Le modèle de lésion cardiaque a une implication significative pour élucider le mécanisme de la régénération cardiaque. Ce protocole a établi un modèle de résection apicale chez X.Tropicalis adulte, qui peut être utilisé pour élucider le mécanisme de régénération cardiaque adulte. Des études antérieures ont indiqué que le cœur peut se régénérer après une résection apicale chez l’adulte X.Tropicalis.
Et des protocoles de résection apex ont été publiés dans des modèles de poissons zèbres et de souris, mais il n’y a pas de protocole publié pour la résection apicale chez X. tropicalis. La perte de la capacité de régénération chez les mammifères adultes fait de l’insuffisance cardiaque l’une des principales causes de décès dans le monde. L’illustration des mécanismes de régénération cardiaque à l’aide de cette technique aura des implications importantes pour les thérapies des cardiopathies ischémiques.
Il est préférable de pratiquer la technique bien avant d’effectuer la chirurgie, car elle ne devrait pas affecter le temps du processus opératoire. Et il est très crucial de garder la grenouille anesthésiée. Pour commencer, placez l’abdomen anesthésié Xenopus tropicalis vers le haut et couvrez l’abdomen avec de la gaze distillée imbibée d’eau pour éviter le dessèchement de la peau de l’animal pendant l’opération.
Appuyez doucement sur la poitrine avec une pince et trouvez le centre de la poitrine parallèle au membre antérieur inférieur. Soulevez la peau avec des ciseaux ophtalmiques et faites doucement une petite incision d’environ 1 centimètre. À l’aide de ciseaux ophtalmiques, ramassez la couche musculaire sous la peau et créez une plaie dans le muscle central de la poitrine.
Comme le cœur est situé dans la position supérieure du site de la plaie, appuyez doucement sur la poitrine avec la pince ophtalmique pour extraire le cœur de la plaie. Doucement, serrez le péricarde avec une pince et brisez-le doucement à l’aide de ciseaux ophtalmiques à l’aide de l’apex du cœur. Attendez que le péricarde se détache en raison du pompage du sang systolique.
Tenez le bout du cœur avec une pince dans la main non dominante et soulevez légèrement le cœur en fonction du rythme de contraction cardiaque. Lorsque le cœur se contracte pour faire recirculer le sang dans les vaisseaux sanguins, coupez rapidement l’apex du cœur, environ 14% du ventricule. Replacez le cœur dans la poitrine à l’aide d’une pince et d’une boule absorbante.
Suturer la peau avec un fil chirurgical non absorbant 4-0, en veillant à ce qu’il n’y ait pas de suture dans la couche musculaire pour prévenir la mortalité postopératoire. Dans le groupe simulé, effectuer la thoracotomie et ouvrir le péricarde, comme démontré précédemment, mais suturer sans effectuer la résection de l’apex. Placez l’animal postopératoire avec son abdomen vers le haut dans une boîte de Petri contenant une petite quantité d’eau désionisée.
Attendez environ 10 minutes que l’animal reprenne conscience et observez sa mobilité et sa suture de la plaie pendant l’activité. Transférez les grenouilles dans un récipient rempli d’eau pure pour la culture et remplacez-le par de l’eau pure tous les jours pour éviter l’infection des plaies. Après la résection apicale du cœur de Xenopus tropicalis, un caillot sanguin s’est formé et a scellé la plaie dans le ventricule, comme observé par la coloration à l’hématoxyline et à l’éosine, ainsi que par la coloration trichrome de Masson.
L’analyse morphologique du cœur à 0, 7, 14 et 30 jours de post-résection a révélé que le caillot sanguin causé par la lésion cardiaque avait disparu au jour 30. Dans le même temps, le jour 14, une régénération significative de l’apex a été observée, et au jour 30, l’apex cardiaque réséqué s’était presque entièrement régénéré. L’analyse histologique a montré une masse de fibrine au site de résection le jour 14, et le cœur s’est complètement régénéré sans cicatrices au jour 30.
L’analyse de la fibrose myocardique du cœur par coloration de Masson a montré qu’au 14e jour de la résection apicale, le caillot a disparu et a été remplacé par de la fibrine. Du jour 14 au 30, le myocarde a progressivement remplacé la fibrine et réparé l’apex du ventricule endommagé. Cette technique permettra aux chercheurs d’explorer le mécanisme cellulaire de la régénération cardiaque chez Xenopus tropicalis et de connaître les cellules liées à la régénération cardiaque dans le cœur des grenouilles en utilisant l’analyse de traçage de lignée après la résection de l’apex.
