Établissement d’un arrêt circulatoire hypothermique profond chez le rat. Arrêt circulatoire hypothermique profond, le DHCA est couramment appliqué lors des chirurgies de cardiopathie congénitale complexe et de maladie de l’arc aortique. La présente étude vise à fournir une méthode pour établir le DHCA chez le rat.
Les protocoles ont fait l’objet d’un examen institutionnel et ont reçu l’approbation du Comité institutionnel de soin et d’utilisation des animaux, Hôpital Fuwai, Académie chinoise des sciences médicales. Travaux préparatoires. Assurez-vous que les circuits CPB contiennent un réservoir modifié à partir de morphs compte-gouttes, pompe à rouleaux, échangeur de chaleur, oxygénateur à membrane, tube de raccordement et un réservoir d’eau connecté au circuit et fait 12 millilitres d’hydroxyamidon avec un millilitre d’héparine sodique et un millilitre de solution saline amorcer le circuit avec une solution d’amorçage de 40 millilitres avec la pompe à rouleaux tournant doucement.
Deux, l’anesthésie et la canulation. Connectez le tube avec le ventilateur et les paramètres latéraux. Mettez une couverture chauffante électrique et la droite et faites face à la droite avec du ruban adhésif.
Appliquez une pommade ophtalmique sur les yeux pour prévenir la sécheresse. Rasez les poils de la région inguinale droite, de la région cervicale droite et de la queue avec le rasoir. Ensuite, désinfectez la peau avec de l’aldéhyde et de l’alcool.
Coupez la peau et la région inguinale gauche et disséquez le muscle et les tissus osseux pour exposer la veine fémorale gauche et l’artère. Séparez soigneusement l’artère. Canuler un cathéter intraveineux de calibre 22 dans l’artère fémorale gauche.
Artère ligottée et cathéter avec soie. Utilisez une solution saline contenant de l’héparine pour rincer la canule afin d’éviter la coagulation. Connectez le cathéter au capteur de presse pour surveiller la pression artérielle.
Coupez la peau de la queue, puis utilisez un scalpel pour couper l’espèce superficielle de l’artère de la queue afin d’exposer l’artère de la queue qui se trouve au milieu du champ chirurgical. Canuler l’artère de la queue avec le cathéter intraveineux de calibre 22. Ligate artère et cathéter avec soie.
Utilisez une solution saline contenant de l’héparine pour rincer le cathéter afin d’éviter la coagulation. Coupez la peau de la jugulaire droite de la veine puis séparez le muscle et le tissu pour exposer la veine. Insérez un cathéter intraveineux multiâge maison de calibre 16 dans la jugulaire externe droite de la veine et placez-le soigneusement dans la veine cave inférieure droite ou dans l’oreillette droite.
Administrer de l’héparine sodique où la veine externe droite recouvre chaque région canulée de boules humides pour éviter la contamination. Troisièmement, connectez le circuit avec le cathéter dans l’artère de la queue et maintenez la pompe à faible débit d’un à deux millilitres par minute. Ensuite, connectez le réservoir avec le cathéter dans la veine jugulaire externe droite.
Assurez-vous qu’il y a toujours un taux sanguin d’environ un centimètre dans le réservoir. Allumez le réservoir d’eau et réglez d’abord la température de l’eau à 37 degrés centigrades. Une fois que la pression artérielle est stable, augmentez doucement la pompe de débit jusqu’à 80 à 100 millilitres par minute.
Quatre, le refroidissement. Réglez la température ambiante à environ 20 degrés centigrades. Mettez des glaçons dans ces gants jetables, puis mettez-les sur la tête et les côtés droits.
La température du réservoir a été suggérée en temps réel en fonction de la température rectale du riz. Modifier correctement les paramètres pertinents du ventilateur en fonction des résultats de l’analyse des gaz du sang. Cinq, l’arrêt circulatoire par hypothermie profonde.
Ensuite, la température rectale chute à 15 à 20e centigrade. Changez le sac de glace et jetez les gants pour assurer le maintien de l’hypothermie profonde pendant l’arrêt circulatoire. Arrêtez la pompe à rouleaux.
Gardez le réservoir en contact avec l’environnement et drainez lentement le sang de la veine jugulaire externe vers le réservoir. Faites attention à la réforme de la pression artérielle. Après qu’il n’y a pas de pression artérielle et de rythme cardiaque, arrêtez le drainage et gardez le réservoir fermé.
Éteignez le ventilateur. Six, l’échauffement et la reperfusion. Retirez tous les gants jetables et augmentez la température ambiante à 25 degrés centigrades.
Rétablir l’interventilation oxygène de la mémoire tout en maintenant l’écrêtage du tube de drainage veineux. Allumez la pompe à rouleaux pour vous assurer que le sang dans le réservoir est lentement de retour vers le bon corps. Allumez le ventilateur après que le niveau sanguin dans le réservoir reste un centimètre.
Utilisez le tube de drainage et drainez lentement le sang de l’oreillette droite vers le réservoir. Allumez la lampe chauffante, le coussin chauffant et le réservoir d’eau. Réglez la température du réservoir d’eau à 25 degrés centigrades.
Ensuite, réglez-le à la température de gauche en temps opportun. Retirez la lampe chauffante lorsque la température rectale est revenue à 34 degrés centigrades. Septièmement, le sevrage de la CPB.
Réduire lentement et progressivement le rouleau de débit de la pompe et ajuster la vitesse du genre veine dans le débit réduire à un millilitre par minute. Gardez le réservoir en contact avec l’environnement. Infuser le sang restant dans un circuit avec un débit d’un millilitre par minute.
Arrêtez l’oxygénation de la mémoire et la pompe à rouleaux. Euthanasié après une période de ventilation mécanique et une anesthésie profonde. Résultats représentatifs.
Comme groupe témoin, la température normale CPB, NtCPB, rat. Sans l’arrêt circulatoire a montré une pression artérielle moyenne stable MAP et la température corporelle pendant toute la procédure. Alors que le MAP des rats DHCA a diminué pendant l’arrêt cardiaque.
La température des rats DHCA a chuté rapidement pendant la phase de refroidissement et s’est rétablie progressivement pendant la phase de rotation. Le sevrage du circuit DHCA la température des rats DHCA est revenue à la normale. Les données ci-dessus indiquaient que notre procédure DHCA imitait les changements réels de température et de MAP des patients dans les cliniques.
L’effet du processeur DHCA et de l’augmentation a été étudié par analyse des gaz du sang. Après le contact du sang total avec la solution primaire, la concentration d’hémoglobine était supérieure à six grammes par déciportée dans les deux groupes. Le sevrage de la surface DHCA, il est passé à neuf grammes par déciportée en raison de la réinjection du sang restant dans le circuit CPB dans la droite.
L’hématocrite, HCT, a montré une tendance similaire à HB. Après la reperfusion DHCA, l’acide de lactate a augmenté rapidement, ce qui était plus prononcé dans le groupe DHCA. Le pH a diminué après la procédure DHCA, ce qui était probablement le résultat de l’accumulation d’acide lactate. Pendant toute l’expérience, la concentration de sodium, de chlorure, d’ions potassium et de glucose n’a pas montré de différences significatives à chaque point 10.
Ce résultat suggère que le DHCA n’a induit que l’augmentation de l’acide lactate, mais n’a pas influencé le pH sanguin et la concentration d’hémoglobine, d’hématocrite, d’ions sodium, d’ions chlorure, d’ions potassium et de glucose. Afin d’évaluer l’impact de la DHCA sur l’autophagie neuronale, nous avons utilisé l’électromicroscope à transmission et avons étonnamment trouvé et augmenté le nombre d’autophagosomes dans l’hippocampe des rats DHCA. Les données ci-dessus indiquent que notre modèle DHCA imite les changements réels de température et de MAP des patients dans les cliniques.
Ce modèle peut être appliqué pour étudier le syndrome de réponse inflammatoire systémique, la neuroinflammation, et cetera.
