוסופילים אחזקה

בדיקת טיפוס זבובים: שיטה לבדיקת תנועה כללית בדרוזופילה מלנוגסטר