Cette étude rapporte l’échantillonnage de sang de la veine de queue chez les souris utilisant un système de tube d’extraction sous vide avec la loupe de lunettes. Notre méthode est facile à pratiquer et pourrait être utilisée pour répéter l’échantillonnage sanguin chez la souris. Une souris est placée dans le support de retenue en plastique dans un premier temps.
La queue est nettoyée et essuyée avec 70% d’éthanol. Ensuite, l’opérateur porte la loupe de lunettes pour améliorer la visualisation de la queue de souris. Une pointe d’aiguille papillon est ensuite insérée dans l’une des veines latérales dilatées de la queue, et le sang est recueilli dans le tube de collecte sous vide à travers l’extrémité en caoutchouc de l’aiguille du papillon.
Enfin, l’aiguille est enlevée et le processus de collecte de sang est terminé. La veine de queue est un endroit préféré pour l’échantillonnage sanguin. Cette méthode d’échantillonnage sanguin est liée à des blessures minimales aux souris, mais la veine de queue des souris est très mince de sorte que c’est parfois difficile à percer, ici nous décrivons une méthode simple d’échantillonnage sanguin de veine de queue sur des souris d’essai de laboratoire utilisant un système de tube d’extraction sous vide.
Cette méthode est simple et efficace et il peut être utilisé pour obtenir le sang requis à plusieurs reprises chez la souris. La procédure sera démontrée par deux membres de notre laboratoire, Xiaoyan Liu et Wusong Zou Pour commencer, nous placeons un support de retenue en plastique, tubes à vide avec bouchon en caoutchouc, et une aiguille à double pointe, et une loupe lunettes sur une surface stérile. Ensuite, placez une souris dans le support de retenue en plastique.
Les pattes avant et arrière de la souris doivent être dans une position confortable. Pour obtenir un échantillon de sang, lavez la queue avec de l’eau chaude de 20 à 30 degrés Celsius, essuyez la queue avec des boules de coton saturées à 70 % d’éthanol pour élargir la veine. Sélectionnez la veine arrière droite ou gauche pour l’échantillonnage sanguin.
Saisir doucement la partie inférieure de la queue et garder la queue droite pendant la collecte d’échantillons de sang. Portez la loupe des lunettes pour améliorer la visualisation afin de faciliter la perforation de la veine de la queue. Insérez la pointe de l’aiguille papillon de calibre 22 dans l’une des veines latérales de la queue à environ une demi-distal de la pointe de la queue à un angle d’environ 10 degrés, se déplaçant vers la base de la queue pour plusieurs échantillons.
Recueillir le sang dans le tube de collecte sous vide en insérant l’extrémité en caoutchouc de l’aiguille papillon dans le tube de collecte de sang sous vide. La queue des souris peut être utilisée pour plusieurs collectes de sang, aussi souvent que nécessaire, selon le protocole approuvé. Il n’est pas toujours facile d’obtenir suffisamment de volume sanguin de la veine de queue mince et faible flux sanguin des souris avec la méthode traditionnelle.
Notre méthode est simple et efficace et peut être utilisée pour obtenir un volume sanguin adéquat à plusieurs reprises chez la souris. Il est rapporté que jusqu’à 10% du volume sanguin total peut être retiré en toute sécurité d’un animal en bonne santé à intervalles de deux semaines, de sorte qu’environ 175 microlitres échantillon de sang de souris a été recueilli à chaque fois conformément aux principes d’éthique. Deuxièmement, il est essentiel d’étendre la queue pour éviter son mouvement dans le processus d’échantillonnage du sang.
Afin d’éviter la coagulation sanguine dans l’aiguille, une autre position de perforation doit être sélectionnée si le sang cesse de s’écouler pendant plus de 15 secondes. La collecte réussie de sang a été définie comme obtenant 175 microlitres de sang chaque fois. Les temps maximaux de perforation ont été fixés à trois essais.
Si le volume sanguin total était inférieur à celui 175 microlitres après la troisième ponction, il a été défini comme une collecte de sang échouée. Lorsque le volume adéquat de l’échantillon a été recueilli, retirez l’aiguille de la veine et appliquez brièvement une pression sur le site d’insertion pour arrêter le saignement. Pour recueillir le plasma, utilisez des tubes contenant de l’EDTA, un anticoagulant, inversez doucement le tube plusieurs fois pour mélanger l’anticoagulant avec le sang et placez les échantillons sur la glace verticalement.
Faire tourner les tubes entiers de collecte d’échantillons de sang dans la centrifugeuse réfrigérée pendant 10 minutes. Extraire le plasma, en prenant soin de ne pas déranger les couches de globules rouges et blancs. Pour recueillir la sérine, utiliser des tubes sans anticoagulant.
Les deux types d’échantillons peuvent être utilisés immédiatement ou stockés à moins de 80 degrés Celsius pendant une année. Cette étude visait à étudier la supériorité de la collecte répétée d’échantillons de sang dans la veine de queue des souris par le biais d’un système de collecte de sang sous vide et d’une loupe de lunettes. Groupe expérimental par rapport à la méthode conventionnelle d’échantillonnage sanguin.
Le groupe conventionnel, par des débutants et des experts respectivement, a rassemblé le volume de sang et la durée d’échantillonnage étaient semblables entre deux groupes pour des experts, cependant, le volume sanguin accru et la durée plus courte d’échantillonnage ont été vus dans le groupe expérimental comparé au groupe conventionnel pour des débutants. Un taux de réussite plus élevé a également été observé dans le groupe expérimental par rapport au groupe conventionnel pour les débutants. Cette méthode d’échantillonnage sanguin est facile à maîtriser et a un taux de réussite élevé.
Le nombre de perforations échouées pourrait être réduit à un par rapport à celui de l’utilisation de la méthode traditionnelle. En outre, cette procédure ne provoque que des blessures minimales pour les souris, c’est juste le ruban arrière des souris sans avoir besoin d’anesthésiques, que l’influence de la réponse au stress dans les anesthésiques sur l’échantillon de sang pourrait être évitée.
